大鼠心肌梗死修复中肌纤维母细胞细胞视黄醇结合蛋白-1的表达

目的:维甲酸是维生素A的体内衍生物,通过受体介导的基因,包括基质金属蛋白酶基因表达改变,发挥多种生物学效能。维甲酸细胞内转运和代谢由细胞视黄醇结合蛋白-1(CRBP-1)调节。在组织修复过程中肉芽组织表达CRBP-1。为探讨心肌梗死后心室重构的机制,检测了大鼠心肌梗死模型中CRBP-1的表达。方法:通过结扎左冠状动脉前降支获得大鼠心肌梗死模型。80只成年雄性Wistar大鼠分为3组。假手术组10只大鼠,假手术后6天处死取心脏。心肌梗死组50只大鼠,每时间点10只,分别于术后3天、6天、15天、30天和45天处死大鼠取心脏。蛋白检测组20只心肌梗死大鼠,每时间点5只,分别于术后3天、6天、15天和45天处死大鼠取心脏标本用于蛋白检测。心脏从心尖至心底部分为四部分,经过固定和石蜡包埋做成切片。苏木素—伊红、Masson’s trichrome染色以及兔抗CRBP-1抗体和鼠抗α平滑肌(α-SM)肌动蛋白抗体经免疫组织化学染色。并应用Western印迹法检测CRBP-1和α-SM肌动蛋白。结果:心肌梗死组大鼠均获得了大面积心肌梗死,按左心室周长法计算,梗死面积从43.3%到58.1%[平均(48.8±3.6)%]。心肌梗死组各时间点心肌梗死面积差异均无显著性。心肌梗死组各时间点大鼠右心室重量和右心室重量/体重以及左心室横径长度和长度/体重均较假手术组显著增加(P均<0.05),提示心肌梗死后左心室重构明显。观察见病区心肌细胞坏死、胶原沉积以及左心室重构。免疫组织化学染色显示,术后3天和6天心肌梗死心内、心外膜区域均有纤维母细胞浸润和心肌细胞坏死以及CRBP-1表达。术后6天和术后15天,心肌梗死区域α-SM肌动蛋白阳性的肌纤维母细胞有CRBP-1表达,这种表达于术后30天逐渐减低。结论:大鼠心肌梗死模型中纤维母细胞短暂而迅速地表达CRBP-1,提示CRBP-1和维甲酸可能在心肌梗死后心室重构中起重要作用。

猪细胞视黄醇结合蛋白基因1(CRBP1)内含子1的克隆测序

类维生素A(维生素A及其代谢产物)在动物的视觉、生长、繁殖、细胞的分化及胚胎发育等方面起重要作用.猪细胞视黄醇结合蛋白基因1(CRBP1)属于猪视黄醇结合蛋白基因家族(CRBPs).本研究将猪细胞视黄醇结合蛋白基因1(CRBP1)的内含子1进行了克隆测序,其大小为453bp.为进一步研究猪CRBP1基因的全序列奠定了一定的基础.

细胞视黄醇结合蛋白1在大鼠心肌梗死后肺重构中的作用

目的检测大鼠心肌梗死后不同时期肺组织中细胞视黄醇结合蛋白1（CRBP-1）的表达，以观察其在肺组织重构中的作用。方法通过结扎左冠状动脉前降支获得大鼠心肌梗死模型，60只成年雄性Wistar大鼠分为假手术组10只，术后6d处死取肺组织。心肌梗死组50只，分别于术后3、6、15、30和45d处死大鼠取肺组织。测量肺组织的重量，肺组织经处理后制成石蜡切片，苏木精-伊红、Masson’strichrome染色以及兔抗CRBP-1抗体免疫组织化学染色。图像分析系统检测肺组织中胶原的含量及CRBP-1阳性细胞数。结果39只大鼠存活并成功建立心肌梗死模型。大鼠心肌梗死后30d肺组织肺泡间隔增厚，胶原含量比假手术组明显增加（8．4％±3．6％比4．5％±2．6％，P〈0．001），心肌梗死后45d胶原含量与其他各组比较均明显增加（25．4％±8．8％，均P〈0．001）。梗死后3d肺泡间隔细胞即有CRBP．1阳性表达，15d时CRBP-1阳性细胞表达最高（43．8±7．4），此后逐渐较少，至45d时与梗死3d组数量相近（16．6±2．2比17．4±6．0，P〉0．05）。结论大鼠心肌梗死后肺组织结构重构，CRBP-1时序性表达参与了肺组织重构的过程。

猪视黄醇及视黄酸结合蛋白基因的几个内含子的克隆测序

视黄醇及其具生理活性的代谢产物在动物的视觉、生长、繁殖、细胞的分化及胚胎发育等方面起重要作用.本研究对猪细胞视黄醇结合蛋白基因2（CRBP2）的内含子3,猪细胞视黄醇结合蛋白基因7（CRBP7）的内含子2,猪血浆视黄醇结合蛋白基因4（RBP4）的内含子2、3,猪细胞视黄酸结合蛋白基因2（CRABP2）的内含子2进行了克隆测序,为这些基因的结构及其功能的深入研究奠定了一定的基础.