细胞角蛋白(CK)13在含牙囊肿衬里上皮的表达

目的研究纤毛柱状上皮向鳞状上皮化生时细胞角蛋白13的表达,探讨其表达在上皮化生方面的意义。方法取54侧含牙囊肿和6例鼻腭管囊肿。分别采用细胞角蛋白13单克隆抗体进行免疫组织化学染色、HE染色和RT-PCR方法研究细胞角蛋白13基因的表达。结果54例含牙囊肿中,46例为复层鳞状上皮细胞衬里。CKl3均呈阳性表达;8例混合性上皮衬里。其中的鳞状上皮细胞部分CKl3也呈阳性表达;纤毛柱状上皮部分和6例鼻腭管囊肿的纤毛柱状上皮细胞均呈阴性表达。RT-PCR结果显示细胞角蛋白13基因在复层鳞状上皮中表达最强。在混合性上皮中表达减弱,在纤毛柱状上皮中表达极弱。结论细胞角蛋白13基因(CKl3-mRNA)在纤毛柱状上皮、混和性上皮和复层鳞状上皮三种不同上皮村里中均有表达,但表达强度不同,呈由弱到强的变化。在鳞状上皮细胞中细胞角蛋白13呈强阳性表达;在纤毛柱状上皮细胞中细胞角蛋白13呈阴性;可是,当纤毛柱状上皮中出现鳞状上皮细胞时,可见细胞角蛋白13呈阳性表达,因而,细胞角蛋白13是纤毛柱状上皮细胞向鳞状上皮细胞化生过程中的标志性产物。但是有待进一步验证。

口腔粘膜癌变过程中细胞角蛋白CK10和CK13的变化

目的：探讨细胞角蛋白ＣＫ１０和ＣＫ１３在口腔粘膜癌变过程的各阶段组织中的分布和表达强度。方法：用ＬＳＡＢ免疫组化染色方法对口腔正常粘膜、上皮单纯增生、上皮异常增生和口腔磷癌切片进行染色，光镜观察。结果：正常颊粘膜和口底舌腹粘膜基底上层ＣＫ１０表达阴性，ＣＫ１３表达强阳性；上皮过度不全角化时，ＣＫ１０表达可为阳性，ＣＫ１３表达减少；上皮过度正角化时，ＣＫ１０在基底上层呈强阳性表达，ＣＫ１３表达进一步减少甚至缺失。随上皮异常增生程度加重，基底上层细胞ＣＫ１０和ＣＫ１３表达减少甚至缺失。在口腔浸润癌中，不管分化程度如何，ＣＫ１３均表达阴性，而ＣＫ１０在分化较好的癌细胞及癌巢中呈阳性表达。结论：ＣＫ１３表达减少或缺失可作为口腔癌前病变诊断的辅助指标，ＣＫ１０可为口腔癌的分化程度及其预后判定提供帮助。

细胞角蛋白(CK)13在鼻腭囊肿衬里上皮中的表达及其意义

目的研究细胞角蛋白(CK)13在鼻腭囊肿衬里上皮中变化的规律和其表达的意义。方法对经临床和病理诊断的36例鼻腭囊肿的衬里上皮进行常规HE染色和免疫组化染色,检测CK13在鼻腭囊肿上皮中的表达。结果CK13在鼻腭囊肿的纤毛上皮表达呈阴性;在纤毛柱状与鳞状上皮细胞的混合型上皮的中间层表达呈弱阳性;CK13在部分鳞状上皮的基底层、中间层或表层表达为阳性;鳞状上皮的全层呈强阳性。结论在纤毛柱状上皮细胞中出现化生鳞状上皮细胞时,同时表达CK13;CK13随着纤毛柱状上皮向鳞状上皮化生程度的逐渐增强而逐渐增多;CK13可作为判断鼻腭囊肿上皮鳞状化生的标志和检测化生程度。根据纤毛柱状上皮向鳞状上皮化生过程中细胞形态的变化和CK13的表达,推测鳞状上皮细胞是由纤毛柱状上皮化生而来。

细胞角蛋白CK13和CK19在口腔鳞癌中的表达及意义

目的研究细胞角蛋白CK13和CK19在口腔鳞癌中的表达,探讨它们在口腔鳞癌发生发展中的作用。方法本实验收集84例口腔癌根治标本及12例正常口腔粘膜做对照,按照原发灶的临床分期、病理分级、以及有无淋巴结转移进行分组,采用免疫组织化学SP法检测细胞角蛋白CK13和CK19在口腔鳞癌中的表达。结果正常口腔粘膜中CK13全部表达,阳性表达率为100%,CK19阳性表达率为8%;OSCC组织中CK13阳性表达率为15.5%,CK19阳性表达率为56%,其中高、中、低分化OSCC组织中CK13的阳性表达率分别为28.0%、10.7%、4%,而CK19的阳性表达率分别为40.6%、60.7%、70.8%。CK13和CK19在OSCC组织中的表达与组织分化程度和临床分期明显相关。结论CK13和CK19异常表达在OSCC发生发展过程中起一定的作用,CK13的表达减少或缺失及CK19表达增加与口腔鳞癌的组织分级和临床分期有关。联合检测CK13及CK19,在口腔鳞癌的诊断、治疗、预后判断中起辅助作用。

细胞角蛋白基因13在喉鳞状细胞癌中缺失和表达的研究

为了探讨细胞角蛋白基因 13(Cytokeratin 13,CK13)在喉癌发生中的作用 ,在CK13基因内部及附近选择 5个微卫星引物进行杂合性丢失 (lossofheterozygosity,LOH)分析 ,于DNA水平间接检测 72例喉鳞状细胞癌患者中该基因的缺失 ,应用NorthernBlot检测 16例喉鳞癌患者的配对肿瘤及癌旁正常组织中CK13基因的表达差异 :同时应用CK13蛋白单克隆抗体对不同分化程度的喉鳞癌组织进行免疫组化染色。结果表明 :5个STR位点均存在LOH ,其中D17S196 4E、D17S2 0 92、D17S791、D17S16 6 5及D17S80 8位点的LOH频率分别为 18.0 3%、2 8.13%、2 7.4 2 %、39.6 8%和 34.85 % ,其中D17S16 6 5位点的LOH频率最高 ,至少一个位点出现LOH的病例高达 77.78% (5 6 / 72 ) ,杂合性丢失与临床分期、淋巴结转移无显著相关 ,但与肿瘤分化程度高低相关 (P <0 .0 5 )。Northernblot结果表明 :16例喉鳞癌患者CK13基因在正常组织中的表达比肿瘤组织显著增强 ,免疫组化结果也显示CK13蛋白在正常组织或高分化肿瘤中的表达明显高于低分化者 ,且存在显著差异 (P <0 .0 1)。证实CK13基因可能在喉鳞状细胞癌的发生中具有重要作用 。

细胞角蛋白13通过PTEN抑制PI3K/AKT/mTOR通路增强鼻咽癌HNE1细胞放疗敏感性

目的:探讨细胞角蛋白13(cytokeratin 13,CK13)对鼻咽癌HNE1细胞放疗敏感性的影响及其作用机制。方法:将HNE1细胞分为对照组、anti-CK13#a组及anti-CK13#b组(敲减CK13)、对照组+西罗莫司处理组(100 nmol/L的西罗莫司处理1 h)、anti-CK13#a+西罗莫司处理组(100 nmol/L的西罗莫司处理1 h),经放疗处理(200 c Gy/min剂量照射5 min)后,用CCK-8法检测各组细胞的增殖能力,用流式细胞术检测各组细胞的凋亡率,q PCR法检测PI3K/AKT/mTOR信号通路相关基因PTEN的表达,WB法检测PI3K/AKT/mTOR信号通路相关蛋白的表达。结果:经放疗处理后,与对照组相比,敲减CK13后HNE1细胞增殖能力明显增强(P<0.01),细胞凋亡率明显降低(P<0.01);细胞中c-caspase-3和γH2AX的表达明显降低(均P<0.01)、p-AKT和p-S6K表达明显升高(P<0.01)、PTEN蛋白表达明显降低(P<0.01)。敲减CK13+西罗莫司(PI3K/AKT/mTOR信号通路抑制剂)处理可以回复敲减CK13导致的细胞增殖能力增强(P<0.05)和细胞凋亡率降低(P<0.01)。结论:敲减CK13通过下调PTEN蛋白水平进而增强PI3K/AKT/mTOR信号通路活性,最终降低HNE1细胞的放疗敏感性。

口腔鳞癌与正常黏膜中细胞角蛋白基因13的表达

目的:研究细胞角蛋白基因13(cytokeratin13,CK13)在口腔鳞状细胞癌(oralsquamouscellcarcinoma,OSCC)组织中的表达及意义。方法:用RT-PCR方法检测30例OSCC患者肿瘤组织及其配对的正常黏膜中CK13mRNA的表达,同时用免疫组化方法检测CK13蛋白在OSCC及正常黏膜标本中的表达。所得数据采用Fisher确切概率计算法进行统计学处理。结果:RT-PCR检测结果表明,CK13mRNA在27例OSCC中的表达较其对照黏膜表达下调,平均下调4.2倍;免疫组化染色结果显示,CK13蛋白在正常口腔黏膜与肿瘤组织之间、高分化OSCC与中、低分化OSCC之间的表达差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:在OSCC的发生、发展中,CK13基因的转录和表达水平发生明显变化,可能存在转录后水平的表达调控。CK13在OSCC分类诊断中有应用价值。

细胞角蛋白4和细胞角蛋白13在鼻腔-鼻窦鳞状细胞癌中的表达及临床意义

目的探讨鼻腔-鼻窦鳞状细胞癌(sinonasal s q u a m o u s c el l c a r c i n o m a,S NS C C)中细胞角蛋白13(cytokeratin13,CK13)、细胞角蛋白4(cytokeratin 4,CK4)的表达及与肿瘤临床特征的关系。方法应用免疫组化检测42例SNSCC标本(SNSCC组)及癌旁正常黏膜(对照组)中CK13、CK4的表达,应用图像分析仪比较其吸收度值(A值),进行统计学处理。结果 1CK13在对照组、SNSCC组中的阳性表达率为100.00%、30.95%,与肿瘤的分化程度及随访KPS评分呈正相关;2CK4在对照组、SNSCC组中的阳性表达率分别为100.00%、60.95%,与随访KPS评分呈正相关;随着T分级和临床分期的增加,阳性表达率减弱;随着分化程度的降低,阳性表达率依次减弱;在有、无淋巴结转移组织中的表达差异有统计学意义。结论对CK4、CK13进行检测,对SNSCC的预后判断具有重要意义。

人细胞角蛋白8(CK8)基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达

目的:克隆人细胞角蛋白8(CK8)基因cDNA并在大肠杆菌中表达CK8蛋白产物。方法:运用DNA重组技术,设计CK8基因特异引物,采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术从人肝细胞癌7721细胞中扩增CK8编码区cDNA,将其插入克隆载体pMD18-T simple vector中,获得重组质粒pMD18-CK8,转化感受态大肠杆菌DH5α。继而采用PCR技术从重组质粒pMD18-CK8中扩增出约1500bp目的片段,再次级克隆到原核表达质粒pET-28a(+)载体中,获得pET-28a-CK8重组原核表达质粒;经酶切、PCR及测序鉴定后转化入BL21(DE3)菌株,在IPTG诱导下进行融合蛋白的表达。采用SDS-PAGE电泳及Western blot检测CK8蛋白表达水平。结果:成功建立了人CK8基因cDNA重组体的无性繁殖系。②在原核细胞中成功地表达出人CK8蛋白,该蛋白具有很好的免疫原性。结论:运用原核细胞基因工程技术成功构建和表达了人细胞角蛋白8(CK8)基因,为进一步研究CK8的基因型及探讨该基因编码的CK8蛋白的性质和生物学活性创造条件。

糖皮质激素对鼻息肉中细胞角蛋白13表达的影响

目的：探讨细胞角蛋白13（CK13）在鼻息肉上皮细胞增生分化过程中的作用。方法选取慢性鼻-鼻窦炎（伴鼻息肉）患者60例。其中 A组30例患者，术前未应用糖皮质激素直接进行手术治疗，术中取下鼻息肉组织；B组30例患者应用糖皮质激素类药物治疗3～5 d后手术治疗，术中取下鼻息肉组织。C组10例为正常中鼻甲组织对照组。采用免疫组化（二步法）检测标本中CK13的表达。结果 A组CK13的阳性表达率高于B组，差异有统计学意义（χ2＝11．482，P＝0．009），C组正常中鼻甲组织上皮细胞未见CK13的阳性表达。结论（1）CK13在鼻息肉组织中不同上皮表达程度的差异，反映了 CK13在鼻息肉在发生发展过程中的动态变化；使用糖皮质激素治疗后鼻息肉组织中 CK13蛋白表达有所下降，说明糖皮质激素对鼻息肉的增生、分化有抑制作用。

细胞角蛋白13在全反式维甲酸和三氧化二砷诱导分化人口腔鳞癌细胞系KB中的表达

目的研究细胞角蛋白(cytokertin,CK)13及其基因在全反式维甲酸(all-trans retinoic acid,ATRA)和三氧化二砷(arsenic trioxide,As2O3)诱导分化人口腔未分化鳞癌细胞系KB中的表达和意义。方法采用MTT法观察ATRA和As2O3对KB细胞的敏感程度,Western blot法和RT-PCR法观察KB细胞经ATRA和As2O3诱导分化后的CK13和CK13-mRNA的表达。结果MTT法显示ATRA和As2O3的IC50分别为35.9×10-6mol/L和1.55×10-6mol/L,As2O3对KB细胞药物化学敏感性比ATRA高;Western blot法显示ATRA和As2O3对KB细胞诱导分化后24h CK13无表达,48h CK13出现弱表达,72h CK13出现明显的表达;RT-PCR法显示ATRA和As2O3对KB细胞诱导分化后24h CK13-mRNA表达明显升高,48h达到高峰,72h出现下降的趋势,并且CK13-mRNA的表达变化提前于CK13的表达。结论CK13可作为口腔鳞癌诱导分化标记物和判断临床口腔鳞癌诱导分化疗效的指标。

非酒精性脂肪性肝病患者血清IL-1RA、CTRP13和CK-18水平变化及其临床意义探讨

目的探讨非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)患者血清白细胞介素-1受体拮抗剂(IL-1RA)、补体C1q肿瘤坏死因子相关蛋白13(CTRP13)和细胞角蛋白18(CK-18)水平变化及其临床意义。方法2021年1月~2023年1月我院收治的67例NAFLD患者和55例健康体检者,经肝活检诊断肝脏脂肪变性分级,采用ELISA法检测血清IL-1RA、CTRP13和CK-18水平。应用多元Logistic回归分析危险因素。结果NAFLD组血清IL-1RA和CTRP13水平分别为(328.6±54.3)pg/ml和(2634.2±397.5)pg/ml,显著低于健康人组【分别为(673.1±125.4)pg/ml和(3425.7±423.8)pg/ml,P<0.05】,而血清CK-18水平为(15.2±3.1)ng/ml,显著高于健康人组【(3.9±0.7)ng/ml,P<0.05】;17例F3级肝脂肪变性患者血清IL-1RA和CTRP13水平分别为(256.3±47.6)pg/ml和(2056.3±308.4)pg/ml,显著低于29例F1级患者【分别为(388.3±59.4)pg/ml和(3071.5±409.3)pg/ml,P<0.05】或21例F2级患者【分别为(304.7±50.1)pg/ml和(2498.1±374.2)pg/ml,P<0.05】,而血清CK-18水平为(23.4±4.7)ng/ml,显著高于F1级患者【(8.1±1.3)ng/ml,P<0.05】或F2级患者【(18.5±2.9)ng/ml,P<0.05】;F3级肝脂肪变性患者肥胖、合并糖尿病、合并高脂血症、有代谢综合征家族史、血清IL-1RA≥256.5pg/ml、CTRP13≥2056.5pg/ml和CK-18≥21.6 ng/ml占比分别为70.6%、76.5%、88.2%、70.6%、35.3%、35.3%和70.6%,与50例F1/F2级的38.0%、42.0%、40.0%、30.0%、92.0%、80.0%和10.0%比,差异显著(P<0.05);多因素Logistic回归分析表明,肥胖【OR(95%)为2.0(1.1~3.6)】、合并糖尿病【OR(95%)为2.1(1.1~4.1)】、合并高脂血症【OR(95%)为1.6(1.0~2.6)】、IL-1RA【OR(95%)为0.5(0.3~0.9)】、CTRP13【OR(95%)为0.5(0.3~0.9)】和CK-18【OR(95%)为1.7(1.2~2.5)】为影响NAFLD患者肝脏脂肪变性程度的危险因素(P<0.05)。结论NAFLD患者血清IL-1RA、CTRP13和CK-18水平异常变化可能为评估肝脏脂肪变性程度提供一定的依据。

C-erbB-2蛋白及细胞角蛋白(CK19)在乳腺癌微转移中的表达及临床意义

目的:探讨C-erbB-2蛋白及细胞角蛋白(CK19)在乳腺癌微转移中的表达及其临床意义。方法:我院2001年-2008年间手术切除的腋窝淋巴结阴性(ANN)乳腺癌石蜡标本60例淋巴结微转移(LNM),运用免疫组化SP法,进行C-erbB-2蛋白及腋窝淋巴结细胞角蛋白(CK19)检测,对相关资料进行回顾性分析,计算生存率并作单因素及多因素分析。结果:在ANN乳腺癌患者中,C-erbB-2的阳性表达与淋巴结微转移(LNM)密切相关,且C-erbB-2的表达强度与LNM率呈显著正相关。肿瘤大小(T)、组织分化程度与LNM率有显著相关,雌激素受体与LNM率无相关性。LNM与ANN乳腺癌患者的术后5年、10年无病生存率及死亡率有显著相关性。LNM阳性组其术后5年、10 无病生存率明显低于LNM阴性组,其术后死亡率明显高于LNM阴性组。结论:C-erbB-2的阳性表达可作为判断ANN乳腺癌预后的临床病理指标,C-erbB-2的较强表达,预示着腋窝淋巴结有微转移的倾向,对选择正确的治疗方案及判断预后,降低复发率具有极其重要意义。

细胞角蛋白13在上颌骨术后囊肿上皮鳞状化生过程中的表达

目的 :探讨细胞角蛋白 13(Cytokeratin13,CK13)在上颌骨术后囊肿上皮鳞状化生过程中的表达。方法 :利用单克隆CK13(DE- K13)抗体 ,应用免疫组化技术检测了 CK13在 10 4例上颌骨术后囊肿上皮中的表达。结果 :CK13在上颌骨术后囊肿的纤毛上皮表达呈阴性 ;在同时存在纤毛上皮与鳞状上皮的混合型上皮的基底上层表达呈弱阳性 ;CK13在部分鳞状上皮的基底上层及表层表达为阳性 ;在另一部分鳞状上皮的全层呈强阳性表达。CK13着色强度以及分布范围存在显著性差异(P<0 .0 1)。结论

反义角蛋白13慢病毒质粒对鼻咽癌细胞放射敏感性的影响

目的探讨反义角蛋白13(Keratin-13,KRT13)慢病毒质粒对鼻咽癌HNE-1细胞放射敏感性的影响。方法构建稳定表达反义KRT13基因的慢病毒质粒,并通过G418筛选出稳定转染该质粒的鼻咽癌HNE-1细胞。按数字随机法将细胞分为control(正常HNE-1细胞)组、lentivirus(转染慢病毒空载体)组和anti-KRT13(转染慢病毒质粒组)。并分别检测各组细胞中KPT13含量。同时采用流式细胞术检测细胞周期和凋亡的变化。在0、1、2、4、6、8 Gy 6个放射剂量点下,采用克隆形成实验分析转染反义KRT13基因对细胞的存活影响,并分别用单击多靶模型和线性二次模型拟合出细胞的剂量存活曲线,对比放射生物学参数D0、Dq、N值、α、β和SF2值,评价细胞放射敏感性的变化。结果转染慢病毒质粒组的HNE-1细胞D0、Dq、N和SF2值较其他两组均增加,α/β值减小,且差异具有统计学意义(P均<0.05);反义KRT13可以阻滞细胞于G2/M期,同时抑制细胞凋亡。结论反义KRT13慢病毒质粒可降低鼻咽癌HNE-1的放疗敏感性。

食管鳞癌中细胞角蛋白13的表达及临床意义

目的研究细胞角蛋白13(CK13)在食管鳞癌组织中的表达及临床意义。方法应用免疫组织化学SP法检测51例临床手术切除的食管癌标本及相应的食管黏膜标本中CK13的表达。结果 CK13在正常食管黏膜的表达为86.3%(44/51)、食管癌为31.4%(16/51),差异有统计学意义(P<0.01);CK13在高分化、中低分化鳞癌阳性表达为10例(19.6%)、6例(0.8%),在Ⅰ、Ⅱ期和Ⅲ、Ⅳ期中阳性表达分别为11例(21.6%)和5例(4.2%);在未浸润外膜和浸润外膜的鳞癌组织中阳性表达分别为12例(23.5%)和4例(7.8%),差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 CK13在食管癌呈低表达,检测CK13在食管癌中的表达有利于对食管癌患者的诊断和预后进行评估。

细胞角蛋白13基因联合放疗对人鼻咽癌细胞株的作用

目的观察CK13基因对人鼻咽癌HNE1细胞株放疗敏感性的影响。方法将HNE1细胞株分为HNE1-CK13A、HNE1-CK13B、HNE1-pEGFP-N1、HNE1四组,经放疗后进行Western blotting及凋亡坏死率的检测。结果转染了CK13基因的HNE1细胞株在放疗后比对照组的凋亡坏死率多,且随着放射剂量的增大,凋亡率也随之提高。结论 CK13基因对人鼻咽癌HNE1细胞株的放疗起协同作用,为HNE1细胞株的放射增敏剂。

反义细胞角蛋白13基因对人鼻咽癌HNE1细胞移植瘤放疗敏感性的影响

目的观察反义细胞角蛋白13(cytokeratin 13,CKl3)基因对鼻咽癌人嗜中性细胞弹性蛋白酶1(human neutrophil elastase,HNE1)细胞移植瘤放疗敏感性的影响。方法将HNE1细胞株分为A组(未经处理)、B组(转染慢病毒空载体),C组(转染慢病毒反义CK13a)和D组(转染慢病毒反义CK13b)共4组建立相应动物模型,放疗后采用流式细胞仪、免疫组化、PCR、Tunel法及Westernblotting检测。结果细胞周期检测发现转染慢病毒质粒的C组和D组在放疗后与对照组比较G2/M期阻滞时间显著延长;免疫组化结果显示C组和D组移植瘤中CK13表达下降;Tunel法检测细胞凋亡坏死率发现C组和D组细胞凋亡率明显降低;Western blotting检测发现caspase-3凋亡标志物下降。PCR检测发现CDC25mRNA水平明显降低。结论反义CK13基因通过调控细胞周期和凋亡可降低鼻咽癌HNE1移植瘤的放疗敏感性,并与caspase-3凋亡途径和CDC25信号通路相关。

细胞角蛋白CK5/6和EGFR在乳腺癌组织中的表达

目的观察检测表皮生长因子受体(EGFR)和细胞角蛋白CK5/6在乳腺癌组织中的表达。方法回顾性分析医院经病理确诊的乳腺癌患者60例临床及病理资料。免疫组化检测EGFR和CK5/6在乳腺癌组织中的表达。结果 EGFR和CK5/6在乳腺癌组织中阳性表达率分别为16.7%(10/60)和25.0%(15/60);EGFR和CK5/6在三阴乳腺癌组织中的表达比非三阴乳腺癌组织中的表达更高,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论EGFR和CK5/6在乳腺癌组织中的高表达提示CK5/6和EGFR可作为乳腺癌预后不良因素。

抗人细胞角蛋白7(CK7)单克隆抗体的制备及鉴定

用KLH偶联合成细胞角蛋白7(CK7)优势表位多肽片段(C14)免疫小鼠,经细胞融合技术制备CK7单克隆抗体(mAb),并收集临床组织进行免疫组化鉴定。C14多肽作为抗原具有良好的免疫反应性。本研究共获得了3株能稳定分泌抗CK7抗体的单克隆细胞株,选择亲和力较好的7A8单克隆抗体进行免疫组化鉴定,结果表明,本研究筛选的7A8单克隆抗体的质量浓度为0.49μg/mL时,与收集的临床标本均有良好的特异性反应,低于医院常用CK7检测试剂盒中抗体质量浓度2~5μg/mL,表现出较高的灵敏度。本研究筛选的7A8单克隆抗体为研发CK7快速诊断试剂提供了关键的原材料。