细胞角蛋白20单克隆抗体免疫胶体金试纸条的研制

目的研制用于尿液检查的细胞角蛋白20单克隆抗体免疫胶体金试纸条(CK20试条),建立一种无创性筛选诊断和检测膀胱癌复发的新的检测手段。方法将经处理的CK20单抗标记在胶体金颗粒上并活性进行鉴定,合格后吸附在硝酸纤维膜上并固定在长方形硬质塑料胶片一端为测定线;同时将吸附有IgG蛋白胶体金的硝酸纤维膜固定在测定线的一侧为质控线。将制成的CK20试条吸样端浸入尿液测定。结果成功的制备CK20试条,初步临床用于膀胱癌检测,敏感性78%(39/50),特异性为87%。结论采用该方法制备的CK20试条对膀胱癌患者尿液的检测具有较好的灵敏度和特异性,可用于膀胱癌瘤患者筛检诊断和复发的检测。

腹腔镜结直肠癌手术外周血细胞角蛋白20mRNA表达的研究

目的研究细胞角蛋白20mRNA（CK20mRNA）在腹腔镜结直肠癌手术患者外周血中的表达情况，探讨腹腔镜治疗结直肠癌手术对肿瘤微转移的影响。方法将44例结直肠癌患者采用单盲随机方法分为腹腔镜组25例与开腹组19例，采用逆转录聚合酶链反应检测患者术前、术中、术后外周血中CK20mRNA的表达，对132例次标本进行CK20mRNA检测的研究。结果腹腔镜组CK20mRNA阳性表达25例次，阴性表达50例次；开腹组：CK20mRNA阳性表达22例次，阴性表达35例次；2组间比较无统计学意义。结论腹腔镜结直肠癌手术患者外周血术前、术后CK20mRNA表达与开腹手术无统计学意义。腹腔镜结直肠癌手术在肿瘤微转移方面是安全、可行、有效的。

CK20和Ki-67在膀胱移行细胞癌中的表达及临床意义

目的探讨细胞角质蛋白20(CK20)和细胞核相关抗原(Ki-67)在膀胱移行细胞癌中的表达及临床意义。方法对经临床确诊的膀胱移行细胞癌患者癌组织标本中CK20(66例)和Ki-67(55例)的表达结果进行回顾性分析。结果CK20在膀胱移行细胞癌表达的阳性率为68.2%(45/66)。CK20表达的阳性指数与膀胱移行细胞癌临床分期和细胞分级均呈正相关(P<0.05)。复发膀胱移行细胞癌组CK20阳性表达率92.3%(12/13)高于初发膀胱移行细胞癌组62.3%(33/53)(P<0.05)。Ki-67在膀胱移行细胞癌表达的阳性率为63.6%(35/55)。Ki-67表达的阳性指数与膀胱移行细胞癌细胞分级呈正相关(P<0.05)。复发膀胱移行细胞癌组Ki-67阳性表达率90.9%(10/11)高于初发膀胱移行细胞癌组56.8%(25/44)(P<0.05)。Ki-67和CK20的表达阳性指数呈正相关(r=0.493,P<0.05)。结论研究结果表明CK20和Ki-67的表达与膀胱移行细胞癌的生物学行为相关,因此CK20和Ki-67可作为膀胱移行细胞癌肿瘤病理分级分期以及预后判断的辅助手段。

联合检测外周血及腹水中CK20水平对结直肠癌微转移的意义

目的检测患者术前外周血和腹水中细胞角蛋白(CK20)的水平对结直肠癌微转移的意义。方法采用改进的T7-RNA聚合酶催化的荧光扩增法(FACTT-T7 RNA),通过与酶联免疫法(ELISA)和流式细胞学技术(FCM)的对比,对附属第三医院2012年11月至2013年11月收治的56例结直肠癌患者术前外周血和术中腹水的CK20水平进行检测评价。结果 56例结直肠癌患者术中,外周血CK20阳性率FACTT为57.14%(32/56),ELISA为25.00%(14/56);腹水CK20阳性率FACTT为30.36%(17/56),FCM为14.29%(8/56),组内对比差异具有统计学意义(P<0.05);FACTT方法检测外周血联合腹水CK20阳性检出率达73.21%(41/56),组间对比率差异具有显著统计学意义(分别为P<0.05,P<0.01),CK20的表达与肿瘤TNM分期、分化程度有关(P<0.05)。结论 FACTT方法联合检测外周血和腹水中CK20水平的阳性表达率高,对结直肠癌患者的微转移具有重要的临床意义。

荧光定量RT-PCR检测早期宫颈鳞癌组织中MMP-7和CK20的表达

目的:检测宫颈癌组织中基质金属蛋白酶7(MMP-7)mRNA和细胞角蛋白(CK20)mRNA的表达水平,并探讨其临床意义。方法:采用实时荧光定量RT-PCR检测33例宫颈鳞癌和12例正常宫颈组织中MMP-7 mRNA和CK20 mRNA的表达水平。结果:MMP-7 mRNA在宫颈鳞癌组织中的表达水平高于正常宫颈组织(P=0.018),与宫颈鳞癌病理分级、淋巴结转移有关(P均<0.05),而与临床分期、年龄因素无关(P均>0.05);CK20 mRNA在宫颈鳞癌组织中的表达水平高于正常宫颈组织(P=0.002),与宫颈鳞癌分期、病理分级、淋巴结转移有关(P均<0.05),而与年龄无关(P>0.05);MMP-7 mRNA与CK20 mRNA之间存在正相关(r=0.427,P=0.026)。结论:MMP-7 mRNA及CK20 mRNA的高表达与宫颈鳞癌的侵袭转移有关。

CK20免疫组化检测Ⅱ期直肠癌淋巴结微转移对结局的影响

目的：研究Ⅱ期直肠癌患者术后病理因素和CK20检测淋巴结微转移对患者结局的影响。方法对2006年12月至2009年12月行全直肠系膜切除的70例Ⅱ期直肠癌标本的743枚淋巴结行连续超薄切片结合cytokeratin-20（CK20）免疫组化染色检测，术后平均随访61.11（21~84）个月。根据随访资料分析Ⅱ期直肠癌患者系膜淋巴结微转移的临床意义。结果临床病理因素中，肿瘤的大小、分化程度、肠壁侵润深度、淋巴管浸润与否与CK20的表达呈正相关，其它因素与淋巴结CK20表达无明显相关性。在淋巴结CK20表达阳性、阴性患者中，5年无瘤生存率各为55.0%、75.6%，差异有统计学意义（P=0.010）。临床病理因素与5年无瘤生存率无明显相关性。结论免疫组化检测直肠癌淋巴结CK20表达可对直肠癌的分期、治疗方案的确定、预后的评估更准确合理。

膀胱癌CK20表达的临床应用

目的探讨CK20在膀胱癌中的表达与膀胱癌的侵袭、转移及预后的关系。方法用免疫组化SP法检测154例膀胱癌组织中CK20的表达。结果 CK20在103例肿瘤组织中有表达,阳性率为66.9%。CK20的表达和膀胱癌的T分期及远处转移呈正相关(P<0.05)。结论 CK20可能参与了膀胱癌的侵袭与转移,CK20可作为预后判断因子,结合病理分级和临床分期分析能提高对膀胱癌患者预后判断的准确性。

子宫内膜癌患者外周血HMGA1、CK19和CK20水平分析

目的检测子宫内膜癌(EC)患者外周血高迁移率蛋白A1(HMGA1)、细胞角蛋白19(CK19)和细胞角蛋白20(CK20)表达水平,并探讨其临床意义。方法回顾性分析2014年1月—2017年6月本院收治的76例EC患者的临床资料,76例EC患者作为观察组,选择同期50例健康女性体检者作为健康组。采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)法检测并对比两组外周血中HMGA1、CK19和CK20 mRNA表达水平,对比各病理参数、随访1年内复发和死亡患者HMGA1、CK19和CK20 mRNA表达水平差异。结果观察组外周血HMGA1、CK19和CK20 mRNA表达水平均明显高于健康组(P<0.05);观察组不同年龄、病理类型、组织分化程度、雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)阳性患者外周血HMGA1、CK19和CK20 mRNA表达水平比较,差异均无统计学意义,临床分期Ⅱ~Ⅳ期、肌层浸润深度≥1/2、有淋巴结转移患者外周血HMGA1、CK19和CK20 mRNA表达水平明显高于临床分期Ⅰ期、肌层浸润深度<1/2、无淋巴结转移患者(P均<0.05);术后1年内复发及死亡患者中HMGA1、CK19和CK20mRNA表达水平明显高于未复发及存活患者(P均<0.05)。结论外周血中HMGA1、CK19和CK20的高表达与EC多种病理学特征有关,且在复发与未复发、死亡与存活患者外周血中存在差异,可能成为临床中评估EC患者预后的重要指标之一。

CK20与大肠癌微转移关系的研究进展

恶性肿瘤微转移一般指非血液系统的恶性肿瘤在发展过程中,播散并存活于淋巴系统、血循环、骨髓、肝、肺等组织器官中的微小肿瘤细胞灶,通常小于2 mm,而无任何临床表现,常规检查方法如CT、MRI、单抗放射显影技术、普通病理检查等都很难发现。本文就细胞角蛋白20(cytokeratin 20,CK20)与大肠癌微转移关系的研究进展进行综述,以阐述CK20在诊断大肠癌微转移中的临床意义。

腹腔镜结直肠癌根治术对肿瘤细胞血循环微转移的影响

目的测定血液细胞角蛋白20(CK20)的水平,探讨腹腔镜结直肠癌根治术对肿瘤细胞血循环微转移的影响,并分析不同性别、年龄及临床状况对血循环微转移的影响。方法选择本院2012年1月至2014年5月结直肠癌患者120例,TNM分期:Ⅰ期、Ⅱ期和Ⅲ期分别38例、40例和42例。根据手术方式分为对照组和观察组,对照组55例,采用传统开腹手术;观察组65例,采用腹腔镜手术。分别于术前1天及术后第1天清晨抽取空腹外周血5 ml,应用RT-PCR法检测CK20 mRNA,分析两组术前、术后外周血中CK20 mRNA水平,并分析不同年龄、肿瘤组织分化程度、病理分期等患者CK20 mRNA的表达水平。结果观察组和对照组治疗后血液CK20 mRNA的OD值分别为(1.60±0.86)和(1.53±0.82),与治疗前比较,差异无统计学意义(P>0.05)。Ⅲ期和Ⅱ期血液治疗后CK20 mRNA的OD值分别为(2.07±0.80)和(1.63±0.77),均高于治疗前和Ⅰ级期治疗后,差异具有统计学意义(P<0.05);低分化治疗后CK20 mRNA的OD值为(1.98±0.76),高于治疗前和高分化治疗后,差异具有统计学意义(P<0.05)。淋巴结转移患者治疗后CK20 mRNA的OD值为(1.77±0.81),高于治疗前和无转移患者治疗后,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论腹腔镜手术没有增加结直肠癌患者血循环微转移的危险性,术后外周血中CK20 mRNA的水平与患者性别、年龄无显著联系,而与肿瘤患者肿瘤的分化程度、TNM分期和淋巴结转移等有关。

纳米炭在腔镜直肠癌根治术淋巴结示踪、定位、清扫和转移中的应用

目的:探讨纳米炭示踪剂在腹腔镜直肠癌根治术淋巴结的示踪、定位、清扫和转移中的应用。方法:选取2017年9月-2020年7月荆州市第一人民医院胃肠外科收治的71例直肠癌患者,随机分为实验组(纳米炭组)37例和对照组34例。术后记录实验组、对照组检出所有淋巴结直径、数量、直径≤5 mm的淋巴结数量及阳性淋巴结数量。将实验组所有淋巴结分别进行常规HE染色及CK20免疫组化,对CK20免疫组化与HE染色检出淋巴结转移进行分析。结果:两组均顺利完成手术,实验组(760枚)与对照组(459枚)检获的总淋巴结数量差异有统计学意义(P<0.05)。实验组所有患者淋巴结总数均大于12枚,而对照组有8例小于12枚,差异有统计学意义(P<0.05)。实验组(460枚)与对照组(197枚)在术中检获直径≤5 mm的微小淋巴结数量差异有统计学意义(P<0.05)。两组患者常规病理HE染色检出的淋巴结转移数目及术后病理分期的比较差异无统计学意义(P>0.05)。实验组760枚淋巴结中,常规HE染色(43枚)与CK20免疫组化(64枚)在检测淋巴结转移方面比较差异有统计学意义(P<0.05),CK20与HE染色对直肠癌Ⅲ期患者诊断率差异无统计学意义(P>0.05)。结论:将纳米炭示踪剂运用于腹腔镜直肠癌根治术中,能有效定位肿瘤,术中指导医师进行淋巴结清扫,提高淋巴结清扫数量,增加微小淋巴结(直径≤5 mm)检出的数量;术后使用CK20免疫组化可以提高淋巴结微小转移灶的检出,有助于提高术后病理分期的准确性及制订患者术后的个体化辅助治疗。