胡桃醌对人胃癌细胞SGC-7901凋亡相关基因p53蛋白表达的影响

目的研究胡桃醌导致人胃癌细胞(SGC-7901)凋亡的机制。方法通过细胞计数试剂盒(CCK)8筛选细胞,利用高通量测序获取胡桃醌处理的SGC-7901与对照组细胞的基因表达数据并筛选差异基因。然后通过Western印迹及实时定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测胡桃醌对SGC-7901凋亡相关基因p53蛋白表达。结果不同浓度的胡桃醌诱导SGC-7901凋亡后p53基因的mRNA表达显著增强,胡桃醌浓度越高其表达量就越高。结论胡桃醌导致SGC-7901凋亡的机制可能是诱导细胞凋亡水平而发挥的,与调节凋亡相关基因p53表达相关。

周期性张应力对牙周膜成纤维细胞增殖的影响

目的探讨周期性张应力对人牙周膜成纤维细胞(hPDLF)增殖的影响及其机制。方法采用多通道细胞牵张应力加载系统,以hPDLF为对象构建细胞体外培养-力学刺激模型。加力组分别给予1、2、4、6、12和24 h的力学刺激,刺激幅度10%、频率为0.1 Hz。以静态组为对照组。应用细胞计数试剂-8(CCK-8)检测hPDLF增殖情况,RT-PCR检测增殖性细胞核抗原(PCNA)和核因子-κB(NF-κB)的表达;以NF-κB特异性抑制剂吡咯烷二硫代氨甲酸盐(PDTC)预处理细胞作为对照组,检测hPDLF增殖情况。结果加力组细胞在加力1、2 h增殖下降,6 h开始增殖,12 h增殖达高峰,24 h增殖受到明显的抑制;PDTC抑制细胞增殖以及pcna和nf-κB mRNA的表达。结论在一定的时间范围内,周期性张应力能促hPDLF增殖;随着时间的延长,细胞增殖受抑制;NF-κB信号传导通路在周期性张应力介导的hPDLF增殖中发挥着重要的作用。

神经生长因子对颗粒细胞增殖检测方法的探讨

目的为了解神经生长因子(NGF)对小鼠卵巢腔前颗粒细胞促增殖情况并探索其机制,同时建立方便灵敏、无污染和毒性小的细胞增殖检测方法。方法用NGF刺激培养的小鼠卵巢腔前颗粒细胞,细胞计数试剂盒-8(CCK-8)实验分析,溴脱氧尿嘧啶核苷(Brd U)掺入标记,免疫荧光技术检测颗粒细胞在体外培养中的增殖情况和Brd U标记指数。结果 NGF明显促进颗粒细胞增殖,并且具有一定的时效关系。荧光显微镜下可见Brd U阳性标记的颗粒细胞,提示细胞处于增殖期。NGF组的Brd U标记指数为45.03%,明显高于对照组20.65%(P<0.01)。NGF使增殖期的细胞显著增多及增殖指数明显升高。结论该研究证实NGF能够促进颗粒细胞增殖,CCK-8分析和Brd U标记是高效、灵敏的标记腔前颗粒细胞增殖的方法,NGF促进颗粒细胞增殖与促进颗粒细胞DNA的合成有关系。