极低频弱磁场对PC-12瘤细胞胞内游离钙离子浓度的影响

采用极低频弱磁场对鼠嗜铬细胞瘤 PC- 12株系细胞进行照射 ,利用显微荧光技术动态监测胞内游离钙离子浓度 ([(Ca2 + ]i)的变化 ,实验结果表明 :5 0 Hz,10 0 μT的正弦磁场照射引起 [Ca2 + ]i 明显升高 ;而在同等强度的静磁场和 2 0 0 0 Hz正弦磁场照射下 ,[Ca2 + ]i 基本维持不变。进一步的实验说明 [Ca2 + ]i 的升高部分源于细胞外 Ca2 +的跨膜内流 ,部分源于胞内钙库的释放。证实了一定强度下特定频率的极低频弱磁场能够影响钙离子的跨膜运输和胞内钙库的释放 。

黄芪多糖对鸡脾脏淋巴细胞内游离钙离子浓度的影响

为进一步探讨黄芪多糖 (APS)的免疫调节机制 ,建立了特异性荧光探针 Fura- 2 / AM测定鸡脾脏淋巴细胞游离钙离子浓度的方法 ,观察了 APS对体外培养的鸡脾脏淋巴细胞内游离钙离子水平的影响。结果表明 :APS以 2 0 0 μg/ ml的终浓度加入体外培养的鸡脾脏淋巴细胞培养液中 ,可极显著升高细胞内游离钙离子的水平 (P<0 .0 1)。提示黄芪多糖通过调节细胞内游离钙离子的浓度而影响机体免疫细胞的信号转导。

1,2-二氯乙烷对大鼠肝细胞内游离钙离子浓度的影响

目的了解1,2-二氯乙烷染毒24h对大鼠肝细胞的损伤及其机理。方法运用显微荧光术测定了大鼠肝细胞内游离钙离子浓度,同时,测定了大鼠肝细胞培养上清液乳酸脱氢酶(LDH)活力作为大鼠肝细胞受损的指标。结果所有剂量组的1,2-二氯乙烷的大鼠肝细胞内游离钙离子浓度与对照组比较差异均无显著性(P>0.05);LDH活力仅在浓度为5mmol/L的1,2-二氯乙烷染毒组与对照组比较差异也无显著性(P>0.05);而1,2-二氯乙烷其他染毒组(即浓度为10mmol/L和20mmol/L)与对照组比较差异均有显著性(P<0.01)。结论较高浓度(10mmol/L和20mmol/L)的1,2-二氯乙烷能损伤大鼠肝细胞,损伤的途径不是通过破坏肝细胞内钙稳态机制。

新型钙荧光指示剂Indo-1测定淋巴细胞内游离钙离子浓度的研究

细胞内游离钙离子是细胞信息传递的重要信使，检测细胞内游离钙离子浓度（［Ｃａ２＋］ｉ）可间接反映细胞活化水平。我们采用新型钙荧光指示剂Ｉｎｄｏ－１测定人外周血淋巴细胞在静息和活化状态下［Ｃａ２＋］ｉ取得较好的结果，现报告如下。１材料与方法１．１试剂及仪...

用Fura-2/AM测定益康唑诱导鼠白血病WEHI-3细胞凋亡后细胞质游离钙浓度

目的 通过体外实验 ,研究益康唑 (Econazole)是否可触发鼠白血病细胞株WEHI 3细胞胞质 [Ca2 + ]i浓度的改变。方法 用Ca2 + 荧光探针 (Fura 2 /AM )负载WEHI 3细胞后测定Econazole作用WEHI 3细胞 12、 18、2 4h的胞内 [Ca2 + ]i浓度。结果 Econazole作用WEHI 3细胞 12、 18、 2 4h后的胞内 [Ca2 + ]i均高于对照组(80 6± 15 3)nmol/L ,分别为 (131 2± 11 2 ) ,(15 6 5± 2 0 1) ,(182 1± 13 6 )nmol/L。结论 提示Econazole作用WEHI 3细胞可增加细胞质内 [Ca2 + ]i浓度。

镧对分离兔成熟破骨细胞胞浆内游离钙离子浓度的影响

通过共扣焦激光扫描显微镜，采用Fluo～3／AM细胞内钙离子荧光探针，研究了La^3＋对分离兔成熟破骨细胞胞浆内游离钙离子浓度的影响。结果表明，各时间点1．00×10^-8mol·L^-1的La^3＋对成熟破骨细胞胞浆内游离钙离子浓度没有影响。然而，浓度为1．00×10^-5和1．00×10^-7mol·L^-1的La^3＋能在各时间点剂量依赖性的减少胞浆内游离钙离子浓度，而且随着作用时间的延长，1．00×10^-5和1.00×10^-7mol·L^-1的La^3＋能剂量依赖性的减小破骨细胞的展开面积；浓度为1．00×10^-8mol·L^-1La^3＋对破骨细胞的展开面积没有影响。结果表明，La^3＋可能通过降低破骨细胞胞浆内游离钙离子浓度，导致破骨细胞骨架收缩，影响破骨细胞的黏附能力，进而降低破骨细胞的骨吸收活性。

用Fura-2/AM测定肺炎链球菌粘附A549细胞后胞浆游离钙离子浓度

目的 :通过体外实验 ,研究肺炎链球菌 (Streotococcus pneumoniae,S.pn)是否可触发肺 型上皮细胞 (A5 49)胞浆 [Ca2 +] i 浓度的改变。方法 :用 F ura-2 /AM荧光探针负载 A5 49细胞后测定 S.pn粘附A5 49细胞 3 0、60、90 min的胞内 [Ca2 +] i 浓度。结果 :S.pn粘附 A5 49细胞 3 0、60、90 min后的胞内 [Ca2 +] i均高于对照 [(187.4± 17.3 ) nmol/L ] ,并达到饱和 ,分别为 (4 87.5± 3 8.1)、(5 48.2± 3 5 .6)、(5 5 7.2± 47.5 )nmol/L。结论 :上述结果提示 S.pn粘附 A5 49细胞可增加胞浆内 [Ca2 +] i

fMLP诱导的中性粒细胞胞内游离钙离子浓度变化与细胞极性化过程

目的:观察不同浓度的fMLP诱导中性粒细胞的极性变化,并结合胞内游离钙离子浓度([Ca2+]i)变化曲线分析不同时相细胞的极性化变化,探讨二者之间的关系。方法:使用激光共聚焦显微镜对胞内[Ca2+]i变化进行监测,细胞极性化情况通过倒置显微镜来分析。结果:胞内[Ca2+]i变化主要包括静息期(0s)、快速上升期(10s)、快速下降期(150s)、慢速下降期(250s)和终末期等5个阶段,在这5个阶段的10s时细胞膜开始皱缩,启动细胞极性化过程,之后呈现为不断的极性化和去极性化过程。结论:游离钙离子浓度升高可能启动了中性粒细胞的极性化,但对之后的极性化过程影响不明显。

新生儿缺氧缺血性脑病过程中红细胞内游离钙离子浓度的变化

新生儿缺氧缺血性脑病（hypoxic—ischemic encephalopathy，ⅢE）是由于各种围产因素引起的脑缺氧和脑血流减少或暂停而导致的胎儿和新生儿的脑损伤。钙离子内流和细胞内钙超载是其重要的发病机制之一。本研究在此基础上进一步研究缺氧损伤的重要机制“钙超载”．精确测定红细胞胞质内游离钙离子的绝对浓度。

抗抑郁新化合物SIPI-C和SIPI-F对PC12细胞内游离钙离子浓度的影响

目的研究抗抑郁新化合物SIPI-C和SIPI-F对PC12细胞内游离钙离子浓度([Ca2+]i)的影响,初步探讨其神经毒性的机制。方法 接种PC12细胞于经胶原Ⅰ包被的培养皿,加入钙离子荧光探针Fluo-3/AM染色后,用激光共聚焦显微镜分别记录①有钙外液中,10μmo.lL-1的SIPI-A,B,C和F对PC12细胞[Ca2+]i的影响;②有钙外液中,1,10和100μmol.L-1的SIPI-C和SIPI-F对[Ca2+]i的影响;③有钙外液中,硝苯地平10μmo.lL-1对10μmo.lL-1的SIPI-C或SIPI-F作用的影响;④无钙细胞外液中,10μmo.lL-1SIPI-C和SIPI-F对[Ca2+]i的影响。结果 有钙外液中,SIPI-A 10μmol.L-1给药后[Ca2+]i下降,10μmol.L-1的SIPI-B,SIPI-C和SIPI-F分别使[Ca2+]i增加27%(P<0.05),84%(P<0.05)和87%(P<0.01);SIPI-C和SIPI-F明显升高[Ca2+]i;同时给予SIPI-C 10μmol.L-1和硝苯地平10μmo.lL-1或SIPI-F 10μmo.l L-1和硝苯地平10μmo.lL-1,给药后荧光强度立即上升达到峰值,随后下降,[Ca2+]i分别增加24%和15%(P<0.05)。在无钙外液中,SIPI-C和SIPI-F 10μmo.lL-1分别使[Ca2+]i增加16%和18%(P<0.01)。结论 抗抑郁化合物SIPI-C和SIPI-F可以引起PC12细胞中[Ca2+]i显著增加,此影响可能与其神经毒性有关。

五味子酮对β-淀粉样蛋白诱导大鼠海马神经元内游离钙离子浓度变化的影响

目的观察中药五味子酮对β-淀粉样蛋白(Aβ25~35)诱导的大鼠海马神经元内游离钙离子浓度([Ca2+]i)变化的影响。方法采用大鼠海马神经元原代培养技术,运用双激发波荧光指示剂Fura-2/AM标记胞内相对[Ca2+]i的变化并进行比较。结果1μmol/L Aβ25~35作用于海马神经元48 h后,[Ca2+]i为0.5951±0.0311,明显高于空白对照组的0.3617±0.0197(P<0.05);1μmol/L Aβ25~35和100μmol/L五味子酮共同作用于海马神经元48 h后,[Ca2+]i为0.4168±0.0468,仍明显高于空白对照组(P<0.05),但较单纯Aβ25~35作用后明显下降(P<0.05)。结论中药五味子酮可以通过抑制Aβ诱导的神经元[Ca2+]i增加,维持细胞内钙稳态,对神经元有一定的保护作用。

脂氧素对脂多糖诱导的巨噬细胞游离钙浓度变化及活性氧的影响

近年来越来越多的研究资料表明炎症反应的及时消退是炎症治疗的重要环节.脂氧素对多种炎症细胞和炎症相关基因有显著的负性调节作用,是体内重要的内源性脂质促炎症消退介质.细胞内游离钙离子浓度变化为巨噬细胞活化的重要第二信使.但脂氧素对巨噬细胞内游离钙浓度变化了解较少.为此,本研究采用细胞内钙离子特异性荧光探针Fluo3-AM和活性氧特异性荧光探针DCFH-DA同时标记小鼠巨噬细胞,用激光共聚焦显微镜同时动态观察脂多糖引起巨噬细胞胞内游离钙浓度和活性氧变化及脂氧素的影响作用.

重组人组织型纤溶酶原激活剂缺失变体的溶栓作用及对血小板聚集和胞浆游离钙离子浓度的影响

目的 研究重组人组织型纤溶酶原激活剂缺失变体(reteplase,Ret)的溶栓作用以及对离体家兔血小板聚集功能和对血小板静息状态胞浆内游离钙浓度的影响。方法 家兔血栓模型采用动-静脉旁路法,血小板聚集实验采用比浊法,血小板静息状态胞浆内游离钙浓度采用Fura-2荧光测定法。结果Ret(3.75×105,7.50× 105,15.0×105U·kg-1)对家兔动-静脉旁路所形成的血栓有明显溶栓作用,可明显减轻血栓干湿重量,并呈一定的剂量依赖性。Ret(1 000,3 000,10 000 U·mL-1)对ADP诱导的血小板聚集可产生浓度依赖性的抑制作用,并可明显降低血小板静息状态的[Ca2+]i,并呈一定的浓度依赖性。结论Ret具有明显的血栓溶解作用,可明显抑制ADP诱导的血小板聚集,并明显降低血小板静息状态的[Ca2+]i。

一种简便准确的计算反应液中游离钙离子浓度的计算机程序

一种简便准确的计算反应液中游离钙离子浓度的计算机程序叶益新，庚以津，董碧莎，杨晓然（中国医学科学院，中国协和医科大学基础医学研究所北京１００００５）严格控制反应液的游离钙离子（ｆｒｅｅＣａ２＋）浓度，是测定心肌肌原纤维Ｃａ，Ｍｇ－ＡＴＰ酶活性和去膜心...

突发性聋患者血小板游离钙离子浓度检测及临床意义

目的 研究突发性聋患者静脉血小板中游离钙离子浓度及其意义。方法 本文采用荧光指示剂Fura- 2AM测定 2 9例突发性聋患者及 2 1例健康对照者静脉血液中血小板游离钙离子的浓度。结果 发现突发性聋组患者血小板内游离钙离子浓度明显高于健康对照组 ,其差异有显著性 (P <0 .0 0 1)。

PLC对血小板游离钙离子浓度作用实验条件研究

对荧光法测定磷酯酶C对血小板细胞质游离钙离子浓度作用的实验条件进行了研究.结果表明,在本实验条件下,Fura 2／AM合适的浓度为4μmol／L;最适pH为7.4;血小板的浓度在1×108～3×108个／L;保护剂ASA及激活剂ADP的浓度分别为0.937mmol／L和20mmol／L;波长选用350nm和380nm;背景值对实验结果没有影响.

血清游离钙离子浓度与多脏器功能衰竭关系的临床研究

目的分析血清游离钙离子浓度和多脏器功能衰竭之间的关系。方法选取2014年6月—2017年6月重症科收入并治疗的50例感染性多脏器功能衰竭患者作为研究对象。将血清游离钙离子浓度小于等于2 mmol/L的25例患者纳入实验组(低钙离子浓度),将血清游离钙离子浓度大于2 mmol/L的25例患者纳入参照组(非低钙离子浓度),研究两组患者的脏器衰竭数目、死亡率及肺衰、休克、肾衰情况。结果两组患者存在2个脏器衰竭例数、存在大于等于5个脏器衰竭例数对比,差异具有统计学意义(P<0.05)。两组患者肺衰例数、休克例数、肾衰例数对比,差异具有统计学意义(P<0.05)。两组患者死亡率对比,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论血清游离钙离子浓度和多脏器功能衰竭之间具有一定的关系。

不同频率电磁场对胆囊癌细胞内游离Ca^2＋浓度的影响

目的探讨不同频率的低功率电磁场对胆囊癌细胞内游离钙离子水平的影响及其意义.方法采用流式细胞仪检测不同频率电磁场作用后,胆囊癌细胞内游离钙离子(Ca2+)水平的变化.结果经不同频率(0.1 MHz～40 MHz)电磁场作用后,各实验组均可见细胞内游离Ca2+浓度上升,0.1 MHz和20 MHz作用后游离Ca2+浓度上升最为显著,有显著统计学意义,1 MHz和40 MHz作用后游离Ca2+浓度上升不明显,无统计学意义.结论 0.1 MHz～40 MHz范围低功率电磁场作用后引起胆囊癌细胞内游离Ca2+浓度升高,不同频率电磁场对游离钙离子升高的影响有明显差异.细胞膜上的不同分子有不同的谐振频率,推测0.1 MHz、20 MHz两频率可能与Ca2+离子回旋谐振频率有关,或与之产生某种偶联,对Ca2+离子产生明显作用,进而在细胞和分子水平产生生物效应.