细胞质多聚腺苷酸化元件结合蛋白4、缺氧诱导因子-1在脑胶质瘤中的表达及对患者术后复发的预测作用

目的探讨细胞质多聚腺苷酸化元件结合蛋白4(CPEB4)、缺氧诱导因子-1(HIF-1)在脑胶质瘤中的表达及对患者术后复发的预测作用。方法收集149例脑胶质瘤患者的肿瘤组织及癌旁正常组织。比较肿瘤组织及癌旁正常组织中CPEB4、HIF-1的表达情况,术后对患者随访1年,记录复发情况,比较复发与未复发患者脑胶质瘤组织中CPEB4、HIF-1的表达情况,并分析脑胶质瘤患者术后复发的影响因素。结果脑胶质瘤组织中CPEB4、HIF-1阳性表达率均明显高于癌旁正常组织,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。术后复发患者脑胶质瘤组织中CPEB4、HIF-1阳性表达率均高于未复发患者,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。Logistic回归分析显示,肿瘤直径≥5 cm、CPEB4阳性表达、HIF-1阳性表达均为脑胶质瘤患者术后复发的独立危险因素(P﹤0.05)。结论CPEB4、HIF-1在脑胶质瘤组织中阳性表达率均明显增高,是脑胶质瘤患者术后复发的危险因素,临床可通过检测两种指标为脑胶质瘤患者的预后评估提供参考。

干扰胞质多聚腺苷酸化元件结合蛋白CPEBs对胶质瘤干细胞侵袭力的影响

目的分析干扰胞质多聚腺苷酸化元件结合蛋白(cytoplasmic polyadenylation element-binding protein,CPEBs)对胶质瘤干细胞(glioma stem cells,GSCs)侵袭力的影响。方法对GSCs进行原代培养,分为实验组、对照组及空白组,实验组接受CPEBs干扰处理,对照组接受空载体转染,空白组正常培养,通过细胞侵袭实验比较各组细胞侵袭力的变化。结果通过Western blot检测可见,siRNA-3对CPEBs干扰效果最佳;显微镜下可见,受慢病毒感染的实验组细胞呈绿色荧光表达,表达率70%以上;Western blot检测可见,受慢病毒感染的实验组CPEBs蛋白表达量显著低于对照组与空白组(P<0.05);处理48h后,实验组细胞凋亡率达到21.43%,显著高于空白组的0.51%及对照组的1.43%(P<0.05);MTT检测结果可见,处理3d后,实验组细胞生长速度显著降低,且低于对照组与空白组(P<0.05);Transwell侵袭实验结果示,实验组细胞穿膜数量显著低于对照组与空白组(P<0.05)。结论干扰CBEPs后胶质瘤干细胞生长、增殖、侵袭能力均得到大幅度抑制,为胶质瘤的靶向治疗提供了新的靶点研究方向,有望在改善胶质瘤患者预后方面发挥重要作用。

基于CREB3L1探讨矾冰纳米乳对兔耳增生性瘢痕模型相关蛋白及炎症因子的影响

目的观察矾冰纳米乳对兔耳增生性瘢痕组织环腺苷酸应答元件结合蛋白3样1(CREB3L1)及炎症损伤的影响,探讨其预防增生性瘢痕的作用机制。方法将30只新西兰大耳白兔随机分为空白组、模型组、积雪草苷组及矾冰纳米乳低、中、高剂量组(8.15、16.3、32.6 mg·mL^(-1))。采用热力烫伤法进行造模,深Ⅱ度烧伤造模成功后第14天给予相应药物外用,空白组、模型组外用等量生理盐水,每日2次,连续给药至第35天。苏木素-伊红(HE)染色观察兔耳瘢痕组织病理学改变;马松(Masson)染色观察瘢痕组织胶原沉积情况;免疫荧光双标法检测兔耳瘢痕组织CREB3L1/α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)共表达情况;酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测瘢痕组织白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素10(IL-10)等炎性因子表达;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测CREB3L1、Ⅰ型胶原蛋白(COL-Ⅰ)、Ⅲ型胶原蛋白(COL-Ⅲ)、α-SMA mRNA表达;蛋白免疫印迹法(Western Bolt)检测CREB3L1、COL-Ⅰ、COL-Ⅲ、α-SMA的蛋白表达情况。结果与空白组比较,模型组瘢痕增生指数明显升高(P<0.01);病理学改变包括真皮层增厚,形成致密的网状纤维,伴见炎症细胞浸润;Masson染色可见真皮层增厚,蓝染的胶原纤维大量沉积排列紊乱;免疫荧光双标结果显示,瘢痕组织中CREB3L1阳性表达增加,α-SMA阳性表达增加,IL-6含量明显升高(P<0.01),IL-10含量明显降低(P<0.01),兔耳瘢痕组织中的CREB3L1、COL-Ⅰ、COL-Ⅲ、α-SMA mRNA相对表达量明显增加(P<0.01),CREB3L1、COL-Ⅰ、COL-Ⅲ、α-SMA蛋白的表达明显增加(P<0.01)。与模型组比较,矾冰纳米乳中、高剂量组及积雪草苷组治疗后瘢痕增生指数均明显下降(P<0.05,P<0.01),病理改变可见真皮层变薄,炎性细胞均有不同程度减少,蓝染的胶原纤维减少,免疫荧光双染可见瘢痕组织中CREB3L1阳性表达降低,α-SMA阳性表达降低,IL-6含量明显降低(P<0.01),IL-10含量明显升高(P<0.01),矾冰纳米乳中、高剂量组和积雪草苷组均能够明显下调CREB3L1、COL-Ⅰ、COL-Ⅲ、α-SMA mRNA的表达(均P<0.01),降低CREB3L1、COL-Ⅰ、COL-Ⅲ、α-SMA蛋白的表达(P<0.05,P<0.01)。结论矾冰纳米乳能够通过调节CREB3L1及相关纤维化蛋白的表达,降低炎症水平,从而预防增生性瘢痕形成,丰富了中医“既病防变”“治未病”思想的科学内涵。

miR-891a-5p通过CPEB1调控结肠癌细胞生物过程的机制研究

目的 探讨miR-891a-5p通过细胞质多聚腺苷酸化元件结合蛋白1(CPEB1)调控结肠癌细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭的机制。方法 运用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qPCR)检测结肠癌组织、癌旁组织、人正常结肠上皮细胞和人结肠癌细胞中miR-891a-5p的表达;将LOVO细胞分为A组(不做任何处理)、B组(转染anti-miRcon)、C组(转染anti-miR-891a-5p)、D组(共转染anti-miR-891a-5p和si-con)、E组(共转染anti-miR-891a-5p和siCPEB1)、F组(转染miR-con)、G组(转染miR-891a-5p);CCK-8法检测细胞增殖率、Annexin V-FITC/PI法检测细胞凋亡率;蛋白免疫印迹实验检测细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、胱天蛋白酶-3酶原(Pro-caspase-3)、裂解的胱天蛋白酶-3(C-caspase-3)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)、上皮细胞钙黏蛋白(E-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)的蛋白表达;Transwell实验检测细胞迁移、侵袭;双荧光素酶报告基因检测实验检测细胞的荧光活性。结果 与癌旁组织相比,结肠癌组织miR-891a-5p表达升高,与正常结肠上皮细胞相比,结肠癌细胞中miR-891a-5p的表达均显著升高(P<0.05)。与B组相比,C组miR-891a-5p、Cyclin D1、N-cadherin、Vimentin蛋白表达下降,细胞增殖率、迁移、侵袭数量降低,C-caspase-3、CPEB1、E-cadherin蛋白表达和凋亡率升高(P<0.05);与D组相比,E组miR-891a-5p、Cyclin D1、N-cadherin、Vimentin蛋白表达水平升高,细胞增殖率、迁移、侵袭数量升高,C-caspase-3、CPEB1、E-cadherin蛋白表达和凋亡率降低(P<0.05)。miR-891a-5p与CPEB1的3′-UTR存在连续的6个互补结合位点。与F组相比,G组WT-CPEB1荧光活性和CPEB1蛋白表达降低;与B组相比,C组WT-CPEB1荧光活性升高(P<0.05)。结论 miR-891a-5p可促进结肠癌细胞增殖、迁移、侵袭,抑制凋亡,其作用机制可能与靶向抑制CPEB1有关。

细胞质聚腺苷酸化元件结合蛋白3表达下调对皮肤黑素瘤细胞增殖、凋亡、迁移及侵袭能力的影响

目的 分析细胞质聚腺苷酸化元件结合蛋白3(Cytoplasmic Polyadenylation Element Binding Protein 3,CPEB3)在5种皮肤黑素瘤细胞中的表达情况,并通过下调其在细胞中的表达,评价CPEB3基因对细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭能力的影响。方法 利用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和Western blot检测5种黑素瘤细胞株(WM3211、SK-MEL-28、A2058、A375和A875)中CPEB3在mRNA和蛋白水平的表达情况;应用shRNA干扰技术下调细胞中CPEB3的表达,采用CCK-8法、平板克隆形成试验、流式细胞术、划痕法、Transwell迁移和侵袭试验等方法检测CPEB3表达下调对黑素瘤细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭能力的影响。结果 CPEB3在5种黑素瘤细胞株中的表达水平从高到低依次为:WM3211、SK-MEL-28、A2058、A375和A875;下调SK-MEL-28细胞中CPEB3的表达后,细胞增殖能力和克隆形成能力显著增强,凋亡率显著降低,细胞迁移和侵袭能力显著提高(均P<0.05)。结论 下调黑素瘤细胞中CPEB3的表达可促进细胞增殖,抑制细胞凋亡,并增强细胞迁移和侵袭能力,提示CPEB3基因可能在黑素瘤恶性进展过程中发挥重要作用。

DNA甲基化介导miR-203/CREB1信号调控对多发性骨髓瘤细胞增殖及凋亡的影响

目的:探讨DNA甲基化介导miR-203/CREB1信号途径的调控对多发性骨髓瘤细胞增殖、侵袭和凋亡等生物学行为的影响。方法:采用重亚硫酸氢盐测序法定量检测多发性骨髓瘤RPMI 8226细胞株中miR-203的甲基化水平;实时荧光定量PCR检测miR-203的表达水平;应用5-杂氮-2’-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)干预RPMI 8226细胞建立去甲基化模型;转染miR-203模拟物(mimic)构建miR-203过表达细胞;采用CCK-8法、Transwell、流式细胞术分别检测RPMI 8226细胞增殖、侵袭和凋亡;采用双荧光素酶报告实验验证miR-203与CREB1的靶向作用关系;Western blot检测CREB1的蛋白表达水平。结果:RPMI 8226细胞miR-203启动子区存在高甲基化且低表达,去甲基化可以诱导表达;去甲基化作用可以抑制RPMI 8226细胞增殖及细胞侵袭能力,促进细胞凋亡,与空白对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。miR-203过表达组的细胞增殖抑制作用、细胞侵袭能力、凋亡率与去甲基化作用组相当。双荧光素酶报告实验证实,CREB1是miR-203的直接作用靶点;去甲基化作用通过上调miR-203抑制CREB1蛋白的表达水平,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:miR-203甲基化沉默导致CREB1表达上调是维持多发性骨髓瘤RPMI 8226细胞恶性生物学行为的重要原因。

PABPC1对人单核白血病细胞系THP-1翻译活性的影响

目的研究细胞质多聚腺苷酸结合蛋白-1(PABPC1)对人单核细胞白血病细胞系THP-1翻译活性的影响。方法在THP-1细胞中转染shPABPC1,Western blot验证敲低效率,多聚核糖体分析技术检测细胞翻译活性变化。结果转染后THP-1细胞中PABPC1表达被抑制(P<0.001);与对照组相比,敲低PABPC1组的翻译活性减弱。结论敲低PABPC1可抑制THP-1细胞翻译活性,PABPC1可能成为治疗急性髓系白血病(AML)的潜在靶点。

miR-760/CPEB2轴对急性淋巴细胞白血病细胞凋亡和增殖的影响

目的探究miR-760对急性淋巴细胞白血病(ALL)凋亡和增殖的影响和机制。方法采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测miR-760和细胞质多腺苷酸化元件结合蛋白2(CPEB2)相对表达。Ball-1细胞分为不同组:miR-NC组(转染miR-NC)、miR-760mimic组(转染miR-760 mimic)、si-NC组(转染si-NC)、si-CPEB2组(转染si-CPEB2)、oe-NC组(转染oe-NC)、oe-CPEB2组(转染oe-CPEB2)、miR-760 mimic+oe-NC组(共转染miR-760 mimic+oe-NC)和miR-760 mimic+oe-CPEB2组(共转染miR-760 mimic+oe-CPEB2)。流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot检测Bax、c-caspase-3、t-caspase-3、Ki67、PCNA和CPEB2相对表达量。双荧光素酶报告实验验证miR-760和CPEB2靶向结合。结果与人B淋巴母细胞HMy2.CIR比较,ALL细胞系Ball-1、Reh和JurkatE6中miR-760水平表达下降,CPEB2 mRNA和蛋白水平表达上升(P<0.05)。与miR-NC组比较,miR-760 mimic组细胞凋亡率、Bax和c-caspase-3水平表达上升,而Ki67和PCNA水平表达下降(P<0.05)。生物信息学方法预测miR-760靶向调控CPEB2,双荧光素酶报告实验验证CPEB2是miR-760的靶标。与si-NC组比较,si-CPEB2组细胞凋亡率、Bax和c-caspase-3水平表达上升,而Ki67、PCNA水平表达下降(P<0.05)。上调CPEB2表达能逆转miR-760过表达对细胞凋亡率、Bax、ccaspase-3的促进和对Ki67、PCNA的抑制(P<0.05)。结论miR-760靶向调节CPEB2,诱导细胞凋亡、抑制细胞增殖,为ALL治疗提供新选择。

UCA1/miR-122-5p/CPEB1轴促进肺腺癌的顺铂耐药发生机制研究

目的探讨尿路上皮癌胚抗原1(UCA1)/miR-122-5p/pcDNA-胞质多聚腺苷酸元件结合蛋白1(CPEB1)轴促进肺腺癌的顺铂耐药发生机制研究。方法通过实时荧光反转录定量PCR(RT-qPCR)检测UCA1相关miRNA分子,并通过细胞转染获得miR-122-5p和CPEB1相关细胞株。通过双荧光素酶报告实验分别验证UCA1与miR-122-5p、CPEB1与miR-122-5p的结合。药物敏感性实验获得顺铂药物半抑制浓度(IC50);通过肿瘤基因组图谱(TCGA)数据库分析CPEB1在肺腺癌中的表达情况以及与免疫细胞功能的关系。结果miR-122-5p在肺腺癌细胞中的表达水平明显升高,并通过双荧光素酶报告实验以验证UCA1与miR-122-5p结合,构建miR-122-5p抑制物和模拟物转染肺腺癌细胞株,发现miR-122-5p抑制后,顺铂IC50浓度下降,而miR-122-5p过表达后,顺铂IC50浓度升高。CPEB1在肺腺癌细胞中的表达水平明显降低,双荧光素酶报告实验证实CPEB1是与miR-122-5p结合,CPEB1过表达后,顺铂IC50浓度减低;对TCGA数据库分析显示肺腺癌组织CPEB1 mRNA明显低于癌旁组织,ROC曲线分析显示CPEB1表达水平能较好地用于诊断肺腺癌(AUC=0.849),进一步分析显示CPEB1表达水平与肺腺癌患者的细胞功能如T细胞、B细胞、CD8+T细胞、自然杀伤细胞、巨噬细胞、中性粒细胞、树突状细胞、肥大细胞存在密切关联。结论UCA1与miR-122-5p存在结合位点,后者可影响肺腺癌的顺铂耐药,并与靶基因CPEB1结合;肺腺癌中CPEB1呈低表达,降低肺腺癌顺铂药物的敏感性。UCA1/miR-122-5p/CPEB1轴有望为干预肺腺癌顺铂耐药的靶点。

脑胶质瘤中胞质多聚腺苷酸化元件结合蛋白4的表达情况及其对胶质瘤细胞生长的影响

目的观察脑胶质瘤中胞质多聚腺苷酸化元件结合蛋白4(CPEB4)的表达情况,以及CPEB4对胶质瘤细胞U87生长的影响。方法测定脑胶质瘤和脑组织中CPEB4蛋白含量。测定细胞中CPEB4蛋白表达、细胞增殖、细胞凋亡和细胞周期及CPEB4、PIK3CA、IGF2、SMAD3、IDH1和AKT1 mRNA的表达。结果低级别脑胶质瘤组织和高级别脑胶质瘤组织中CPEB4蛋白阳性表达率高于正常脑组织(P<0.05),高级别脑胶质瘤组织中CPEB4蛋白阳性表达率高于低级别脑胶质瘤组织(P<0.05)。低级别脑胶质瘤组织和高级别脑胶质瘤组织中CPEB4蛋白水平高于正常脑组织(P<0.05),高级别脑胶质瘤组织中CPEB4蛋白水平高于低级别脑胶质瘤组织(P<0.05)。转染后24 h,CPEB4-shRNA组U87细胞中CPEB4蛋白水平低于阴性对照组和空白对照组(P<0.05)。培养第3天和第7天,CPEB4-shRNA组细胞的A490值低于阴性对照组和空白对照组(P<0.05)。CPEB4-shRNA组早期细胞凋亡率明显高于阴性对照组和空白对照组(P<0.05)。CPEB4-shRNA组G1期细胞明显高于阴性对照组和空白对照组(P<0.05),S期细胞明显低于阴性对照组和空白对照组(P<0.05)。CPEB4-shRNA组CPEB4 mRNA、PIK3CA mRNA、IGF2 mRNA和SMAD3 mRNA相对表达量均低于阴性对照组和空白对照组(P<0.05)。结论 CPEB4在脑胶质瘤中高表达,CPEB4参与脑胶质瘤细胞的生长,CPEB4对脑胶质瘤细胞的影响可能和CPEB4、PIK3CA、IGF2和SMAD3水平有一定关系。

脑胶质瘤组织中胞质多聚腺苷酸化成分结合蛋白1、细胞周期蛋白B2的表达及临床意义

目的:检测脑胶质瘤组织中胞质多聚腺苷酸化成分结合蛋白1(CPEB1)、细胞周期蛋白B2(CCNB2)的表达,分析CPEB1、CCNB2表达与脑胶质瘤患者临床病理特征以及预后的关系。方法:选取2016年1月至2018年1月东莞松山湖中心医院神经外科收治的经手术切除的55例脑胶质瘤患者瘤组织标本(脑胶质瘤组)和50例颅脑损伤患者额叶或颞叶组织标本(对照组)。检测CPEB1、CCNB2表达,分析CPEB1、CCNB2表达与脑胶质瘤患者临床病理特征的关系。结合随访资料,采用Kaplan-Meier生存分析CPEB1、CCNB2阳性/阴性表达脑胶质瘤患者的预后差异及采用Cox比例风险回归分析其预后的影响因素。结果:脑胶质瘤组CPEB1、CCNB2阳性表达率均高于对照组(P<0.05)。肿瘤直径>2 cm、WHO分级Ⅲ级及远处转移的患者CCNB2阳性表达率高于肿瘤直径≤2 cm、WHO分级Ⅰ~Ⅱ级及无远处转移的患者(P<0.05);WHO分级Ⅲ级、远处转移患者的CPEB1阳性表达率高于WHO分级Ⅰ~Ⅱ级、无远处转移的患者(P<0.05)。CPEB1、CCNB2阳性表达患者3年生存率低于CPEB1、CCNB2阴性表达患者(P<0.05)。WHO分级Ⅲ级、CPEB1及CCNB2阳性表达是脑胶质瘤患者术后3年死亡的危险因素(P<0.05)。结论:脑胶质瘤组织中CPEB1、CCNB2的阳性表达率均升高,其与脑胶质瘤恶性生物学行为以及不良预后有关。

胞质多聚腺苷酸化元件结合蛋白4对胶质瘤细胞生长的影响

目的探讨胞质多聚腺苷酸化元件结合蛋白4(cytoplasmic polyadenylation-element-binding protein,CPEB4)在脑胶质瘤组织中的表达及其对胶质瘤细胞生长的影响。方法测定脑胶质瘤组织中CPEB4蛋白表达、脑胶质瘤组织和细胞中CPEB4 m RNA水平、细胞中CPEB4蛋白、PIK3CA蛋白、SMAD3蛋白的表达、细胞凋亡、细胞周期、细胞增殖和细胞的侵袭能力。结果低级别脑组织和高级别脑组织中CPEB4蛋白阳性率高于正常脑组织(P<0.05),高级别脑组织中CPEB4蛋白阳性率高于低级别脑组织(P<0.05);低级别脑组织和高级别脑组织中CPEB4蛋白水平高于正常脑组织(P<0.05),高级别脑组织中CPEB4蛋白水平高于低级别脑组织(P<0.05);SiRNA-CPEB4组细胞CPEB4蛋白表达量低于阴性对照组和空白对照组(均P<0.05);SiRNA-CPEB4组早期细胞凋亡率明显高于阴性对照组和空白对照组(均P<0.05);SiRNA-CPEB4组G1期细胞比例高于阴性对照组和空白对照组(均P<0.05),SiRNA-CPEB4组S期细胞比例低于阴性对照组和空白对照组(均P<0.05);SiRNACPEB4组第3天、第7天细胞OD值均低于阴性对照组和空白对照组(P<0.05);SiRNA-CPEB4组侵袭细胞数低于阴性对照组和空白对照组;SiRNA-CPEB4组细胞PIK3CA蛋白、SMAD3蛋白表达量均低于阴性对照组和空白对照组(均P<0.05)。结论脑胶质瘤组织中CPEB4水平升高,CPEB4影响脑胶质瘤细胞的凋亡、细胞周期、增殖和侵袭,其机制可能和PIK3CA、SMAD3有关。

CPEB1与Bcl-xL蛋白在人脑胶质瘤中的表达及其与恶性程度和预后的关系

目的探讨胞质多聚腺苷酸化成分结合蛋白1(CPEB1)与Bcl-xL蛋白在人脑胶质瘤中的表达及其与恶性程度和预后的关系。方法选取2008年5月—2014年12月收集的68例人脑胶质瘤组织和68例瘤旁正常组织,回顾性分析所有标本来源患者的临床及随访资料,观察2组CPEB1与Bcl-xL蛋白的表达情况,并分析影响预后的危险因素。结果脑胶质瘤组织CPEB1与Bcl-xL蛋白阳性表达率均高于瘤旁正常组织(P <0. 05)。CPEB1与Bcl-xL蛋白阳性表达患者3年总生存率均低于阴性表达者(P <0. 05)。肿瘤分级过高、分化程度过低、出现淋巴结转移、术前KPS评分过低、术后未进行放化疗及CPEB1和Bcl-xL蛋白阳性均为影响人脑胶质瘤患者预后的独立危险因素(P <0. 05)。结论 CPEB1与Bcl-xL蛋白在人脑胶质瘤患者其癌组织中均以高水平表达,且随着病情的加重其阳性表达率均上升,且过高表达均为影响人脑胶质瘤患者预后的独立危险因素,故临床可将其作为评估人脑胶质瘤患者病情及预后的有效指标。

吲哚胺2,3-双加氧酶和胞质多聚腺苷酸化元件结合蛋白4在胃癌组织的表达及临床意义

目的探讨吲哚胺2,3-双加氧酶(IDO)和胞质多聚腺苷酸化元件结合蛋白4(CPEB4)在胃癌及癌旁组织的差异表达及临床意义。方法收集92例胃癌肿瘤标本,应用免疫组织化学方法检测IDO和CPEB4在胃癌组织和癌旁组织的表达水平。结果IDO在胃癌组织的阳性表达率为65.22%(60/92),明显高于胃癌癌旁组织阳性表达率[38.04%(35/92),t=13.60,P<0.01],IDO表达水平与胃癌TNM分期、淋巴结转移明显相关(分别为t=7.64、5.37,P<0.05);CPEB4在胃癌组织的阳性表达率为57.61%(53/92),明显高于胃癌癌旁组织阳性表达率[32.61%(30/92),t= 11.61,P<0.01],CPEB4表达水平与胃癌组织学分化程度、TNM分期、淋巴结转移明显相关(分别为t= 5.58、6.85、7.35,P<0.05)。结论IDO和CPEB4的表达水平与胃癌的发生、发展明显相关。

下调miR-183靶向肿瘤抑制因子CPEB1增强脑胶质瘤细胞的放射敏感性

目的:探讨miR-183对脑胶质瘤细胞放射敏感性的影响。方法:2020年10月至2021年6月,收集秦皇岛市第一医院40例脑胶质瘤组织标本,对T98G细胞进行梯度剂量X射线(0、2、4、6 Gy)照射。采用qPCR检测miR-183、细胞质多腺苷酸化元件结合蛋白1(cytoplasmic polyadenylation element-binding protein 1,CPEB1)在脑胶质瘤组织、T98G细胞和经X射线照射的T98G细胞中的表达量。将miR-183 inhibitor转染T98G细胞后下调miR-183表达,经6 Gy X射线垂直照射,CCK-8法、流式细胞术和WB法,分别检测T98G细胞增殖能力、细胞凋亡率及BAX和Bcl2蛋白表达量。Targetscan软件预测和双荧光素酶报告基因实验检测miR-183与CPEB1的靶向关系。下调CPEB1表达后,经6 Gy X射线照射,分别用CCK-8法、流式细胞术和WB法检测T98G细胞增殖能力、细胞凋亡率及BAX和Bcl2蛋白表达量。将pcDNA-CPEB1或CPEB1 siRNA质粒转染T98G细胞,分别下调或过表达CPEB1后,检测miR-183通过CPEB1对T98G细胞放射敏感性的影响。结果:脑胶质瘤组织和细胞中miR-183呈高表达,CPEB1 mRNA呈低表达。T98G细胞中miR-183的表达量随着X射线放射剂量增加而降低(P<0.05),CPEB1表达量随着X射线放射剂量增加而升高(P<0.05)。6 Gy X射线照射T98G细胞后,下调miR-183可降低细胞增殖能力、增加细胞凋亡率,而过表达miR-183则起到相反作用(P<0.05)。miR-183靶向CPEB1 mRNA且负调控CPEB1表达。下调CPEB1表达后,经6 Gy X射线照射可显著提高T98G细胞增殖能力(P<0.05)、降低细胞凋亡率(P<0.05),miR-183可逆转CPEB1过表达对细胞T98G放射敏感性的促进作用(P<0.05)。结论:下调miR-183的表达能够负调控CPEB1,从而增强脑胶质瘤细胞的放射敏感性。

非小细胞肺癌组织中miR-454-3p、CPEB1 mRNA表达水平及临床意义

目的分析非小细胞肺癌组织中微小RNA-454-3p(miR-454-3p)、胞质多聚腺苷酸化成分结合蛋白1(CPEB1)信使RNA(mRNA)表达水平与临床病理特征及预后的相关性。方法选取2014年4月—2016年3月在中国科学院合肥肿瘤医院确诊为非小细胞肺癌患者96例,术中取其癌组织设为肺癌组,癌旁正常组织为对照组。采用实时荧光定量PCR法检测2组miR-454-3p、CPEB1 mRNA表达水平;以二者表达水平均值为界,再分为miR-454-3p低表达亚组、高表达亚组和CPEB1 mRNA低表达亚组、高表达亚组,分析癌组织中miR-454-3p、CPEB1 mRNA表达水平与患者临床病理特征及预后的关系;Logistic回归分析影响非小细胞肺癌患者预后的因素。结果肺癌组miR-454-3p表达水平高于对照组,CPEB1 mRNA表达水平低于对照组(t/P=14.130/0.000、12.541/0.000)。患者癌组织miR-454-3p、CPEB1 mRNA表达水平与性别、年龄、吸烟史、分化程度无关(P>0.05),与肿瘤直径、病理类型、淋巴结远处转移、TNM分期有关(miR-454-3p:χ^(2)/P=7.102/0.008、13.577/0.000、9.687/0.002、14.291/0.000;CPEB1 mRNA:χ^(2)/P=10.816/0.001、18.288/0.000、14.122/0.000、16.239/0.000);癌组织miR-454-3p与CPEB1 mRNA表达水平呈负相关(r/P=-0.524/0.000)。miR-454-3p高表达患者5年生存率低于miR-454-3p低表达患者(χ^(2)/P=7.012/0.008),CPEB1 mRNA高表达患者5年生存率高于CPEB1 mRNA低表达患者(χ^(2)/P=4.112/0.043);miR-454-3p高表达、淋巴结远处转移是影响非小细胞肺癌患者死亡的独立危险因素[OR(95%CI)=2.255(1.725~2.948)、1.987(1.428~2.765)],CPEB1 mRNA高表达是影响患者死亡的保护因素[OR(95%CI)=0.677(0.518~0.886)]。结论非小细胞肺癌组织中miR-454-3p呈高表达,CPEB1 mRNA呈低表达,且二者均与患者肿瘤直径、病理类型、淋巴结远处转移、TNM分期及预后有关。

CPEB4在透明细胞性肾细胞癌中的表达及临床意义

目的探讨胞质多聚腺苷酸化元件结合蛋白4(CPEB4)在透明细胞性肾细胞癌(ccRCC)患者ccRCC组织中的表达情况及与患者临床特征和预后的关系。方法收集76例ccRCC患者的ccRCC组织及其中32例患者的癌旁(距肿瘤外缘≥5 cm)正常组织标本,采用实时定量聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫组织化学染色法检测不同组织中CPEB4 mRNA和蛋白的表达情况,分析ccRCC组织中CPEB4 mRNA的阳性表达情况与ccRCC患者临床特征及预后的关系,以及ccRCC患者预后的影响因素。结果ccRCC患者ccRCC组织中CPEB4蛋白的高表达率和CPEB4 mRNA的阳性表达率均明显高于癌旁正常组织(P﹤0.01)。不同年龄、性别、肿瘤部位的ccRCC患者ccRCC组织中CPEB4 mRNA的阳性表达率比较,差异均无统计学意义(P﹥0.05);不同TNM分期、世界卫生组织(WHO)组织学分级和淋巴结转移情况的ccRCC患者ccRCC组织中CPEB4 mRNA的阳性表达率比较,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。Cox比例风险模型分析结果显示,TNM分期为Ⅲ~Ⅳ期和CPEB4 mRNA阳性表达均是ccRCC患者预后的独立危险因素(P﹤0.05)。CPEB4 mRNA阴性表达患者的3年生存率明显高于CPEB4 mRNA阳性表达患者(P﹤0.01)。结论TNM分期为Ⅲ~Ⅳ期和CPEB4 mRNA阳性表达均是ccRCC患者预后的独立危险因素,CPEB4的表达情况对临床ccRCC治疗方案的选择及ccRCC患者预后的评估具有重要的临床指导价值。

CPEB4对慢性髓系白血病细胞迁移与周期的影响

目的:探讨CPEB4对慢性髓系白血病细胞K562迁移与周期的影响及可能参与机制调控的蛋白分子的变化。方法:采用Western blot检测正常白细胞和K562细胞中CPEB4的表达水平;再将过表达质粒pcDNA3.1(+)-His-CPEB4、沉默质粒pPLK+Puro-CPEB4 shRNA电穿孔转染K562细胞,改变CPEB4在K562细胞中的表达量,利用Western blot检测转染效率;最后利用Transwell小室、流式细胞术检测不同处理细胞的迁移、周期情况,并用Western blot检测MMP2、MMP9、CDK4、CyclinD1、P21蛋白的表达变化。结果:与正常白细胞相比,K562细胞中的CPEB4蛋白表达量明显升高(P<0.01);CPEB4沉默的K562细胞与对照组相比,细胞的迁移能力显著提高(P<0.01);G0/G1期细胞比例减少,G2/M期细胞比例增加,细胞周期进程加快(P<0.01);MMP2(P<0.05)、MMP9(P<0.05)、CDK4(P<0.01)、CyclinD1蛋白表达水平明显增加(P<0.01),P21蛋白表达显着降低(P<0.01)。CPEB4过表达后K562细胞迁移能力明显下降(P<0.01);细胞周期中G0/G1期细胞比例增加,S期比例降低,细胞周期进程阻滞于G0/G1期(P<0.01);P21蛋白表达明显增加,MMP2、MMP9、CDK4、CyclinD1蛋白表达均显著降低(P<0.05-0.01)。结论:CPEB4可抑制K562细胞迁移,将细胞周期进程阻滞于G0/G1期;CPEB4影响K562细胞周期和迁移可能是通过调控MMP2、MMP9、CDK4、CyclinD1、P21等分子的表达完成的。

PD-L1、CPEB4和GRP在脑胶质瘤中的表达及与临床病理特征和预后的关系研究

目的分析程序性死亡受体-配体1(PD-L1)、胞质多聚腺苷酸化成分结合蛋白4(CPEB4)、胃泌素释放肽(GRP)在脑胶质瘤中的表达及与临床病理特征和预后的关系。方法回顾性选取辽宁省健康产业集团铁煤总医院2015年2月至2018年11月收治的94例脑胶质瘤患者取手术切除的癌组织作为脑胶质瘤组(94例)同时取距离肿瘤组织5 mm处的组织作为癌旁组(94例),另取同期颅脑损伤减压术切除的脑组织作为正常对照组(87例)。采用免疫组化法检测三组PD-L1、CPEB4、GRP表达情况;分析PD-L1、CPEB4、GRP在脑胶质瘤患者不同临床病理特征中的表达差异,并比较预后良好组和预后不良组临床病理特征脑胶质瘤组织中PD-L1、CPEB4、GRP表达;通过Logistic回归分析PD-L1、CPEB4、GRP对预后的影响。结果脑胶质瘤组患者组织中PD-L1、CPEB4、GRP强阳性及阳性表达率高于癌旁组、正常对照组差异有统计学意义(P <0.05)。脑胶质瘤组织中PD-L1、CPEB4、GRP在WHO分级Ⅲ~Ⅳ级中阳性率高于Ⅰ~Ⅱ级在KPS评分<80分患者中阳性率高于KPS评分≥80分患者差异有统计学意义(P<0.05)。患者随访1~3年,出现复发者16例(17.02%),肿瘤源性死亡4例(4.26%),预后不良共20例(21.28%)。预后不良组患者PD-L1、CPEB4、GRP阳性表达率高于预后良好组差异有统计学意义(P <0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,PD-L1、CPEB4、GRP阳性是脑胶质瘤患者预后不良的危险因素(B=2.535、2.164、2.373,95%CI=1.513~105.257、1.764~42.973、1.274~90.311,均P<0.05)。结论 PD-L1、CPEB4、GRP在脑胶质瘤组织中阳性表达率增高且与WHO分级、KPS评分有关,并影响患者预后,检测PD-L1、CPEB4、GRP对脑胶质瘤患者的病理分级和预后评估具有重要意义。

组织PABPC1 mRNA、Rap1GAP mRNA、Glypican-1 mRNA表达预测脑胶质瘤外科术后复发的效能及意义研究

目的探讨脑胶质瘤组织细胞质多聚腺苷酸结合蛋白1(PABPC1)mRNA、Rap1 GTP酶激活蛋白(Rap1GAP)mRNA、磷脂酰肌醇蛋白聚糖1(Glypican-1)mRNA表达与病理特征的关联性及预测外科术后复发的效能。方法选取2019年1月至2020年5月我院收治的106例脑胶质瘤手术患者,比较瘤组织、瘤旁组织PABPC1 mRNA、Rap1GAP mRNA、Glypican-1 mRNA表达,并根据术后6个月复发情况分为复发组和未复发组,比较两组脑胶质瘤组织PABPC1 mRNA、Rap1GAP mRNA、Glypican-1 mRNA表达,分析脑胶质瘤组织各指标预测外科术后复发的效能。结果瘤组织PABPC1 mRNA、Rap1GAP mRNA低于瘤旁组织,Glypican-1 mRNA高于瘤旁组织(P<0.05);复发组WHO病理分级、PABPC1 mRNA、Rap1GAP mRNA、Glypican-1 mRNA与未复发组比较,差异有统计学意义(P<0.05);WHO病理分级增高,PABPC1 mRNA、Rap1GAP mRNA逐渐降低,Glypican-1 mRNA逐渐升高(P<0.05);PABPC1 mRNA、Rap1GAP mRNA与WHO病理分级呈负相关,Glypican-1 mRNA与病理分级呈正相关(P<0.05);WHO病理分级控制后,脑胶质瘤组织PABPC1 mRNA、Rap1GAP mRNA、Glypican-1 mRNA仍与外科术后复发相关(P<0.05);PABPC1 mRNA、Rap1GAP mRNA、Glypican-1 mRNA联合预测外科术后复发的AUC为0.959,大于单一指标预测(P<0.05)。结论脑胶质瘤组织PABPC1 mRNA、Rap1GAP mRNA、Glypican-1 mRNA表达与病理特征关系密切,且是外科术后复发的独立危险因素,联合检测可为临床完善脑胶质瘤术后复发风险评价机制提供参考。