目的 分析细胞质聚腺苷酸化元件结合蛋白3(Cytoplasmic Polyadenylation Element Binding Protein 3,CPEB3)在5种皮肤黑素瘤细胞中的表达情况,并通过下调其在细胞中的表达,评价CPEB3基因对细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭能力的影响。方法 ...目的 分析细胞质聚腺苷酸化元件结合蛋白3(Cytoplasmic Polyadenylation Element Binding Protein 3,CPEB3)在5种皮肤黑素瘤细胞中的表达情况,并通过下调其在细胞中的表达,评价CPEB3基因对细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭能力的影响。方法 利用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和Western blot检测5种黑素瘤细胞株(WM3211、SK-MEL-28、A2058、A375和A875)中CPEB3在mRNA和蛋白水平的表达情况;应用shRNA干扰技术下调细胞中CPEB3的表达,采用CCK-8法、平板克隆形成试验、流式细胞术、划痕法、Transwell迁移和侵袭试验等方法检测CPEB3表达下调对黑素瘤细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭能力的影响。结果 CPEB3在5种黑素瘤细胞株中的表达水平从高到低依次为:WM3211、SK-MEL-28、A2058、A375和A875;下调SK-MEL-28细胞中CPEB3的表达后,细胞增殖能力和克隆形成能力显著增强,凋亡率显著降低,细胞迁移和侵袭能力显著提高(均P<0.05)。结论 下调黑素瘤细胞中CPEB3的表达可促进细胞增殖,抑制细胞凋亡,并增强细胞迁移和侵袭能力,提示CPEB3基因可能在黑素瘤恶性进展过程中发挥重要作用。展开更多
目的探讨胞质多聚腺苷酸化元件结合蛋白4(cytoplasmic polyadenylation-element-binding protein,CPEB4)在脑胶质瘤组织中的表达及其对胶质瘤细胞生长的影响。方法测定脑胶质瘤组织中CPEB4蛋白表达、脑胶质瘤组织和细胞中CPEB4 m RNA水...目的探讨胞质多聚腺苷酸化元件结合蛋白4(cytoplasmic polyadenylation-element-binding protein,CPEB4)在脑胶质瘤组织中的表达及其对胶质瘤细胞生长的影响。方法测定脑胶质瘤组织中CPEB4蛋白表达、脑胶质瘤组织和细胞中CPEB4 m RNA水平、细胞中CPEB4蛋白、PIK3CA蛋白、SMAD3蛋白的表达、细胞凋亡、细胞周期、细胞增殖和细胞的侵袭能力。结果低级别脑组织和高级别脑组织中CPEB4蛋白阳性率高于正常脑组织(P<0.05),高级别脑组织中CPEB4蛋白阳性率高于低级别脑组织(P<0.05);低级别脑组织和高级别脑组织中CPEB4蛋白水平高于正常脑组织(P<0.05),高级别脑组织中CPEB4蛋白水平高于低级别脑组织(P<0.05);SiRNA-CPEB4组细胞CPEB4蛋白表达量低于阴性对照组和空白对照组(均P<0.05);SiRNA-CPEB4组早期细胞凋亡率明显高于阴性对照组和空白对照组(均P<0.05);SiRNA-CPEB4组G1期细胞比例高于阴性对照组和空白对照组(均P<0.05),SiRNA-CPEB4组S期细胞比例低于阴性对照组和空白对照组(均P<0.05);SiRNACPEB4组第3天、第7天细胞OD值均低于阴性对照组和空白对照组(P<0.05);SiRNA-CPEB4组侵袭细胞数低于阴性对照组和空白对照组;SiRNA-CPEB4组细胞PIK3CA蛋白、SMAD3蛋白表达量均低于阴性对照组和空白对照组(均P<0.05)。结论脑胶质瘤组织中CPEB4水平升高,CPEB4影响脑胶质瘤细胞的凋亡、细胞周期、增殖和侵袭,其机制可能和PIK3CA、SMAD3有关。展开更多
目的探讨胞质多聚腺苷酸化成分结合蛋白4(CPEB4)在胶质瘤发生发展过程中的作用。方法免疫组化、Western blot及Real Time PCR法检测胶质瘤组织和细胞中CPEB4的表达情况,Western blot及Real Time PCR法检测CPEB4 siRNA的干扰效率,裸鼠成...目的探讨胞质多聚腺苷酸化成分结合蛋白4(CPEB4)在胶质瘤发生发展过程中的作用。方法免疫组化、Western blot及Real Time PCR法检测胶质瘤组织和细胞中CPEB4的表达情况,Western blot及Real Time PCR法检测CPEB4 siRNA的干扰效率,裸鼠成瘤试验测定CPEB4基因表达下调后胶质瘤细胞在体内致瘤情况。结果免疫组化、Western blot和Real Time PCR结果显示脑胶质瘤组织CPEB4的蛋白和mRNA表达明显升高,随着WHO分级的增加,CPEB4的蛋白和mRNA水平也显著增加。Western blot和Real Time PCR结果显示U87细胞系CPEB4的蛋白和mRNA水平显著高于胶质瘤细胞系U251。在体干扰CPEB4表达能显著降低肿瘤的体积和质量。结论脑胶质瘤组织和细胞高表达CPEB4基因,在体干扰CPEB4表达能显著抑制脑胶质瘤细胞的生长,CPEB4可能成为治疗胶质瘤的重要靶点。展开更多
文摘目的探讨胞质多聚腺苷酸化元件结合蛋白4(cytoplasmic polyadenylation-element-binding protein,CPEB4)在脑胶质瘤组织中的表达及其对胶质瘤细胞生长的影响。方法测定脑胶质瘤组织中CPEB4蛋白表达、脑胶质瘤组织和细胞中CPEB4 m RNA水平、细胞中CPEB4蛋白、PIK3CA蛋白、SMAD3蛋白的表达、细胞凋亡、细胞周期、细胞增殖和细胞的侵袭能力。结果低级别脑组织和高级别脑组织中CPEB4蛋白阳性率高于正常脑组织(P<0.05),高级别脑组织中CPEB4蛋白阳性率高于低级别脑组织(P<0.05);低级别脑组织和高级别脑组织中CPEB4蛋白水平高于正常脑组织(P<0.05),高级别脑组织中CPEB4蛋白水平高于低级别脑组织(P<0.05);SiRNA-CPEB4组细胞CPEB4蛋白表达量低于阴性对照组和空白对照组(均P<0.05);SiRNA-CPEB4组早期细胞凋亡率明显高于阴性对照组和空白对照组(均P<0.05);SiRNA-CPEB4组G1期细胞比例高于阴性对照组和空白对照组(均P<0.05),SiRNA-CPEB4组S期细胞比例低于阴性对照组和空白对照组(均P<0.05);SiRNACPEB4组第3天、第7天细胞OD值均低于阴性对照组和空白对照组(P<0.05);SiRNA-CPEB4组侵袭细胞数低于阴性对照组和空白对照组;SiRNA-CPEB4组细胞PIK3CA蛋白、SMAD3蛋白表达量均低于阴性对照组和空白对照组(均P<0.05)。结论脑胶质瘤组织中CPEB4水平升高,CPEB4影响脑胶质瘤细胞的凋亡、细胞周期、增殖和侵袭,其机制可能和PIK3CA、SMAD3有关。
文摘目的探讨胞质多聚腺苷酸化成分结合蛋白4(CPEB4)在胶质瘤发生发展过程中的作用。方法免疫组化、Western blot及Real Time PCR法检测胶质瘤组织和细胞中CPEB4的表达情况,Western blot及Real Time PCR法检测CPEB4 siRNA的干扰效率,裸鼠成瘤试验测定CPEB4基因表达下调后胶质瘤细胞在体内致瘤情况。结果免疫组化、Western blot和Real Time PCR结果显示脑胶质瘤组织CPEB4的蛋白和mRNA表达明显升高,随着WHO分级的增加,CPEB4的蛋白和mRNA水平也显著增加。Western blot和Real Time PCR结果显示U87细胞系CPEB4的蛋白和mRNA水平显著高于胶质瘤细胞系U251。在体干扰CPEB4表达能显著降低肿瘤的体积和质量。结论脑胶质瘤组织和细胞高表达CPEB4基因,在体干扰CPEB4表达能显著抑制脑胶质瘤细胞的生长,CPEB4可能成为治疗胶质瘤的重要靶点。