人乳头瘤病毒感染细胞的核仁组成区嗜银蛋白染色研究及临床意义

本文采用细胞核仁组成区嗜银蛋白技术观察了人乳头瘤病毒（ＨＰＶ）感染阳性食管癌蜡块切片２Ｏ例，阴性组１４例。结果发现ＨＰＶ感染阳性癌肿细胞核仁组成区嗜银蛋白计数（１１．３５６±１．６２８，－ｘ±ｓ）明显高于阴性组（５．３３９±０．７９６，－ｘ±ｓ），两组差异显著（Ｐ＜０．０５）。该结果说明ＨＰＶ感染阳性的食管癌细胞的增殖较阴性活跃，ＨＰＶ感染性癌肿的恶性度较阴性高，预后差，对食管癌的临床治疗有一定的指导意义。

T淋巴细胞核仁形成区嗜银蛋白(Ag-NORs)检测对恶性肿瘤临床意义的探讨

目的 探讨T淋巴细胞核仁形成区嗜银蛋白 (Ag NORs)在恶性肿瘤诊断及疗效观察中的临床价值。方法 制作银染T淋巴细胞涂片 ,显微镜下选取转化良好的T淋巴细胞 ,利用KL型肿瘤免疫图像分析系统检测其Ag NORs含量 (Ag NORs面积与细胞核面积的比值 ,即I /S % )。结果 检测 6 6例正常人、117例恶性肿瘤患者和 2 5例良性肿瘤患者 ,发现 :(1)正常人的T淋巴细胞Ag NORs含量与良性肿瘤患者和恶性肿瘤患者均有显著性差异 (P <0 .0 5 ) ,其均值分别为 :7.0 9± 0 .79、6 .31± 0 .75、5 .4 4± 1.13。 (2 )正常人和良性肿瘤患者的T淋巴细胞AgNORs含量与鼻咽癌、食管癌、乳腺癌、肝癌患者之间有显著性差异(P <0 .0 5 )。鼻咽癌、食管癌、乳腺癌、肝癌患者T淋巴细胞AgNORs检测的阳性率分别为 6 2 .86 %、71.4 3%、6 6 .6 7%、70 %。 (3)观察 6 7例鼻咽癌患者放疗过程的不同阶段 ,发现放疗中和放疗结束患者的T淋巴细胞Ag NORs均值分别为 4 .38± 1.16和 4 .16± 1.2 7,较放疗前 (均值 5 .5 5± 1.2 0 )低 ,但放疗一年后有所上升 (均值 5 .75± 0 .4 8)。 (4)观察 2 8例食管癌患者的不同治疗阶段 (术前、术后七天和术后一月 ) ,发现其T淋巴细胞AgNORs值没有显著性差异 (P >0 .0 5 ) ,分别为 :5 .2 3± 1.16、5 .11±

日本血吸虫培养细胞核仁组织区相关嗜银蛋白的研究

目的 通过研究日本血吸虫成虫与童虫培养细胞核仁组织区相关嗜银蛋白(AgNORs)含量及β-巯基乙醇对培养细胞AgNORs的影响,探讨AgNORs能否作为评价日本血吸虫培养细胞增殖的指标以及β-巯基乙醇对培养细胞的促增殖作用。方法 联合法培养虫龄分别为18d和24d的日本血吸虫童虫与成虫,将童虫细胞随机分成对照组和实验组,对照组细胞与成虫细胞使用常规培养基培养,实验组在常规培养基中加入50μmoL/L β-巯基乙醇和1mmoL/L丙酮酸钠。培养第5d,运用胶银法染色,使用HPIAS-2000图像分析系统,计算培养细胞核内AgNORs颗粒数,测定银染颗粒面积与核面积的百分比和平均光密度。结果 日本童虫培养细胞(对照组)的AgNORs颗粒数目、颗粒面积与核面积百分比、平均光密度均高于成虫培养细胞。统计学分析显示,两者之间的AgNORs颗粒数日,银染颗粒面积与核面积百分比、平均光密度两两比较均有统计学差异(P<0.01或P<0.05);实验组培养细胞与对照组比较,AgNORs颗粒数目明显增多颗粒面积与核面积百分比、平均光密度均显著升高。统计学分析可知,两组细胞三组参数之间均有统计学差异(P<0.01或P<0.05)。结论 AgNORs可作为评价日本血吸虫培养细胞增殖的一个简便、敏感的指标。日本血吸虫童虫培养细胞较成虫培养细胞更具增殖潜能;

亚精胺对日本血吸虫成虫培养细胞核仁组织区相关嗜银蛋白的影响

目的以日本血吸虫培养细胞核仁组织区相关嗜银蛋白(Argyrophilicnucleolarorganizerregionassociatedproteins,AgNORs)为评价指标,探讨亚精胺(Spermidine,Spd)对培养细胞的促增殖作用。方法采用联合法将虫龄为24d的日本血吸虫成虫细胞接种于小盖玻片上,培养于常规培养基中。接种后第3天,随机分为实验组和对照组。将实验组细胞用无血清培养基配制的终浓度为75μmol/L的Spd处理48h,对照组细胞则用不含Spd的无血清培养基处理,时间相同;PBS清洗3次后换用常规培养基继续培养。于第7、14、21、28、35天分别对培养细胞进行AgNORs染色。使用HPIAS-2000图像分析系统,计算培养细胞核内AgNORs颗粒数及平均吸光值,并作统计分析。结果经Spd处理,各实验组培养细胞AgNORs着色明显深于对照组;但随着培养时间的延长,实验组与对照组细胞着色均逐渐变浅。各实验组细胞AgNORs颗粒数目与平均吸光值高于对照组,二者比较差异有统计学意义(u7=50.95、43.78;u14=55.23、43.54;u21=36.65、32.25;u28=31.6、32.95;u35=28.86、9.54;P<0.01)。各实验组AgNORs吸光值两两比较,除第7天与第14天之间差异无统计学意义外(q=0.008058,P>0.05),其余差异都有统计学意义(P<0.01)。结论Spd具有促进日本血吸虫培养细胞增殖的能力,每周用Spd处理培养细胞1次,能更大限度地促进血吸虫培养细胞的生长。

卵巢癌患者外周血T淋巴细胞核仁形成区嗜银蛋白的研究

目的 :研究卵巢癌患者外周血T淋巴细胞核仁形成区嗜银蛋白 (AgNORs)与卵巢癌的临床特点及生物学行为的关系。方法 :以卵巢癌患者 36例为研究组 ;以良性卵巢肿瘤患者 17例及健康妇女 2 0例为对照组。利用KL型肿瘤免疫图像分析系统计数T淋巴细胞核仁银染面积与细胞核面积比值 (integratedsquare ,IS)。结果 :卵巢浆液性腺癌、子宫内膜样腺癌、粘液性腺癌及未分化腺癌的IS均值分别为 9.31± 1.96 %、7.4 1± 0 .39%、7.98± 2 .95 %、6 .78± 0 .70 % ;高分化、中分化、低分化卵巢癌患者IS均值分别为 9.6 6±1.85 %、8.37± 1.95 %、8.16± 2 .0 5 % ;Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期及Ⅳ期卵巢癌患者的IS均值分别为 8.80± 1.35 %、10 .6 5± 0 .96 %、9.12± 1.6 3%、6 .0 1± 0 .4 5 % ;良性卵巢肿瘤及健康妇女的IS均值分别为 9.0 9± 1.83%、9.6 3± 1.5 2 %。不同组织学类型、不同分化级别卵巢癌患者其外周血T淋巴细胞AgNORs表达差异无显著性 (P >0 .0 5 )。Ⅳ期卵巢癌与Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期卵巢癌及对照组患者的外周血T淋巴细胞AgNORs表达有高度显著性差异 (P <0 .0 1)。结论 :Ⅳ期卵巢癌患者较Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期卵巢癌及对照组患者外周血T淋巴细胞rD NA转录活性及细胞免疫功能明显降低 。

急性非淋巴细胞白血病细胞核仁组织区相关嗜银蛋白的研究

目的研究核仁形成区相关嗜银蛋白(Ag-NORs)对评估急性非淋巴细胞白血病(AML)细胞增殖分化水平的价值。方法用嗜银染色方法检测AML细胞的嗜银颗粒数目和形态,观察Ag-NORs形态与细胞形态学之间的关系,Ag-NORs分数与染色体、荧光分子原位杂交(FISH)检查以及AML预后的关系。结果不同Ag-NORs形状特征的细胞比例与细胞形态学的原幼稚细胞比例有显著相关性。Ag-NORs分数比较,染色体和FISH检查异常组高于正常组;治疗前未缓解组高于缓解组;持续缓解1年以上组高于1年内复发组;生存期1年以上组高于1年内死亡组(均P<0.01)。结论用嗜银染色方法检测AML细胞Ag-NORs分数和形态可观察白血病细胞的增殖状况,可作为白血病细胞动力学研究的一项指标,由于操作简便和易于普及,可为白血病的临床诊治提供快捷有效的实验依据。

T淋巴细胞核仁形成区嗜银蛋白在不同人群中表达含量的探讨

目的:探讨T淋巴细胞核仁形成区嗜银蛋白(Ag-NORs)在新生儿、正常人和恶性肿瘤患者中免疫功能评价的意义。方法:对培养后的新生儿、恶性肿瘤患者及正常成年人的淋巴细胞进行普通细胞银染色,用KL型肿瘤免疫图像分析仪检测T淋巴细胞核仁银染面积与细胞核面积比值(I.S%)。结果:新生儿的T淋巴细胞Ag-NORs测定值是7.79±0.57%,正常成年人为7.56±0.51%,恶性肿瘤患者为5.15±0.68%。恶性肿瘤患者的T淋巴细胞Ag-NORs较正常人及新生儿均显著降低(均P<0.01),新生儿与正常人相比无显著性差异。结论:恶性肿瘤患者T淋巴细胞的Ag-NORs测定值较低,可能与免疫系统受损有关。

病毒性心肌炎患儿外周血T淋巴细胞核仁形成区嗜银蛋白含量测定

目的 :探讨病毒性心肌炎患儿外周血T淋巴细胞核仁形成区嗜银蛋白 (Ag -NORs)的变化和意义。方法 :选择急性期病毒性心肌炎患儿 32例 ,迁延期 17例 ,对其外周血T淋巴细胞经培养后制片进行银染 ,检测并计算淋巴细胞核仁银染面积和细胞核面积比值。结果与 2 5例健康对照比较。结果 :病毒性心肌炎急性期患儿外周血T淋巴细胞Ag-NORs含量较对照组显著降低 (P <0 .0 1) ;迁延期Ag -NORs含量逐渐恢复 ,但与对照组比较差异仍有统计学意义 (P <0 .0 5 ) ,与急性期比较差异无统计学意义 (P >0 .0 5 )。结论

T淋巴细胞核仁形成区嗜银蛋白含量的对比

目的 探讨核仁形成区嗜银蛋白 (Ag -NORs)含量检测对肺癌和肺结核患者的诊断及鉴别诊断的意义。方法 采用KL型免疫分析系统检测正常人、肺癌和肺结核患者外周血T淋巴细胞核仁形成区嗜银蛋白含量 ,用I .S %表示。以反映T淋巴细胞核内rDNA的转录活性。结果 肺癌患者和肺结核患者的I.S值均明显低于正常人 (P<0 0 1) ;肺癌患者的I .S %值显著低于肺结核患者 (P <0 0 1)。结论 Ag -NORs检测对于鉴别正常人、肺癌。

T淋巴细胞核仁形成区嗜银蛋白在血液病诊断与监测中的价值

目的 :探讨外周血T淋巴细胞核仁形成区嗜银蛋白 (AgNORs)在血液病诊断和监测中的价值。方法 :应用计算机图像分析系统对 2 5例恶性血液病患者、2 7例良性血液病患者和 3 1例正常人外周血AgNORs值进行测定和比较。结果 :与正常人和良性血液病患者相比 ,恶性血液病患者AgNORs值显著下降 (P <0 0 1) ,而且治疗后达完全缓解的患者的AgNORs值有所上升。结论 :T淋巴细胞AgNORs检测在血液病的诊断和疗效观察中有一定的价值。

人卵巢耐药细胞亚株(COC1/DDP)的核及核仁组成区嗜银蛋白图像分析

目的 :建立判别卵巢癌耐药指标。方法 :以银染法 ,用自动图像分析仪 ,对卵巢癌细胞株 (COC1)及耐药细胞亚株 (COC1/DDP)的细胞核及核仁组成区嗜银蛋白 ,进行 2 3项几何参数及构造参数的测量。结果 :COC1/DDP及COC1细胞核及AgNOR测量结果差异有显著性 ,并用判别分析 ,建立判别模式 ,其回代率各为 98%及 94%。结论 :细胞核及AgNOR的测定可以作为判断细胞耐药指标之一 ,也可用于指导临床用药。

葛根素对T淋巴细胞核仁区嗜银蛋白的影响

目的观察葛根素对外周血T淋巴细胞核仁区嗜银蛋白(Ag鄄NORs)的影响。方法采用KL型免疫图像分析系统检测T淋巴细胞Ag鄄NORs。结果使用葛根素前、后T淋巴细胞Ag鄄NORs分别为(5.67±0.95)%、(6.19±1.16%),二者相比,P<0.05,有显著差异,使用葛根素治疗后T淋巴细胞Ag鄄NORs含量增加。结论葛根素有增强机体细胞免疫功能的作用。

对核仁组成区嗜银蛋白外周血染色的探讨

目的探索一种简便实用的能直接应用于外周血的核仁组成区嗜银蛋白染色方法。方法取25mm×55mm的双层滤纸贴盖于经固定的血片上,自然光条件下滴加按1:2现配的银胶溶液,放暗盒内30℃水浴染50min,水洗晾干,先低倍找到最佳部位后换油镜观察血膜染色后视野内背景清洁度、细胞结构和银染颗粒着色情况,并另作30 min和40 min同等条件对照。结果本法采用滤纸贴盖血膜面后,染液完全扩散于滤纸的时间较未用滤纸时以手工完全铺展液面的时间(即染色前试剂曝光时间)明显缩短,且利用了滤纸的过滤功能,使视野中杂质沉淀大为减少;适当延长染色时间能使细胞和银染颗粒着色程度加深,更易于检测识别。结论经此改进后的银染法可用于自然光条件下血片嗜银蛋白直接染色,适于各级医疗机构应用。

柔红霉素对培养人视网膜色素上皮细胞核仁组成区相关嗜银蛋白影响的定量分析

目的:了解视网膜色素上皮(retinal pigment epithelium,RPE)细胞核仁组成区相关嗜银蛋白(ar-gyrophilic nucleolar organiser region-associated proteins,AgNORs)的表达量及柔红霉素对其影响。方法:将柔红霉素加入培养人RPE细胞的培养液中(终浓度为180μg/L)作用12小时,撤药后继续培养24小时。对培养细胞行AgNORs染色,图像分析染色结果。结果:对照组和柔红霉素组AgNORs面积(μm^2/核)分别为41.61±4.52和13.66±0.65(P<0.01);平均面密度(AgNORs面积与胞核面积之比)(%)为20.37±1.97和13.06±2.44(P<0.01)。结论:柔红霉素抑制体外培养人RPE细胞核仁组成区转录活性可能是其细胞毒作用的机理之一。眼科学报1999;15:70—73。

核仁组成区相关嗜银蛋白染色革新法

核仁组成区相关嗜银蛋白（ＡｇＮＯＲ）银染技术已广泛用以研究细胞生长活性，根据ＡｇＮＯＲ数目多少来判定肿瘤的良恶性和对肿瘤进行鉴别诊断。然而ＡｇＮＯＲ技术至今还存在背景非特异性银颗粒沉积问题而影响结果判定。本研究发现影响背景染色结果的主要因素是明胶的质量，采用Ｆａｒｍｅｒ’ｓ液可以清除背景染色，运用微波炉染色不仅可以缩短染色时间而且可以减少银用量。