流式细胞仪检测白细胞胞浆内抗原髓过氧化物酶的实验研究及其应用

目的评价流式细胞仪检测胞浆内抗原髓过氧化物酶(MPO)的方法,探讨实验中各因素对检测结果的影响。方法以HL-60细胞为模型,多参数流式细胞仪分析,比较FACS、Fix&Perm、Fixation&Permeabiliza-tion 3种破膜剂处理及不同处理时间、不同荧光染料对实验结果的影响。检测正常人和急性白血病患者的MPO表达情况。结果FACS破膜剂对细胞的前向散射角/侧向散射角(FSC/SSC)影响最小,相对荧光强度(RFI)明显高于其他两者。3种破膜剂在破膜时间15 min时均可达到最佳效果。藻红蛋白(PE)标记的MPO抗体在荧光强度上明显优于异硫氰酸荧光素(FITC)。41例初发急性白血病患者和20例非白血病患者骨髓检测结果证实,MPO为急性髓系白血病诊断中最为敏感的髓系抗原。结论流式细胞仪检测MPO的标准推荐方法:应用FACS破膜剂15 min,标本必须当天完成检测,尽量采用PE标记的MPO抗体。MPO对急性白血病的诊断和分型非常重要。

流式细胞仪检测白细胞髓过氧化物酶的方法研究

目的评价流式细胞仪检测胞浆内抗原髓过氧化物酶(MPO)的方法,探讨实验中各因素对检测结果的影响。方法以HL-60细胞为模型,多参数流式细胞仪分析,比较3种不同破膜剂处理及不同处理时间,标本不同放置时间,不同荧光染料对实验结果的影响。结果比较FACS、Fix&Perm、Fixation&Permeabilization 3种破膜剂,得出FACS破膜剂对细胞的前向散射角/侧向散射角(FSC/SSC)影响最小,相对荧光强度(RFI)明显高于其他两者,效果最佳。3种破膜剂均在破膜时间15 min时可达到最佳效果。标本放置在室温条件下,12 h内应对其进行处理,至24 h细胞已出现部分死亡,将影响实验结果的正确性。PE荧光的MPO在荧光强度上明显优于FITC荧光,因此推荐在条件允许的情况下,尽可能地选用PE荧光的MPO抗体。结论流式细胞仪检测MPO的推荐方法:调整样本细胞数,应用FACS破膜剂15 min,标本必须当天完成检测,尽量采用PE标记的MPO抗体。

急性心肌梗死患者经皮冠状动脉介入术后血清成纤维细胞生长因子21和髓过氧化物酶水平与预后的关系

目的探究急性心肌梗死(AMI)患者经皮冠状动脉介入术(PCI)后血清成纤维细胞生长因子21(FGF-21)、髓过氧化物酶(MPO)水平与预后的关系。方法选择2016年1月至2018年12月在我院接受PCI术治疗的108例AMI患者作为研究对象。根据随访过程中是否发生主要不良心血管事件(MACE),病人分为预后不良组(25例)和预后良好组(83例)。采用酶联免疫吸附法检测受试者血清FGF-21水平,采用胶体金免疫层析法检测受试者血清MPO水平。分析FGF-21、MPO与AMI患者PCI术后MACE发生的关系及诊断MACE发生的效能。结果预后不良组血清FGF-21、MPO水平均高于预后良好组,差异均有统计学意义(P<0.05)。FGF-21+MPO诊断AMI患者PCI术后MACE发生的ROC曲线下面积(AUC)为0.860,高于FGF-21、MPO单独诊断AMI患者PCI术后MACE发生的AUC。FGF-21>140.41 ng/L和FGF-21≤140.41 ng/L的患者,MACE发生率分别为39.58%和10.00%,差异有统计学意义(P<0.001)。MPO>419.42μg/L和MPO≤419.42μg/L的患者,MACE发生率分别为35.00%和8.33%,差异有统计学意义(P=0.001)。Cox单因素及Cox多因素分析显示FGF-21、MPO与AMI患者PCI术后MACE发生密切相关(均P<0.05)。结论 AMI患者PCI术后血清FGF-21、MPO水平与预后有关。高水平的FGF-21、MPO与MACE发生密切相关。

急性白血病患者细胞质髓过氧化物酶检测结果分析

目的探讨并比较急性白血病(AL)患者细胞过氧化物酶(POX)染色与细胞质髓过氧化物酶(cMPO)流式细胞术检测的阳性率及阳性积分,评价cMPO流式细胞术的检测能力。方法选取该院60例AL住院患者作为研究对象,分别进行POX染色与cMPO流式细胞术检测,并比较AL患者细胞POX染色与cMPO流式细胞术的阳性率及阳性积分。结果在急性非淋巴细胞白血病(ANLL)中cMPO的阳性率较高,与POX染色的阳性率对比差异无统计学意义(P>0.05);急性淋巴细胞白血病(ALL)的POX染色存在一定的假阳性率。ALL与ANLL的POX染色与cMPO流式细胞术的阳性积分对比,差异无统计学意义(P>0.05)。结论POX染色的准确度低于cMPO流式细胞术,但成本低、仪器依赖性小,建议两种方法联合应用,继而为血液系统疾病的诊断提供客观依据。

冠心病患者PCI手术前后血清髓过氧化物酶水平变化及临床意义

目的：探讨冠心病（ CHD）患者经皮冠状动脉介入术（ PCI）治疗前后血清髓过氧化物酶（ MPO）水平变化及临床意义。方法成功行PCI治疗的CHD患者80例（ CHD组），其中稳定型心绞痛（ SAP亚组）50例，不稳定型心绞痛（ UAP亚组）患者30例，又根据冠状动脉Gensini积分分为重度病变亚组32例和非重度病变亚组48例；另选取非CHD志愿者20例为健康对照组。观察PCI术前及术后1 h和24 h时血清MPO水平改变，综合分析MPO改变与临床各指标的关系。结果 SAP亚组和UAP亚组患者术前MPO和CRP水平均高于健康对照组（ P ＜0蜒．05）。与术前比较，PCI术后1 h MPO水平上升（ P ＜0．05），24 h回落。重度病变亚组患者术前MPO和CRP水平均高于非重度病变亚组（ P ＜0．05）。经PCI治疗后，重度病变亚组PCI术后1 h水平仍明显高于非重度病变亚组（ P ＜0．05）。ROC分析可见术后24 h和△1（术后1 h－术前）、△3（术后24 h－术后1 h）的MPO水平有助于预测MACE的发生（AUC分别为0．823、0．769和0．845， P ＜0．05）。△1（术后1 h－术前）与MACE存在正相关（ r ＝0．372， P ＜0．05），与Gensini积分存在正相关（ r ＝0．392， P ＜0．05），△3（术后24 h－术后1 h）与MACE存在负相关（ r ＝－0．329， P ＜0．05），与Gensini积分存在负相关（ r ＝－0．435， P ＜0．05）。 Logistic回归发现Gensini积分（OR＝1．03，95％CI 0．92～1．32， P ＜0．05）和△3（OR＝1．12，95％CI 0．94～1．45， P ＜0．05）为MACE发生的独立危险因素。结论 PCI术后CHD患者血清MPO出现一过性波动，这种改变与冠状动脉狭窄程度和临床预后相关。

心房颤动患者血浆髓过氧化物酶水平与射频消融术后复发的相关性

目的探讨心房颤动患者血浆髓过氧化物酶(MPO)水平与射频消融术(RFCA)后复发的相关性。方法选择2017年1月至2018年6月在该院初次接受RFCA治疗的心房颤动患者82例,根据术后3~12个月是否复发分为复发组(n=30)、未复发组(n=52)。比较两组患者基本临床资料,以及术前血脂、C反应蛋白(CRP)、同型半胱氨酸(HCY)、MPO等实验室指标,分析血浆MPO与术后复发的相关性。结果与未复发组比较,复发组患者持续性心房颤动比例、病程、左心房内径(LAD)、HCY、CRP、MPO水平均明显升高,高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平明显下降,差异有统计学意义(P<0.05);与高MPO组比较,低MPO组随访6、12个月时术后复发率均明显降低,差异有统计学意义(P<0.05);多因素logistic回归分析显示,阵发性心房颤动、病程、LAD、HCY、MPO均是RFCA术后复发的独立危险因素(P<0.05)。结论心房颤动患者术前血浆MPO水平与RFCA术后复发密切相关,可作为RFCA患者术后复发的独立评估指标之一。

血浆髓过氧化物酶浓度对急性ST段抬高型心肌梗死急诊经皮冠状动脉介入术患者预后的预测价值分析

急性ST段抬高型心肌梗死(STEMI)是一种常见的心血管疾病,不稳定斑块、血栓形成、血小板聚集是引起该疾病的主要原因,经皮冠状动脉介入术(PCI)是目前治疗冠状动脉粥样硬化性心脏病(冠心病)、重建冠状动脉血运的重要手段,但仍有部分经PCI治疗后冠心病患者术后3个月仍可再次发生冠状动脉狭窄、闭塞,最终导致死亡,故而,有必要探寻一种评估冠心病预后效果的有效指标,为早期干预治疗提供可靠的参考依据[1].有关研究发现,炎症反应在急性ST段抬高型心肌梗死发展过程中起着重要作用,贯穿于斑块形成、发展、破裂、形成血栓的全过程[2].

61名新生儿髓性过氧化物酶的测定

髓性过氧化物酶(Myeloperoxidase MPO)是中性粒细胞内一种重要杀菌物质。MPO缺乏时,白细胞杀菌功能减弱,临床上可出现反复的细菌感染。测定初生婴儿MPO活性,有助于了解围生期免疫特点和白细胞的发育规律。为此我们测定了61名初生婴儿粒细胞MPO活性,并以健康成人作为对照,以资比较。材料和方法测定对象:61名初生婴儿均为在我院产科出生后1～4天的足月顺产婴儿,出生体重为2.8～3.5kg,其中男婴30名,女婴31名;健康成人年龄在20～40岁之间,男34名,女27名,无新近感染及慢性病史。方法:采用Kaplon报告的简易MPO染色法,染色后在油镜下计数100个中性粒细胞。

胞浆髓过氧化物酶和C反应蛋白检测在小儿细菌性肺炎中的应用

本文采用流式细胞术和荧光免疫技术检测了70例小儿细菌性肺炎患者外周血多形核细胞胞浆髓过氧化物酶（ Cytoplasmic myeloperoxydase, cMPO）及全血超敏-C反应蛋白（hs．CRP）和WBC水平，旨在分析两者在早期感染诊断中何者更佳。现报道如下。

急性白血病细胞髓过氧化物酶染色与细胞质髓过氧化物酶诊断意义比较

目的通过对急性白血病细胞细胞化学染色法检测过氧化物酶(peroxidase,POX)与流式细胞术检测其细胞质髓过氧化物酶(cytoplasm myeloperoxidase,c MPO)的结果分析,对比两种方法检测髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)对白血病分型的差异,为更准确地进行白血病分型提供依据。方法用细胞化学染色法检测急性白血病细胞POX阳性率,用流式细胞术检测急性白血病细胞c MPO阳性率,并对POX、c MPO阳性率及阳性细胞积分结果进行比较。结果急性淋巴细胞白血病中细胞化学染色检测POX与流式细胞术检测c MPO阳性率和阳性积分差异均有统计学意义(P<0.05),POX明显较高;急性非淋巴细胞白血病细胞POX、c MPO阳性率差异有统计学意义(P<0.05),c MPO阳性率较高;但POX、c MPO阳性细胞积分差异无统计学意义(P>0.05)。急性髓系白血病,未分化型(M1)的POX、c MPO阳性率差异有统计学意义(P=0.006),c MPO阳性率明显高于POX阳性率,但POX阳性细胞积分明显高于流式细胞术c MPO阳性积分(P=0.001);急性髓系白血病,伴成熟型(M2)、急性早幼粒细胞白血病(M3)、急性粒-单核细胞白血病(M4)、急性单核细胞白血病(M5)的POX、c MPO阳性率及阳性细胞积分差异均无统计学意义(P>0.05)。结论细胞化学染色检测POX与流式细胞术检测c MPO的阳性率及阳性细胞积分在急性白血病尤其急性髓系白血病中差异不大,二者各有优缺点,可以根据实际情况和对敏感性的要求选择适合的试验方法,最优方案是两种方法相互补充,以形态学作为基础,细胞免疫学作为辅助,同时进一步结合临床表现、遗传学检查等因素综合分析,进行血液系统疾病的诊断。

多药耐药基因表达与急性髓细胞性白血病化疗效果的关系

1目的 探讨白血病细胞多药耐药 (MDR)基因表达与化疗效果的关系。 2方法 应用 MRK- 16和C1 2 9单克隆抗体对 2 0例急性髓细胞性白血病 (AML)进行了流式细胞术、细胞免疫化学、多聚酶链反应检查 ,并行细胞遗传学分析。 3结果 18例初、复诊病人均有 MDR表达 ,但 MDR表达与完全缓解 (CR)率无线性关系 ,化疗未完全缓解者 CD+ 3 4细胞增多。 4结论 MDR基因表达难估 AML 预后 ,CD+ 3 4细胞可作为 AML

wt1定量联合FCM在急性髓细胞白血病MRD监测中的临床应用

目的探讨在急性髓细胞白血病(AML)中Wilms瘤基因1(wt1)mRNA定量联合多参数流式细胞术(FCM)分析监测微小残留病灶的临床应用。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应技术(qRT-PCR)检测35例AML患者的wt1表达水平;将患者根据不同亚型分组检测;并且对9例缓解和4例复发患者进行随访,检测wt1表达水平。采用FCM分析AML中微小残留病灶(MRD)水平。结果与对照组比较,AML病例组wt1表达水平明显增高,差异有统计学意义(P<0.05)。在初诊的各种AML亚型中,M2亚型wt1表达水平最高,M6亚型wt1表达水平最低。9例随访患者提示在达到完全缓解时wt1表达水平下降,而4例随访复发患者在复发时再次升高。FCM检测MRD在不同阶段异常髓系细胞比例明显不同。联合qRT-PCR和FCM技术对MRD检测的敏感性和特异性大大提高,两者具有一致性;利用ROC曲线对复发病例进行分析得到的监测阈值为3.33%。结论在急性髓细胞白血病中wt1 mRNA定量联合多参数流式细胞术分析可用于监测MRD、评估治疗效果、预后及预测疾病复发风险。

曲格列酮诱导胃癌MKN45细胞株凋亡

目的:研究不同浓度曲格列酮对胃癌MKN45细胞过氧化物酶体增殖激活受体γ(PPARγ)激活水平变化及细胞凋亡的作用.方法:胃癌MKN45细胞培养后分为4组,分别为生理盐水对照组和1、5、10μmol/L曲格列酮实验组.用EMSA测定不同浓度曲格列酮对胃癌MKN45细胞PPARγ激活水平的变化,用流式细胞术检测caspase-3蛋白的表达、细胞周期的变化及凋亡.结果:随曲格列酮浓度的增加,PPARγ活性明显升高,以对照组活性为100.1、5、10μmol/L曲格列酮组的PPARγ平均活性分别为155.8、21 8.7和307.6(P<0.01).流式细胞术证实MKN45细胞经1,5,10μmol/L曲格列酮的作用后,随着曲格列酮剂量的增加,Caspase-3蛋白的表达均值分别为4.51,10.95,20.49,33.56(P<0.01),G_0/G_1期细胞逐渐增加,S期细胞下降,凋亡细胞增多.结论:曲格列酮通过对胃癌MKN45细胞PPARγ的激活可引发胃癌MKN45细胞株细胞周期抑制及凋亡,可为胃癌的治疗提供新的靶点.

过氧化物酶体增殖因子活化受体δ基因对人大肠癌细胞凋亡的影响

过氧化物酶体增殖因子活化受体δ（PPAR5）是APC／β-catenin／Tcf-4信号通路上亟待揭示的下游靶基因之一，其下游靶基因的激活可能导致大肠癌的发生。本实验采用流式细胞术及原位缺口末端标记法（TUNEL）观察PPAR8基因沉默对大肠癌细胞凋亡的影响。

中性粒细胞胞外诱捕网检测方法综述

中性粒细胞胞外诱捕网(NETs)是由多种蛋白质和DNA组成的复杂网状结构。许多研究表明,NETs是机体多种免疫炎性疾病、血栓、癌症等病理生理过程的重要参与者。每个阶段NETs的动态变化可在一定程度上预示病程发展方向。该文就目前有效定量NETs的检测方法进行系统综述,旨为临床慢性炎症和癌症早期检测,以及靶向治疗提供最新的理论参考。

NLRP3炎性小体水平联合ECP/MPO比值预测慢性鼻窦炎鼻内镜术后复发的临床价值

目的探讨NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)炎性小体水平联合嗜酸性阳离子蛋白(ECP)/髓过氧化物酶(MPO)比值预测慢性鼻窦炎鼻内镜术后复发的临床价值。方法前瞻性选择医院2018年2月至2022年12月就诊的慢性鼻窦炎鼻内镜术后患者205例,根据患者术后1年是否复发分为非复发组与复发组。筛查影响慢性鼻窦炎患者鼻内镜术后复发的因素,以受试者工作特征曲线(ROC)评价预测效能。结果复发组NLRP3炎性小体水平、ECP/MPO比值、鼻窦CT评分、Lund-Kennedy评分、免疫球蛋白E高于非复发组(P<0.05)。NLRP3炎性小体水平、ECP/MPO比值、鼻窦CT评分、Lund-Kennedy评分、免疫球蛋白E为慢性鼻窦炎患者鼻内镜术后复发的影响因素(P<0.05)。NLRP3炎性小体水平、ECP/MPO比值及二者联合预测慢性鼻窦炎患者鼻内镜术后复发的曲线下面积(AUC)值分别为0.823、0.815、0.899(P<0.05),且二者联合的AUC值更高(P<0.05)。结论NLRP3炎性小体水平联合ECP/MPO比值预测鼻内镜术后复发风险的价值高。

502例急性髓系白血病患者髓过氧化物酶的表达及其在分型诊断中的意义

目的探讨髓过氧化物酶（cMPO）在急性髓系白血病（AML）患者中的表达及其在诊断分型中的意义。方法采用CD45／SSC双参数散点图设门方法对502例AML患者进行八色流式细胞术免疫表型分析，观察患者白血病细胞cMPO表达的阳性率和阳性强度。结果502例AML患者cMPO总体阳性率为58．0％，其中阳性占21．5％，弱阳性占34．1％，部分阳性占2．4％；阴性占42．0％。各亚型中，AML伴t（15；17）（q22；q12）／PML．RARa的cMPO阳性率最高，为100％，阳性强度多数接近正常粒细胞水平；其次为AML伴t（8；21）（q22；q22）／RUNXl-RUNX1T1，阳性率为91．4％，阳性强度多为弱阳性；AML微分化型和急性巨核细胞白血病患者cMPO表达皆为阴性；余各亚型阳性率在22．7％～76．2％。结论各亚型AMLcMPO的阳性率及阳性强度存在显著差异。

外周血MPO、NLR、hs-CRP对ST段抬高型心肌梗死患者PCI术后主要不良心脏事件的预测价值

目的探讨外周血髓过氧化物酶(MPO)联合中性粒细胞/淋巴细胞比值(NLR)、高敏C反应蛋白(hs-CRP)对ST段抬高型心肌梗死(STEMI)患者经皮冠状动脉介入术(PCI)术后主要不良心脏事件(MACE)的预测价值。方法选取2016年5月—2020年8月南阳医学高等专科学校第一附属医院收治的178例STEMI患者行PCI治疗,术后随访1年。收集患者临床资料,测定PCI术前外周血MPO、NLR、hs-CRP,分析患者冠状动脉病变狭窄程度。分析不同病情严重程度STEMI患者外周血MPO、NLR、hs-CRP,统计患者术后1年MACE发生情况,分析影响STEMI患者PCI术后发生MACE的因素,分析外周血MPO、NLR、hs-CRP对STEMI患者PCI术后发生MACE的预测价值。结果重度狭窄组MPO、NLR、hs-CRP均高于轻、中度狭窄组(P<0.05),中度狭窄组均高于轻度狭窄组(P<0.05)。逐步多因素Logistic回归分析结果显示:Cys C[OR=3.662(95%CI:1.507,8.899)]、MPO[OR=3.725(95%CI:1.533,9.052)]、NLR[OR=4.088(95%CI:1.682,9.935)]、hs-CRP[OR=5.089(95%CI:2.094,12.367)]、LDL-C[OR=6.385(95%CI:2.627,15.518)]是影响STEMI患者PCI术后发生MACE的独立影响因素(P<0.05)。ROC曲线结果显示,外周血MPO、NLR、hs-CRP及3者联合预测STEMI患者PCI术后发生MACE的曲线下面积分别为0.749(95%CI:0.650,0.849)、0.758(95%CI:0.657,0.859)、0.775(95%CI:0.675,0.876)和0.898(95%CI:0.835,0.962)。结论外周血MPO、NLR、hs-CRP与STEMI患者病情、PCI术后发生MACE有关,3者联合预测STEMI患者PCI术后发生MACE效能良好。

血清多种生化指标在PCI患者围术期的浓度变化

目的探讨经皮冠状动脉介入治疗(percutaneous coronary intervention,PCI)患者心型脂肪酸结合蛋白(heart-type fatty acid-binding protein,h-FABP)、缺血修饰清蛋白(ischemia modified albumin,IMA)、白细胞介素-2受体(interleukin-2receptor,IL-2R)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、白细胞介素-8(interleukin-8,IL-8)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)等指标在术后24h内的变化规律。方法收集2011年11月~2012年2月北京协和医院心内监护室实施PCI术后34例患者2,4,8和24h血清标本,分别检测IL-2R,IL-6,IL-8,TNF-α,h-FABP,IMA和MPO血清浓度。结果 MPO,h-FABP和CKMB浓度在PCI术后2h已明显升高(2h与24h比较,Z值分别为-3.621,-5.123,-2.789,均P<0.05),h-FABP浓度在24h内快速降到正常范围内,MPO浓度在4h后明显降低,CKMB浓度在4h达峰值,然后迅速降低;CK,cTnI浓度在PCI术后4h升高(4h和24h比较,Z值分别为-2.803,-2.31,均P<0.05),8h达峰值后逐渐降低。Spearman相关分析cTnI与CKMB,CK相关系数大于0.6以上。结论研究发现PCI术后多种生化标志物的变化规律,为临床诊治提供依据。

微血管减压术与球囊压迫术治疗三叉神经痛的疗效对比

目的探讨微血管减压术(MVD)与球囊压迫术(PBC)治疗三叉神经痛(TN)的疗效。方法选取140例TN患者随机分为MVD组和PBC组各70例。对比2组术后疼痛缓解情况、术后并发症以及复发情况,分析治疗前后2组血清去甲肾上腺素(NE)、皮质醇(Cor)和髓过氧化物酶(MPO)水平差异。结果PBC组中平均手术时间、住院时间和住院费用均低于MVD组(P<0.05)。PBC组术后即刻疼痛缓解情况明显优于MVD组(P<0.05),而2组术后3个月、术后1 a疼痛缓解情况及术后1 a复发率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。PBC组术后面部麻木、咀嚼无力的发生率显著高于MVD组(P<0.05);术后6 h,PBC组患者血清NE、Cor、MPO水平均低于MVD组(P<0.05)。结论MVD和PMC术治疗TN的远期疗效均较好,且复发率低;MVD手术并发症发生率小于PMC,但PMC手术应激刺激低于MVD,临床上应根据患者情况选择合适术式。