云南锡矿粉尘中钒和锆的细胞转化实验

云南锡矿矿工肺癌高发，我们曾分别用矿粉、矿粉加吸氡和冶炼厂烟尘诱发金仓鼠肺癌均获成功。矿粉及烟尘中含有３０余种相似的化学成分，为了排除其中微量放射元素的致癌作用，证实非放射性无机化学成分与肺癌发生是否有关，本实验选择矿粉及烟尘中共有的钒（Ｖ）和锆（Ｚｒ）进行体外细胞转化实验。结果：１．钒和锆细胞毒性试验阳性。２．钒的细胞转化实验阳性。

云锡矿粉中钒和锆的细胞转化实验

云锡矿工肺癌高发,昆明医学院病理教研室曾分别用矿粉、矿粉加吸氡以及冶炼厂烟尘诱发金仓鼠肺癌均获成功。矿粉及烟尘中含有30余种相似的化学成分,为了排除其中微量放射元素的致癌作用,证实非放射性无机化学成分与肺癌发生是否有关,并逐步缩小矿粉及烟尘中致癌因素的研究范围,本实验选择两者中共有的钒(V)和错(Zr)进行体外细胞转化实验,结果:①钒和锆细胞毒性试验阳性;②钒的细胞转化实验阳性,锆为阴性。目前国内外尚未见报导。

人乳头状瘤病毒16型E6E7基因与MCA、TPA协同诱导细胞恶性转化的实验研究

目的探讨人乳头状瘤病毒(HPV)16型E6E7基因与化学致癌物MCA、TPA对Balb/c 3T3细胞恶性转化的协同作用。方法构建含HPV16 E6E7基因的重组质粒,用其转染Balb/c 3T3细胞。采用RT-PCR和Westernblot技术检测HPV16 E6E7基因和蛋白表达;应用细胞转化实验研究由MCA和TPA诱导的细胞恶性转化;并检验转化细胞在软琼脂上形成集落的能力及对SCID小鼠的致瘤能力。结果转染HPV16 E6E7基因的细胞比未转染细胞形成更多的转化灶,转化灶个数增加4～25倍,且实验时间明显缩短;其转化细胞在软琼脂上形成集落的能力及对SCID小鼠的致瘤能力更强。结论 HPV16 E6E7基因与MCA、TPA可协同诱导Balb/c 3T3细胞恶性转化。

染料木黄酮对NIH/3T3细胞体外短期转化实验的影响

目的 通过观察染料木黄酮对NIH/ 3T3细胞体外恶性转化的影响 ,研究染料木黄酮在癌症起始阶段的预防作用。方法 体外短期转化实验。结果 染料木黄酮在对细胞无明显毒性的浓度下 ,对MNNG所诱发NIH/ 3T3细胞恶性转化有明显的抑制作用 ,其最低抑制浓度为 3 7μmol/L。结论 染料木黄酮可能是化学致癌过程的抑制剂。

细胞转化试验研究源水及饮用水的潜在致癌性

用叙利亚地鼠胚胎（syrianhamesterembryo，SHE）细胞转化实验研究了G市自来水公司所属的4个水厂的水源水、自来水及2个新拟建的水源点水样有机提取物的细胞毒性和潜在的致癌性。结果：4个采样点的水源水及自来水可不同程度地诱导转化灶的形成，并有一定的细胞毒性；各点自来水的转化率与源水相比有增高的趋势；新拟建的2个水源取水点水样虽有一定的细胞毒性，但无致转化作用。结论：水源水经一般的氯化消毒处理。可增加水中的致突变致癌物质；细胞毒性与遗传毒性并不成平行关系。

自身免疫调节因子缺失对小鼠脾脏T/B淋巴细胞功能的影响

目的:探讨自身免疫调节因子(Aire)基因的缺失对小鼠脾脏T/B淋巴细胞功能的影响。方法:利用淋巴细胞转化实验和酶联免疫吸附实验分别检测T/B淋巴细胞在受到特异性及非特异性刺激后的增殖情况以及细胞因子和免疫球蛋白分泌状况。结果:与对照鼠相比,Aire-/-鼠的脾脏T/B淋巴细胞增殖功能并未受到显著影响;T/B淋巴细胞分泌IL-2和Ig的能力无统计学意义。结论:Aire基因不影响外周免疫器官T/B淋巴细胞的基本功能。

细胞荧光转化灶单位实验体外滴定狂犬病病毒毒力方法的优化

目的用细胞荧光转化灶单位实验[Fluorescence Focus Units(FFU)Assay]替代小鼠50%致死量(50% Lethal Does,LD50)法检测狂犬病病毒毒力,优化、改进现有的检测方法 ,从而降低检测成本。方法将狂犬病病毒固定毒株3倍系列稀释后感染乳金黄地鼠肾细胞,通过荧光标记的抗狂犬病病毒核蛋白单克隆抗体染色检测病毒感染的荧光灶,同时将病毒颅内接种10～12g昆明小鼠,通过观察记录小鼠发病死亡数,计算引起半数小鼠死亡的病毒剂量即LD50。结果 FFU和LD50存在一定的数量关系,且成正相关,相关系数为0.99。lgFFU值与LD50值之间有统计学意义,重复性好。结论 FFU实验体外滴定狂犬病病毒毒力方法可取代LD50法,更有利于推广、实施。

草苁蓉多糖的抗肿瘤作用及免疫调节作用

目的:观察草苁蓉多糖对荷瘤小鼠免疫器官的调节作用及对免疫功能的影响。方法:接种肝癌细胞H22的荷瘤小鼠随机分为50、100、200和400 mg.kg-1.d-1草苁蓉多糖组、阴性对照组及阳性对照组(环磷酰胺组),按剂量给药。10 d后处死小鼠,分别称量脾重、胸腺重,检测荷瘤小鼠脾脏指数和胸腺指数;采用MTT法测定NK细胞活性;淋巴细胞转化实验测定T淋巴细胞转化率(LTT);中性红比色法观察小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬能力;通过称量各小鼠实体瘤的重量,计算抑瘤率。结果:草苁蓉多糖能够显著抑制肿瘤生长,抑瘤率达38.86%;与阴性对照组比较,实验组荷瘤小鼠的脾脏指数显著提高(P<0.01),胸腺指数则有降低趋势,T淋巴细胞的转化率、NK细胞的活性、巨噬细胞的吞噬能力显著增强(P<0.01),与给药剂量存在正相关关系。结论:草苁蓉能抑制肿瘤生长,对小鼠免疫功能具有调节作用。

酶解猪血蛋白中活性肽的纯化和功能研究

利用层析、超滤等生物化学手段纯化猪血胰蛋白酶水解液 ,得到的目标产物是一种在高压液相色谱水平上的纯品 ,分子量大约为 3 0 0 0的小肽 .利用 T淋巴细胞转化实验和 E花环形成实验确定目标小肽的存在 ,并分别采用体内、体外的免疫学和药理学实验 ,初步确定了目标小肽对机体免疫活性的增强性质 .

升血汤对环磷酰胺模型小鼠免疫和造血功能的影响

目的:观察中药复方升血汤对小鼠免疫和造血功能的影响。方法:用注射给予环磷酰胺(80 mg/kg,ip, qd×3)的方法造成免疫低下小鼠模型,升血汤口服给予(3.12,6.25,12.5 g/kg,ig,qd×7),以外周白细胞计数,碳廓清指数,ConA和LPS诱导的脾淋巴细胞转化实验,脾细胞介导的SRBC溶血分光光度法为观察指标。结果:升血汤对环磷酰胺所致小鼠外周血白细胞减少有明显的提升作用,并可明显改善环磷酰胺致小鼠单核巨噬细胞的吞噬功能低下,显著增强环磷酰胺所致免疫功能低下小鼠的脾淋巴细胞的增殖以及抗体产生能力。结论:中药复方升血汤对环磷酰胺所致免疫和造血功能低下有显著的促进恢复作用。

中国人共刺激信号抑制配体表达载体的构建及在大肠杆菌DH5α中的表达

目的 :构建CTLA 4基因表达载体并在大肠杆菌DH5α中表达CTLA 4蛋白。方法 :用PCR方法获得中国人CTLA 4基因第二外显子 ,构建重组表达质粒pPBCTLA ,转化大肠杆菌DH5α ,以PCR和RFLP方法筛选阳性克隆 ,以免疫印迹技术检测表达产物。结果 :阳性重组子在DH5α中经温度诱导可表达CTLA 4蛋白 ,分子量与理论值相符 (约 12kD)。进一步分析表明 ,CTLA 4蛋白主要以包涵体形式存在。Western blot结果证实 ,12kD的表达条带可与标准羊抗人CTLA 4IgG起特异反应。淋巴细胞转化实验结果表明该蛋白具有明显的免疫抑制作用。结论 :用基因工程技术获得中国人CTLA 4基因表达蛋白 ,为进一步研究CTLA 4的生物学功能及研制抗CTLA 4抗体奠定了基础。

硒和灵芝对小鼠免疫的影响

目的了解硒和灵芝对免疫系统的影响。方法①质量为18～22 g昆明140只小鼠随机分为7组,其中6组左前腋皮下注射S180,然后分别给予生理盐水、灵芝、富硒灵芝、低硒灵芝、富硒灵芝加环磷酰胺和环磷酰胺处理,未注射S180的一组只给予生理盐水,一周后处死各组动物观察各组脾脏胸腺质量大小、测定血清TNF-α水平变化;②培养EL-4细胞株,分成阴性对照、阳性对照、灵芝、低硒灵芝、富硒灵芝和环磷酰胺组进行淋巴细胞转化实验。结果灵芝能增加胸腺和脾脏质量(P<0.05),提高T淋巴细胞转化率(P<0.05),少量的硒大大减低血清中TNF-α水平(P<0.05),大剂量的硒则能升高血清中TNF-α水平(P<0.05)。结论灵芝能增强小鼠免疫,硒能对小鼠不同的T淋巴细胞群作用不同。

肺炎克雷伯菌与双歧杆菌裂解物的免疫调节作用对比研究

目的:对肺炎丸雷伯菌与双歧杆菌裂解物的免疫调节作用做对比研究。方法:上述2种菌经培养后,采用超声破碎法获得其细菌裂解物。对细菌裂解物采用淋巴细胞转化试验和溶血空斑试验检测具对免疫功能的影响。结果:0.625g/L肺炎克雷伯菌和双歧杆菌裂解物对T细胞和B细胞的激活最显著,与对照组相比有显著性差别(P<0.01)。结论:肺炎克雷伯菌裂解物具有良好的免疫增强作用,在感染性疾病的防治中有良好的应用前景。

软骨多糖对H22肝癌小鼠抑瘤作用研究

[目的]研究软骨多糖对H22肝癌小鼠的抑瘤作用并探讨其作用机制。[方法]以小鼠H22肝癌细胞腹腔造模,将动物分为正常组﹑模型组和治疗组3组,治疗组每天腹腔注射给药。记录小鼠的体重变化﹑生存时间并计算生命延长率;测定胸腺指数和脾指数,进行淋巴细胞转化实验,免疫荧光检测CD40、CD40L表达。[结果]软骨多糖能显著抑制H22荷瘤小鼠肿瘤生长,提高荷瘤小鼠生命延长率﹑胸腺指数和脾指数;淋巴细胞转化实验表明治疗组的刺激指数明显高于模型组;免疫荧光实验显示出软骨多糖能够提高荷瘤小鼠脾细胞CD40、CD40L蛋白的表达。[结论]软骨多糖对H22肝癌小鼠肿瘤生长具有显著抑制作用,其抑瘤作用机制可能通过提高小鼠的免疫力来实现。

大蒜油对小鼠免疫功能影响的研究

目的探讨不同剂量大蒜油对正常小鼠免疫功能的影响。方法 160只健康雌小鼠随机分为4批,每批分为4笼,分别编号1~4号,每笼10只;4批小鼠中每批1号笼为空白对照,2、3、4号笼分别按照2.0 mg/kg、4.0 mg/kg、8.0 mg/kg低、中、高3个剂量大蒜油进行喂养31 d,第1批4笼小鼠进行脏器/体质量比值测定;第2批实验小鼠进行碳廓清实验;第3批实验小鼠进行小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验;第4批小鼠进行小鼠淋巴细胞转化实验。结果2、3、4号笼小鼠脏器/体质量比值与1号笼比较,差异均无统计学意义（P〉0.05）;高剂量大蒜油组小鼠的吞噬指数明显高于其他两组,碳廓清能力提高（P〈0.05）;食用大蒜油小鼠吞噬率均高于未食用的1号笼（P〈0.05）,并且随着食用剂量的增加,吞噬率也成正比增高;食用大蒜油小鼠光密度差值均高于对照1笼小鼠（P〈0.05）。结论大蒜油具有提高小鼠免疫功能的效果。

癌基因理论及其在膀胱肿瘤中的研究

当代分子生物学及其实验技术的发展,使肿瘤的病因学研究已经扩展到细胞分子水平。国内外许多研究表明,癌基因与肿瘤发生关系密切。本文仅就癌基因的基础理论及其与膀胱肿瘤的关系综述如下。1 癌基因的组成及致癌机理癌基因(oncogene)是一类具有使正常细胞转化潜能的 DNA 序列。70年代人们从致瘤性逆转录病毒中发现可使易感细胞恶变的基因序列,命名为病毒癌基因(viral oncogene,V-onc)。1978年 Bishop 首次证实正常脊椎动物基因组中存在有 V-onc

国产汽车尾气颗粒提取物的遗传毒性研究

为了解国产汽车排放物的遗传毒性，本研究选择桑塔纳轿车、吉普212、跃进131，公交客车和解放141货车5种汽油机车为代表，于待速状态收集尾气中的颗粒物，经二氯甲烷提取，进行如下研究。