TGF-β1诱导的肺泡Ⅱ型上皮细胞向间质细胞转变

目的检测转化生长因子(TGF-β1)能否在体外诱导肺泡Ⅱ型上皮细胞-间质细胞转变(epithelial-mes-enchymal transition,EMT)及其相应的信号转导机制。方法在体外培养的大鼠肺泡Ⅱ型细胞(RLE-6TN)中加入TGF-β1后,于不同时间段收取细胞,分别采用Real-time PCR及Western blot检测上皮及间质细胞标志物表达的改变;Western blot检测TGF-β1对RLE-6TN细胞p-Smad2/3表达的影响;TGF-β1诱导的RLE-6TN细胞形态学的改变采用倒置相差显微镜观察,超微结构的改变采用透射电子显微镜观察。结果加入TGF-β1到RLE-6TN细胞后,其间质细胞标志物表达上调,上皮细胞标志物的表达下调;加入TGF-β1到RLE-6TN细胞后,其p-Smad2/3的表达明显上调;形态学上,TGF-β1诱导RLE-6TN细胞向成肌纤维细胞样细胞转变;超微结构上,TGF-β1诱导RLE-6TN细胞特有的嗜锇性板层小体发生变性、肿胀并随TGF-β1作用时间延长最终完全消失。结论TGF-β1能在体外诱导肺泡Ⅱ型上皮细胞向间质细胞转变,其机制部分与Smad信号转导途径相关。

上皮细胞-间质细胞转变在肝纤维化中的作用

上皮细胞-间质细胞转变(epithelial-mesenchymal transition,EMT)是指在一定条件下上皮细胞失去上皮细胞的特征而获得成纤维细胞典型特点的变化过程。EMT在肾纤维化、肺纤维化研究较多,也有可能在肝纤维化时发生重要作用。肝星状细胞(hepatic stellate cells,HSCs)被认为是肝脏中成纤维细胞的主要来源,而肝实质上皮细胞的肝细胞在肝纤维化过程中的病理生理作用一直被忽略。在肝纤维化过程中,很可能也伴随有肝细胞的间质变,即有EMT的发生。因此,如果从肝纤维化时可能发生EMT的多个环节探索其阻断措施及其对肝纤维化的影响,将有助于了解肝纤维化的发病机制以及EMT在肝纤维化诊断中的价值,为肝纤维化的病因研究和建立有效的预防控制措施提供依据。

重组Klotho蛋白对骨髓来源M1型巨噬细胞向M2型巨噬细胞转变的影响

目的:探究重组Klotho蛋白对小鼠骨髓来源M1型巨噬细胞向M2型巨噬细胞表型转变的影响。方法:分离并鉴定小鼠骨髓来源性巨噬细胞,用巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)诱导骨髓间充质干细胞(BMSC)转变为巨噬细胞M0,流式细胞术和细胞免疫荧光鉴定细胞,普通光镜观察M0细胞形态。将成熟骨髓来源巨噬细胞细胞M0分成LPS组、LPS+Klotho组和空白组。LPS组用100 ng/mL LPS处理,LPS+Klotho组给与1μg/mL Klotho和100 ng/mL LPS+LPS共同处理。RT-qPCR检测巨噬细胞极化相关分子:M1亚型巨噬细胞相关标志物(IL-1β、IL-6、iNOS)mRNA和M2亚型巨噬细胞相关标记物(Arg-1、IL-10)mRNA表达。Western blotting检测iNOS、Arg-1蛋白表达水平,细胞免疫荧光检测细胞肿瘤坏死因子(TNF-α)和Arg-1蛋白含量。结果:流式细胞术显示骨髓巨噬细胞纯度为98.4%,光镜和细胞免疫荧光显示骨髓巨噬细胞呈现不规则形态。与空白组相比,LPS组IL-6、iNOS、IL-1β的mRNA和iNOS、TNF-α蛋白相对表达量明显提高(P<0.001)。而与LPS组相比,LPS+Klotho组降低M1亚型巨噬细胞标记物IL-6、iNOS、IL-1β的mRNA和iNOS、TNF-α蛋白相对表达量(P<0.001),显著提高了M2型巨噬细胞标志物Arg-1、IL-10 mRNA和Arg-1的蛋白的表达(P<0.001)。结论:重组Klotho蛋白可促进骨髓来源性巨噬细胞由M1表型向M2表型转变。

上皮细胞向间充质细胞转变在肝癌进程中的作用

上皮细胞向间充质细胞转变(epithelial to mesenchymal transition,EMT)是细胞通过瞬时去分化为间充质表型,导致上皮细胞的可塑性发生变化的多步骤的生物学过程。EMT及其逆转MET多数发生在胚胎发生形态发生过程中。近期更多的证据显示EMT参与肝纤维化和肝癌进程。在肝癌转移的早期阶段,细胞由于E-钙粘蛋白的消融而丧失细胞-细胞接触抑制,迁移能力增强,得以扩散到周围或远处组织,故EMT在肝癌转移的早期阶段中起关键作用。此外,由于EMT的增强诱导剂如转移生长因子(transforming growth factor-β,TGF-β)具有协调肝纤维化及肝癌进程的作用,故肝癌进程中上皮细胞的可塑性研究显得尤为重要。在本综述中,作者将阐述EMT-MET在肝癌进程中的重要性,及EMT在肝癌进程中的作用机制。同时,概述最近在识别影响重要EMT转录因子的临床诊治方面取得的进展。

结缔组织生长因子在人视网膜色素上皮细胞的增生、迁移和上皮细胞-间充质细胞转变中的作用

目的研究结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)在人视网膜色素上皮(retinal pigment epithelium,RPE)细胞的增生、迁移和上皮细胞-间充质细胞转变(epithelial mesenchymal transition,EMT)中的作用。方法采用CCK-8细胞计数试剂盒测定400 ng·m L-1CTGF处理后的ARPE-19细胞以及稳定表达CTGF siRNA或对照siRNA的ARPE-19细胞的增生情况。采用细胞划痕实验评估CTGF RNAi对ARPE-19细胞迁移的影响,同时测定稳定表达CTGF siRNA或对照siRNA的ARPE-19细胞中CTGF、FN、MMP-2和α-SMA的表达水平以评估CTGF对于TGFβ1诱导的EMT作用。结果 400 ng·m L-1CTGF处理组APRE-19细胞与未接受CTGF处理组细胞之间以及CTGF siRNA处理组与阴性对照siRNA组之间的细胞倍增时间均存在显著差异(均为P<0.05)。正常培养ARPE-19细胞组修复划痕的时间(≤48 h)显著少于CTGF RNAi靶向干扰处理组(≥72 h)。以TGF-β1诱导EMT,CTGF siRNA处理组与阴性对照组比较,CTGF、α-SMA、FN和MMP-2表达均显著下调。此外,外源性CTGF可单独诱导ARPE-19细胞α-SMA表达增加。结论 CTGF能够促进ARPE-19细胞增生,而CTGF RNAi不但能够显著抑制其增生还可显著抑制由划痕实验引发的ARPE-19细胞的迁移。此外,CTGF可通过上调α-SMA表达水平而增强ARPE-19细胞对于TGF-β1的反应,CTGF RNAi可使TGF-β1诱导的EMT减弱。

亚砷酸钠对上皮细胞向间充质细胞转变过程的影响

目的研究亚砷酸钠(NaAsO2)对上皮细胞向间质细胞的转变(epithelial to mesenchymal transition,EMT)过程的影响。方法①EMT模型的建立:培养小鼠乳腺上皮细胞(NMuMG),当细胞大约融合50%时,换成3%血清的培养基,24h后加入5ng/ml TGF-β,作用24 h后,观察NMuMG形态,细胞染色检测E-ca、Vimentin表达、实时定量RT-PCR检测E-ca,Vimentin mRNAs表达水平,是否成功的由上皮细胞转变成间质细胞。②加入NaAsO2:以5 ng/ml TGF-β作为阴性对照组,观察组5ng/ml TGF-β+5μmol/ml NaAsO2、5ng/ml TGF-β+10μmol/ml NaAsO2,再次检测上述指标。结果①成功建立EMT模型:细胞形态由立方形的上皮细胞转变成长梭形间质细胞;细胞染色显示,与未诱导组相比,E-ca表达呈阴性,Vim-entin表达明显呈阳性;E-ca基因表达水平显著下降,Vimentin基因表达水平显著上调。②NaAsO2对EMT过程的影响:一定浓度范围内,随NaAsO2浓度升高,明显增强了Vimentin表达;E-ca基因水平逐渐降低,Vimentin基因水平明显升高,呈剂量-效应关系。结论 NaAsO2促进了EMT过程,可能是砷中毒引发癌症的发病机制之一。

p38 MAPK介导高糖诱导的肾小管上皮细胞向间充质细胞转变

本文旨在观察p38MAPK与高糖诱导的肾小管上皮细胞向间充质细胞转变之间的关系。将雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠随机分为对照组、糖尿病组、胰岛素治疗组,用免疫组织化学、Westernblot检测p38MAPK和磷酸化p38MAPK(p-p38MAPK)蛋白表达。采用机械分离和酶消化获取SD大鼠肾小管节段,进行肾小管上皮细胞培养,将肾小管上皮细胞分为对照组、高渗组(20mmol/LD-mannitol)、高糖组(20mmol/LD-glucose)和SB202190(p38MAPK特异性抑制剂)+高糖组,处理72h后收集细胞,用免疫细胞化学检测α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、p-p38MAPK和Snail1蛋白表达,Western blot检测p38MAPK、p-p38MAPK、Snail1、转化生长因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)、α-SMA和E-cadherin的表达,RT-PCR检测α-SMA和E-cadherin mRNA的表达。体内和体外结果均显示,高糖状态激活了p38MAPK,这种活化作用在体内可因胰岛素控制血糖而被消除,在体外可被p38MAPK特异性抑制剂SB202190显著抑制;高糖组α-SMA蛋白和mRNA在原代培养肾小管上皮细胞的表达较对照组分别增加12倍和8倍(P<0.01),SB202190处理组其表达则较高糖组分别减少67%和50%(P<0.01)。SB202190不影响TGF-β1蛋白表达,但下调Snail1蛋白表达,并部分恢复高糖组E-cadherin蛋白和mRNA的表达。上述结果提示,p38MAPK可能通过转录因子Snail1介导高糖诱导的肾小管上皮细胞向间充质细胞转变。

Snail1 siRNA对高糖诱导肾小管上皮细胞表型转变的影响

目的:观察Snail1 siRNA对高糖诱导的肾小管上皮细胞向间充质细胞转变(TEMT)的影响。方法:原代培养肾小管上皮细胞分为5组:(1)对照组(含糖5.5mmol/L);(2)高糖组(含糖25mmol/L);(3)Snail1 siRNA处理组,转染Snail1 siRNA,6h后更换为高糖(含糖25mmol/L)培养;(4)control siRNA处理组,转染control siRNA作为siRNA阴性对照,6h后换为高糖(含糖25mmol/L)培养;(5)高渗组(含D-manntio19.5mmol/L);72h后收集细胞,用Western blotting和半定量RT-PCR检测Snail1、TGF-β1、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、vimentin和E-cadherin蛋白和mRNA表达。结果:与高糖组比较,肾小管上皮细胞转染Snail1 siRNA后,Snail1 mRNA和蛋白表达水平分别下降62%和68%(P<0.01)。同时,Snail1 siRNA处理组α-SMA和vimentin蛋白和mRNA表达显著下调(P<0.01),而E-cadherin蛋白和mRNA表达显著上调(P<0.01)。结论:Snail1参与了高糖诱导TEMT的调节。

溶血磷脂酸受体6在蕈样肉芽肿向大细胞转变中的意义及其对皮肤T细胞淋巴瘤细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨皮肤T细胞淋巴瘤(CTCL)蕈样肉芽肿(MF)患者中溶血磷脂酸受体6(LPAR6)的表达水平及其对CTCL疾病发展及预后的影响与可能机制。方法收集北京大学第一医院皮肤性病科2011-2020年间确诊的110例MF患者,包括49例发现队列的24例大细胞转变(LCT)及25例非大细胞转变(NLCT),61例验证队列的24例LCT及37例NLCT。提取患者组织总RNA分别采用RNA测序及RT-PCR检测LPAR6的表达,比较LPAR6在LCT与NLCT患者间的表达差异及对生存预后的影响。构建2种CTCL细胞系MyLaSz4过表达LPAR6细胞模型,以正常表达细胞为对照,检测过表达LPAR6对MyLa、Sz4细胞增殖活力的影响;通过加入LPAR6相关配体溶血磷脂酸(LPA)、2S-OMPT、三磷酸腺苷(ATP)、腺苷(ADO),采用细胞增殖实验检测试剂盒及流式细胞仪检测激活LPAR6对过表达LPAR6 MyLa、Sz4细胞增殖活力与凋亡的影响。采用log-rank检验进行预后分析,两组间数据的比较采用t检验或Mann-Whitney U检验。结果RNA测序结果显示,发现队列中LPAR6是LCT中显著性低表达的基因之一;验证队列中,LCT组的LPAR6表达水平[M(Q_(1),Q_(3))为204.90(81.90,512.70)]低于NLCT组[809.40(417.50,1829.20),U=242.00,P=0.002];两队列中,低表达LPAR6均与不良预后的发生风险显著相关(P<0.01)。细胞增殖实验结果显示,在实验的0、2448、72 h,过表达组MyLa、Sz4细胞与对照组细胞的细胞增殖活力差异均无统计学意义(均P>0.05);分别采用LPA、2S-OMPT、ATP、ADO激活MyLa细胞LPAR6后48 h,过表达组MyLa细胞的增殖活力(1.38±0.01、1.04±0.01、1.09±0.03、1.23±0.01)均低于对照组(1.73±0.04、1.23±0.01、1.24±0.01、1.42±0.03,t值分别为30.33、18.38、4.78、5.75,均P<0.05),细胞凋亡率(17.93%±0.88%、17.75%±0.35%、23.97%±0.57%、31.44%±0.34%)均高于对照组(3.98%±0.03%、7.81%±0.59%、11.95%±0.85%、12.02%±0.48%,t值分别为15.93、14.49.11.74.33.01,均P<0.05);分别采用2S-OMPT、ADO激活Sz4细胞LPAR6后48 h,Sz4细胞增殖活力2S-OMPT对照组为1.48±0.01、过表达组为1.29±0.04;AD0对照组为1.51±0.02过表达组为1.27±0.01,过表达组均低于对照组(P<0.05),细胞凋亡率均高于对照组(2S-OMPT对照组29.35%±0.55%、过表达组41.70%±0.70%;AD0对照组24.60%±1.00%、过表达组37.05%±0.15%,均P<0.05)。结论LPAR6在LCT患者中低表达并与不良预后的发生风险显著相关,体外激活LPAR6能够抑制CTCL细胞的增殖,促进细胞凋亡,LCT患者LPAR6表达水平降低可能是疾病进展的重要机制之一。

上皮细胞向间质细胞转变的调控及其与细胞凋亡的关系

上皮细胞向间质细胞的转变(EMT)是一种十分广泛而重要的生物学过程,对于胚胎发育、细胞分化和迁移以及生物体内稳态的维系起着极其重要的作用。EMT与癌细胞的转移以及组织的纤维化也密切相关。此外,细胞的凋亡/存活和分化命运的选择也受到EMT的深刻影响。因此,EMT参与诸多生理病理现象的发生发展过程,了解其调控机制有助于认识这些过程和相关疾病的发生条件与基础。该文就转化生长因子-β(TGF-β)介导的EMT及其与细胞凋亡命运的关系作一简单综述。

器官克隆和肿瘤细胞系转变研究承诺兑现报告书

二ОО二年八月十六日，我们以集团企业的名义向社会公布了我们所进行的组织器官再生医学研究结果，当时公布了研究计划中组织器官克隆已经完成的部分研究，并承诺在未来的五年要继续完成其他剩余组织器官的克隆研究计划，同时承诺要完成肿瘤细胞系的细胞转变研究。

体外缺血后处理对缺血再灌注损伤大鼠肾小管上皮细胞间质转变的影响

目的探讨缺血后处理对肾小管上皮间质转变的影响。方法应用NRK-52E建立有效的体外模型,实验分为对照组(COS):应用对照缓冲液培养,3 h后换完全培养基培养;缺血再灌注损伤组(IRI):应用缺血缓冲液,3 h后同样更换完全培养基培养;缺血后处理组(IPO):应用缺血缓冲液培养3 h,立即行体外缺血后处理,然后更换完全培养基。以上各组于处理3、6、12、24 h后收集细胞,Hoechst用于检测细胞凋亡,蛋白印迹法检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、转化生长因子-β1(TGF-β1)、结缔组织生长因子(CTGF)的蛋白表达水平。结果在经历缺血3 h后再灌注24 h,IRI组和IPO组有明显细胞凋亡,但IPO组凋亡明显较IRI组减轻(P<0.05)。IRI组α-SMA随时间延长表达逐渐增强,在24 h时表达最强(P<0.05);而IPO组随时间延长表达逐渐减弱,在24 h时达到最低值(P<0.05)。IRI组TGF-β1在缺血再灌注3、6 h时表达较强,之后减弱;且IPO组表达与IRI组相似,但3、6 h时表达水平明显受到抑制。IRI组CTGF在缺血再灌注3、6 h时表达较强,之后减弱;而IPO组表达各时间点较COS组没有明显变化。结论体外缺血再灌注损伤可以诱导肾小管上皮细胞α-SMA的表达,诱导上皮细胞间质转化;而原因可能与激活TGF-β1,进而也抑制基质蛋白的降解,促进基质蛋白CTGF的表达等有关;同时IPO能有效抑制α-SMA、TGF-β1、CTGF的表达,说明其能抑制间质转化的发生。

mTORC1控制静息状态干细胞从G_0到G_(Alert)的适应性转变

许多成体干细胞的一个独特属性是其能以一个非循环的静息状态存在。在需要动用干细胞维持组织稳态或修复前,静息状态能一直维持干细胞的功能。然而,静息状态下的干细胞的缺陷可导致组织功能障碍。

低氧微环境通过TGFBI调控Wnt/β-catenin通路介导胰腺癌化疗耐药及机制研究

目的:研究低氧微环境通过TGFBI调控胰腺癌耐药的作用及分子机制。方法:以CCK-8方法检测细胞增殖;以Western blotting技术检测蛋白表达水平;以ImageJ软件分析蛋白灰度值;RNAi技术用于敲减TGFBI基因。结果:TGFBI在Panc-1细胞中表达比正常细胞增强;低氧促进胰腺癌细胞Panc-1增殖并减弱顺铂对Panc-1的抑制作用,而高氧抑制Panc-1细胞增殖并加强顺铂的杀伤作用;低氧促进TGFBI表达及EMT行为;低氧通过TGFBI调控Panc-1细胞增殖及顺铂的杀伤作用;低氧通过TGFBI调控Wnt/β-catenin信号,进而促进EMT行为。结论:低氧微环境通过增强TGFBI表达促进胰腺癌细胞增殖及耐药;低氧微环境通过TGFBI激活Wnt/β-catenin信号通路,促进EMT标志分子表达。

连翘苷对食管上皮恶性转变细胞和食管癌Eca-109细胞的抑制作用及机制

目的:探究连翘苷对食管上皮恶性转变细胞和食管癌Eca-109细胞增殖、周期、凋亡、迁移、侵袭的影响,分析其对这两种细胞的抑制效果及其作用机制。方法:取食管上皮恶性转变细胞和食管癌Eca-109细胞,使用不同浓度(10、100μmol/L)的连翘苷处理干预细胞24 h,采用细胞计数试剂盒-8(cell counting kit-8,CCK8)法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞周期、凋亡,Transwell实验检测细胞迁移、侵袭,蛋白免疫印迹法(Western blotting)检测细胞中磷脂酰肌醇-3-激酶(phosphoinositide 3-kinase,PI3K)、蛋白激酶B(protein kinase B,PKB),(也称为AKT)、磷酸化磷脂酰肌醇3-激酶(phosphorylated phosphatidylinositol-3-kinase,p-PI3K)、磷酸化蛋白激酶B(phosphorylated protein kinase B,p-PKB)(也称为p-AKT)、p21蛋白、B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)和基质金属蛋白酶9(matrix metallopeptidase 9,MMP9)表达水平。结果:连翘苷对食管上皮恶性转变细胞和食管癌Eca-109细胞的半数抑制浓度(50%inhibitory concentration,IC_(50))分别为308.4μmol/L和322.0μmol/L。10、100μmol/L连翘苷可显著抑制食管上皮恶性转变细胞和Eca-109细胞增殖(P<0.05),对人食管正常上皮细胞无毒性作用。10、100μmol/L连翘苷可诱导食管上皮恶性转变细胞和Eca-109细胞周期改变,促进细胞凋亡。10、100μmol/L连翘苷可显著抑制食管上皮恶性转变细胞和Eca-109细胞迁移及侵袭(P<0.05)。10、100μmol/L连翘苷可显著降低食管上皮恶性转变细胞和Eca-109细胞中p-PI3K、p-AKT、Bcl-2和MMP9蛋白的表达水平(P<0.05),100μmol/L连翘苷可显著提高食管上皮恶性转变细胞和Eca-109细胞中p21蛋白的表达水平(P<0.05)。结论:连翘苷可显著抑制食管上皮恶性转变细胞和食管癌Eca-109细胞增殖、迁移、侵袭,其机制可能与PI3K/AKT通路失活有关。

细胞周期蛋白依赖性激酶在miR-193a5p调控卵巢癌细胞增殖及上皮细胞间充质转变中的作用

目的:探讨miR-193a-5p靶向CDK14并调控卵巢癌细胞OVAC的增殖和上皮间充质转变(EMT)的作用。方法:通过Target Scan Human分析miR-193a-5p与CDK14的匹配情况,通过荧光素酶报告系统检测miR-193a-5p靶向CDK14情况;在miR-193a-5p mimics过表达或者miR-193a-5p inhibitor基因沉默miR-193a-5p的情况下,采用免疫印迹检测CDK14,EMT相关蛋白质E-cadherin、vimentin、fibronectin和N-cadherin的表达量,采用CCK-8检测卵巢癌细胞OVAC增殖情况,MMT检测卵巢癌细胞OVAC的细胞活力。结果:miR-193a-5p靶向CDK14的3‘UTR;过表达miR-193a-5后,CDK14的表达下降,EMT相关蛋白质E-cadherin的表达上升,vimentin、fibronectin和N-cadherin的表达下降,卵巢癌细胞OVAC的增殖和细胞活力均增加;同时,基因沉默miR-193a-5p后,CDK14的表达上升,EMT相关蛋白质E-cadherin的表达下降,vimentin、fibronectin和N-cadherin的表达量上升,卵巢癌细胞OVAC的增殖和细胞活力均减少。结论:miR-193a-5p通过靶向CDK14的3‘UTR降低卵巢癌细胞OVAC的增殖、细胞活力和EMT。

Snail对宫颈癌细胞侵袭转移的影响

目的研究Snail与宫颈癌侵袭转移间的关系,并探讨其分子机制。方法构建正义全长Snail真核表达载体并转染宫颈癌细胞系HeLa、SiHa。采用Western blot方法分析相关基因表达,细胞伤痕愈合实验,Trans well模型穿膜细胞计数检测细胞侵袭转移能力。结果①在转染pEGFPC1/Snail的宫颈癌细胞株HeLa、SiHa中E-cadherin表达明显下调,Snail和Vimentin则表达上调(P<0.05)。②宫颈癌细胞系HeLa、SiHa转染正义全长Snail真核表达载体,12h细胞伤痕愈合能力显著提高(P<0.05);转染pEGFPC1/Snail后,HeLa、SiHa细胞12h穿膜细胞数明显增多(P<0.05)。Snail过表达可显著促进宫颈癌细胞株HeLa、SiHa的侵袭转移潜能。结论转录因子Snail促进宫颈癌上皮细胞间质化转变(EMT),并提高其侵袭转移能力。

原发性肝细胞癌对索拉非尼耐药机制的研究进展

索拉非尼是目前公认的治疗晚期原发性肝细胞癌的分子靶向药物,但原发性肝细胞癌对其耐药性的出现,影响了药物对肝癌的疗效。原发性肝细胞癌对索拉非尼耐药存在多种机制。肝癌细胞本身表皮生长因子受体的表达上调及其下游信号通路的异常改变,沉默信息调节因子1的过表达,肝癌细胞的自噬能力增强及间充质转变均可能导致其对索拉非尼耐药。肝癌血管内皮细胞出现耐药,肿瘤微环境中缺氧诱导因子-1α、趋化因子及其受体上调等也可能影响肿瘤对索拉非尼的敏感性。该文就原发性肝细胞癌对索拉非尼耐药机制的研究进展进行综述。

MDS—RAEBT与急性单核细胞白血病临床疗效区别及其与端粒酶活性的关系

目的：探讨难治性贫血伴原始细胞增多转变型（MDS-RAEBT）与急性单核细胞白血病（AML-M5）临床疗效的区别及其与端粒酶活性的关系。方法：用常规方法提取MDS-RAEBT和AML-M5初诊病人的单个核细胞（mononuclear cell,MNC)并用TRAP（telomeric repeat amplification protocol,TRAP)法检测两组病人的端粒酶的活性。同时观察以DAE或HAE为基本方案化疗的上述两组病人的临床疗效。结果：MDS-RAEBT组端粒酶的活性表达高于AML-M5组，而完全缓解率（completeremession,CR)却低于AML-M5组。两组之间端粒酶的活性、CR比较均有显著差异。结论：MDS-RAEBT与AML-M5两者之间明显的临床疗效差别可能与端粒酶活性存在一定关系。

SiRNA干扰FOXF2对人宫颈癌Hela细胞的上皮-间质转化的影响

目的研究siRNA干扰叉头框转录因子F2(forkhead box F2,FOXF2)对人宫颈癌Hela细胞的上皮-间质转化的影响。方法采用Real Time-PCR、Western blot分别检测siRNA干扰FOXF2前后Hela细胞中FOXF2mRNA、蛋白的表达变化来验证转染成功;同时用RT-PCR检测siRNA干扰FOXF2前后,Hela细胞中E-钙黏蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(vimentin)、Snail、Twist、P53、E2F1、RBmRNA的变化;Western blot检测siRNA干扰FOXF2前后,Hela细胞中E-cadherin、vimentin、Snail、P53、E2F1蛋白的变化。结果 siRNA干扰FOXF2后,RT-PCR、WB检测显示siRNA-FOXF2 1415组FOXF2的蛋白、mRNA均明显下降,验证转染率较高(P<0.001)。RT-PCR显示E-cadherin mRNA表达下降,vimentin、Snail及Twist mRNA表达升高;抑癌基因P53mRNA表达下降,致癌基因RB mRNA及其相关转录因子E2F1 mRNA表达升高。Western blot检测显示:E-cadherin蛋白表达下调,vimentin及Snail蛋白表达上调;抑癌基因P53蛋白表达下调,E2F1蛋白表达升高。结论 siRNA干扰FOXF2促进Hela细胞的上皮间质转化(EMT),并加速了肿瘤的进展。