肝损伤和细胞连接分子

肝损伤和细胞连接分子水野元夫等在Ｂ型和Ｃ型病毒性慢性肝炎时肝细胞损伤的发生上，宿主对病毒感染肝细胞的细胞性免疫反应起重要作用。电镜观察Ｂ型慢性肝炎者的活检肝组织发现肝细胞中间出现许多淋巴细胞。用免疫电镜方法证明此种肝细胞的胞浆内出现许多ＨＢＣ抗原，而...

细胞连接分子对上皮组织物质转运的调控机制

细胞连接分子对上皮组织物质转运有重要的调节作用,其分子机制有待总结归纳。上皮组织中多数细胞连接分子参与形成紧密连接、粘附连接、桥粒连接和间隙连接等连接结构,调控细胞间转运和跨细胞运输。构成紧密连接的Claudin蛋白通过栅栏功能、受体功能和维持上皮细胞极性三种机制在调控上皮组织物质运输中起到至关重要的作用,其它细胞连接分子通过对紧密连接的调控间接影响物质运输。由于Claudin家族的各成员之间的功能代偿作用及转录后调控对Claudin蛋白的表达的重要性,给细胞连接研究造成一定局限,新的研究方法和技术有待发展。该文总结归纳出上皮细胞间连接分子调控物质转运的三种方式及当前应用于检测连接分子的生物技术,为基础和临床研究提供参考。

人参皂苷Rh2对小鼠移植瘤生长及对细胞间连接黏附分子表达的影响

目的:观察人参皂苷Rh2对小鼠移植瘤生长及其对细胞间连接黏附分子(JAM)在癌组织表达的影响,探讨其抗肿瘤作用。方法:昆明种小鼠40只,前肢皮下接种S180小鼠癌性腹水0.2 mL,成瘤后随机分为2组,实验组给予人参皂苷Rh2(20 mg.kg-1)灌服,2 mL/只;对照组给予等量生理盐水,6周后取材。用免疫组化法观察JAM-1,JAM-2在癌细胞、淋巴管及血管的表达。结果:对照组JAM-1阳性表达的肿瘤细胞吸光度(A)549.90,实验组340.55,P<0.05;JAM-2阳性表达弱。对照组JAM-1和JAM-2阳性表达的血管数密度分别为2.33和1.34,实验组分别为1.09和0.9。对照组JAM-1和JAM-2阳性表达的淋巴管数密度分别为2.23和1.88,实验组分别为0.99和0.79;两组间的差异均为P<0.05。结论:人参皂苷Rh2通过下调JAM在肿瘤细胞的表达,抑制肿瘤组织血管及淋巴管的生成,进而抑制肿瘤生长。

人参皂甙Rh-2对细胞间连接黏附分子在小鼠移植瘤淋巴管表达的影响

目的观察细胞间黏附分子(JAM)在小鼠移植瘤淋巴管内皮细胞的表达及人参皂甙Rh-2的影响,探讨JAM在癌淋巴管转移中的意义。方法于小鼠前肢皮下接种S180小鼠癌性腹水,成瘤后给予人参皂甙Rh-2灌服,6周后取材。用免疫组化法观察LYVE-1、JAM-1、JAM-2在淋巴管内皮细胞的表达。结果在对照组肿块的周边部可见LYVE-1阳性表达的淋巴管,JAM-1、JAM-2在淋巴管有阳性表达,用药组表达减少。结论JAM-1、JAM-2在淋巴管内皮细胞的表达可能与癌淋巴管转移有关。

膜-细胞骨架连接分子Ezrin在胃癌组织中的表达及其临床意义

目的探讨膜-细胞骨架连接分子Ezrin在胃癌组织中的表达及其病理学特征的关系。方法对84例胃癌组织行免疫组织化学检测,对比不同组织分型中Ezrin蛋白表达的差异。结果 Ezrin蛋白在正常胃黏膜中的表达阳性率为61.9%低于胃癌组织中的表达阳性率84.5%和胃癌转移淋巴结中的表达阳性率88.9%,差异均有统计学意义(P<0.05)。胃癌中Ezrin蛋白的阳性率与年龄、性别及肿瘤体积的大小无关,差异无统计学意义(P>0.05)。Ezrin蛋白在高分化管状腺癌中阳性(93.8%)与低分化腺癌中(71.4%)的表达比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 Ezrin蛋白表达可能与胃癌发病、侵袭、转移及预后有密切关系的重要基因,对胃癌发病及转移早期诊断和预后判断有重要指导意义。

CV-A16和EV-A71感染对肠道上皮细胞间连接分子排布和表达的影响

柯萨奇病毒A组16型(Coxsakievirus A 16,CV-A16)与肠道病毒71型(Enterovirus 71,EV-A71)是引发手足口病(Hand foot and mouth disease,HFMD)的两种主要病原体,然而两者的致病机理仍未完全被阐明。病毒感染对肠道上皮细胞间连接分子排布和表达直接与病毒感染造成的后果相关。本研究通过右旋糖苷穿透实验、免疫荧光以及蛋白免疫印迹等技术检测了CV-A16和EV-A71感染对肠道上皮细胞系(Intestinal epithelial cell)FHC后细胞通透性的变化以及细胞间连接分子排布和表达情况。研究结果表明,CV-A16和EV-A71感染FHC可导致其通透性显著增强、连接分子Nectin1、Claudin4、Claudin5、ZO-1以及E-Cadherin的排布被破坏,且表达量显著性降低。这一结果提示了CV-A16和EV-A71感染肠道FHC细胞并在细胞中复制引起肠道上皮细胞损伤,导致肠道上皮细胞间连接分子排布的改变和表达量的减少。

参苓白术散治疗炎症性肠病与肠上皮细胞紧密连接的关系探讨

目的:探讨参苓白术散通过肠上皮细胞紧密连接对抗5%葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的小鼠肠炎(IBD)的作用机制。方法:48只SPF级BALB/c小鼠随机分为正常组、模型组、柳氮磺胺吡啶组、参苓白术散低、中、高剂量组,除正常组之外,5%DSS自由饮用7 d诱导BALB/c小鼠急性炎症性肠病,参苓白术散高、中、低剂量组ig分别给予12,6,3 g·kg-1参苓白术散,正常组和模型组ig等体积生理盐水,柳氮磺胺吡啶组ig给予柳氮磺胺吡啶2 g·kg-1,15 d后观察小鼠体重、粪便性状、隐血便血,计算疾病活动度(DAI)积分、病理检测肠黏膜病变。采用Western blot和RT-PCR检测闭合蛋白(Claudin)水平变化和咬合蛋白(Occluding),Claudin,胞浆附着蛋白(ZO-1)和细胞间连接黏附分子(JAM)mRNA表达。结果:与正常组相比,模型组Clandin蛋白表达明显降低(P<0.05),Occluding,Claudin,ZO-1和JAM mRNA水平降低(P<0.05);给药后,与模型组相比,柳氮磺胺吡啶组、参苓白术散低、中、高剂量组Clandin蛋白表达量明显升高(P<0.05),各给药组的Occluding,Claudin,ZO-1和JAM mRNA表达明显升高(P<0.05)。结论:参苓白术散抗DSS诱导的IBD的作用与调节肠上皮细胞间细胞紧密连接有关。

基于“逆流挽舟”法探索人参败毒散对溃疡性结肠炎模型大鼠胃肠功能的影响及作用机制

目的:观察人参败毒散对TNBS诱导的溃疡性结肠炎(UC)大鼠胃肠功能的影响,及其对肠上皮细胞紧密连接细胞间黏附分子(JAM)蛋白表达的影响,并基于"逆流挽舟"法探索该方对UC大鼠的作用机制。方法:将雄性SD大鼠60只随机分为6组,正常组、模型组、西药组(柳氮磺胺吡啶组)及人参败毒散高、中、低剂量组。除正常组以生理盐水灌肠外,其余各组采用TNBS/乙醇灌肠建立UC模型大鼠。造模24 h后,正常组和模型组灌胃等体积生理盐水,西药组灌胃给予柳氮磺胺吡啶0.5 g/kg,人参败毒散高、中、低剂量组灌胃分别给予31.2、15.6、7.8 g/kg人参败毒散,给药7 d后,观察大鼠体重、一般状态;测算胃残留率和小肠推进率。取结肠黏膜病变部位,采用RT-PCR和Westerm blot检测细胞间连接黏附分子JAMmRNA表达和蛋白表达水平。结果:与正常组相比,模型组、西药组、人参败毒散高中低组胃残留率升高(P<0.05),模型组、西药组、人参败毒散高剂量组小肠推进率降低(P<0.05);与模型组比较,西药组、人参败毒散高中低组胃残留率降低(P<0.05),小肠推进率升高(P<0.05)。RT-PCR结果显示,与正常组比较,模型组、西药组和人参败毒散各组UC大鼠肠黏膜JAMmRNA表达显著性降低(P<0.05);与模型组比较,西药组和人参败毒散各组JAMmRNA表达显著升高(P<0.05)。此外Westerm blot结果显示,与空白组比较,模型组、人参败毒散高、中剂量组UC大鼠肠黏膜组织中JAM蛋白表达明显降低(P<0.05);与模型组比较,西药组、人参败毒散各组JAM蛋白表达明显升高(P<0.05)。结论:人参败毒散能降低胃残留率,提高小肠推进率,通过促进胃肠功能恢复,增加JAM蛋白表达,与调节肠上皮细胞紧密联系相关,这可能是该方治疗溃疡性结肠炎的作用机制之一。