小干扰RNA沉默细胞连接蛋白37对小鼠胃癌皮下移植瘤的影响

目的 构建慢病毒介导的鼠细胞连接蛋白37（CX37）小干扰RNA （siRNA）及建立小鼠胃癌模型,将慢病毒转染进入鼠植入瘤并进一步分析植入瘤.方法 体外构建CX37的siRNA,抑制CX37 mRNA及蛋白的表达.60只植入瘤小鼠被随机分成3组：siRNA组、mock-siRNA组、盐水对照组.将siRNA、mock-siRNA及生理盐水分别注入瘤体.6周后采用半量逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测肿瘤CX37 mRNA表达,采用Western blot检测CX37蛋白的表达.肿瘤凋亡指数采用原位末端转移酶标记（TUNEL）法.结果 慢病毒转染6周后,结果显示siRNA组CX37 mRNA表达水平（42％）低于mock-siRNA组及对照组（63％、58％,P＜0.05）.Western blot分析显示,siRNA组CX37蛋白表达水平低于mock-siRNA组及对照组（0.21±0.07、0.65±0.06、0.54±0.07）.同时siRNA组CX37凋亡指数高于mock-siRNA组及对照组[（19.7±5.1）％、（9.8±6.4）％、（10.5±7.2）％P＜0.05].结论 通过siRNA干扰CX37基因表达可影响小鼠胃癌细胞生长,显著抑制CX37 mRNA及蛋白的表达,加速肿瘤细胞凋亡.