高效液相色谱法检测耐药细胞逆转前后细胞内长春新碱药物浓度及其临床意义

肿瘤细胞对化疗药物产生抗药性是化疗失败的重要因素之一,业已旺实,决定多药耐药性的基因是肿瘤细胞抗药性（MDR）基因,分子量170kD是一种浆膜大分子糖蛋白,具有ATP依赖性主动转运泵将药物由细胞内泵出的功能。本实验采用经基因转移技术将人MDR1cDNA转染体外EJ膀胱癌细胞所获得的EJ膀胱癌耐药细胞,以及EJ膀胱癌细胞为研究对象。

重组小鼠干细胞逆转录病毒载体高效基因转染CD41^+、UT7、U937和MDA-MB-435细胞

目的 :研究重组小鼠干细胞逆转录病毒载体介导基因转染 ,探索一条高效基因转染的途径 ,为重组小鼠干细胞逆转录病毒载体在基因转染中的应用提供理论依据和奠定实验基础。方法 :①逆转录病毒载体的构建 :EC1- 4 (repeats 1- 4ofcadherin - 5extracellulardomains)基因克隆产物和mutant(Ser2 2 2A)MEK 1基因克隆产物 ,Bg1Ⅱ和EcoRⅠ限制性内切核酸酶切割后 ,克隆进入逆转录病毒表达载体pMSCV。②CD4 1+ 细胞的获取和细胞培养 :从脐带血分离的CD34+ 细胞通过TPO诱导表达CD4 1,FACS分离CD4 1+ 细胞。高糖DMEM培养液培养NIH 3T3和MDA -MB - 4 35细胞 ,U937细胞培养在RPMI- 16 4 0培养液 ,UT7细胞是细胞因子依赖性细胞株 ,Iscove’smodifiedDulbeco’s培养液中加入GM -CSF。③测定病毒滴度 :逆转录病毒载体转入包装细胞 2 93,36h后收集病毒上清液 ,感染NIH3T3细胞 ,流式细胞仪测定病毒滴度。④Westernblot:基因转染CD4 1+ 、UT7、U937和MDA -MB - 4 35细胞 ,Westernblot检测基因产物的表达。结果 :2 93细胞产生高滴度MEK1pMSCV病毒 :3 1× 10 7,高滴度EC1- 4pMSCV病毒 :1 0×10 8。用稀释 8倍的病毒转染基因 ,重组逆转录病毒MEK1pMSCV转染白血病细胞株UT7和U973,GFP阳性细胞 (转染阳性细胞 )分别是 6 0 73%、

PARP酶抑制剂诱导转化细胞逆转及外源ras癌基因丢失的研究

用5mmol／LPARP抑制剂苯甲酸胺处理经c－Ha－T24－ras活化癌基因转染得到的转化细胞系，处理4周后发现转化细胞系的某些细胞生物学特性发生了改变，呈现出正常细胞的某些特性．伴随这一现象，检测到细胞中整合的外源T24－ras基因发生了丢失．

癌细胞逆转

研究癌细胞逆转是肿瘤生物学的核心问题之一,是肿瘤分子生物学的一个崭新的领域,不仅有理论意义,更有其实用价值。本文简述了癌细胞逆转研究的某些实例,癌细胞逆转的条件技术、方法及机理。

胃细胞逆转丸治疗胃癌前期病变927例的逆转作用

胃癌是严重危害人类健康的恶性肿瘤之一．在我国，胃癌的死亡率一直占恶性肿瘤的首位［１］．要降低胃癌的死亡率，治疗胃癌前期病变十分重要．自１９９２年ＷＨＯ提出肠上皮化生、异型增生为胃癌前期病变的概念以来，国内外学者对此予以高度重视．人们不断探索治疗慢性萎...

评肿瘤研究领域里的“以太”观(上)——癌细胞逆转论

评肿瘤研究领域里的“以太”观（上）———癌细胞逆转论美国加州洛杉矶希望城国立医学中心Ｂｅｃｋｍａｎ研究所分子遗传室廖世栋２０世纪前，人们由于误用类比推理和旧物理观的影响，一直认为光的传播是由“以太”（Ｅｔｈｅｒ）媒体所介导，因为声波、地震波、水波的传...

评肿瘤研究领域里的“以太”观(下)——癌细胞逆转论

评肿瘤研究领域里的“以太”观（下）———癌细胞逆转论美国加州洛杉矶希望城国立医学中心Ｂｅｃｋｍａｎ研究所分子研究室廖世栋为什么结果如此令人失望呢？答案很简单，人们把某些类似于正常细胞的一些特征统统化作“分化”，而是否是分化正常了呢？答案是否定的，分析...

抗肿瘤转移和癌细胞逆转药物

癌侵袭、转移的机理、药物和癌细胞逆转是近年来国际上在抗肿瘤医学上很重要的课题。肿瘤治疗的成败相当程度上取决于抗转移的治疗和癌细胞逆转的治疗。本文就这方面的基础、临床研究药物的简况做一论述。

胃细胞逆转丸治疗萎缩性胃炎360例

1 对象和方法 1.1 对象 1994年以来应用胃细胞逆转丸(山西省太原消化病研治中心研制)治疗萎缩性胃炎360例,均经内镜和组织活检确诊,男184例,女176例,年龄22-78岁,平均52岁。慢性萎缩性胃炎伴肠化123例,不典型增生87例,Hp阳性194例。 1.2 方法 方剂组成:党参,丹参,大黄,黄连。

高效腺病毒介导的抗ras核酶致肿瘤细胞逆转

高效腺病毒介导的抗ｒａｓ核酶致肿瘤细胞逆转ＦｅｎｇＭ，ＣａｂｒｅｒａＧ，ＤｅｓｈａｎｅＪ，ｅｔａｌ．ＣａｎｃｅｒＲｅｓ１９９５；５５：２０２４～２０２８本文采用策略为消除显性癌基因的异常表达以达到根除靶肿瘤细胞。该作者曾证明用锤头状核酶在激活的Ｈ┐ｒ...

高效腺病毒介导的抗ras核酶致肿瘤细胞逆转

高效腺病毒介导的抗ｒａｓ核酶致肿瘤细胞逆转ＦｅｎｅＭ，ＣａｂｒｅｒａＧ，Ｄｅ－ｓｈａｎｅＪ，ｅｔａｌ．ＣａｎｃｅｒＲｅｓ１９９５；５５：２０２４～２０２８本文采用策略为消除显性癌基因的异常表达以达到根除靶肿瘤细胞。该作者曾证明用锤头状核酸在激活的Ｈ－...

抗肿瘤转移和癌细胞逆转的民族民间药物

从抗肿瘤组织细胞转移、癌细胞逆转成正常细胞途径机理出发,揭示如何利用上述机制去研究开发民族民间药物,从中筛出临床疗效好的新药.

超声造影剂联合超声介导耐药基因反义寡脱氧核苷酸转染裸鼠肝癌细胞逆转多药耐药效应的研究

肝癌是最常见的恶性肿瘤之一，严重危害人类的健康。研究肝癌多药耐药（multi—drugresistance，MDR）是肝癌临床治疗迫切需要解决的问题，肝癌MDR与耐药基因mdr-1、mrp和相应表达蛋白P—gP、MRP（P190）密切相关。

胃细胞逆转丸治疗胃癌前期病变的临床与实验研究

目的观察胃细胞逆转丸对胃癌前期病变的治疗效果．方法选择３６例胃癌前期病变患者应用胃细胞逆转丸（主要由党参，丹参，大黄，黄连等１５味中药组成）进行治疗，其中轻度萎缩性胃炎１３例（３６１％），中度萎缩性胃炎１４例（３８９％），重度萎缩性胃炎９例（２５０％），伴肠上皮化生者２２例（６１１％），异型增生者２７例（７５０％）．男２０例，女１６例，年龄３０岁～６７岁，其中４０岁～５９岁者２２例（６１１％）．病程３个月～２１年，其中５年～１０年者２０例（５５６％）．临床表现为痞满３１例，疼痛２７例，纳呆３０例，嗳气２６例，泛酸６例，便溏９例．３个月１疗程．疗程结束后，对患者的临床症状、胃粘膜的萎缩、肠上皮化生、异型增生改善情况进行分析．结果经胃细胞逆转丸治疗３个月后，临床症状痊愈７例，显效１１例，好转１３例，无效５例，总有效率为８６１％．１３例轻度萎缩性胃炎中１１例转为浅表性胃炎，２例无变化；１４例中度萎缩性胃炎中有４例转为浅表性胃炎，７例转为轻度萎缩性胃炎，３例无变化；９例重度萎缩性胃炎中有５例转为中度萎缩性胃炎，４例无变化，慢性萎缩性胃炎总有效率为７７８％．９例轻度肠上皮化生消失６例，无变化３例；１?

单细胞逆转录聚合酶链反应与膜片钳同步技术

目的 建立与膜片钳技术相结合的单细胞逆转录聚合酶链反应(reversetranscriptasepolymerasechainreaction,RT -PCR)技术。方法 采用传统酶解法分离出SD大鼠单个心室肌细胞,应用全细胞方式膜片钳技术记录通道电流后对同一细胞吸取内容物,采用RT-PCR技术,分别对单细胞内GAPDH及L型钙通道的mRNA表达进行逆转录聚合酶链反应。结果 电泳结果显示GAPDH及L型钙通道条带,对后者的测序分析结果与cDNA基因文库符合率为 100%。结论 此实验方法可以用于同时进行膜片钳操作及单细胞RT-PCR检测。