REDV/雷帕霉素复合涂层构建内皮细胞选择性功能界面

运用复合涂层的概念构建了兼具药物洗脱和内皮促进作用的载药涂层.以载雷帕霉素(Rapamycin,RAP)的聚乙二醇甲基丙烯酸酯(PEGMA)-甲基丙烯酸丁酯(BMA)(PEGMA-BMA,PEGB)为内层,Arg-Glu-Asp-Val(REDV)多肽修饰的PEGBN[PEGBA-BMA-对硝基苯氧羰基聚乙二醇甲基丙烯酸酯(MEONP)]为外层包裹载药涂层.体外药物释放结果表明,雷帕霉素可以维持缓慢稳定的长效释放,释放过程中没有出现暴释现象.表面细胞生长行为表明,雷帕霉素可以有效地阻抗内皮细胞和平滑肌细胞的黏附,抑制细胞活性;随着药物释放的进行,雷帕霉素浓度逐渐减低,但涂层依然维持对平滑肌细胞的非特异性阻抗;而REDV修饰的外涂层开始呈现内皮细胞的选择性黏附,随着释放时间延长,内皮细胞特异选择性也逐渐加强.雷帕霉素和REDV多肽协同构建的复合涂层能够有效抑制平滑肌细胞的增殖,获得内皮细胞选择性黏附.

心血管植介入器械原位内皮化策略——内皮细胞选择性

心血管疾病严重危害人类生命健康,心血管植介入器械则被广泛用于心血管疾病的临床治疗。但现有器械存在表面血液相容性差、原位内皮化缓慢或不完全等缺点,易产生血栓形成、炎症反应、内膜增生等问题,极大限制了其长期治疗效果。促进内皮细胞在材料表面的选择性黏附、增殖和迁移被认为是实现原位内皮化的关键。本文从心血管疾病的介入治疗出发,梳理总结了近5年来心血管植介入器械表面内皮细胞选择性的修饰策略,并就其未来发展趋势进行讨论。

巨噬细胞选择性活化的信号通路及其干预措施的研究进展

巨噬细胞在不同环境刺激下分化为经典活化巨噬细胞和选择性活化巨噬细胞,巨噬细胞选择性活化的信号通路包括:JAK/STAT6途径、M2分化成熟的转录调节途径(KLF4的转录调节,PPARs的转录调节)以及Jmjd3表观遗传学调节途径。选择性活化对机体而言是一种保护机制,可以依据上述分子理论予以干预,如:细胞因子、PPARγ完全性激动剂、PPARγ部分性激动剂、微量元素硒以及生活方式等通过IL-4/STAT6/PPARγ途径促进巨噬细胞选择性极化。对巨噬细胞选择性活化的信号通路及其促进措施进行了简述。

蜂毒多肽空间稳定免疫脂质体的制备及体外对肿瘤细胞的选择性

蜂毒多肽在肿瘤治疗中的应用引起研究者的极大兴趣。本研究使用大豆磷脂、胆固醇、羧酸化PEG-胆固醇制备了蜂毒多肽空间稳定脂质体,并将二硫键稳定抗人肝癌单链抗体联结PEG-胆固醇末端。使用酶联免疫法考察了蜂毒多肽空间稳定免疫脂质体的活性。蜂毒多肽空间稳定免疫脂质体有较高的肿瘤细胞选择性。体外实验证明,其对SMMC-7721细胞的杀伤能力远强于蜂毒多肽空间脂质体,而对Hela细胞的杀伤能力与蜂毒多肽空间脂质体无区别。蜂毒多肽空间稳定免疫脂质体对肿瘤细胞的选择性,可使其成为一种有效的靶向制剂。

基于聚乙二醇和不同多肽构建的生物涂层及其内皮细胞选择性研究

利用自由基聚合反应将甲基丙烯酸聚乙二醇酯(PEGMA)和甲基丙烯酸缩水甘油酯(GMA)的二元共聚物接枝在基材表面,并通过开环反应分别固定精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸(RGD)、精氨酸-谷氨酸-天冬氨酸-缬氨酸(REDV)和酪氨酸-异亮氨酸-甘氨酸-丝氨酸-精氨酸(YIGSR)3种可特异性黏附内皮细胞的多肽.通过核磁共振检测合成的聚合物分子结构,并进一步通过X射线光电子能谱(XPS))以及原子力显微镜(AFM)的测试结果证明聚合物成功接枝在基材表面.利用紫外-可见吸收光谱(UV-Vis)对表面固定的3种多肽进行了定量表征.体外内皮细胞和平滑肌细胞黏附结果表明,3种不同多肽修饰的共聚物表面均能够有效阻抗平滑肌细胞的黏附,同时不同程度地促进内皮细胞的黏附,从而实现了基材表面内皮细胞的选择性黏附.其中与RGD和YIGSR多肽修饰的表面相比,REDV多肽修饰的表面呈现出更优异的内皮细胞选择性.这种具有内皮细胞特异选择性的界面在心血管支架涂层原位内皮化方面具有良好的应用前景.

泛素化信号调控细胞选择性自噬的新机制

细胞选择性自噬 自噬（autophagy）途径是细胞对胞内的大分子物质的包被、吞噬后在溶酶体中降解的过程。细胞受到饥饿、高温、低氧及荷尔蒙等外界刺激,或细胞器的损坏、突变蛋白的积聚及微生物的侵袭等,都可能引起细胞自噬的发生。

形态选择性卵细胞胞质内单精子注射对比卵细胞胞质内单精子注射治疗男性因素不育症的Meta分析

目的:评价形态选择性卵细胞胞质内单精子注射(IMSI)对比卵细胞胞质内单精子注射(ICSI)治疗男性因素不育症的效果和安全性。方法:采用Cochrane系统评价方法,检索MEDLINE、EMBASE、CENTRAL、Clinical Trials.gov和Sino Med数据库,检索时限为1992年至2017年7月,并手工检索相关参考文献,纳入比较IMSI和ICSI的随机对照试验(RCT)。应用Rev Man 5.3软件进行Meta分析。由于单纯男性因素和合并男性因素的不育症患者具有明显的临床异质性,故行亚组分析。结果:检索到文献280篇,纳入8个RCT,合计1 741个周期(IMSI=842,ICSI=899)。在单纯男性因素亚组,无证据证明IMSI周期和ICSI周期的活产率具有差异[RR=1.31,95%CI(0.68,2.51),1个RCT,77个周期,极低质量证据];IMSI能提高临床妊娠率[RR=1.46,95%CI(1.02,2.07),4个RCT,813个周期,低质量证据]。在合并男性因素亚组,均无证据证明IMSI周期和ICSI周期的活产率[RR=0.88,95%CI(0.60,1.31),1个RCT,255个周期,低质量证据]和临床妊娠率[RR=1.03,95%CI(0.86,1.23),3个RCT,851个周期,中等质量证据]具有差异。结论:尽管IMSI能提高单纯男性因素不育症患者体外受精周期的临床妊娠率,但证据质量等级较低,尚不足以支持将IMSI常规应用于该类患者。

选择性粒细胞吸附装置治疗重症急性肾损伤的研究

目的初步观察选择性粒细胞吸附装置(selective cytopheretic device,SCD)联合连续性静静脉血液滤过(continuous veno-venous hemofiltration,CVVH)治疗重症急性肾损伤(acute kidney injury,AKI)患者的疗效,并观察不良事件的发生情况。方法本研究重症AKI的定义为临床诊断为缺血性或肾毒性急性肾小管坏死,同时至少有1个肾外器官衰竭或存在脓毒血症。入选者除给予标准的重症监护治疗外,还同时接受SCD联合CVVH治疗。历史对照组为改善急性肾脏疾病照护计划(the program to improve care in acute renal disease,PICARD)研究中年龄和序贯器官衰竭评分(sequential organ failure assessment,SOFA)评分匹配的患者。主要终点事件为院内全因死亡。其他观察指标包括尿量变化及不良反应情况。使用Cox回归模型校正混杂因素,分析SCD联合CVVH治疗模式的疗效是否优于常规CVVH治疗。结果共入选9例重症AKI患者。SCD联合CVVH治疗组院内全因死亡率为22.2%,显著低于历史对照组(77.8%)(x2=5.247,P=0.027)。在校正年龄、SOFA评分、平均尿量变化等混杂因素后,Cox回归模型显示,SCD联合CVVH的疗效优于常规CVVH治疗(T=-2.596,P=0.0222)。治疗7d后,SCD治疗组平均尿量从基线值约500ml/d升高至2000ml/d以上。研究过程中,患者仅有数例轻度不良反应,无严重不良事件发生。结论 SCD可通过灭活激活的白细胞而调控机体免疫反应,最终降低重症AKI患者的死亡率。SCD安全性良好。

选择性白细胞吸附疗法治疗溃疡性结肠炎的疗效及安全性分析

目的探讨选择性白细胞吸附疗法(granulocyte and monocyte adsorption apheresis,GMA)治疗溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)的疗效及安全性。方法回顾性收集2018年5月至2019年5月在山东中医药大学第二附属医院行GMA治疗的18例UC患者的临床资料,所有入组患者均行1周2次、5次为1个疗程的治疗方案,重度患者适当延长疗程,分析治疗前、治疗1个疗程后的内镜检查、改良Mayo评分、红细胞沉降率(ESR)、C-反应蛋白(CRP)、白细胞计数(WBC)、中性粒细胞计数(NEUT)、白蛋白(ALB)、血红蛋白(HGB),同时观察患者治疗后的不良反应。结果与治疗前比较,GMA治疗1个疗程结束后,改良Mayo评分、ESR、CRP均显著降低(P<0.05),ALB、HGB均显著升高(P<0.05),WBC、NEUT差异无统计学意义(P>0.05)。18例患者在GMA治疗过程中及治疗后均无明显不良反应发生,安全性良好。结论GMA可明显降低炎症活动度及改善临床症状,且不良反应发生率较低,具有良好的疗效及安全性。

PI3K和MEK抑制剂抑制选择性激活的巨噬细胞促乳腺癌细胞浸润迁移的研究

目的探讨选择性激活的巨噬细胞(M2)促进乳腺癌浸润迁移的分子机制,为治疗乳腺癌提供新的分子靶点。方法用密度梯度离心法,从健康成人外周血中分离单个核细胞,体外诱导选择性激活巨噬细胞(M2)。用Western blot的方法检测M2对乳腺癌信号分子的激活;用浸润迁移实验和划痕实验检测PI3K和ERK抑制剂对M2促乳腺癌迁移的抑制作用。结果模拟乳腺癌微环境,把M2与乳腺癌MDA-MB-231细胞共培养,证明PI3K抑制剂LY294002和MEK抑制剂U0126作用于乳腺癌细胞,可以在6、12 h抑制M2对乳腺癌PI3K/ERK的激活;两种抑制剂可以抑制M2促进乳腺癌浸润迁移的作用。结论 PI3K和MEK抑制剂可以抑制M2促进乳腺癌浸润迁移,PI3K/ERK可以成为抑制M2作用的新靶点。

选择性激活巨噬细胞促进乳腺癌细胞黏附于细胞外基质

背景与目的:在乳腺癌微环境中,肿瘤相关巨噬细胞(tumor associated macrophages,TAMs)促进乳腺癌转移,与病人的预后呈负相关。本研究旨在探讨与TAMs表形和功能相似的选择性激活巨噬细胞(alternatively activated macrophages,M2)是否能促进乳腺癌细胞黏附于细胞外基质(extracellular matrix,ECM),进一步阐明M2促进乳腺癌浸润迁移的作用机制。方法:用密度梯度离心法,从正常成人外周血中分离单个核细胞,体外诱导M2。在乳腺癌细胞与巨噬细胞的无血清共培养体系中,用纤粘连蛋白包被或不包被培养板的底面,模拟乳腺癌微环境,用黏附实验的方法检测M2促进乳腺癌细胞黏附于ECM的作用。结果:在M2的作用下,乳腺癌MDA-MB-231、BT-474、SK-3rd细胞发生黏附于ECM的细胞明显增多;随时间延长,MDA-MB-231细胞黏附于ECM的细胞数明显增多。结论:M2促进乳腺癌细胞黏附于ECM。

免疫磁珠选择性清除人异基因反应性T细胞的实验研究

本研究用磁性细胞分离系统清除CD25+和CD69+人同种异体反应性T细胞,为减轻异基因骨髓移植后的移植物抗宿主病探索新的手段。对健康供者外周血单个核细胞与白血病缓解病人的骨髓单个核细胞进行单向混合淋巴细胞培养。3天后,通过磁性细胞分离系统清除CD25+和CD69+的同种异体反应性T细胞;通过3H-TdR掺入实验,观察处理后的供者外周血单个核细胞对同一病人的骨髓单个核细胞及无关者外周血单个核细胞的反应性。结果表明:与未清除组相比,清除后供者细胞对同一病人抗原的反应性降低50%,但保留了大部分对无关者抗原的反应性。结论:在体外反应中清除同种异体反应性T细胞可降低对刺激抗原反应,同时保留大部分对无关者抗原的反应。

选择性破坏胰腺A细胞大鼠脑海马VAChT免疫组化研究

目的探讨选择性破坏胰腺A细胞的模型大鼠胆碱能神经的变化。方法选用硝酸钴和利血平选择性破坏大鼠胰腺A细胞,并用特异性较强的VAChT抗血清,从形态学上观察了模型大鼠胆碱能神经在中枢脑海马的变化。结果硝酸钴可引起模型大鼠脑海马内胆碱能神经递质乙酰胆碱明显减少(P<0.01),利血平可引起乙酰胆碱明显增多(P<0.01)。结论这种内源性乙酰胆碱的变化可能与胰腺A细胞损伤有关,提示胆碱能神经除受其上级中枢调节外,还受某些内分泌细胞的影响。

使用放大系统对睾丸精子行形态选择性卵细胞胞质内单精子注射的临床结局分析

目的:探讨使用放大系统对睾丸精子行形态选择性卵细胞胞质内单精子注射术(ICSI)的临床结局。方法:回顾分析本中心2008年1月至2008年10月共66例无精子症患者行常规ICSI,2008年11月至2009年7月共39例无精子症患者用放大系统将睾丸精子放大6 000倍后,行卵细胞胞质内形态选择性单精子注射(IMSI)。结果:行ICSI的患者临床妊娠率为51.52%,种植率为30.67%,早期流产率为11.76%;行IMSI的患者临床妊娠率为56.41%,种植率为35.29%,早期流产率为4.50%。结论:无精子症患者的睾丸精子通过放大系统选择后行ICSI,早期流产率较常规ICSI有下降的趋势。

选择性去细胞异种(猪)皮与自体微粒皮复合移植对创面愈合的影响

目的:观察选择性去细胞异种(猪)皮与自体微粒皮复合移植对创面愈合的影响。方法:将异种(猪)皮经甲醛、胰蛋白酶、去污剂TritonX-100处理得到一种选择性去细胞异种(猪)皮。以SD大鼠为动物模型,在背部作全层皮肤缺损,使用微粒皮与选择性去细胞异种(猪)皮、异体皮、戊二醛皮及油纱覆盖皮肤缺损,观察创面愈合情况。结果:经组织学,免疫组化染色及电镜观察,选择性去细胞异种(猪)皮表皮层连续、完整,真皮中三大纤维排列有序且无细胞成分,基底膜结构完整。以选择性去细胞异种(猪)皮为覆盖物的创面愈合效果略差于异体皮覆盖创面的效果,但明显优于戊二醛皮及油纱覆盖创面的效果。结论:选择性去细胞异种(猪)皮易于制备,来源广泛,价格低廉,具有无细胞真皮支架和失活表皮,有望取代异体皮成为覆盖烧伤创面的新型敷料。

1例重度溃疡性结肠炎病人行选择性白细胞吸附治疗的护理

总结1例重度溃疡性结肠炎病人行选择性白细胞治疗的护理经验,护理要点包括应对病人活动期高热症状,保证病人舒适;密切观察排便情况,做好肛周皮肤护理,保持肛周皮肤完好清洁干燥;实施针对性营养支持,纠正营养失调;熟练操作流程,有效识别并处理并发症;提供心理护理,调动病人主观能动性。经过39 d的住院治疗和个性化护理,病人病情好转出院。后续4个疗程治疗后,有长达7个月症状缓解期,治疗效果显著。

选择性T细胞清除骨髓移植——协调移植物抗宿主病和移植物抗白血病的移植新策略

移植物抗宿主病 (GVHD)与移植物抗白血病 (GVL)本质上是异基因淋巴细胞介导的细胞免疫反应 ,各细胞亚群在GVHD和GVL中作用不平衡 ,选择性清除活化细胞 ,可在减轻GVHD的同时保留GVL。应用基因工程技术人为增加T细胞识别标记 ,如自杀基因和特异性次要组织相容性抗原 ,可选择性清除T细胞 ,为协调GVHD和GVL提供一种新策略。目前实验室选择性T细胞清除的骨髓移植已取得成效 ,临床应用也逐步开展。

选择性激活巨噬细胞通过JAK2/STAT3途径促进胰腺癌SW1990细胞侵袭迁移

目的:探讨JAK2/STAT3通路对胰腺癌SW1990细胞侵袭迁移能力的影响,研究肿瘤相关巨噬细胞(TAMs)促进胰腺癌演进的机制。方法:通过密度梯度离心法获取健康成人外周血单个核细胞,采用IL-4体外诱导选择性激活巨噬细胞(M2),模拟胰腺癌微环境中的TAMs,并将不同激活状态的巨噬细胞与胰腺癌SW1990细胞进行共培养。采用q-PCR和western blotting实验检测胰腺癌SW1990细胞JAK2、STAT3 m RNA与蛋白水平的变化,划痕实验和Transwell实验分别检测细胞迁移与侵袭能力的变化。结果:M2可明显上调胰腺癌SW1990细胞JAK2、STAT3的m RNA(P<0.05)与蛋白水平(P<0.05),共培养32 h后可显著促进胰腺癌SW1990细胞的横向迁移(P<0.05)和纵向侵袭能力(P<0.05)。结论:M2可通过JAK2/STAT3信号通路促进胰腺癌SW1990细胞的侵袭和迁移。

FDA批准首个选择性T细胞共刺激调节剂abatacept

施贵宝公司日前宣布，FDA批准abatacept（Orencia）治疗类风湿性关节炎（RA）。本品系首个选择性T细胞共刺激调节剂。

单纯男性因素不育患者行形态选择性卵胞浆内单精子注射对胚胎发育及临床结局的影响

目的使用放大系统对不育男性患者的精子进行形态选择性卵母细胞浆内单精子注射术（IMSI）,观察IMSI技术能否改善因男性精液问题而不孕不育夫妇的助孕结局。方法回顾分析本中心2013年1月-2014年11月共82例梗阻性无精子症患者,将行TESA（经皮睾丸穿刺抽吸精子术）获得的睾丸精子通过放大系统（×6600）挑选后行卵母细胞注射（IMSI组）,2013年1月-2014年11月共91例梗阻性无精子症患者经TESA取精术后行常规卵母细胞浆内单精子注射（ICSI组）;2014年1月-11月共44例畸精子症患者行形态选择性包浆内单精子注射治疗（IMSI组）,2014年1月-11月共71例畸精子症患者行常规ICSI治疗（ICSI组）。统计分析ICSI组和IMSI组患者的实验室结局和临床结局。结果梗阻性无精子症患者中正常受精率IMSI组显著高于ICSI组（84.3%vs 77.0%）（P〈0.05）;ICSI组的卵裂率95.5%,优胚率28.2%,囊胚形成率54.8%,种植率26.4%,临床妊娠率47.3%,流产率14%,梗阻性无精子症IMSI组患者的卵裂率96.7%,优胚率29.2%,囊胚形成率54.3%,种植率32.3%,临床妊娠率50.0%,流产率7.3%,两组无显著性差异（P〉0.05）。畸精子症患者的正常受精率IMSI组显著高于ICSI组（68%vs 75.5%）（P〈0.05）,囊胚形成率IMSI组显著高于ICSI组（54.6%vs 67.9%）（P〈0.05）,ICSI组的卵裂率96.2%,优胚率27.6%,种植率28.2%,临床妊娠率43.7%,流产率9.7%;IMSI组患者的卵裂率95.2%,优胚率27.1%,种植率30.7%,临床妊娠率43.2%,流产率10.5%,两组无显著性差异（P〉0.05）。结论梗阻性无精子症患者的睾丸精子经放大系统选择后行ICSI,正常受精率较传统ICSI有显著性提高;畸精子症患者射出的精液标本经放大系统挑选后行ICSI,正常受精率、囊胚形成率较传统ICSI有显著性提高。