板栗失水对其种子细胞透性和两种酶活性的影响

板栗栗果在室温 ( 18～ 2 1℃ )自然风干失水过程中 ,其种子脱氢酶 ( DHase)活性总趋势降低 ,电导率、MDA含量增加 ,过氧化氢酶 ( CAT)活性升高 ,到处理的第 14d达最大值 ,然后降低。栗果含水量与其种子 DHase活性之间呈显著正相关 ,与电导率、MDA含量呈显著负相关。当含水量从 43.7%下降到 30 .9%时 ,各指标变化显著 ,DHase活性降低 12 2 .8% ,电导率增大了 179.6 % ,MDA增加 5 4.4% ,CAT活性增大到最大值。说明 。

钙与渗透胁迫下大豆细胞透性的关系

缺钙(加EGTA 1mmol/L)处理的大豆下胚轴和幼根细胞透性增大,K^+外漏;钙浓度提高时,膜透性降低。在渗透胁迫下,细胞透性是缺钙处理大干低钙(1mmol/L)处理大于高钙(5mmol/L)处理,且高钙下细胞透性明显改变的时间延迟。Mg^(2+)不能代替Ca^(2+);La^(3+)对钙的作用有拮抗性。

应用细胞透性化技术快速提取氧化葡萄糖杆菌胞内右旋糖酐糊精酶

将细胞透性化技术应用到右旋糖酐酶的提取检测过程中,根据单因素实验和正交试验设计确定了从氧化葡萄糖杆菌（Gluconobacter oxydans）细胞中提取胞内右旋糖酐糊精酶（DDase）的最佳方法：甘氨酸（Gly）质量分数15%,Triton X-100体积分数1%,菌悬液OD600为0.5~6.0,pH为6.81,冰浴处理时间1 h,透性化试剂的提取效率可达到酶活最大值的90%以上。与超声波细胞破碎法相比,该方法条件温和,酶的释放率较高并易于大量试样的平行实验操作。

渗透胁迫和呼吸抑制剂对细胞透性的影响

利用呼吸抑制剂和解偶联剂探讨了在渗透胁迫下大豆下胚轴细胞透性与呼吸速率之间的关系,结果表明,渗透胁迫和呼吸抑制剂KCN、解偶联剂DNP均可以引起大豆下胚轴细胞透性显著增大,尤以DNP的效应最大.各处理下,透出物中以K^+为主.渗透胁迫下,呼吸速率降低;细胞透性增大与渗透胁迫程度呈正相关,而与呼吸速率下降和ATP含量呈显著负相关.

FDP生物合成中啤酒酵母细胞透性处理方法研究

本文在比较诸物理和化学方法对酵母细胞透性影响作用的基础上，采用了蒸馏水洗涤．甲苯预处理和表面活性剂渗透酵母细胞，通过依次分析检测以及放大生产中的推广应用，结果证明：其较好地解决了啤酒酵母细胞在FDP生物合成过程中的传质要求，是工业化生产实际中最行之有效的方法．

基于海泡石的细胞透性化

利用矿石纳米材料海泡石处理大肠杆菌细胞,建立高效、可逆透性化处理方法。结果表明:海泡石和大肠杆菌BW25113细胞悬液涡旋振荡,细胞通透性增强,90%以上的细胞因渗入博莱霉素致死;而在4℃修复处理过的样品,仅23%的细胞被杀死。发现烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)进出透性化细胞的能力与胞内外NAD浓度梯度正相关。该可逆透性化方法对生物催化和药物递送等研究具有重要价值。

三种改变酵母细胞透性方法对1,6-二磷酸果糖生产的影响

目的:研究不同方法改变酵母细胞透性对1,6-二磷酸果糖生产的影响。方法:采用反复冻融、甲苯处理、活化培养这 三种方法改变酵母细胞透性并测定这些改变了细胞透性和生理状态的酵母的1,6-二磷酸果糖生产能力。结论:三种方法均 使1,6.二磷酸果糖的发酵产量提高,其中活化培养方法使1,6-二磷酸的发酵产量达40 mg/mL。

低温对温室番茄叶片膜细胞透性及脯氨酸含量的影响

为研究番茄叶片膜细胞透性和脯氨酸含量随温度的变化规律,探讨二者对番茄耐寒能力的影响。以普罗旺斯,浙粉202,靓粉三个番茄品种为材料进行低温处理,测定叶片膜细胞透性和脯氨酸含量。结果表明:番茄叶片膜细胞相对透性随温度降低和低温时间延长而增加,温度越低,叶片膜细胞透性越大;番茄叶片脯氨酸含量随着温度降低,先增高后降低。同一低温条件下,随时间延长,番茄叶片脯氨酸含量均增加。

长期喷施葡萄糖和磷酸二氢钾对西红柿膜细胞透性及脯氨酸含量的影响

以普罗旺斯为试验材料,当温室温度降至10℃时,通过喷施葡萄糖及磷酸二氢钾处理,研究其对番茄叶片膜细胞相对透性、脯氨酸含量、生长指标及产量的影响。试验结果表明:西红柿叶片膜细胞透性随温度降低逐渐增大;脯氨酸含量随温度降低呈先增加后降低的趋势。喷施葡萄糖及磷酸二氢钾能有效降低西红柿叶片膜细胞透性并增大叶片脯氨酸含量,以处理Ⅱ(1.5%葡萄糖+3%磷酸二氢钾)效果最明显,西红柿叶片细胞膜透性显著低于其他处理,且脯氨酸含量显著高于其他处理。处理Ⅱ番茄植株的株高、茎粗均明显大于其他处理,发病率最低,受冷害影响相对较低,产量最大,达8787.00kg/667m~2,显著高于其他处理,较对照增产9.39%。

高温和零上低温对小麦根系含糖量及细胞透性的影响

本文以小麦根系为材料，通过适宜高温和零上低温处理测定小麦根系含糖和细胞透性的变化来研究植物对不良环境的抵抗力和适应性。以便了解植物对不良环境的适应机理，为农业生产上防止胁迫危害以及在育种上选育抗性品种提供线索。结果证明：经零上低温处理小麦根系的含糖量随处理时间延长而增加；高温处理，则随着处理时间的延长其含糖量逐渐下降。

METTL3介导的m6A甲基化调控脂多糖诱导的内皮细胞通透性变化

目的探讨甲基化转移酶3(METTL3)介导的N6-甲基腺苷(m6A)甲基化修饰参与调控脂多糖(LPS)诱导的内皮细胞通透性变化的分子生物学机制。方法选用人脐静脉内皮细胞(HUVECs)进行体外培养,使用50、125、250、500、1000、2000 ng/ml的LPS干预HUVECs 24 h,应用Real-time PCR检测METTL3 mRNA的表达;选用500 ng/ml的LPS干预HUVECs 24 h,检测m6A甲基化水平,应用细胞通透性实验检测细胞通透性,应用Real-time PCR和Western blot检测细胞间连接蛋白(Claudin-5、Occludin和VE-caherin)mRNA和蛋白表达;构建METTL3过表达稳转细胞株,检测METTL3过表达时内皮细胞m6A甲基化水平及通透性的变化。结果与对照组相比,LPS抑制HUVECs METTL3 mRNA表达,使得内皮细胞m6A甲基化下调,细胞通透性升高,细胞间连接蛋白(Claudin-5、Occludin和VE-caherin)mRNA和蛋白表达下降;当METTL3过表达时,内皮细胞m6A甲基化水平增强,LPS诱导的内皮细胞通透性增加得以改善。结论METTL3介导的m6A甲基化能够改善脓毒症诱导的内皮细胞通透性增加。

细胞膜通透性对大黄欧文氏菌异麦芽酮糖产率的影响

利用超声波、吐温-80、丙酮和甲苯等改变大黄欧文氏菌DXW-62的细胞膜通透性,研究其对异麦芽酮糖产率的影响。结果显示:90 W超声波处理1 min后,与空白对照组相比,异麦芽酮糖产率达到80.0%以上的时间由4.0 h缩短为3.0 h;添加浓度为5.0%的吐温-80处理后,异麦芽酮糖产率在2.0 h时已达到了75.40%,与空白对照组相比,异麦芽酮糖产率达到最高值的时间由4.0 h缩短为2.5 h;2.0%的丙酮处理后,在3.5 h时异麦芽酮糖产率达到最大,为83.04%。低浓度的甲苯处理DXW-62时的异麦芽酮糖产率无明显提高,高浓度的甲苯处理时异麦芽酮糖产率有明显下降。超声波和吐温-80共同处理后异麦芽酮糖产率远低于对照组,经碘化丙啶染色后显红色荧光细胞数量最多。

宫颈癌源外泌体miR-191-5p通过靶向TJP1调控血管内皮细胞层通透性促癌细胞转移的分子机制研究

目的探讨宫颈癌细胞分泌的外泌体miR-191-5p对血管内皮细胞层的通透性影响,为肿瘤血管相关的基因靶点研究提供理论依据。方法提取并鉴定宫颈癌细胞(SiHa/HeLa)培养上清来源的外泌体。将宫颈癌细胞源外泌体与人脐静脉内皮细胞(HUVEC)共培养,检测外泌体的摄取。跨内皮电阻(TEER)测定HUVEC单层细胞形成时间。内皮细胞层通透性测定HUVEC细胞层通透性。qRT-PCR检测宫颈癌细胞、外泌体及与外泌体共培养48 h的HUVEC中miR-191-5p表达。双荧光素酶报告基因实验检测miR-191-5p与TJP1的靶向关系。qRT-PCR、Western blot检测miR-191-5p、TJP1表达。内皮细胞层穿透实验检测miR-191-5p对HUVEC细胞层通透性的影响以及能否促进宫颈癌转移。恢复实验、qRT-PCR、Western blot检测TJP1的表达。结果提取的微小囊泡确是宫颈癌源外泌体。宫颈癌源外泌体可被HUVEC细胞摄取。TEER随时间增加而增大,在培养3 d时细胞形成单层,TEER达到最大值;外泌体共培养的HUVEC细胞层通透性增大,差异有统计学意义(P<0.0001)。miR-191-5p在宫颈癌源外泌体中富集,并被转运至HUVEC细胞中,miR-191-5p与TJP1存在靶向关系。与PBS组比较,miR-191-5p mimics组的miR-191-5p相对表达水平升高,TJP1的相对表达水平下降,而miR-191-5p inhibitor组的miR-191-5p相对表达水平下降,TJP1的相对表达水平升高,差异有统计学意义(P<0.01);与PBS组比较,miR-191-5p mimics组通透性增加,而miR-191-5p inhibitor组通透性减弱,差异有统计学意义(P<0.0001)。在SiHa细胞中,与PBS组比较,miR-191-5p mimics组穿透的平均细胞数增加,miR-191-5p inhibitor组穿透的平均细胞数下降,差异有统计学意义(P<0.05)。在HeLa细胞中,与PBS组比较,miR-191-5p mimics组穿透的平均细胞数增加,miR-191-5p inhibitor组穿透的平均细胞数下降,差异有统计学意义(P<0.05)。恢复实验结果显示,与PBS组比较,miR-191-5p mimics组TJP1的相对表达量下降,差异有统计学意义(P<0.05);与miR-191-5p mimics组比较,pCMV-T+mimics组中TJP1的表达量增加,差异有统计学意义(P<0.01)。结论宫颈癌源外泌体miR-191-5p通过靶向调控TJP1导致血管内皮细胞层通透性增加,进而促进宫颈癌细胞转移。

电导率传感器在“细胞质膜透性的模拟实验”中的应用

在“细胞质膜透性的模拟实验”中,以NaCl、 NH_(4)Cl、 KCl等小分子盐类和大分子蛋白质为材料,利用其通过透析膜时产生的不同的电导率变化,运用数字化工具进行采集整理,并形成随时间变化的曲线图,使学生定量认识细胞质膜的选择透过性特点,为更好理解物质进出细胞质膜的方式奠定基础,培养建构数学模型的科学思维方式。

血管生成素-2通过膜突蛋白介导内皮细胞通透性增高

目的探讨血管生成素-2(Angiopoietin-2,Ang-2)对内皮细胞通透性的影响及其潜在分子机制。方法内皮细胞培养于Transwell培养皿,给予Ang-2(200 ng/mL)刺激0、12、24和48 h后检测内皮细胞通透性变化;内皮细胞接种到6孔板,Ang-2刺激0、15、30和60 min后检测膜突蛋白(Moesin)的磷酸化;使用moesin siRNA特异性敲低moesin后,给予Ang-2刺激,检测内皮细胞通透性的改变,并进一步利用免疫荧光染色检测内皮细胞F-actin以及血管内皮-钙黏蛋白(Vascular endothelial cadherin,VE-cadherin)的变化。结果Ang-2(200 ng/mL)刺激内皮细胞0、12、24和48 h后,细胞通透性以时间依赖的方式逐渐增高;Ang-2显著增加内皮细胞moesin磷酸化,而使用Ang-2受体Tie-2的中和抗体Anti-Tie-2处理细胞后,显著抑制了Ang-2介导的moesin磷酸化;Moesin的特异性敲除显著抑制了Ang-2介导的内皮细胞通透性增高、F-actin应力纤维的形成以及VE-cadherin的破坏。结论Ang-2通过moesin介导内皮细胞通透性增高。

冬小麦低温处理叶片细胞膜透性的QTL定位

为探索冬小麦抗寒性的分子机制,以168个花培3号×豫麦57的双单倍体株系为作图群体,利用已构建含有324个SSR标记的遗传图谱,对电导法测定低温(-18℃)处理后的叶片膜透性进行QTL定位。利用完全区间作图法,在3种环境下共检测到21个与叶片膜透性相关的加性QTLs,分布于1B、2A、3A、3B、5B、6A、6B、6D、7B和7D染色体上,其中4个位点(qCMP-1B-1、qCMP-3B-2、qCMP-5B-1和qCMP-5B-4)遗传贡献率大于10%,属主效基因,其余QTL的遗传贡献率较小,属微效基因。3种环境条件下在5B染色体的Xgwm213-Xswes861.2区间检测到共同位点,与Xswes861.2的遗传距离为0cM,其中qCMP-5B-1(环境1)和qCMP-5B-4(环境3)的贡献率高达17.5%和14.0%。研究结果对于小麦抗寒标记选择和抗寒育种具有应用价值。

干旱胁迫下沙棘叶片细胞膜透性与渗透调节物质研究

研究了干旱胁迫下沙棘幼林苗木渗透调节能力与沙棘耐旱性的关系。结果表明:长期轻度及中度干旱胁迫下渗透调节物质中可溶性糖、游离氨基酸、Pro在干旱中、后期累积显著增加而降低渗透势,使沙棘具备较强的渗透调节能力而表现为低水势耐旱特性;K+在干旱下无显著累积。渗透调节物质(可溶性糖、游离氨基酸、Pro)的共同作用,使长期轻度、中度干旱下沙棘叶片可溶性蛋白降解少,细胞膜透性和MDA含量增加缓慢,重度干旱下也能在一定时间内保持稳定,这些物质是构成沙棘强耐旱性的内在基础。

镁对大豆叶片细胞膜透性和保护酶活性的影响

采用溶液培养方法研究不同的镁水平对两个大豆品种在五叶期和盛花期叶片细胞膜透性和保护酶活性的变化.结果表明,在缺镁胁迫下,大豆叶片的质膜透性(MP)和丙二醛(MDA)含量显著增加,产生的活性氧物质诱导超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化物酶(POD)活性升高,而过氧化氢酶(CAT)活性下降;而施镁则能明显降低大豆叶片MP和MDA含量,提高CAT活性,有利于大豆抗膜脂过氧化胁迫.在施镁1 ～ 10 mg/L浓度下,大豆叶片的质膜透性和MDA以及SOD和POD活性均达最低值,而CAT活性则达最高值.说明在低镁胁迫下,大豆叶片的CAT活性受到抑制,而适量施镁则大大增强了CAT活性,有利于大豆体内活性氧的清除和抗逆境胁迫能力的提高.各处理下,大豆盛花期SOD和CAT活性明显降低,说明随着时间的延长,大豆叶片细胞内产生过多的活性氧超出了酶的防御能力,造成了酶活性伤害,而POD活性则变化不大; 说明POD对活性氧具有较强的耐受性,是盛花期时起主要清除活性氧的作用的保护酶.本试验表明,大豆体内保护系统所存在的酶类在抵御逆境胁迫中相互协调,协同抗氧化.