细胞形态学检验在良恶性胸腹水细胞鉴别中的临床价值研究

目的:分析细胞形态学检验在良恶性胸腹水细胞鉴别中的临床价值。方法:选取2015年1月-2016年11月在我院就诊的255例胸腹水患者作为研究对象,所有患者均采用有核细胞计数检验,并对其中52例体积较大的细胞进行细胞形态学检验,分析有核细胞计数结果及良恶性胸腹水检验结果。结果:52倒细胞体积增大的标本中,17例血性积液标本中发现12例恶性细胞,约占70.59%,35例非血性积液标本中发现24例恶性细胞,约占68.57%;经临床及病理学检验共检出38例恶性细胞,细胞形态学检出36例,诊断符合率为94.74%,35例为真阳性,约占92.11%,3例为假阴性,约占7.89%,14例为良性细胞,真阳性为13例,约占92.86%,假阳性为1例,约占7.14%。结论:采用细胞形态学鉴别良恶性胸腹水具有准确、快速、便捷等特点,可有效提高临床诊断率,为医生的诊治提供有利的依据,在临床应用中值得推广。

普通光镜观察独特形态红细胞鉴别血尿的临床意义

血尿来源的鉴别．近十余年来广泛采用位相显微镜或普通光镜加染色观察尿红细胞形态作筛选检查。前者因位相显微镜价格不菲基层单位难以购置．此项检查应用受限；后者受观察者主观影响大，误差发生率高。有报道观察畸形红细胞中一种独特的结构（G）1，对诊断肾小球性血尿有高度的特异性．及重要的临床意义。我们用普通光镜观察了一组病人的尿红细胞形态。并与临床及肾活检结果作对照．现将观察到的结果报告如下．

STR图谱用于生物制品生产用人源细胞鉴别的研究

目的研究短串联重复序列（STR）图谱鉴别方法在生物制品生产用人源细胞质量控制中的应用。方法采用PCR一毛细管电泳分析方法，分别建立检测9个和16个人STIR位点的方法鉴别人源细胞，并对来自不同生物制品生产单位、不同传代水平的病毒性疫苗生产用人二倍体细胞株及基因治疗制品生产用的293细胞进行STR图谱的检测和比较。结果建立人源细胞株的STR图谱分析方法。13个单位提供的病毒疫苗生产用21株人二倍体细胞中，除1株细胞并非MRC-5细胞外，其他细胞均可认定为本细胞，且未发现交叉污染现象。而8个单位提供的12株基因治疗用293细胞的STIR图谱则存在明显差异，提示该类细胞可能存在来源、基因修饰改造背景不清及传代过程中遗传特性不稳定的因素。结论STR图谱分析灵敏度高、特异性强，可用于生产用人源细胞株／系间的鉴别。

计算机图像分析技术在胸水腺癌细胞和反应性间皮细胞鉴别中的应用

能够快速而准确地对胸水中脱落细胞做出良恶性判断，是目前临床对病理医师的迫切要求。在致病因子刺激下，大量增生的反应性间皮细胞（ reactive mesothelial cell， RMC）脱落到胸水中与腺癌细胞（ adenocarcinoma cell， ACC）形态相似，单靠显微镜通过肉眼观察很难做出正确的诊断［1］。计算机医学图像处理与分析技术通过对细胞形态、组成成分等进行定量分析，在临床诊断和研究工作中越来越多的得到实际应用［2］，其中细胞形态结构和颜色的变化［3］无论在主观观察还是在定量分析中都是重要的参考指标。我们前期的研究结果显示，基于全细胞色度学参数所建立函数的判别符合率明显优于细胞质和细胞核色度学参数，并且与结合细胞质和细胞核色度学参数所建立函数的符合率相当［4-5］，提示全细胞的色度学参数综合了细胞质和细胞核的色度学特点，更能反映ACC的色度学特征，对于胸水中ACC和RMC的分类与判别更具有鉴别价值，但是其判别效果仍不理想，考虑是否引入形态学参数，在不同形态学参数分类下进行判别分析，探索全细胞色度学参数的应用范围。因此我们借助计算机图像分析技术对巴氏染色胸水ACC和RMC的细胞核和细胞质面积进行定量测试，计算核质比（ nuclear to cytoplasmic ratio，Rnp ），比较不同Rnp中基于全细胞色度学参数所建立函数在胸水ACC的判别符合率，探讨全细胞色度学参数在不同Rnp对胸水ACC临床病理诊断分类的价值，从而为临床计算机自动识别细胞的应用奠定基础。

浆膜腔积液恶性肿瘤细胞鉴别诊断标志物研究进展

良性和恶性浆膜腔积液的诊疗和预后不同，因此对浆膜腔积液恶性肿瘤细胞的鉴别诊断具有重要的临床意义。传统的浆膜腔积液细胞学检查特异性高，但敏感性较低，特别是转移性癌细胞和间皮细胞的形态学上有交叉，鉴别诊断常很困难。随着免疫细胞化学和分子遗传学技术的进步，越来越多的标志物开始被应用于浆膜腔积液恶性肿瘤细胞的鉴别诊断。

血细胞鉴别欧洲共识报告：欧洲白血病网络WP10形态学专家对术语应用和形态学诊断的一致性评价

欧洲白血病网络制定了用于规范诊断学中造血细胞术语的研究方法,由于网络的使用,仅通过2天的现场交流和辩论就完成了这项高度互动性的工作.这项研究的意义在于可以通过这些简单可行的工具用于培训以及提高肿瘤/血液界的形态学报告的一致性.由于没有地理上的限制,可将这些方法应用于欧洲以外的国家.更重要的是,这项合作性研究通过个人经验、会议互动以及文献数据形成了共识.

银染法检测短串联重复序列(STR)位点PCR产物鉴别MRC-5细胞

通过采用银染法鉴别短串联重复序列聚合酶链式反应(STR)位点的PCR产物来鉴别人二倍体细胞MRC-5株主细胞库、工作细胞库及限制代细胞。运用PCR方法对细胞库的9个STR位点(CSF1PO、TPOX、TH01、F13A01、FESFPS、vWA、D16S539、D7S820、D13S317)和性别鉴别位点Am elogen in进行扩增,变性聚丙烯酰胺凝胶电泳分离,银染法显影技术,检测MRC-5主细胞库、工作细胞库及限制代细胞的遗传标记。与ATCC公布的MRC-5的荧光STR图谱的8个STR位点和Am elogen in位点相比,MRC-5主细胞库、工作细胞库、限制代细胞的银染STR图谱的9个STR位点和Am elogen in位点,荧光法和银染法重叠的8个位点(CSF1PO、TPOX、TH01、FESFPS、vWA、D16S539、D7S820、D13S317和Am elogen in)数据完全吻合,说明细胞鉴别试验成立。STR图谱作为细胞鉴别的方法简单、易行、准确。

生菜细胞的鉴别与细胞壁提纯

不同部位的生菜切片经染色用光学显微镜进行了细胞鉴别,用HEPES缓冲液在低温条件下对生菜细胞壁进行了提纯.生菜主要由初级细胞组成,生菜的细胞壁提纯得率(干重)为1 33%.

细胞学联合肿瘤标志物鉴别非典型良恶性胸水

目的探讨细胞学联合肿瘤标志物鉴别非典型良恶性胸水的临床效果。方法 85例非典型良恶性胸水患者,经临床细胞学诊断分为良性组(42例)和恶性组(43例),采取化学荧光法检测两组患者的癌胚抗原、细胞角蛋白片段和糖类抗原19-9三项肿瘤标志物,对比两组患者肿瘤标志物的水平及其准确性、敏感性与特异性。结果 1良性组癌胚抗原(3.1±1.0)μg/L、细胞角蛋白片段(21.2±4.0)μg/L和糖类抗原19-9水平(13.2±5.0)U/ml均低于恶性组(95.5±33.2)μg/L、(95.8±30.0)μg/L、(186.9±66.5)U/ml,差异均具有统计学意义(P<0.05)。2癌胚抗原的准确性85.5%高于细胞角蛋白片段和糖类抗原19-9,糖类抗原19-9特异性97.1%高于癌胚抗原、细胞角蛋白片段,三项指标敏感性基本相同。结论细胞学联合肿瘤标志物鉴别非典型良恶性胸水的临床效果肯定,可为临床治疗提供科学的理论依据。

免疫组织化学标记物与乳腺细针吸取细胞学联合对诊断乳腺癌的意义

目的分析免疫组织化学标记物与乳腺细针吸取细胞学(fine needle aspiration cytology,FNAC)联合对诊断乳腺癌的意义。方法选取本院2017年3月至2019年9月收治的80例疑似乳腺癌患者作为研究对象,患者均行免疫组织化学标记物检测、FNAC检查,并以病理诊断结果作为金标准。比较单独免疫组织化学标记物检测、FNAC检查及联合诊断的乳腺癌诊断效能[准确率(accuracy,ACC)、敏感度(sensitivity,SEN)、特异度(specificity,SPE)、阳性预测值(+predictive value,+PV)、阴性预测值(-predictive value,-PV)]。结果 80例疑似乳腺癌患者,最终病理诊断结果显示,阳性患者48例,阴性患者32例;免疫组织化学标记物检测检出阳性患者41例,其中真阳性40例;FNAC检查检出阳性患者40例,其中真阳性39例;免疫组织化学标记物检测与FNAC检查联合诊断检出阳性患者49例,其中真阳性47例。免疫组织化学标记物检测联合FNAC检查诊断乳腺癌的SPE(93.75%)、+PV(95.92%)与二者单独诊断比较差异均无统计学意义;免疫组织化学标记物检测联合FNAC检查诊断乳腺癌的ACC(96.25%)、SEN(97.92%)、-PV(96.77%)均较二者单独诊断高(P<0.05)。结论免疫组织化学标记物检测与FNAC检查联合诊断可准确鉴别乳腺肿块良恶性,准确诊出乳腺癌,可降低漏诊、误诊情况,提高诊断效能。

以技能大赛为引领的医学检验教学的实践探究

医学检验对于疾病诊断具有极其重要的意义,同时也有着仪器诊断所无法替代的作用。然而,医学检验专业人才虽需求量大,但人才培育有一定周期性,加上现实教学水平和条件所限,人才培育还存在一定滞后性。对此,基于职业技能大赛的引领,强化医学检验教学及训练,以赛促教、以教促赛,有助于强化人才培育实效。鉴于传统教学模式容易受资源、人力及时间等条件限制的情况,对此我们可以推动线上线下相结合的办法,线上着重于血细胞形态资源库、血细胞形态鉴定网络平台建设等,线下着力于一体化课堂构建及形态学检验考核方式改革等,创新教学实践,高质量开展技能大赛,培育和输送优质的应用型人才。

STR图谱分析方法扩大用于人源细胞的鉴别研究

目的采用短串联重复序列（STR）图谱分析的方法，建立本所细胞库中所有人源细胞的鉴别图谱，并进行细胞交叉污染及细胞误判现状分析的研究。方法采用16个位点的STR图谱分析方法，检测本所细胞库中所有收集保存的及其他单位来源的共计61株人源细胞，并将STR图谱检测结果与目前国际细胞库公布的数据进行比对，分析细胞的正确性及交叉污染情况。对未检出信号的细胞株，采用同工酶法对细胞的种属进行鉴别。结果被检测的61株细胞中，41株细胞呈现特征性STR图谱，不存在与其他细胞的交叉污染现象，其中36株细胞与ATCC或JCRB保存的同一名称细胞在相应的9个STR位点的数据完全一致，5株细胞均仅在vWA位点与ATCC数据不完全相同，可判定为正确细胞；7株细胞尚无国际可比对数据，但STR图谱特异，可认定为新建细胞。11株细胞（占18．0％）被鉴定为错误的细胞，其中舌癌细胞Tca8113及肝癌细胞HHCC（现更名为FHCC98）的STR图谱数据分别与HeLa及HeLa S3细胞的数据完全一致；2株HuT-102的数据与ATCC的数据完全不同；4株细胞未检测到信号，同工酶结果显示均为鼠源细胞；同时还发现2株细胞为交叉污染细胞。结论细胞误判及细胞交叉污染现象较为严重，正确鉴别细胞，特别是对国内自建细胞重新鉴定，对保证科学研究的可信性及可重复性极为重要。

人用疫苗生产用工作细胞库Vero细胞的鉴别

目的采用两种不同的方法进行人用疫苗生产用工作细胞库Vero细胞的鉴别,为提高人用疫苗生产用细胞的准确性及疫苗的安全性提供保障。方法采用短串联重复序列(short tandem repeat,STR)-PCR基因分型法对本所疫苗生产用Vero细胞的8个STR位点(D8S1106、D1S518、D6S1017、D17S1304、D4S2408、D5S1467、D19S245和DYS389)进行测定,并与文献报道的结果进行比对分析;采用染色体核型检查法,将Vero细胞经Giemsa染料染色,于显微镜下精确计数100个细胞的染色体后,统计染色体数为58或60条的细胞所占比例。结果 STR基因分型得到的特征性图谱与文献报道的结果完全相同,未出现三单位基因,且STR的重复数完全相同;高倍镜下精确计数100个细胞染色体数为58或60条的细胞所占比例为79%。结论本所疫苗生产用工作细胞库Vero细胞为正确细胞株,不存在污染或交叉污染的情况,为本所人用疫苗的安全性和准确性提供了保障。

用于鉴别猴源细胞及其交叉污染短串联重复序列图谱分析方法的建立

目的建立用于鉴别猴源细胞及其交叉污染的短串联重复序列(Short Tandem Repeat,STR)图谱分析方法。方法选择可用于猴源细胞鉴别的10个STR位点,采用PCR-毛细管电泳分析方法分别检测猴源、人源、鼠源细胞及猴源细胞交叉污染模型细胞中的10个STR位点,并验证方法的特异性及稳定性。同时对5家不同受检单位生产用的Vero细胞进行STR图谱分析。结果 STR图谱分析法可为每一个独立的猴源细胞系提供独特的STR图谱,并能有效判断猴源细胞与其他细胞间的交叉污染,且特异性及稳定性较高。采用该方法检测的5株不同受检单位生产用的Vero细胞均未发生污染。结论建立的STR图谱分析方法具有良好的特异性和稳定性,可用于不同猴源细胞系的鉴别和有效判断相关细胞间交叉污染。

Identification of differentially expressed proteins between human esophageal immortalized and carcinomatous cell lines by two-dimensional electrophoresis and MALDI-TOF-mass spectrometry

AIM：To identify the differentially expressed proteins between the human immortalized seophageal epithelial cell line(SHEE)and the malignant transformed esophageal carcinoma cell line(SHEEC),and to explore new ways for studying esophageal carcinoma associated genes.METHODS:SHEE and SHEECcell lines were used to separate differentially expressed proteins by two-dimensionalelectrophoresis.The siler-stained2-Dgels was scanned with EDAS290 digital camera system and analyzed with the PDQuest6.2Software.Six spots in which the differentially expressed protein was more obviouw were selected and analyzed with matrix-assisted laser desorption/ionization time of flying mass spectrometry(MALDI-TOF-MS).RESULTS:There were107±4.58and115±9.91orotein spots observed in SHEEand SHEEC respectively,and the majority of these spots between the two cell lines matched each other(r=0.772),only a few were expressed differentially.After analyzed by MALDI-TOF-MSand database search for the six differentially expressed proteins,One new protein as well as other five sequence-known proteins including RNPEP-like protein,human rRNA gene upstream sequence binding transcription factor,uracil DNAglycosylase,AnnexinA2 and p300/CBP-associated facto were preliminarily identified.CONCLUSION:These differentially expressed proteins might play an importance role during malignant transformation of SHEEC from SHEE.The identification of these proteins may serve as a new way for studying esophageal carcinoma associated genes.

STR图谱法从疫苗成品中鉴别生产用人源细胞株的研究

目的:探讨采用短串联重复序列(STR)图谱分析法检测人二倍体细胞生产的疫苗成品,判定生产所用细胞基质种类的可能性,为疫苗的质量控制及监测等环节提供参考。方法:研究用疫苗均以人二倍体细胞为生产基质,品种包括水痘减毒活疫苗、甲肝减毒活疫苗、麻疹风疹联合减毒活疫苗、甲肝灭活疫苗、狂犬灭活疫苗,分别来自11个厂家共22批。其中甲肝灭活疫苗均经过纯化,且均以甲醛为灭活剂。狂犬灭活疫苗来自2个厂家,1家疫苗采用了柱层析纯化工艺,2家疫苗均以β-丙内酯为病毒灭活剂。首先提取疫苗成品中的DNA,然后采用STR图谱分析方法对DNA进行检测,并对所获得的指纹图谱与标准图谱数据进行比对,判定生产所用细胞的正确性。结果:对减毒活疫苗进行检测可准确地判定生产用细胞的种类,结果显示8家疫苗生产企业中1家使用了错误的细胞。在对灭活疫苗的检测中,无柱层析纯化工艺的狂犬灭活疫苗可得到良好的STR数据,且比对结果正确。经柱层析的狂犬灭活疫苗经酚抽提法提取的DNA检测可获得STR信号,尽管Penta E位点信号缺失也可判定出生产所用的细胞基质种类及正确性。含有铝佐剂的甲肝灭活疫苗检测均未获得STR图谱数据。进一步对2种病毒灭活剂进行初步分析,结果显示:利用β-丙内酯进行病毒灭活,对疫苗中STR检测存在干扰,甲醛灭活对检测无明显影响。结论:利用STR图谱分析法能够直接从人二倍体细胞生产的减毒活疫苗和不含铝佐剂的灭活疫苗中鉴别生产所用的细胞基质种类,可为疫苗生产的质量控制及监测等环节提供参考。

hs-CRP与WBC联合检测在儿童上呼吸道感染中的应用

目的探讨超敏C-反应蛋白(hs-CRP)、白细胞计数(WBC)联合检测在小儿上呼吸道感染中的临床诊断意义。方法回顾性分析100例已明确诊断的小儿上呼吸道感染病例,收集其hs-CRP、WBC检测资料,进行综合分析比较。结果小儿上呼吸道感染hs-CRP、WBC计数及分类均有异常,同时hs-CRP增高比较明显,并且出现时间较早。结论小儿上呼吸道感染时联合检测hs-CRP与WBC,有助于疾病早期快速的鉴别诊断。