单疱疹病毒结构蛋白BVP22的亚细胞定位及在细胞间的穿梭

背景与目的单疱疹病毒结构蛋白BVP22具有在细胞间穿梭的特性,并能够携带与其融合的蛋白从细胞内合成后穿梭到周围的细胞,克服了基因治疗中转染效率低的问题。本研究的目的是检测BVP22蛋白在细胞中的定位及体内外的穿梭,为将其应用于肺癌的基因治疗提供依据。方法Lipofectamin介导质粒pEYFP和pEYFPBVP22转染肺癌细胞系801D,G418筛选,建立单克隆细胞系。荧光观察确定BVP22的表达及定位。单克隆细胞系与母系801D以一定比例混合培养,采用流式细胞分选计数、免疫细胞化学染色检测BVP22在细胞间的穿梭。建立裸鼠移植瘤,脂质体包裹质粒注入瘤体检测BVP22在实体瘤中的穿梭。结果成功获得单克隆细胞系pEYFP801D和pEYFPBVP22801D。BVP22在细胞中的定位表现出多相性,多数为胞核定位,少数为胞质丝状定位。流式细胞计数显示,随培养时间延长,YFP阳性细胞的比例无明显增加。免疫细胞化学染色显示pEYFPBVP22801D与801D混合培养24h后,几乎所有细胞的胞核都染成了棕黄色;裸鼠移植瘤的免疫组化染色显示注射pEYFPBVP22的肿瘤组织大部分被染成棕黄色。结论BVP22主要定位于细胞核中,其胞核定位可能与细胞分裂及其在细胞间穿梭相关。在体内外BVP22均能够介导与其融合的蛋白在细胞间发生穿梭。

ATP和[H]在叶绿体、细胞质基质、线粒体间的转移

以2018年江苏高考题为例,简述ATP和[H]在叶绿体、细胞质基质、线粒体间的转移方向和转移形式,以期解决中学教师对此问题认知的困惑。

单疱疹病毒结构蛋白VP22在细胞间的穿梭及其在基因治疗中的应用

VP22是单疱疹病毒间层的主要蛋白,它表现出在细胞间穿梭的特性,因此VP22可能被用作一种潜在的蛋白质传递体系,在癌基因治疗中用来传递治疗的毒性分子或介导间隙连接阴性细胞的旁观效应,以提高基因治疗的效果.本文主要就VP22的亚细胞定位、细胞间的转运机制、功能结构域及其在基因治疗中的应用方面综述。