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靶向程序性细胞死亡蛋白配体-1多肽类放射性核素标记分子探针研究进展
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作者 朱诗宇 梁蓓蓓 +2 位作者 付加煜 林建国 邱玲 《新乡医学院学报》 CAS 2024年第5期491-496,共6页
程序性细胞死亡蛋白配体-1(PD-L1)是一个重要的免疫检查点分子,在调节机体免疫反应方面发挥重要作用。临床研究表明,肿瘤组织中PD-L1的表达水平与免疫检查点抑制剂疗效密切相关。由于肿瘤的时空异质性,临床上常用的免疫组织化学方法不... 程序性细胞死亡蛋白配体-1(PD-L1)是一个重要的免疫检查点分子,在调节机体免疫反应方面发挥重要作用。临床研究表明,肿瘤组织中PD-L1的表达水平与免疫检查点抑制剂疗效密切相关。由于肿瘤的时空异质性,临床上常用的免疫组织化学方法不能全面准确地反映患者体内PD-L1的表达水平,而核医学分子影像技术可在分子水平上无创、实时、动态、可视化监测机体内PD-L1的表达水平。本文主要针对靶向PD-L1多肽类放射性分子探针的研究进行综述,为寻找新型免疫成像的多肽类分子探针及免疫治疗适宜患者的筛选和疗效评估等提供指导。 展开更多
关键词 程序性细胞死亡蛋白配体-1 分子探针 正电子发射型计算机断层显像 单光子发射型计算机断层显像
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锌指蛋白281抑制高糖诱导的肾小管上皮细胞上皮间质转化和细胞外基质合成
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作者 侯维玲 乔云阳 +3 位作者 吴小芸 施会敏 曲高婷 张爱青 《天津医药》 CAS 2024年第7期720-726,共7页
目的探讨锌指蛋白281(ZNF281)在高糖(HG)诱导的肾小管上皮细胞(RTECs)上皮间质转化(EMT)和细胞外基质(ECM)合成中的作用及机制。方法使用HG诱导RTECs以构建糖尿病肾病模型,分为Control组、HG组和Mannitol组,使用CCK-8检测细胞增殖活力... 目的探讨锌指蛋白281(ZNF281)在高糖(HG)诱导的肾小管上皮细胞(RTECs)上皮间质转化(EMT)和细胞外基质(ECM)合成中的作用及机制。方法使用HG诱导RTECs以构建糖尿病肾病模型,分为Control组、HG组和Mannitol组,使用CCK-8检测细胞增殖活力。使用小干扰RNA(siRNA)在HG诱导的RTECs中敲低ZNF281的表达水平,分为Control组、HG组、HG+ZNF281 siRNA组和HG+ZNF281 vector组。使用腺苷单磷酸活化蛋白激酶(AMPK)激动剂阿卡地新(AICAR)活化AMPK,分为Control组、HG组、HG+AICAR组和HG+二甲基亚砜组。实时荧光定量PCR和蛋白免疫印迹法检测ZNF281、EMT和ECM合成相关指标表达水平。结果与Control组相比,HG组ZNF281、波形蛋白(vimentin)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、纤维连接蛋白(FN)和Ⅰ型胶原蛋白(ColⅠ)的蛋白和mRNA表达水平升高,E-钙黏蛋白(E-cadherin)表达水平降低;与HG组相比,HG+ZNF281 siRNA组和HG+AICAR组的EMT和ECM合成相关指标的蛋白和mRNA表达水平发生明显变化,同时HG+AICAR组ZNF281的蛋白和mRNA表达水平较HG组降低;在使用AICAR和转染ZNF281过表达质粒共处理的细胞中,AICAR+ZNF281组vimentin、α-SMA、FN、ColⅠ的表达水平较空载组升高,E-cadherin表达水平降低。结论AMPK通过负向调控ZNF281的表达水平进而抑制HG诱导的RTECs中EMT和ECM合成。 展开更多
关键词 糖尿病肾病 Tristetraprolin蛋白 上皮-质转化 细胞外基质 AMP活化蛋白激酶 肾小管质纤维化 锌指蛋白281
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九肽激活肥大细胞致类过敏反应的作用及其机制 被引量:2
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作者 陈晓敏 刘娜 +1 位作者 张丽娜 李友佳 《中国药房》 CAS 北大核心 2023年第24期2995-2999,共5页
目的探讨九肽IVQKIKHCF激活肥大细胞引发类过敏反应的作用及潜在机制。方法以人肥大细胞系LAD2为对象,以P物质为阳性对照,通过检测β-氨基己糖苷酶释放率、组胺释放量、炎症因子释放量来考察25、50、100μmol/L IVQKIKHCF的激活作用;分... 目的探讨九肽IVQKIKHCF激活肥大细胞引发类过敏反应的作用及潜在机制。方法以人肥大细胞系LAD2为对象,以P物质为阳性对照,通过检测β-氨基己糖苷酶释放率、组胺释放量、炎症因子释放量来考察25、50、100μmol/L IVQKIKHCF的激活作用;分别以敲低MrgprX2的LAD2细胞和Mas相关G蛋白偶联受体X2(MRGPRX2)高表达的人胚胎肾细胞系HEK293(MRGPRX2/HEK293细胞)为对象,通过检测β-氨基己糖苷酶释放率和细胞内钙离子浓度来评价IVQKIKHCF激活作用与MRGPRX2的相关性。结果25、50、100μmol/L的IVQKIKHCF可显著提高LAD2细胞的β-氨基己糖苷酶释放率和组胺释放量(P<0.05),并不同程度地促进肿瘤坏死因子α、白细胞介素8、巨噬细胞炎症蛋白1β、单核细胞趋化蛋白1的释放(P<0.05);敲低MrgprX2后,25、50、100μmol/L的IVQKIKHCF对LAD2细胞β-氨基己糖苷酶释放的促进作用被显著逆转(P<0.05),且可升高MRGPRX2/HEK293细胞内的钙离子浓度。结论九肽IVQKIKHCF可通过激活MRGPRX2而促进肥大细胞释放颗粒物质和炎症介质,从而引发类过敏反应。 展开更多
关键词 IVQKIKHCF 肥大细胞 过敏反应 Mas相关G蛋白偶联受体X2
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抗脂肪细胞膜蛋白多克隆抗体对猪脂类和内分泌代谢的影响 被引量:4
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作者 李卫真 张永云 +2 位作者 刘凌云 张曦 高士争 《云南农业大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期479-483,494,共6页
给15 kg体重仔猪分别腹腔注射0,10,20,30 mg抗脂肪细胞膜蛋白多克隆抗体。结果显示,抗脂肪细胞膜蛋白抗体可显著提高血清脂蛋白脂酶(LPL)的活性和低密度脂蛋白(LDL)的含量(P<0.05),降低游离脂肪酸(FFA)和极低密度脂蛋白(VLDL)的含量(... 给15 kg体重仔猪分别腹腔注射0,10,20,30 mg抗脂肪细胞膜蛋白多克隆抗体。结果显示,抗脂肪细胞膜蛋白抗体可显著提高血清脂蛋白脂酶(LPL)的活性和低密度脂蛋白(LDL)的含量(P<0.05),降低游离脂肪酸(FFA)和极低密度脂蛋白(VLDL)的含量(P<0.05),对血清总脂、甘油三酯(TG)、血清总胆固醇(CHO)和高密度脂蛋白(HDL)的含量无明显影响(P>0.05)。此外,该抗体可显著降低血清胰岛素(Ins)的水平(P<0.05),提高三碘甲状腺原氨酸(T3)的水平(P<0.05),而对血清生长激素(GH)和胰岛素样生长因子-1(IGF-1)的水平无明显影响(P>0.05)。表明抗脂肪细胞膜蛋白抗体可通过影响血液脂类代谢和激素的水平而减少体内脂肪沉积。 展开更多
关键词 抗脂肪细胞蛋白抗体 代谢 内分泌
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应用A549细胞单层模型研究蛋白多肽类药物肺部吸收的特性 被引量:4
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作者 王智瑛 张悦 张强 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期392-395,共4页
药物通过呼吸进行吸收的路径依次为气管→支气管→肺泡,其中通过肺泡上皮细胞吸收占90%以上.由于肺泡上皮细胞使大分子的蛋白多肽类药物不易通过,是它们渗透的主要屏障,因此对肺泡膜屏障特性、药物透过过程及渗透特性的研究有助于更好... 药物通过呼吸进行吸收的路径依次为气管→支气管→肺泡,其中通过肺泡上皮细胞吸收占90%以上.由于肺泡上皮细胞使大分子的蛋白多肽类药物不易通过,是它们渗透的主要屏障,因此对肺泡膜屏障特性、药物透过过程及渗透特性的研究有助于更好地理解蛋白多肽类药物的肺部吸收. 展开更多
关键词 A549细胞 细胞模型 蛋白药物 肺部吸收 表观渗透系数
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膜联蛋白5对大鼠睾丸间质细胞中类固醇急性调节蛋白和睾酮合成相关酶表达的影响 被引量:3
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作者 陶晓倩 林钗英 +7 位作者 柳海燕 时姗姗 路榕 黄宇烽 李晓军 戈一峰 崔英霞 姚兵 《北京大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期183-188,共6页
目的:研究膜联蛋白5(annexin 5)对大鼠睾丸间质细胞(Leydig细胞)睾酮合成相关蛋白和酶表达的影响。方法:原代培养大鼠睾丸间质细胞24 h后,用10-9mol/L的annexin 5处理间质细胞12 h和24 h,分别提取细胞总RNA和总蛋白;反转录聚合酶链式反... 目的:研究膜联蛋白5(annexin 5)对大鼠睾丸间质细胞(Leydig细胞)睾酮合成相关蛋白和酶表达的影响。方法:原代培养大鼠睾丸间质细胞24 h后,用10-9mol/L的annexin 5处理间质细胞12 h和24 h,分别提取细胞总RNA和总蛋白;反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测类固醇急性调节蛋白(steroidogenic acute regulatory,StAR)、胆固醇侧链裂解酶(P450scc)、3β-羟基类固醇脱氢酶(3β-hydroxysteroid dehydrogenase,3β-HSD)、17α-羟化酶(17α-hydroxylase,CYP17A)、17β-羟基类固醇脱氢酶Ⅹ型(17β-HSD10)mRNA表达的改变,并用蛋白免疫印迹方法(Western blotting)检测蛋白表达水平的变化。结果:与对照组相比,在mRNA水平上,annexin 5处理细胞12 h后,只有17β-HSD10的表达升高了26%(P<0.05),其他差异均无统计学意义,而处理24 h后,StAR、P450scc和3β-HSD的表达分别升高55%、69%和59%(P<0.05),17β-HSD10升高了104%(P<0.01),17α-hydroxylase表达则无显著差异;在蛋白水平上,annexin 5处理细胞12 h后,17β-HSD的表达升高了39%(P<0.05),而处理24 h后发现,除StAR表达无显著变化外,P450scc、3β-HSD和17β-HSD的表达分别升高了35%、88%(P<0.05)和47%(P<0.01)。结论:Annexin 5对睾酮合成具有调节作用,这种作用是通过在基因水平和蛋白水平上影响P450scc、3β-HSD和17β-HSD的表达而实现的。 展开更多
关键词 膜联蛋白5 睾丸细胞 胆固醇侧链断裂酶 17-羟甾脱氢酶
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过敏性和冠心病猝死者心肌组织中肥大细胞类胰蛋白酶、脑利钠肽的表达 被引量:5
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作者 史洁茹 田成俊 +3 位作者 曾强 郭相杰 路健 高彩荣 《法医学杂志》 CAS CSCD 2016年第3期161-164,共4页
目的探讨肥大细胞类胰蛋白酶、脑利钠肽(brain natriuretic peptide,BNP)在过敏性猝死和冠心病猝死鉴别诊断中的意义。方法选取山西医科大学法医病理学教研室2010—2015年尸检案例心肌标本共30例,分为颅脑损伤致死组、过敏性猝死组、冠... 目的探讨肥大细胞类胰蛋白酶、脑利钠肽(brain natriuretic peptide,BNP)在过敏性猝死和冠心病猝死鉴别诊断中的意义。方法选取山西医科大学法医病理学教研室2010—2015年尸检案例心肌标本共30例,分为颅脑损伤致死组、过敏性猝死组、冠心病猝死组,每组各10例。采用免疫荧光染色和Western印迹法分析各组心肌组织肥大细胞类胰蛋白酶和BNP的表达。结果过敏性猝死组、冠心病猝死组心肌组织内肥大细胞类胰蛋白酶免疫荧光染色均出现阳性染色;三组间两两比较,表达差异均具有统计学意义(P<0.05)。冠心病猝死组心肌组织内BNP的表达量高于过敏性猝死组、颅脑损伤致死组(P<0.05),过敏性猝死组与颅脑损伤致死组之间差异无统计学意义(P>0.05)。结论联合检测心肌组织内肥大细胞类胰蛋白酶、BNP有望为过敏性猝死和冠心病猝死的法医学鉴别诊断提供帮助。 展开更多
关键词 法医病理学 猝死 过敏反应 冠状动脉硬化 肥大细胞 蛋白 利钠
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棘皮动物微管相关类蛋白4-间变性淋巴瘤激酶与耐药性非小细胞肺癌研究进展 被引量:6
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作者 宋宝英 贾金虎 辛娇娇 《中国医药》 2017年第1期150-152,共3页
非小细胞肺癌(NSCLC)是肺部恶性肿瘤中最常见的病理类型,占肺癌总数的85%,由于其起病隐匿,多数NSCLC患者明确诊断时已处于中晚期,已失去手术治疗机会, 而目前以铂类为主的联合标准化疗方案因不良反应多、有效率有限,使得晚期NSCL... 非小细胞肺癌(NSCLC)是肺部恶性肿瘤中最常见的病理类型,占肺癌总数的85%,由于其起病隐匿,多数NSCLC患者明确诊断时已处于中晚期,已失去手术治疗机会, 而目前以铂类为主的联合标准化疗方案因不良反应多、有效率有限,使得晚期NSCLC患者治疗较为棘手。随着近年来对恶性肿瘤分子生物学的不断深入研究,以表皮生长因子受体 (EGFR)酪氨酸激酶抑制剂(TKI)为代表的分子靶向精准治疗成为中晚期NSCLC患者的最佳选择,然而部分NSCLC患者EGFR基因检测阴性或对EGFR-TKI无效或耐药,因此,尚需进一步探 寻耐药性NSCLC的有效治疗策略。 展开更多
关键词 非小细胞 棘皮动物微管相关蛋白4-变性淋巴瘤激酶 耐药性
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益气活血类方药及骨髓间充质干细胞(BMSCs)在脑缺血再灌注损伤中对基质金属蛋白酶(MMPs)的影响的研究进展 被引量:6
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作者 胡红艳 王燃冰 +1 位作者 刘颖 张运克 《中医临床研究》 2015年第4期137-139,共3页
脑缺血性疾病是神经系统常见病及多发病,目前已成为危害我国中老年人群人身健康和生命的主要原因。近年的研究发现,中医活血化瘀疗法能改善脑微循环,阻滞神经细胞的凋亡和坏死,但中医益气活血法对神经细胞的修复作用尚未见深入研究。骨... 脑缺血性疾病是神经系统常见病及多发病,目前已成为危害我国中老年人群人身健康和生命的主要原因。近年的研究发现,中医活血化瘀疗法能改善脑微循环,阻滞神经细胞的凋亡和坏死,但中医益气活血法对神经细胞的修复作用尚未见深入研究。骨髓间充质干细胞(BMSCs)是一种非造血干细胞,在微环境作用下能向各个胚层的细胞分化,具有取材方便、免疫源性低等特点,近年来成为细胞、基因工程和再生医学研究的热点。近几年,基质金属蛋白酶(MMPs)已被视为缺血性脑卒中急性期的标志物之一,更成为治疗脑卒中的新靶点。 展开更多
关键词 脑缺血再灌注损伤 益气活血方药 骨髓充质干细胞 基质金属蛋白
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含RGD肽类弹性蛋白制备及促HUVECs细胞黏附的影响 被引量:1
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作者 崔梅英 王明月 +5 位作者 陈丽 王冬梅 杨泽斌 黄莉莉 刘宇轩 关新刚 《北华大学学报(自然科学版)》 CAS 2020年第6期740-743,共4页
目的探讨含RGD肽的类弹性蛋白多肽RGD-ELPs和RDG-ELPs与细胞相容性及两种融合蛋白对人脐静脉内皮细胞(Human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)黏附的影响.方法应用大肠杆菌系统表达RGDELPs和RDG-ELPs蛋白,利用可逆相变循环(ITC... 目的探讨含RGD肽的类弹性蛋白多肽RGD-ELPs和RDG-ELPs与细胞相容性及两种融合蛋白对人脐静脉内皮细胞(Human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)黏附的影响.方法应用大肠杆菌系统表达RGDELPs和RDG-ELPs蛋白,利用可逆相变循环(ITC)纯化两种融合蛋白;通过MTT法及活/死细胞染色法检测两种融合蛋白与人胚肾细胞(HEK293T)的相容性;通过贴壁细胞计数方法检测不同浓度RGD-ELP对体外HUVECs细胞黏附表达的影响.结果利用BL21(DE3)大肠杆菌表达系统制备高浓度的RGD-ELPs和RDGELPs,通过ITC纯化得到了高纯度融合蛋白;MTT法及活/死细胞染色法结果提示RGD-ELPs和RDG-ELPs蛋白具有良好的相容性;细胞黏附实验结果表明:RGD-ELPs浓度越大,HUVEC细胞黏附能力越强,而对照组RDGELPs则未显示出明显的细胞黏附效果.结论成功表达并纯化了RGD-ELPs和RDG-ELPs融合蛋白;两种蛋白均具有良好的细胞相容性;RGD-ELPs蛋白具有明显的促进HUVECs细胞黏附作用. 展开更多
关键词 弹性蛋白 RGD 蛋白纯化 细胞黏附
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类弹性蛋白多肽-红色荧光蛋白融合蛋白的表达纯化及细胞相容性 被引量:1
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作者 刘宁 崔梅英 +6 位作者 王明月 杨泽斌 王浩 毛禹 方楷漪 夏薇 关新刚 《北华大学学报(自然科学版)》 CAS 2021年第1期42-46,共5页
目的构建携带红色荧光蛋白(mCherry)标签的类弹性蛋白(ELP)原核表达载体,并表达纯化ELPmCherry融合蛋白,探讨ELP-mCherry融合蛋白与细胞的相容性.方法对利用限制性内切酶Xba I和Xho I对mCherry质粒和pET28a-ELP载体同时进行双酶切,将酶... 目的构建携带红色荧光蛋白(mCherry)标签的类弹性蛋白(ELP)原核表达载体,并表达纯化ELPmCherry融合蛋白,探讨ELP-mCherry融合蛋白与细胞的相容性.方法对利用限制性内切酶Xba I和Xho I对mCherry质粒和pET28a-ELP载体同时进行双酶切,将酶切产物回收、连接并转化DH5α大肠杆菌感受态细胞,构建重组质粒pET28a-ELP-mCherry;将重组质粒转化到BL21(DE3)大肠杆菌感受态细胞中,诱导表达ELPmCherry融合蛋白;利用可逆转变循环(ITC)法对ELP-mCherry融合蛋白进行纯化;通过MTT法探讨ELPmCherry融合蛋白与人胚肾上皮细胞HEK293T和小鼠胚胎成纤维细胞NIH3T3的细胞相容性.结果DNA测序结果显示成功构建了ELP-mCherry原核表达载体;利用BL21(DE3)大肠杆菌表达系统成功表达ELP-mCherry融合蛋白,通过ITC法纯化得到了高纯度融合蛋白.MTT结果表明:在所有ELP-mCherry蛋白测试浓度下,HEK293T和NIH3T3细胞存活率接近或超过100%.结论成功构建ELP-mCherry原核表达载体,成功表达并纯化得到高纯度的ELP-mCherry融合蛋白,ELP-mCherry融合蛋白在HEK293T和NIH3T3细胞中具有良好的细胞相容性. 展开更多
关键词 弹性蛋白 红色荧光蛋白 原核表达 蛋白纯化 细胞相容性
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人脐血间充质干细胞体外诱导分化为类肝细胞 被引量:15
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作者 何念海 赵文利 王宇明 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2005年第15期1814-1818,共5页
目的:建立人脐血间充质干细胞(umbilicalcordbloodmesenchymalstemcells,UCBMSC)的体外分离、培养方法,体外诱导UCBMSC分化为类肝细胞,观察UCBMSC细胞生物学特性,并对类肝细胞进行分子生物学及功能鉴定.方法:采用体外细胞培养技术,分离... 目的:建立人脐血间充质干细胞(umbilicalcordbloodmesenchymalstemcells,UCBMSC)的体外分离、培养方法,体外诱导UCBMSC分化为类肝细胞,观察UCBMSC细胞生物学特性,并对类肝细胞进行分子生物学及功能鉴定.方法:采用体外细胞培养技术,分离培养人脐血UCBMSC,在10g/LMatrigel作基质,2.5mmol/LAZA预处理10-12h,HGF10μg/L+FGF410μg/L+HGM培养基中诱导.用显微摄像和MTT研究细胞增殖及生长特征,用流式细胞仪、免疫组织化学、RT-PCR鉴定细胞表型.采用ELISA法检测培养上清中人白蛋白水平.结果:每份脐血可获得150±20个贴壁细胞:细胞种植后6d达到对数生长期,连续传10代后,每份脐带血UCBMSC可扩增达109-1010个细胞.UCBMSC表型为CD44及CD166阳性,CD34及CD45阴性.在添加FGF4和HGF的Matrigel上诱导培养的UCBMSC在21-28d时,形态由长梭形变为三角形,多角形或类圆形.细胞转圆率为40-50%,双核细胞比率5-7%.免疫组化,RT-PCR检测显示未诱导培养的UCBMSC中,有较少的细胞表达AFP及其mRNA,未见其他肝脏特有的转录因子或者胞质蛋白标志.诱导早期可见较多细胞表达GATA4,AFP和CK19及其mRNA,至诱导后期表达下降,而ALB,CK18,GST-π和肝细胞转录因子HNF1α表达逐渐上升.ALB,CK18阳性细胞比例达61-65%.未诱导分化的UCBMSC没有分泌ALB和产生尿素,诱导分化的UCBMSC以时间依赖方式产生白蛋白.结论:人脐血UCBMSC先分化为肝前体细胞,再分化为成熟肝细胞,获得了在复制及翻译各环节肝细胞标志阳性的类肝细胞,已具备肝细胞特有的分泌白蛋白功能. 展开更多
关键词 人脐血充质干细胞 细胞 分化 蛋白 细胞转录因子 体外诱导分化 充质干细胞 人脐血 体外细胞培养技术 ELISA法检测
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重组腺相关病毒介导的BMP13和SOX9共转染促进骨髓间充质干细胞向类髓核细胞分化 被引量:3
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作者 岳宗进 刘汝银 +2 位作者 于露 冯仲锴 王新立 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第8期897-900,907,共5页
目的观察骨形态发生蛋白13(bone morphogenetic protein 13,BMP13)和性别决定区Y框蛋白9(sex determining region Y box protein 9,SOX9)基因共转染对骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)向类髓核细胞分化的影... 目的观察骨形态发生蛋白13(bone morphogenetic protein 13,BMP13)和性别决定区Y框蛋白9(sex determining region Y box protein 9,SOX9)基因共转染对骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)向类髓核细胞分化的影响。方法通过腺相关病毒(adeno-associated virus,AAV)将目的基因导入BMSCs中;细胞分为4组:对照组、AAV-SOX9组、AAV-BMP13组和共转染组(AAV-SOX9+AAV-BMP13);应用实时荧光定量PCR技术检测mRNA表达水平;Western blot法检测蛋白表达水平;糖胺聚糖检测试剂盒检测糖胺聚糖的合成水平;MTT法检测细胞增殖。结果共转染组BMP13和SOX9的表达水平明显高于AAV-SOX9组、AAV-BMP13组和对照组(P<0.05);共转染组的糖胺聚糖合成水平、角蛋白19(keratin 19,KRT19)及蛋白聚糖(Aggrecan)和Ⅱ型胶原蛋白(typeⅡcollagen,Col2a1)的表达水平明显高于AAV-SOX9组、AAV-BMP13组和对照组(P<0.05);另外,AAV-SOX9和AAV-BMP13及共转染组的细胞增殖活性明显高于对照组(P<0.05),但AAV-SOX9组和AAV-BMP13组与共转染组的增殖活性相比差异无显著性(P>0.05)。结论 BMP13和SOX9双基因转染的BMSCs向类髓核细胞分化的能力明显高于单基因转染组,为椎间盘突出疾病的细胞治疗提供理论依据和参考。 展开更多
关键词 骨髓充质干细胞 髓核细胞 骨形态发生蛋白13 性别决定区Y框蛋白9
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基质金属蛋白酶及其组织抑制因子在人前列腺组织及各种类型前列腺细胞中的表达
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作者 石建党 张立国 +1 位作者 张琚 赵洪 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期1106-1110,共5页
目的:研究基质金属蛋白酶(MMPs)及其组织抑制因子(TIMPs)在人前列腺组织及各种类型细胞中的表达。方法:用半定量RT-PCR的方法,对癌变和非癌变部分的前列腺组织、原代培养的平滑肌细胞、成纤维细胞、上皮细胞以及4种前列腺上皮细胞系(BP... 目的:研究基质金属蛋白酶(MMPs)及其组织抑制因子(TIMPs)在人前列腺组织及各种类型细胞中的表达。方法:用半定量RT-PCR的方法,对癌变和非癌变部分的前列腺组织、原代培养的平滑肌细胞、成纤维细胞、上皮细胞以及4种前列腺上皮细胞系(BPH-1、LNCaP、DU-145和PC-3)中MMP2、MMP7和MMP9、膜型基质金属蛋白酶1和3(MT1-MMP和MT3-MMP)及其组织抑制因子1和2(TIMP-1和TIMP-2)的mRNA水平进行了测定。结果:MMP-2主要在前列腺基质细胞中表达;MMP-7和MMP-9则在前列腺上皮细胞中有较高的表达;MT1-MMP、MT3-MMP、TIMP-1和TIMP-2在前列腺基质细胞和上皮细胞中均有表达,但MT1-MMP和MT3-MMP在成纤维细胞中的表达量较高;另外,各种基质金属蛋白酶及其组织抑制因子在各种前列腺细胞系中也存在差异表达。结论:MMPs和TIMPs在前列腺组织及其各种类型细胞中的差异表达提示:它们可能在前列腺癌的转移中起着不同的作用。 展开更多
关键词 基质金属蛋白 前列腺 上皮细胞 细胞
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高糖诱导HT-22小鼠海马神经元代谢记忆细胞模型的构建及影响
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作者 段云峰 许永劼 +4 位作者 杨婷婷 黄昶煜东 朱丽英 李兴 潘卫 《天津医药》 CAS 2024年第1期44-50,共7页
目的 体外构建高糖诱导HT-22小鼠海马神经元“代谢记忆”细胞模型,探究“代谢记忆”对HT-22细胞凋亡和组蛋白乙酰化的影响。方法 以高糖培养基(葡萄糖浓度为55 mmol/L)和常规糖培养基(葡萄糖浓度为25 mmol/L)培养HT-22细胞,分为常糖组(N... 目的 体外构建高糖诱导HT-22小鼠海马神经元“代谢记忆”细胞模型,探究“代谢记忆”对HT-22细胞凋亡和组蛋白乙酰化的影响。方法 以高糖培养基(葡萄糖浓度为55 mmol/L)和常规糖培养基(葡萄糖浓度为25 mmol/L)培养HT-22细胞,分为常糖组(NG 4、6、8组,25 mmol/L葡萄糖分别培养4、6、8 d),高糖组(HG 4、6、8组,高糖培养4、6、8 d),代谢记忆组(HG2NG2、HG2NG4、HG2NG6、HG4NG2、HG4NG4组,即高糖2 d转25 mmol/L葡萄糖培养2、4或6 d,高糖4 d转25 mmol/L葡萄糖培养2 d或4 d)。CCK-8法检测细胞活力变化,检测细胞培养上清液中乳酸脱氢酶(LDH)释放量,筛选出建立“代谢记忆”模型的最佳作用时间。后续将细胞分为NG4组、NG8组、HG4组、HG4NG4组和HG8组,光学显微镜观察各组细胞形态;流式细胞术检测各组细胞凋亡率;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测去乙酰化酶(HDAC)和组蛋白乙酰转移酶(HAT)活性;Western blot检测组蛋白去乙酰化酶4(HDAC4)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)和胱天蛋白酶3(Caspase-3)蛋白表达情况。结果 HG4NG4组为理想的高糖“代谢记忆”细胞模型;NG4、NG8组细胞交织成致密网状,生长状态良好,细胞呈梭形,突触结构明显。而HG4、8组细胞胞体变圆,突触结构消失,生长受抑,HG4NG4组细胞数量增多但形态受损;流式细胞术结果显示,与NG8组相比,HG8、HG4NG4组凋亡率增加(P<0.05);ELISA结果表明,与NG8组相比,HG8组及HG4NG4组HAT和HDAC的水平均增高(P<0.05),与HG8组相比,HG4NG4组HAT和HDAC差异无统计学意义;Western blot结果显示,与NG8组相比,HG8组、HG4NG4组HDAC4、Bax和Caspase-3蛋白表达增加,Bcl-2蛋白表达水平降低(P<0.05),与HG8组相比,HG4NG4组蛋白表达差异无统计学意义。结论 HT-22小鼠海马神经元细胞经高糖55 mmol/L培养4 d后,再以25 mmol/L葡萄糖培养4 d是理想的高糖“代谢记忆”细胞模型。其机制可能与高糖模型中HDAC、HAT活性及HDAC4表达升高有关。 展开更多
关键词 糖尿病 脑疾病 细胞凋亡 蛋白乙酰转移酶 蛋白脱乙酰基酶 HT-22 代谢记忆
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实电解质钙可诱发人肥大细胞组胺和类胰蛋白酶分泌
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作者 何韶衡 何永松 谢华 《中国应用生理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期69-72,共4页
目的 :利用人大肠组织的肥大细胞和肥大细胞激活的体外研究系统 ,评价实电解质钙 (calciumionophoreA2 3187,CI)诱导肥大细胞释放类胰蛋白酶和组胺的能力和机制。方法 :经酶悬浮的人大肠肥大细胞与CI共同培养后收集上清液 ,并用酶联免... 目的 :利用人大肠组织的肥大细胞和肥大细胞激活的体外研究系统 ,评价实电解质钙 (calciumionophoreA2 3187,CI)诱导肥大细胞释放类胰蛋白酶和组胺的能力和机制。方法 :经酶悬浮的人大肠肥大细胞与CI共同培养后收集上清液 ,并用酶联免疫吸附试验 (ELISA)的方法检测类胰蛋白酶分泌量 ,用以玻璃纤维为基础的荧光比色法检测组胺释放量。结果 :经过 15min的培养 ,CI可引起浓度相关性的组胺和类胰蛋白酶释放。其中组胺的最大分泌量比基础分泌量超出了 5 .3倍以上 ,而类胰蛋白酶的最大分泌量则比基础分泌量超出了 2 .8倍以上。CI在浓度高于 1.0 μmol/L时引起的组胺释放量明显多于类胰蛋白酶释放量。时间关系曲线显示 ,CI的作用从加样后 10s开始 ,6min后达高峰并至少持续 15min。百日咳毒素和代谢抑制剂均能抑制CI引起的组胺和类胰蛋白酶释放。结论 :人大肠肥大细胞在受到CI刺激时具有释放类胰蛋白酶和组胺的能力 ,这个过程与肥大细胞膜G蛋白偶联受体的激活有关 ,并消耗能量。 展开更多
关键词 组胺 蛋白 肥大细胞 百日咳毒素 代谢抑制剂
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前列腺癌去势后脂类和能量代谢通路变化的蛋白表达研究 被引量:2
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作者 邢瑞 苏静 +4 位作者 邢召全 郭兆新 孟力维 高泽 刘照旭 《医学与哲学(B)》 2016年第10期66-69,共4页
建立前列腺癌细胞系模拟雄激素剥夺疗法(ADT)后前列腺癌细胞的转化状态,评估去势抵抗性前列腺癌(CRPC)转变过程中参与细胞代谢的脂类和能量蛋白的表达变化,探讨其对CRPC细胞的调节作用。用雄激素依赖性LNCaP细胞系在无雄激素环境下培养... 建立前列腺癌细胞系模拟雄激素剥夺疗法(ADT)后前列腺癌细胞的转化状态,评估去势抵抗性前列腺癌(CRPC)转变过程中参与细胞代谢的脂类和能量蛋白的表达变化,探讨其对CRPC细胞的调节作用。用雄激素依赖性LNCaP细胞系在无雄激素环境下培养获得雄激素非依赖性LNCaP-R,通过双向凝胶电泳(2-DE)及质谱分析评估这两个同源细胞系中参与代谢相关蛋白的表达变化。结果 LNCaP及LNCaP-R间蛋白质存在差异表达;其中参与脂类和能量代谢通路的蛋白表达差异明显。参与能量和脂类等细胞代谢的蛋白在前列腺癌去势后发生明显变化,生长抑素以及他汀类(Statins)药物对该类蛋白的抑制作用,有可能通过调节前列腺癌细胞的新陈代谢和线粒体功能,可作为治疗CRPC的潜在辅助药物应用于临床。 展开更多
关键词 去势抵抗性前列腺癌 细胞代谢 代谢 能量代谢 蛋白表达
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蛋白多肽类药物和单抗药物免疫原性评价方法及研究进展 被引量:3
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作者 王慧敏 闻镍 +2 位作者 王晓霞 刘丽 刘会芳 《中国医药生物技术》 2021年第3期251-255,共5页
免疫原性是指药物刺激机体产生特异性抗体或致敏淋巴细胞的性质[1]。许多生物药物在体内都具有免疫原性,对动物或人给予蛋白多肽类药物或单克隆抗体(简称单抗)药物后可能会引起机体产生抗药物抗体(anti-drugantibody,ADA)。ADA会对药物... 免疫原性是指药物刺激机体产生特异性抗体或致敏淋巴细胞的性质[1]。许多生物药物在体内都具有免疫原性,对动物或人给予蛋白多肽类药物或单克隆抗体(简称单抗)药物后可能会引起机体产生抗药物抗体(anti-drugantibody,ADA)。ADA会对药物暴露、药物代谢动力学特征、药效、药物毒性作用等造成影响,主要包括:ADA与药物结合,可能增加或减少药物的清除、影响血浆半衰期和组织分布、改变药物的暴露水平和药代动力学特征。 展开更多
关键词 致敏淋巴细胞 血浆半衰期 蛋白药物 药物代谢动力学 药物刺激 生物药物 单克隆抗体 药物毒性
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单侧输尿管结扎幼鼠肾组织肥大细胞类胰蛋白酶蛋白酶活化受体-2表皮生长因子蛋白的表达 被引量:3
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作者 李琳琳 江春亚 马宏 《中国药物与临床》 CAS 2016年第3期318-321,共4页
目的通过单侧输尿管结扎模型模拟临床肾纤维化的病理过程,观察肥大细胞与肾间质纤维化的关系,进一步探讨肥大细胞相关因子类胰蛋白酶、蛋白酶活化受体-2、表皮生长因子在肾间质纤维化中的表达。方法将大鼠随机平均分为3组,每组于术后3、... 目的通过单侧输尿管结扎模型模拟临床肾纤维化的病理过程,观察肥大细胞与肾间质纤维化的关系,进一步探讨肥大细胞相关因子类胰蛋白酶、蛋白酶活化受体-2、表皮生长因子在肾间质纤维化中的表达。方法将大鼠随机平均分为3组,每组于术后3、7、11、14 d各取6只,留取左肾,检测胶原纤维的程度[采用(Masson)染色]及肥大细胞相关因子类胰蛋白酶、蛋白酶活化受体-2(PAR-2)、表皮生长因子(EGF)在单侧输尿管结扎(UUO)介导肾间质纤维化中的表达(采用免疫组织化学法)。结果 UUO模型组各时间点tryptase、PAR-2、EGF的表达水平显著高于假手术组(P<0.05);而雷帕霉素治疗组各时间点tryptase、PAR-2、EGF的表达水平均低于模型组(P<0.05),但比假手术组的表达水平高(P<0.05)。结论肥大细胞可能通过tryptase-PAR-2-EGF途径促进肾间质纤维化,而雷帕霉素治疗组可能有防治纤维化的作用。 展开更多
关键词 肥大细胞 蛋白 受体 PAR-2 表皮生长因子 质纤维化 西罗莫司
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消斑肽加速氧化低密度脂蛋白诱导的血管平滑肌细胞凋亡 被引量:10
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作者 袁中华 杨永宗 +2 位作者 杨小毅 谭健苗 万载阳 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第10期935-937,T001,共4页
目的 :我们已经发现消斑肽能逆转平滑肌源性的泡沫细胞 ,阻抑C5 7BL/6J小鼠动脉粥样硬化斑块的形成 ,对已形成的斑块有消退作用。本文主要探讨消斑肽的作用机制。方法 :体外培养的猪主动脉平滑肌细胞 ,先与 15mg/L的氧化低密度脂蛋白孵... 目的 :我们已经发现消斑肽能逆转平滑肌源性的泡沫细胞 ,阻抑C5 7BL/6J小鼠动脉粥样硬化斑块的形成 ,对已形成的斑块有消退作用。本文主要探讨消斑肽的作用机制。方法 :体外培养的猪主动脉平滑肌细胞 ,先与 15mg/L的氧化低密度脂蛋白孵育 72h ,再与 0 1mg/L消斑肽孵育 2 4h ,应用荧光染色技术、激光共聚焦显微技术和流式细胞术 ,观察消斑肽对平滑肌细胞的作用。结果 :氧化低密度脂蛋白能诱导血管平滑肌细胞发生凋亡 ;消斑肽能加速氧化低密度脂蛋白诱导的细胞凋亡。结论 :综合以前的实验 ,消斑肽可能是通过加速斑块中细胞的凋亡发挥抗动脉粥样硬化效果。 展开更多
关键词 蛋白 LDL 细胞凋亡 血管平滑肌细胞 VSMC 消斑 氯化低密度脂蛋白 动脉粥样硬化
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