慢性丙型肝炎病毒对肝癌细胞静止的影响及其机制研究

目的探讨慢性丙型肝炎病毒(HCV)通过PCNA钳位相关因子(PCLAF)调控肝癌细胞静止的潜在机制。方法HCV感染后,检测肝癌细胞HUH7的细胞周期分布。HCV感染或不感染后,肝癌细胞进行RNA-seq,使用siRNA敲低差异基因并检测细胞周期分布。过表达PCLAF后检测肝癌细胞的细胞周期分布。过表达HCV的非结构蛋白5A(NS5A)后,检测肝癌细胞PCLAF的表达和细胞周期分布。PCLAF抑制剂α-常春藤皂苷处理后,检测HCV对肝癌细胞周期分布的影响。结果HCV感染后,肝癌细胞G0期和G1期细胞分布减少(P<0.05),而S期和G2/M期细胞分布增加(P<0.05)。敲低PCLAF后肝癌细胞G0期细胞分布增加(P<0.05)。HCV感染的情况下,过表达PCLAF后肝癌细胞G0期细胞分布减少(P<0.05)。过表达NS5A后,肝癌细胞PCLAF mRNA和蛋白相对表达量升高(P<0.05)。过表达NS5A后,肝癌细胞G0期和G1期细胞分布减少(P<0.05),而S期和G2/M期细胞分布增加(P<0.05)。但过表达NS5A的同时敲低PCLAF后,肝癌细胞的细胞周期分布无显著变化。过表达NS5A同时α-常春藤皂苷处理后,肝癌细胞的细胞周期无显著变化。HCV感染同时α-常春藤皂苷处理后,肝癌细胞的细胞周期无显著变化。结论HCV诱导肝癌细胞跨越G0/G1期静止,减少细胞分裂时间。HCV的NS5A蛋白通过提高PCLAF的表达而抑制肝癌细胞静止。PCLAF抑制剂α-常春藤皂苷可以阻断HCV抑制的肝癌细胞静止。

静止型嗜铬细胞瘤和非静止型嗜铬细胞瘤的比较

目的:提高对静止型嗜铬细胞瘤的诊断和治疗水平。方法:回顾性分析12例静止型嗜铬细胞瘤和同期105例非静止型嗜铬细胞瘤的临床资料。结果:12例静止型嗜铬细胞瘤患者的血压、尿儿茶酚胺(CA)、尿香草基苦杏仁酸(VMA)均正常或略高于正常值;静止型嗜铬细胞瘤常见于肾上腺偶发瘤及上腹部肿物诊断中,以女性及右侧偏多,肿瘤多呈球形,直径大多<2cm或>5cm,瘤体中常见液化坏死,并且面积较大;所有病例均进行手术治疗,其中6例术中血压无上升,3例有轻度上升,3例发生高血压危象,无一例死亡。结论:静止型嗜铬细胞瘤在临床上具有潜在的危险性,应充分认识,术前充分准备,术中及时妥善处理。

调控静止期癌细胞预防肺癌复发转移初探

复发转移是导致肺癌死亡的主要原因,目前尚缺乏有效的理论指导和干预措施。田建辉团队基于"扶正治癌"学术思想,融合现代肿瘤学的研究,提出"正虚伏毒"为肺癌发生发展的核心病机,其中"伏毒"指的是肿瘤病人体内的多种肿瘤细胞,包括静止期癌细胞。静止期癌细胞对放化疗不敏感且可以逃避机体免疫清除,激活后会造成肿瘤的转移和复发。徐宏喜课题组率先提出可以通过抑制静止期癌细胞激活预防肿瘤的转移和复发,建立了一系列体内外的研究模型,并发现了抑制静止期癌细胞激活的关键分子机理和活性先导化合物。静止期癌细胞的研究将为预防肺癌转移复发提供实验证据和理论支持。

人胚肋软骨静止区细胞的体外培养及生物学特性研究

目的 :研究体外培养的人胚肋软骨静止区细胞的生物学特性及分化规律 ,为组织工程生长板的研究提供种子细胞。方法 :采用Ⅱ型胶原酶消化的方法获取人胚肋软骨静止区细胞 ,观察细胞形态学变化 ;测定细胞生长曲线 ;借助特殊染色、免疫荧光染色的方法了解糖胺聚糖、碱性磷酸酶、Ⅱ型胶原酶的合成情况。结果 :贴壁后细胞呈多角形 ,从第 6代开始绝大多数细胞转变为成纤维细胞状 ,细胞培养至第 2代开始分泌大量Ⅱ型胶原。结论 :体外单层培养的人胚肋软骨静止区细胞具有正常的生长增殖与分化能力 ,可分化至成熟期软骨细胞。

Guttiferone K抑制静止期前列腺癌细胞重新激活的作用研究

目的:观察从云南藤黄(Garcinia yunnanensis)中提取分离得到的PPAPs(Polycyclic Polyprenylated Acylphloroglucinol)类化合物Guttiferone K(GUTK)对人静止期前列腺癌LNCa P细胞重新激活的影响。方法:处于对数生长期的人前列腺癌LNCa P细胞去除血清培养7d诱导其进入静止期,通过再次加入血清培养使其重新激活进入细胞周期,同时给予GUTK进行干预。用免疫细胞化学的方法检测Ki-67蛋白表达的变化;利用PI染色的流式分析法和Ed U Incorporation法检测GUTK对细胞周期分布的影响;利用Western Blotting法检测Cyclin D1/3、CDK4/6和E2F1蛋白表达水平的变化。结果:GUTK呈剂量依赖性地抑制静止期LNCa P细胞的再次增殖并阻止静止期LNCa P细胞重新进入S期;GUTK在静止期LNCa P细胞激活的早期明显下调了Cyclin D1/3、CDK4/6和E2F1蛋白的表达水平。结论:从云南藤黄中提取分离得到的化合物GUTK能够抑制人静止期前列腺癌LNCa P细胞的重新激活,具有潜在的延缓前列腺癌病情发展和预防复发的作用。

GABA产生菌分离鉴定及静止细胞转化条件优化

采用乳酸菌分离纯化方法,从传统四川泡菜中分离筛选得到3株γ-氨基丁酸(GABA)产生菌,其中转化能力最强的菌株L13-1经鉴定为短乳杆菌(Lactobacillus brevis)。L13-1菌株经液体培养后,离心获得静止细胞,并将此静止细胞均匀分散于含有转化底物谷氨酸钠(MSG)的转化缓冲液中,转化生产GABA。采用响应面法(RSM)优化转化条件。经优化,GABA产量达到95.1mM,较优化前提高了136%。本研究表明,利用转化能力强的乳酸菌株静止细胞转化生产GABA具有良好的应用前景。

静止性促肾上腺皮质激素细胞腺瘤的诊断及研究进展

随着生物标志物数量的急剧增加,通过术后病理组织中转录因子水平的检测可有效对垂体腺瘤行进一步划分,为医生术后治疗方案的决策、高风险腺瘤患者的管理和监测提供更准确的指导建议。其中,静止性促肾上腺皮质激素细胞腺瘤(SCA)临床上既无生化检验提示外周血激素水平的升高,同时无皮质醇增多症的临床表现,明确诊断是通过促肾上腺素病理染色证实。随着转录因子t-Pit免疫组化的引入使得SCA的诊断得到了进一步扩充,本文对目前SCA的最新诊断标准及相应研究进展进行综述。

针药结合治疗静止期滋养细胞疾病患者血清HCG持续呈低水平升高1例

持续性低水平血清人绒毛膜促性腺激素(human chorionic gonadotropin,HCG)升高是指患者血清HCG持续呈低水平升高(<250 U/L),至少持续3个月以上,但体格检查及影像学检查未发现病灶。临床上偶见,治疗(包括化疗及手术)效果不佳。

肿瘤干细胞:起源与争论

近年来,随着干细胞理论在肿瘤研究中的广泛应用,人们逐渐认识到在绝大多数癌症中,肿瘤细胞很可能起源于一种肿瘤起始细胞———肿瘤干细胞,它在机体内具有自我更新并形成肿瘤的能力。肿瘤干细胞的存在已在多种肿瘤类型与细胞系中得到证实,并鉴定出相应的分选方法,但人们对它的起源却莫衷一是,干细胞突变、细胞融合、胚胎干细胞残留等都有可能是肿瘤干细胞产生的原因。通过多年对肝癌的研究,笔者提出肝癌干细胞来源的假说:认为干细胞在修复肝炎病毒所致肝损伤的过程中,在病毒与炎症的双重刺激下,干细胞与突变肝细胞之间发生细胞融合、交换,最终产生肝癌干细胞。随着相关研究的不断深入,肿瘤干细胞学说在理论与技术上也面临着诸多质疑与挑战,其中有观点认为,干细胞可能只是被趋化至癌变部位并因其可塑性而表现出恶变表型,但并未在实质上参与肿瘤的发生与发展。

食管癌干细胞特性及相关蛋白的研究进展

肿瘤干细胞学说是一种与肿瘤相关的新学说,该学说认为肿瘤组织中有极少量的肿瘤干细胞,具备自我更新及无限增殖的能力,在促进肿瘤发生和维持肿瘤发展及治疗抵抗中起着至关重要的作用。食管癌的复发、转移与耐药被认为与肿瘤干细胞密切相关。目前,针对特定位点的分子靶向药物在恶性肿瘤的治疗中取得了一定的临床疗效,因此全面了解影响食管癌干细胞的相关机制,并进行针对性的干预,可能会杀灭食管癌干细胞,提高食管癌的临床疗效。本文就食管癌干细胞特性及相关蛋白的研究进展进行综述。

α-酮戊二酸二甲酯抑制乳腺癌细胞增殖的机制研究

α-酮戊二酸二甲酯（DM-2KG）是目前在基础研究中广泛被应用为养料来营救因营养缺失导致的细胞生长抑制[1].据报道,在多种代谢酶发生突变如IDH1或SDH突变的肿瘤细胞中,当应用DM-2KG干预后,这类代谢物进入细胞后即可转化为PHD活化的辅助因子α-KG,激活PHD酶活性,促进缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）蛋白降解[2],即HIF-1α蛋白的PHD经典降解途径。

特殊类型嗜铬细胞瘤

特殊类型嗜铬细胞瘤表现特殊,患病人群特殊,涉及科室面较广。本文侧重介绍了它们特殊的临床表现以及诊断处理方法。

植物细胞学专题讲座——第二讲 植物细胞周期与细胞的异常分裂

生物有机体都是由细胞组成,植物体的生长、发育和繁殖都是通过细胞分裂的方式来实现的。细胞分裂必须通过DNA(去氧核糖核酸)、RNA(核糖核酸)和蛋白质等物质的复制后才能进行,这些物质是在细胞分裂间期的特定时期加倍的。通过放射自显术研究蚕豆根尖细胞实验,进一步证实细胞分裂期与间期密切关系,明确提出细胞周期的概念。

标准与简易便携式CO_2培养箱对牛体细胞核移植重构胚的体外发育能力影响的比较(英文)

尽管利用克隆技术来扩大优良品种家畜的数量 ,以及生产以农业和生物医学为目的的转基因动物和拯救濒危动物品种的需求不断增加 ,克隆技术对于大规模应用仍然成功率太低 ,而且成本昂贵。为了探索培养因素对改进克隆效率的作用 ,我们比较了标准与简易便携式CO2 培养箱对通过融合胎儿成纤维细胞核与去核的体外成熟卵母细胞生产的牛重构胚。在这两种培养系统中 ,温度 ( 38.5℃ )和CO2 浓度( 5% )相同 ,便携式培养箱的CO2 浓度较低 ( 8%到 1 0 % ) ,该培养系统同时在负压影响下进行了操作。虽然两种培养系统对卵母细胞体外成熟 (MII)、融合率和第 7d发育囊胚的细胞数无显著差异 ,但便携式培养箱的卵裂率 (P <0 .0 5)和囊胚率 (P <0 .0 1 ) ( 70 .5%±0 .6 %和 36 .1 %± 1 .4% )显著高于标准培养箱 ( 6 4.1 %± 3.2 %和 2 3.5%± 1 .4% )。将 6枚在便携式培养箱培养的重构胚移入 3只受体牛 ,在 6 0、90和 1 2 0d的存活率分别为 1 0 0 %、6 6 .7%和 33.3%。这种相对较高的早期胚胎死亡可能与多因素影响怀孕的复杂性和在克隆胚上经常观察到的胎盘形成异常有关。使用便携式培养系统还需对CO2 、O2