口服大黄酸超分子纳米粒的制备与表征及其巨噬细胞靶向性能研究

目的:制备可口服递送的大黄酸超分子纳米粒(CP-FA-RH NPs),并对其巨噬细胞靶向性能进行探究。方法:基于主客体结合和静电相互作用力,制备CP-FA-RH NPs。以平均粒径、Zeta电位、外观形态和X射线衍射光谱等指标评价其成功制备,并通过高效液相色谱法,测定CP-FA-RH NPs中RH的包封率和载药量。此外,通过显微成像对FA-RH NPs的靶向性能进行可视化研究。结果:本研究制得的CP-FA-RH NPs的平均粒径为220.53±2.13 nm,Zeta电位为20.6±1.8 mV,包封率和载药量分别为75.8%和5.1%;透射电子显微镜观察纳米粒子呈现大小均一的圆球状;激光共聚焦显微镜可视化图像表明,FA-RH NPs对巨噬细胞靶向性能良好。结论:CP-FA-RH NPs被成功制备,且对巨噬细胞具有良好的靶向作用,是一种潜在的可有效改善药物溶解度和生物利用度,精准靶向巨噬细胞的新型纳米制剂。

细胞靶向肽在多肽偶联药物中的研究进展

靶向治疗利于提高治疗效率,减少不良反应,克服耐药性,特别在癌症治疗领域被广泛运用。多肽偶联药物(PDC)由归巢肽、连接臂和具有药理作用的有效载荷构成。其中归巢肽包括细胞穿透肽(CPP)及细胞靶向肽(CTP),在整个分子中作用重要,决定了分子穿透生物膜并靶向特定靶标的能力。介绍了PDC中CTP的种类、递送药物的应用等,为CTP及其用于新型PDC研发提供指导,推进新型PDC的研发进程。

无唾液酸胎球蛋白修饰脂质体在小鼠体内的肝实质细胞靶向性研究

目的 :研究经无唾液酸胎球蛋白 (asialofetuin ,AF)修饰后 ,脂质体达到小鼠肝实质细胞靶向的可能性。方法 :用放射性同位素标记的方法测定普通长循环脂质体 (stericallystabilizedliposomes,SSL)、AF 修饰普通脂质体(AF linkednormalliposomes,AF NL)及AF 修饰长循环脂质体 (AF linkedstericallystabilizedliposomes,AF SSL)在小鼠血、心、肝、脾、肺、肾等各器官及肝内不同细胞中的分布。结果 :SSL、AF NL及AF SSL的血中半衰期分别为14.44、4.73、11.49h ;整个肝中的分布AF NL >AF SSL >SSL ,经t化极差 q法检验 ,三者之间差异均存在显著性 ;肝不同细胞 (即实质与非实质细胞 )中脂质体的浓度均为AF NL >AF SSL >SSL(P <0 .0 5 ) ,但实质细胞与非实质细胞的浓度比为AF NL≈AF SSL SSL(P <0 .0 5 )。结论 :经AF修饰后 ,无论是否长循环 。

免疫细胞靶向治疗结肠癌肿瘤干细胞

结直肠癌（Colorectal cancer,CRC）发病率列我国第三位。随着我国人民生活水平的不断提高和饮食习惯的改变,发病率也呈现出逐年上升的趋势,结直肠癌5年生存率只有50%。研究发现结直肠癌肿瘤干细胞在结直肠癌的发生、复发和转移中发挥着重要作用。

肝细胞靶向性半乳糖-聚乙二醇-聚乙烯亚胺纳米基因载体的合成及其理化特性

背景:对聚乙二醇-聚乙烯亚胺进行半乳糖化修饰,可使其成为具有肝细胞靶向性的纳米基因载体半乳糖化聚乙二醇-聚乙烯亚胺[Galactosylated poly(ethylene glycol)-graft-polyethylenimine,Gal-PEG-PEI]。目的:合成Gal-PEG-PEI,考察其基本理化特征,为下一步的转染研究提供参考。设计、时间及地点:对比观察基因工程实验,于2007-10/2008-06在中山大学生物医学工程中心完成。材料:两步法合成Gal-PEG-PEI。方法:应用纳米粒径-zeta电位仪、透射电镜、凝胶阻滞实验和EB结合实验测定Gal-PEG-PEI与psiRNA复合物的理化性质,CCK-8法检测其细胞毒性,纳米复合物转染HepG2细胞并观察其转染效率。主要观察指标:Gal-PEG-PEI/psiRNA的粒径、zeta电位及形态;包覆效率;细胞毒性实验结果;肝脏靶向性转染结果。结果:Gal-PEG-PEI/psiRNA复合物的粒径随N/P的增大而减小,最小粒径为81.1nm,而zeta电位随Gal-PEG-PEI中氨基与psiRNA磷酸基比例的增大呈上升趋势;Gal-PEG-PEI对siRNA质粒有较好的包覆效率。Gal-PEG-PEI载体的细胞毒性小于聚乙烯亚胺而其转染效率高于聚乙烯亚胺。结论:成功合成Gal-PEG-PEI纳米基因载体,表现出良好的肝细胞靶向性,且细胞毒性较小。

疏水化阳离子透明质酸胶束介导的siRNA转染影响因素及细胞靶向性研究

研究疏水化阳离子透明质酸胶束HAPL9600介导基因转染的影响因素。通过测定HAPL9600胶束与siRNA形成复合物的粒径,分别考察透明质酸相对分子质量、HAPL9600浓度、HAPL9600与siRNA比例、pH、介质、孵育时间以及血清对疏水化阳离子透明质酸胶束体外转染效率的影响,筛选较优的转染条件。同时进行受体抑制实验,考察该载体的细胞靶向性。结果表明当透明质酸相对分子质量为9 600、载体与siRNA质量比为8,孵育时间为30 min、体系中HAPL9600浓度为15 mg/mL,转染介质为pH 6.8的PBS溶液时转染效率较高。游离透明质酸可抑制经CD44介导的siRNA的转染效率。HAPL9600可作为合成新型靶向非病毒载体的骨架,但必须控制有关因素才能得到可重复的最佳转染结果。

肝细胞靶向性Gal-Bu对大鼠肝细胞的转染效率检测

目的检测肝细胞靶向性半乳糖基化聚乙烯亚胺衍生物Gal-Bu对大鼠肝细胞(BRL-3A)的转染效率。方法对PEI-Bu化学修饰以半乳糖基团制备Gal-Bu,琼脂糖凝胶电泳检测其复合质粒DNA的能力;MTT法检测Gal-Bu对BRL-3A的细胞毒性;以荧光素酶质粒作为报告基因,测定Gal-Bu在BRL-3A细胞的转染效率;半乳糖竞争抑制实验观察Gal-Bu对肝细胞的靶向性。结果琼脂糖凝胶电泳表明在质量比>15时,Gal-Bu具有复合DNA的能力。在5～100μg/mL浓度范围内,Gal-Bu和PEI 25 000的细胞毒性随浓度升高而增大;在同一浓度下,Gal-Bu的细胞毒性小于PEI 25 000(P<0.01)。Gal-Bu/DNA在质量比为50时达到最高转染活性,其数值为PEI 25 000的5.6倍(P<0.01),且接近Lipofectamine 2000。半乳糖竞争抑制实验表明,100 mmol/L的半乳糖可显著降低Gal-Bu的转染效率(P<0.01),但是并不影响PEI-Bu的转染效率(P>0.05)。结论 Gal-Bu是一种低细胞毒性、高转染活性的非病毒肝细胞靶向基因载体,在肝脏疾病的基因治疗领域中具有潜在的应用前景。

谷甾醇葡萄糖苷和卞泽双重修饰肝实质细胞靶向阳性脂质体介导的基因转染和抗乙肝病毒作用

目的研究载乙型肝炎病毒(HBV)反义寡核苷酸的双重表面修饰肝实质细胞靶向阳性脂质体的基因转染,抗乙肝病毒作用和其介导基因转染的机制。方法以3β-[N-(N,′N′-二甲氨基乙基)-氨甲酰基]胆固醇(DC-Chol)和二棕榈酰磷脂酰胆碱(DPPC)为脂材,分别以谷甾醇葡萄糖苷(sito-G)和卞泽(B rij 35)为膜表面修饰成分,制备载HBV反义寡核苷酸的阳性脂质体。采用大鼠原代肝实质细胞和人肝癌细胞HepG 2.2.15,通过流式细胞分析、荧光显微镜观察和酶联免疫吸附试验(ELISA),考察脂质体对基因转染的促进作用及其病毒抑制作用;通过评价渥曼青霉素、尼日利亚菌素以及无涎胎球蛋白对其病毒抑制作用的影响,探讨其转染机制。结果以sito-G和B rij 35对脂质体进行双重表面修饰,显著提高了脂质体的转染率和病毒抑制作用;荧光显微镜下观察到较强转染,反义寡核苷酸的胞内分布以在细胞核中为主;渥曼青霉素、尼日利亚菌素和无涎胎球蛋白均不同程度地降低了载反义寡核苷酸脂质体的病毒抑制作用。结论B rij 35和sito-G双重修饰阳性脂质体显示出较高的基因转染效率和显著的病毒抑制作用,其基因转染过程以内吞和膜融合为主,并表现出肝实质细胞表面去唾液酸糖蛋白受体(ASGPR)的靶向选择性。

细胞靶向抗肿瘤纳米药物载体的研究进展

肿瘤已经成为严重危害人类健康的重大疾病之一,而如何治疗肿瘤疾病已逐渐变为近年内的研究热点。由于纳米药物载体在细胞靶向抗肿瘤中表现出来的特殊性质,使其受到了越来越多的关注。本文将就一些常见的纳米药物载体作一综述。

肝细胞靶向性Asor-PLL-DNA复合物的构建

目的:构建肝细胞靶向性Asor-PLL-DNA复合物。方法:将携带外源基因的质粒与脱唾液酸糖蛋白结合在一起,形成一种可溶性的蛋白-核酸复合物。结果:该复合物能通过脱唾液酸糖蛋白受体介导的内吞作用,以非病毒感染的方式,将外源基因导入肝细胞并得以表达。结论:和传统的重组病毒介导的基因转移方式相比,该复合物具有更高的靶向性、安全性,该系统的建立为以肝细胞为靶组织的外源基因介导的肝脏相关疾病的基因治疗提供实验基础。

探究肿瘤靶向物载体的细胞靶向性

目的探讨和分析肿瘤靶向物载体的细胞靶向性。方法选择293T细胞和H460细胞作为实验标本,实验地点选择该院实验室,时间为2016年2—3月,选择合成的SP5-52、阿霉素、第4代聚酰胺—胺、超滤离心管、荧光分子异硫氰酸荧光素等,并总结和探讨肿瘤靶向性药物所具有的细胞靶向性。结果在常规药物制剂的条件下对抗肿瘤药物新型靶向载体系统进行发展,并且改善药物在载体内部的代谢动力学相关特征,能够让药物向富集到肿瘤药部位、肿瘤细胞内部聚集,保证疗效得到提升,毒副作用逐渐减小,检测浓度范围之内细胞存活率超过80%,其中G4-Ac毒性为90%、G4-Ac-FITC为87%、而G4-Ac-FITC-SP5-52细胞毒性为97%,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论在科学技术不断发展和进步的影响下,抗癌药物剂型的研究工作开始朝着靶向、高效、智能化方向发展,理想药物剂型具有控释、缓释、靶向发展前景较为广阔,值得在;临床运用上进行使用和推广。

系统性红斑狼疮患者应用靶向B细胞治疗后发生中枢神经系统病变文献病例分析

目的探讨系统性红斑狼疮(SLE)患者经靶向B淋巴细胞生物制剂治疗后发生中枢神经系统不良反应的临床特征。方法检索国内外相关数据库(截至2023年5月),收集系统性红斑狼疮患者经贝利尤单抗、利妥昔单抗治疗后发生中枢神经系统病变的病例报告类文献,提取患者的基本信息、贝利尤单抗或利妥昔单抗用药情况(用法用量、单用或联用、联用方案等)、中枢神经系统病变发生时间、临床表现、影像学特征、临床治疗及转归等,并进行描述统计分析。结果检索到进行性多灶性脑白质病(PML)患者14例,发病年龄(50.71±11.45)岁;可逆性后部脑病综合征(PRES)患者24例,发病年龄(30.67±14.93)岁。纳入有详细病例报道的患者共7例,7例患者均未合并HIV感染、恶性肿瘤及其他自身免疫性疾病。7例患者均经磁共振检查确诊,均未行脑组织活检。临床表现:癫痫5例,视物模糊或视力丧失3例,构音障碍或失语2例,头痛2例,昏迷1例,血压升高4例。最终7例患者中1例死亡。结论应用靶向B细胞治疗后,SLE患者中枢神经系统副作用多发生在疾病活动期且合并使用其他免疫抑制剂时。患者的临床表现容易与神经精神狼疮混淆,导致病情延误,提示在使用靶向B细胞生物制剂治疗时,应评估SLE患者发生中枢神经系统副作用的潜在风险。

自组装脂质体纳米载体对骨肉瘤细胞Saos-2靶向递送及凋亡的影响

目的以天然脂肪酸月桂酸和硬脂酸为骨架,利用它们在二甲基甲酰胺(dimethylformamide,DMF)中的自组装构建了一种脂质体纳米载体并负载阿霉素,对其靶向人骨肉瘤细胞Saos-2及凋亡情况进行考察.方法采用自组装制备了负载阿霉素的脂质体纳米载体,采用激光共聚焦考察了其靶向人骨肉瘤细胞Saos-2能力,采用Annexin V-FITC染色技术考察了脂质体纳米载体对人骨肉瘤细胞Saos-2凋亡的影响.结果自组装脂质体纳米载体与人骨肉瘤细胞Saos-2孵育48h时,荧光强度最高,绿色荧光的自组装脂质体纳米载体会围绕在骨肉瘤细胞Saos-2周围,相对于同剂量DMF的对照组,自组装脂质体纳米载体组的细胞无论是早期凋亡还是晚期凋亡的比例均有所增加.结论负载阿霉素的脂质体纳米载体能准确地靶向人骨肉瘤细胞Saos-2,并加速人骨肉瘤细胞Saos-2的凋亡.

双靶点嵌合抗原受体-T细胞治疗复发难治多发性骨髓瘤患者疗效和安全性的Meta分析

背景嵌合抗原受体(CAR)-T细胞免疫疗法已在多发性骨髓瘤(MM)中取得较好的疗效,最常见的靶点为B细胞成熟抗原(BCMA)。单靶点CAR-T细胞免疫疗法的缺点是会导致疾病抵抗和复发,可能与抗原逃逸有关。为此,改进开发了双靶点CAR-T细胞治疗复发难治多发性骨髓瘤(RRMM),此方面尚缺乏系统的临床分析。目的对RRMM患者应用双靶点CAR-T细胞免疫疗法治疗的有效性及安全性进行Meta分析。方法计算机检索PubMed、Embase、Cochrane Library、Web of Science、中国知网、万方数据知识服务平台、维普网7个数据库中有关双靶点CAR-T细胞治疗RRMM的单组率研究,检索时限为建库至2023-02-06。由2名研究人员使用自制的数据表单来提取收集数据,并采用非随机对照试验方法学评价指标进行文献质量评价。采用R Studio软件进行数据分析。结果共纳入9篇文献,包括200例既往接受过多线治疗的RRMM患者。双靶点CAR-T细胞疗法根据不同靶点可分为4类:BCMA+CD19、BCMA+CD38,BCMA+跨膜剂与钙调节亲环素配体的相互作用者(TACI)、BCMA+人信号淋巴细胞激活分子家族成员7(CS1),其中BCMA+CD19靶点的研究较多。根据输注形式不同CAR-T细胞疗法可分为4类:双特异性CAR-T细胞、联合或序贯输注两种不同CAR-T细胞、双顺反子结构、共转导。Meta分析显示,双靶点CAR-T细胞治疗RRMM的总缓解率(ORR)为90.0%(95%CI=0.849~0.943),完全缓解率(CRR)为54.6%(95%CI=0.416~0.673),微小残留病(MRD)阴性率为75.6%(95%CI=0.489~0.952),髓外病变(EMD)总缓解率为55.1%(95%CI=0.234~0.851),最后一次随访时的复发率为29.7%(95%CI=0.141~0.454),最后一次随访时的生存率为75.6%(95%CI=0.554~0.915),3~4级细胞释放因子综合征(CRS)发生率为16.4%(95%CI=0.094~0.245),神经毒性(ICANS)发生率为4.0%(95%CI=0~0.120)。敏感性分析提示结果稳定。Egger's检验结果显示,ORR(P=0.03)及EMD总缓解率(P=0.02)提示存在一定的偏倚风险;CRR(P=0.53)、MRD阴性率(P=0.79)、最后一次随访时的复发率(P=0.71)、生存率(P=0.98)、3~4级CRS发生率(P=0.90)、ICANS发生率(P=0.30)提示不存在发表偏倚。结论双靶点CAR-T细胞免疫治疗RRMM显示出良好的疗效和安全性,未来需要多中心、大样本、更长随访期的研究来进一步评估其疗效和安全性。

多发性骨髓瘤单克隆抗体疗法、靶向B细胞成熟抗原疗法研究进展

多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)是一种以骨髓中单克隆浆细胞恶性增殖为特征的血液系统疾病。尽管多种新型药物的应用使患者生存及预后有所改善,但很大程度上仍复发难治。单克隆抗体靶抗原、B细胞成熟抗原均在骨髓瘤细胞上高表达,是理想的靶抗原,因此针对靶抗原的单克隆抗体疗法及靶向B细胞成熟抗原疗法在多发性骨髓瘤中显示出较好的临床疗效。现结合相关文献对上述两种疗法的研究进展进行综述。

金纳米棒在光热治疗中的新策略——靶向细胞核

肿瘤已成为对人类健康的巨大威胁之一是全球共同面对的持续性公共卫生挑战。造成恶性肿瘤发病率上升的根本原因是遗传和环境压力等因素诱发细胞分裂增殖调控失常而导致的恶行病变。近些年来,相继提出了各种新开发的癌症治疗策略,包括光动力治疗,光热治疗,基因治疗等。光热治疗法(PTT)作为一种非入侵性的新兴抗肿瘤治疗方法,逐渐的成为抗肿瘤领域的研究热点。原理是利用纳米材料的靶向识别技术聚集在肿瘤组织附近,在近红外光的照射下将光能转化为热能,从而杀死癌细胞。随着纳米技术的迅速发展,与纳米材料结合的PPT逐渐进入研究者的视野,在肿瘤检测与治疗监测领域取得了重大进展。

靶向BCMA的嵌合抗原受体T细胞治疗三重难治性多发性骨髓瘤的研究进展

目前,尽管在以蛋白酶体抑制剂(PIs)、免疫调节剂(IMiDs)和抗CD38单克隆抗体(MoAbs)等为主的新药时代下,多发性骨髓瘤(MM)患者的生存期得到了显著的提高,但复发与进展仍不可避免,复发后对后续治疗的反应持续时间越来越短,最终出现顽固性耐药。三重难治性多发性骨髓瘤(TCR MM)是目前治疗的难点。B细胞成熟抗原(BCMA)是MM理想的靶抗原,靶向BCMA的嵌合抗原受体T细胞(CAR-T)疗法产生了持久而深度的缓解,显著改善了TCR MM患者的预后。现结合相关文献对上述疗法在临床方面的最新进展进行综述,旨在为临床治疗提供更多理论参考。

细胞死亡诱导p53靶蛋白1—一种新型凋亡蛋白的功能研究进展

细胞死亡诱导p53靶蛋白1(CDIP1)是一种新型凋亡蛋白,参与外源性凋亡通路、内源性凋亡通路及细胞焦亡相关通路,是多通路介导细胞凋亡的关键调节因子。近年来研究发现,CDIP1通过与凋亡因子相结合,参与多种肿瘤、心血管疾病的发生发展。然而,目前CDIP1调控细胞凋亡的分子机制、上下游调控因子及在各类肿瘤及疾病的作用机理亟待深入研究和挖掘。该文就CDIP1在细胞凋亡通路中的功能研究进展,不同凋亡通路中与B细胞受体相关蛋白31(BAP31)、凋亡相关基因-2(ALG2)等蛋白分子的作用机制及其在疾病中的作用进行综述。