地塞米松对大鼠肝细胞球状体细胞骨架再建的影响

探讨地塞米松对大鼠肝细胞球状体细胞骨架再建的影响机制。肝细胞球状体培养于胶原三维基质中,行ZO-1免疫组化染色;抽提蛋白行蛋白质的印记杂交。ZO-1在肝细胞球状体空泡壁聚集,地塞米松促进Pgp及细胞粘连相关蛋白质的表达,促进小GTPase超家族蛋白Rho A和ERM超家族radixin的表达,Rho A、radixin表达水平与空泡形成率相一致。地塞米松促进大鼠三维培养的肝细胞胆汁分泌,在Rho A和radixin介导下肌动蛋白重新分布,细胞骨架再建,调节紧密连接功能和聚集,导致空泡样结构的形成。

雌二醇对大鼠肝细胞胆汁分泌及细胞骨架再建的影响

目的 探讨雌激素对大鼠肝细胞胆汁分泌及细胞骨架再建的影响。方法 从F344大鼠肝脏分离肝细胞 ,行单层培养或肝细胞球状体三维培养 ,培养基中加入雌二醇 ,行位相差显微镜观察 ;进行肝细胞荧光素排泌实验及Rhodamine Phallodin染色观察 ,细胞间粘连相关蛋白质和胆汁分泌相关的Pgp糖蛋白测定采用免疫印记杂交。 结果 雌二醇 (E2 )使单层培养的肝细胞间毛细胆管样结构显著扩张 ,三维培养的肝细胞球状体中央出现空泡样改变 ,肌动蛋白在肝毛细胆管壁及球状体空泡壁周围聚集 ,荧光代谢物在扩张的毛细胆管及空泡中聚集 ,E2促进Pgp和RhoA和radixin的表达 ,其水平与空泡形成率相一致。结论 E2促进大鼠三维培养的肝细胞胆汁分泌 ,在RhoA和radixin介导下肌动蛋白重新分布 ,细胞骨架再建 ,调节紧密连接功能和聚集 ,导致毛细胆管样结构的扩张和三维培养时球状体空泡样结构的形成。