卵丘细胞和细胞骨架稳定剂对绵羊成熟卵母细胞玻璃化冷冻的影响

[目的]为了提高绵羊成熟卵母细胞玻璃化冷冻的效果。[方法]以未冷冻的卵母细胞为对照,研究卵丘细胞存在与否以及不同浓度的细胞骨架稳定剂对绵羊成熟卵母细胞冷冻保存的影响。[结果]卵丘细胞存在与否对绵羊成熟卵母细胞玻璃化冷冻没有影响。在所有细胞松弛素B处理组中,用7.5、10.0μg/ml细胞松弛素B处理的绵羊成熟卵母细胞玻璃化冷冻后获得较高的囊胚率(P<0.05),分别为8.1%、7.8%;在所有紫杉醇处理组中,用0.5μmol/L紫杉醇处理的绵羊成熟卵母细胞玻璃化冷冻后获得的囊胚率最高为10.1%(P<0.05)。[结论]细胞骨架稳定剂细胞松弛素B或紫杉醇可以提高绵羊成熟卵母细胞的玻璃化冷冻效果。

改变肌动蛋白聚合状态调控人成纤维细胞成骨分化的线粒体动力学

目的检测在人成纤维细胞成骨分化过程中肌动蛋白的改变及其介导的线粒体动力学改变。方法诱导人成纤维细胞成骨分化,检测肌动蛋白和线粒体动力学的改变。在人成纤维细胞中打断(细胞松弛素D,Cyto D)或者促进(Jasplakinolide,JAS)肌动蛋白的聚合,于处理的第1、4、7 d分别进行免疫荧光和Western blot等实验检测细胞性能及线粒体动力学相关指标。结果Cyto D减弱成骨诱导液效果,JAS增强成骨诱导液效果。JAS增强线粒体动力学效果比Cyto D更加显著。结论肌动蛋白的聚合促进细胞成骨分化;肌动蛋白的聚合或解聚影响细胞成骨分化过程中线粒体与细胞骨架肌动蛋白的共定位比率。Cyto D和JAS引起的对细胞成骨分化的影响和线粒体动力学的改变,可为研究细胞线粒体以及成骨分化机制提供生物学信息。

玻璃化冷冻对哺乳动物卵母细胞骨架系统的影响

玻璃化冷冻技术已广泛应用于多种哺乳动物卵母细胞的冷冻保存。相比传统的冷冻方法,玻璃化冷冻具有操作简便、费用低、效率高等特点,因而极大提高了卵母细胞的利用效率。然而由于卵母细胞自身的特点,造成玻璃化冷冻技术的应用存在许多问题,主要表现为冻后结构的改变和后续发育能力降低。本文主要综述了细胞骨架在卵母细胞成熟与受精中的作用以及玻璃化冷冻对细胞骨架的影响,并论述了细胞骨架稳定剂在玻璃化冷冻中的应用。