长链非编码RNA细胞骨架调节RNA靶向微小RNA-1246对帕金森病模型细胞损伤的保护作用

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)细胞骨架调节RNA(CYTOR)靶向微小RNA(miR)-1246对帕金森病(PD)模型细胞损伤的影响。方法采用100μmol/L 1-甲基-4-苯基-吡啶离子(MPP^(+))诱导SK-N-SH细胞建立PD细胞模型。Real-time PCR检测CYTOR和miR-1246表达。在SK-N-SH细胞中转染pcDNA-CYTOR或anti-miR-1246,或共转染pcDNA-CYTOR和miR-1246模拟物,经MPP^(+)处理后,采用流式细胞术分析细胞凋亡,试剂盒检测丙二醛(MDA)含量及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH)活性。双荧光素酶报告基因实验分析CYTOR和miR-1246靶向关系。结果PD细胞模型中CYTOR表达量降低(P<0.05),miR-1246表达量升高(P<0.05)。过表达CYTOR或抑制miR-1246表达均可降低模型细胞凋亡率和MDA含量(P<0.05),并增加GSH活性(P<0.05)。MiR-1246是CYTOR的靶基因,CYTOR负性调控miR-1246表达。上调miR-1246可逆转CYTOR过表达对模型细胞凋亡和氧化损伤的影响(P<0.05)。结论LncRNA CYTOR靶向miR-1246可减轻PD模型细胞凋亡和氧化损伤。

lncRNA CYTOR靶向miR-139-5p对三阴性乳腺癌细胞增殖的影响及其机制

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)细胞骨架调节因子RNA(CYTOR)靶向微小RNA-139-5p(miR-139-5p)对三阴性乳腺癌细胞增殖的影响及其机制。方法体外传代培养三阴性乳腺癌细胞株HCC1806,取传3代、对数生长期、生长状态良好的细胞进行后续实验。通过starBase数据库预测lncRNA CYTOR与miR-139-5p的结合位点,通过双荧光素酶报告基因实验验证lncRNA CYTOR与miR-139-5p的靶向关系。取HCC1806细胞,随机分为空白对照组、阴性对照组、lncRNA CYTOR沉默组、miR-139-5p过表达组、lncRNA CYTOR沉默+miR-139-5p过表达组。阴性对照组、lncRNA CYTOR沉默组、miR-139-5p过表达组、lncRNA CYTOR沉默+miR-139-5p过表达组分别转染NC mimics、lncRNA CYTOR siRNA、miR-139-5p mimics、lncRNA CYTOR siRNA+miR-139-5p mimics,转染48 h更换新鲜培养基,继续培养24 h。空白对照组常规培养,不予转染。收集各组上述细胞,采用RT-qPCR法检测miR-139-5p、性别决定区Y框蛋白8(SOX8)mRNA表达,采用EdU法检测细胞增殖能力,采用Western blotting法检测ATP结合盒转运蛋白G2(ABCG2)、SOX8表达。结果经starBase数据库预测,lncRNA CYTOR与miR-139-5p存在结合位点;经双荧光素酶报告基因实验验证,lncRNA CYTOR与miR-139-5p存在靶向调控关系。lncRNA CYTOR沉默组、miR-139-5p过表达组、lncRNA CYTOR沉默+miR-139-5p过表达组miR-139-5p相对表达量均高于空白对照组和阴性对照组,SOX8 mRNA相对表达量、EdU阳性细胞比例以及ABCG2、SOX8蛋白相对表达量均低于空白对照组和阴性对照组(P均<0.05);lncRNA CYTOR沉默+miR-139-5p过表达组miR-139-5p相对表达量高于lncRNA CYTOR沉默组和miR-139-5p过表达组,SOX8 mRNA相对表达量、EdU阳性细胞比例以及ABCG2、SOX8蛋白相对表达量均低于lncRNA CYTOR沉默组和miR-139-5p过表达组(P均<0.05);而空白对照组与阴性对照组、lncRNA CYTOR沉默组与miR-139-5p过表达组miR-139-5p、SOX8 mRNA相对表达量以及EdU阳性细胞比例和ABCG2、SOX8蛋白相对表达量比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。结论lncRNA CYTOR可通过靶向miR-139-5p调控ABCG2和SOX8表达,从而促进三阴性乳腺癌细胞增殖。

长链非编码RNA CYTOR在人类癌症中调控机制研究进展

癌症因其多具有异质性、耐药性以及易复发转移的特点,临床很难治愈。揭示癌症发生发展的分子机制、鉴定新的诊断标志物和分子治疗靶标,无疑是解决癌症早期诊断、治疗以及改善患者预后问题的有效策略。越来越多的研究表明,长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)在人类癌症中特异性表达,是癌症发生发展的关键调节因子。细胞骨架调节因子RNA(cytoskeleton regulator RNA,CYTOR)是近年发现的一种致癌性lncRNA。CYTOR在多种类型癌症中均高表达,通过多种途径调控癌症发生发展,可能是癌症早期诊断、分子靶向治疗以及评估预后有效生物标志物。该文综述了CYTOR在人类癌症中的分子调控机制及其相关生物学效应,以期为临床癌症的诊疗提供新的科学参考。

长链非编码RNA在鼻咽癌组织中表达及其生物学功能研究

目的探讨长链非编码RNA (cytoskeleton regulator RNA, CYTOR)在鼻咽癌组织中表达及其生物学功能。方法实时荧光定量PCR检测32例鼻咽癌组织及28例鼻咽部良性病变患者黏膜组织中CYTOR的表达情况;Real-time PCR检测人鼻咽上皮细胞(NP69)和鼻咽癌细胞(CNE1、HONE1)中CYTOR的表达情况;应用小干扰RNA抑制CNE1、HONE1细胞中CYTOR中的表达,并采用MTT、Transwell和划痕实验分别检测下调CYTOR表达后鼻咽癌细胞(CNE1,HONE1)的增殖能力、迁移能力变化情况。结果CYTOR在鼻咽癌组织及鼻咽癌细胞系(CNE1、HONE1)中表达水平高于鼻咽部良性病变患者黏膜组织和人鼻咽上皮细胞(NP69),而瞬时抑制CYTOR表达,鼻咽癌细胞系(CNE1、HONE1)的增殖与迁移能力降低,差异均有统计学意义(P <0.05)。结论CYTOR在鼻咽癌组织及鼻咽癌细胞系中高表达,并与鼻咽癌的增殖和迁移能力有关。