癌痛消胶囊调节小鼠荷H_(22)移植性肝癌细胞VEGF表达的实验研究

目的 :通过观察癌痛消胶囊对小鼠荷H22 移植性肝癌细胞血管内皮细胞生长因子 (vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)表达的调节作用 ,探讨该药抑制肿瘤的作用是否与抑制肿瘤血管生成有关。方法 :于昆明种雄性小鼠前肢右腋皮下接种0 2mlH22 肿瘤细胞悬液(浓度为1×107/ml)进行造模。利用造模动物观察瘤块重量 ,计算肿瘤生长抑制率 ,用免疫组化法检测瘤细胞中VEGF的表达程度。结果 :与阴性对照组相比 ,癌痛消胶囊组有明显的抑瘤作用(P<0 05) ,抑瘤率为36 34 % ;病理检测显示 ,造模各组VEGF阳性表达率为100% ,但程度不同 ,癌痛消胶囊组可使肿瘤组织VEGF的表达明显下调 ,与阴性对照组比较 ,差异有显著性意义(P<0 01)。结论 :癌痛消胶囊对小鼠荷H22 移植性肝癌细胞的生长有抑制作用 ,能减少血管生成调控基因VEGF的表达。

2型糖尿病合并白内障患者晶状体上皮细胞中PEDF和VEGF的表达及意义

目的:观察糖尿病合并年龄相关性白内障患者晶状体上皮细胞(LECs)中色素上皮衍生因子(PEDF)、血管内皮细胞生长因子(VEGF)的表达水平,探讨糖尿病合并年龄相关性白内障的发病机制。方法:回顾性研究。收集2020-08/2021-04在蚌埠医学院第一附属医院眼科就诊的年龄相关性白内障和2型糖尿病合并年龄相关性白内障患者各30例。所有患者白内障超声乳化术中收取术眼晶状体中央区5.5~6.0mm直径的前囊膜标本,采用蛋白免疫印迹法(Western-blot)检测LECs中PEDF、VEGF蛋白表达水平。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)方法检测PEDF、VEGF mRNA的相对表达量。结果:两组患者LECs中均存在PEDF、VEGF的表达,2型糖尿病合并年龄相关性白内障组患者VEGF mRNA相对表达量为1.364±0.062,高于年龄相关性白内障组的1.000±0.0(P<0.01),PEDF mRNA的相对表达量为0.398±0.053,明显低于年龄相关性白内障组的1.000±0.0(P<0.001)。2型糖尿病合并年龄相关性白内障组患者LECs中VEGF和PEDF蛋白表达量为2.053±0.026、0.579±0.045,年龄相关性白内障组为1.680±0.064、1.058±0.007(均P<0.01)。结论:2型糖尿病合并年龄相关性白内障患者LECs中PEDF和VEGF表达水平发生变化,可能与糖尿病患者白内障的发生和发展有关。

“手十二井穴”放血预处理对大鼠急性低氧肺组织损伤模型血气、HIF-1α及VEGF水平的影响

目的 观察“手十二井穴”放血预处理对大鼠急性低氧肺组织损伤模型血气相关指标、低氧诱导因子(HIF)-1α及血管内皮细胞生长因子(VEGF)表达的影响,探讨“手十二井穴”放血预处理对急性低氧肺组织损伤的影响。方法 将72只雄性SD大鼠随机分为对照组8只、低氧(模型)组32只、井穴放血预处理(放血)组32只,模型组和放血组又分为6、24、48、72 h 4个时间段亚组,每组各8只。采用实验动物低氧模拟舱模拟15%O_(2)浓度,制备大鼠急性低氧肺组织损伤模型。放血组按“少商”“商阳”“中冲”“关冲”“少冲”“少泽”的顺序,每天1次,共5 d。用手持式血气分析仪检测肺动脉血气氧分压(PaO_(2))、血氧饱和度(SaO_(2))、酸碱度(pH)、二氧化碳分压(PaCO_(2))等相关指标,采用Western印迹法检测HIF-1α表达,酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测VEGF含量。结果 与对照组比较,模型组各时间段PaO_(2)、SaO_(2)明显降低,HIF-1α和VEGF表达水平显著升高(P<0.01)。与同时间段模型组比较,放血组PaO_(2)和SaO_(2)均出现升高,PaO_(2)在6、48 h时有统计学意义,SaO_(2)值在6、24、48 h时有统计学意义(P<0.05,P<0.01),HIF-1α表达在各时段明显下调,VEGF含量在24、48、72 h时明显下降(P<0.05,P<0.01)。但放血组PaO_(2)各时间段和SaO_(2)(6、24 h)仍低于对照组,HIF-1α(6、48、72 h)和VEGF各时间段表达水平仍高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论 “手十二井穴”放血预处理在一定时间和程度上可改善大鼠急性低氧(15%O_(2),85%N_(2))肺组织损伤模型的缺氧情况,其可能的作用与升高动脉血PaO_(2)、SaO_(2)及下调HIF-1α表达、降低VEGF含量有关,从而有利于模型大鼠适应急性低氧环境。

三棱、莪术含药血清对培养的人脐静脉血管内皮细胞生长和VEGF表达的影响

目的探讨三棱、莪术含药血清对血管内皮生长因子(vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)诱导的血管内皮细胞增殖和VEGF表达影响。方法以三棱、莪术含药血清作用于VEGF诱导的人脐静脉血管内皮细胞(humanumbili-calveinendothelialcell-1,HUVEC-1),倒置相差显微镜观察细胞形态学改变,MTT法观察细胞增殖情况,Westernblot和RT-PCR方法分别检测内皮细胞VEGF蛋白和mRNA的表达。结果三棱、莪术5.0g·kg-1·d-1、2·5g·kg-1·d-1大鼠含药血清可使正常人脐静脉血管内皮细胞排列紊乱,明显梭形化。5.0g·kg-1·d-1大鼠10%、5%、2.5%含药血清组和2.5g·kg-1·d-1大鼠10%含药血清组HUVEC-1细胞的增殖显著低于空白血清相同浓度组(P<0·05)。5.0g·kg-1·d-1、2.5g·kg-1·d-1大鼠5%的含药血清使HUVEC-1细胞VEGF蛋白、VEGFmRNA表达均显著降低。结论三棱、莪术含药血清可抑制VEGF诱导的血管内皮细胞增殖,其机制与抑制血管内皮生长因子表达密切相关。

PTEN在肝细胞癌中的表达及其与VEGF的关系研究

目的研究PTEN在人类肝细胞癌中的异常表达及其临床意义,探讨PTEN及VEGF在肝细胞癌中表达的相互关系。方法采用免疫组织化学S-P法对67例人类肝细胞癌和36例癌旁肝组织、10例正常肝组织中的PTEN蛋白产物及VEGF的表达情况进行检测、分析。结果肝细胞癌组、癌旁肝组织组、正常肝组织组PTEN表达蛋白的阳性表达率分别为53.73%、83.33%及100%。PTEN的表达与肿瘤组织分化、有无门静脉侵犯及区域淋巴结转移、肿瘤包膜是否完整相关,而与患者的年龄、性别、肿瘤的大小、是否携带乙肝表面抗原均无明显关系。在同一肝细胞癌组织中,PTEN与VEGF的表达呈一定程度的负相关关系。结论PTEN的表达与肝细胞癌的发生发展有关,PTEN与VEGF在肝细胞癌的发生、发展过程中可能起协同作用.

microRNA抑制卵巢癌细胞VEGF表达及其对肿瘤细胞增殖的影响

目的研究小分子RNA(microRNA)抑制卵巢癌细胞(vascular endothelial growth factor,VEGF)表达及其对肿瘤细胞增殖的影响,以期为临床诊治提供新途径。方法将转染细胞分为HO-8910-H1-VEGF组和HO-8910-H1组,将未转染细胞设为对照组(HO-8910组),经四唑盐(MTT)法、细胞周期分析法对miR-NA对卵巢癌细胞的增殖影响进行观察。结果转染后特异性的小发夹状miRNA质粒表达载体相关HO-8910细胞内VEGF的表达显著减少,即相较于HO-8910-H1组、HO-8910组,HO-8910- H1-VEGF组的细胞内VEGF表达显著降低;间接免疫荧光法测定发现:HO-8910-H1-VEGF组显示荧光强度较弱,但HO-8910-H1组和HO-8910组荧光强度较强;受阻于G1期(间隙1期)的HO-8910-H1-VEGF组相关细胞增高24%,且S期(DNA合成期)细胞显示减少21%。结论 microRNA能对卵巢癌HO-8910细胞内VEGF表达明显抑制,阻断卵巢癌细胞增殖,为临床开展肿瘤基因治疗提供理论依据。

EB病毒潜伏膜蛋白1在鼻咽癌细胞中通过STAT3促进VEGF表达

探讨了EB病毒编码的潜伏膜蛋白 1(LMP1)是否通过STAT3调控诱导血管内皮细胞生长因子 (VEGF)的表达 .利用蛋白质印迹的方法对HNE2、HNE2 LMP1以及瞬时转染STAT3显性负性突变体STAT3β的HNE2 LMP1细胞中VEGF含量进行检测 ,发现LMP1可以上调VEGF的表达 ,而STAT3β可以抑制VEGF的上调 ;利用LMP1可控表达细胞系tet on LMP1 HNE2进行LMP1时间和剂量诱导表达研究 ,发现VEGF可以随LMP1的动态表达而表达 ;将VEGF野生型报告基因和VEGF潜在的STAT3转录因子突变体报告基因与LMP1表达载体分别共转染研究发现 ,LMP1可以激活VEGF的转录 ,这种转录通过VEGF启动子区STAT3转录因子的结合位点发挥作用 ;电泳迁移率变动分析 (EMSA)确证了STAT3的这种DNA位点的特异性活性 .结果表明 :EB病毒编码的LMP1在鼻咽癌细胞中可以增加VEGF的转录和表达 。

口腔鳞癌中VEGF表达和肿瘤相关巨噬细胞在血管生成中相互作用的初步研究

目的:探讨口腔鳞癌中血管内皮生长因子(vascularendothelialgrowthfactorVEGF)和肿瘤相关巨噬细胞(tumor-associatedmacrophagesTAMs)在肿瘤血管生成中的关系。方法:采用免疫组化染色,光镜进行高倍视野下巨噬细胞、微血管计数、图像分析,以观察VEGF表达的强度,免疫组化双染观察巨噬细胞内VEGF的表达。结果:在口腔鳞癌中VEGF的表达与微血管计数(P<0.05,酌=0.412)及肿瘤相关巨噬细胞计数(P<0.05,酌=0.376)有关,免疫组化双染显示,TAMs内有VEGF的表达。结论:口腔鳞癌中与TAMs和VEGF表达有关,二者相互作用促进肿瘤的血管生成,参与肿瘤生长和转移。

胰管刷检标本细胞学联合VEGF检测对胰腺癌的诊断价值

目的 研究胰管刷检细胞学和VEGF检测对胰腺癌的诊断价值。方法 应用内镜逆行胰胆管造影(ERCP)下胰管刷检细胞学涂片,分别行HE染色和免疫组化法检测血管内皮生长因子(VEGF)表达,并比较其对胰腺癌的诊断价值。结果 细胞学HE染色诊断胰腺癌的敏感性51.9％,特异性为100％。VEGF免疫组化法诊断胰腺癌的敏感性为63.5％,特异性为100％,与HE染色相比差异有显著意义(X^2=4.17,P=0.0412)。细胞学HE染色联合VEGF免疫组化法诊断敏感性为75％,特异性为100％,与单独细胞学HE染色(X^2=10.08,P=0.0015)或VEGF检测(X^2=4.17,P=0.0412)相比,差异均有显著意义。结论 胰管刷检标本细胞学与VEGF检测相结合可显著提高胰腺癌的诊断敏感性。

脂质体介导的VEGF_(165)基因转染对内皮细胞生长的作用

构建血管内皮细胞生长因子基因VEGF165真核表达载体pcDNA3 VEGF165,以阳离子脂质体介导的基因转染技术 ,将基因转入原代培养的人脐静脉内皮细胞中。结果表明 ,基因转染 1h后细胞内就有VEGFDNA存在 ,VEGFmRNA水平显著上升 ;基因转染 2d后培养液上清VEGF蛋白表达显著上升 (135 5 12± 6 2 34)pg/ml和 (19 2 7± 2 96 )pg/ml,P <0 0 1。转染VEGF165基因 2d的内皮细胞再经程序降温冷冻保存复苏后 ,其存活率显著高于对照组 (pcDNA3 组 ) (90 13%± 2 84 %和81 5 2 %± 2 15 % ,P <0 0 5 ) ,凋亡率显著低于对照组 (7 15 %± 0 4 2 %和 17 6 1%± 1 5 6 % ,P <0 0 5 )。MTT法显示转染VEGF165基因能促进内皮细胞VEGF蛋白的表达 ,促进细胞增殖 ,抑制细胞凋亡。在治疗心脏及下肢动脉缺血性疾病中 ,VEGF165基因治疗可能具有重要的意义。

PTEN抑制人脐静脉内皮细胞ECV304的增殖和VEGF的表达

目的:探讨与张力蛋白同源的10号染色体缺失的磷酸酶基因(phosphatase and tensin hemology deleted on chromo-some ten gene,PTEN)对人脐静脉内皮细胞ECV304细胞增殖、凋亡,及血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)及其受体1(VEGF receptor 1,VEGFR1)的影响。方法:将携带有野生型PTEN及绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)基因的腺病毒Ad-PTEN-GFP及空载体腺病毒Ad-GFP感染ECV304细胞,MTT实验、Hoechst3342染色法及流式细胞术检测ECV304细胞的增殖和凋亡。实时荧光定量PCR法检测Ad-PTEN-GFP感染后ECV304细胞中PTEN、VEGF和VEG-FR1 mRNA表达水平,ELISA检测ECV304细胞培养上清中VEGF的水平。鸡胚尿囊膜(chick chorioallantoic membrane,CAM)血管生长实验检测PTEN对鸡胚血管生长的影响。结果:与Ad-GFP相比,Ad-PTEN-GFP感染能明显抑制ECV304细胞的增殖,诱导细胞凋亡,5 d时增殖抑制率可达(50.38±5.42)%、细胞凋亡率达(73.3±5.3)%。当感染复数为100时,Ad-PTEN-GFP组ECV304细胞的VEGF及VEGFR1 mRNA表达水平分别为未感染组的(13.40±1.32)%及(46.12±5.20)%。同时,Ad-PTEN-GFP感染能够明显抑制CAM体内血管生长[血管指数(57.6±3.37)%vs(92.2±4.37)%,P<0.05]。结论:PTEN能显著抑制人脐静脉内皮细胞ECV304的增殖、促进其凋亡,其机制可能与抑制VEGF和VEGFR1表达,抑制血管新生有关。

细胞因子VEGF、IGF-1与2型糖尿病视网膜病变的相关性研究

目的探讨血浆VEGF、IGF-1水平与2型糖尿病视网膜病变的相关性。方法选择2型糖尿病患者60例,分为2型糖尿病不伴有视网膜病变组(NDR)20例;2型糖尿病伴视网膜病变(非增值期)组(BDR)20例;糖尿病伴视网膜病变(增值期)组(PDR)20例;健康对照组20例,经口服葡萄糖耐量试验证实排除糖尿病。分别检测空腹血糖、糖化血红蛋白、甘油三脂、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇及细胞因子VEGF、IGF-1等各项指标。结果①VEGF水平:2型糖尿病各组均高于正常对照组;BDR组明显高于NDR组,但PDR组VEGF含量下降;②IGF-1水平:呈正常对照组<NDR组<BDR组<PDR组递增趋势;③IGF-1与VEGF水平在NDR和BDR两组呈显著正相关。结论细胞因子VEGF、IGF-1参与了糖尿病视网膜病变的发生发展,与糖尿病视网膜病变密切相关。

联合应用rhBMP-2与bFGF对兔骨髓基质细胞表达VEGF及其成骨潜能的影响

目的:观察兔骨髓基质细胞经rhBMP-2与bFGF刺激后,其VEGF因子表达及成骨潜能的变化。方法:取兔双侧股骨骨髓基质细胞,采用骨髓基质细胞体外培养技术,单独或联合以rhBMP-2、bFGF刺激细胞。细胞培养5 d后,进行细胞形态(HE染色)、增殖情况(细胞记数法与MTT法)、碱性磷酸酶(改良钙钴法染色)、成骨结节(图像分析)、VEGF阳性细胞率(免疫组化染色)等项目的检测。结果:①联合应用rhBMP-2、bFGF在细胞记数、ALP活性、矿化面积百分率、VEGF阳性细胞率4个检测项目上优于单独应用rhBMP-2或bFGF,差别有统计学意义。②分开联合应用rhBMP-2、bFGF优于同时应用rhBMP-2或bFGF。结论:合理的联合使用rhBMP-2和bFGF,不仅可促进骨髓基质细胞的快速增殖及向成骨细胞转化,还可促进促血管内皮细胞增生的重要介质VEGF的表达。此项技术可应用于骨组织工程,促进工程化骨在体内的存活。

长期大强度游泳对大脑血管内皮细胞生长因子(VEGF)的影响

研究长时间大强度游泳训练对大鼠大脑皮质VEGF表达的影响,探讨大脑皮质微循环变化与VEGF表达的变化之间的关系,可为深入研究大脑微循环与运动性中枢疲劳的发生机制提供基础实验资料.采用VEGF免疫组化染色和Ⅶ因子免疫荧光染色用Nikon&Spot计算机图像自动分析系统进行分析.结果显示(1)长时间大强度游泳训练可以加强大鼠大脑皮质特异部位的VEGF表达;(2)内皮细胞VEGF阳性表达和神经元的阳性表达以及微血管面积三者之间存在同步关系;(3)VEGF在大脑皮质微血管的作用可能以改变内皮细胞通透性功能为主,而在神经元表达的VEGF可能具有某种神经内分泌功能,参与了改变大脑皮质局部微循环的过程.

早产儿视网膜病变抗VEGF治疗进展

早产儿视网膜病变(retinopathy of prematurity,ROP)是发生于早产儿的一种未成熟视网膜血管增生性眼病,是发展中及发达国家儿童致盲的主要因素。ROP的传统治疗方法是视网膜激光光凝或冷冻治疗,但凝固治疗可导致视网膜永久性破坏,存在发生视野缺损、高度近视等并发症风险。玻璃体腔注射抗血管内皮细胞生长因子(VEGF)药物治疗ROP后视网膜功能的发育比凝固治疗更趋向正常,再加上操作简便、耗时短等优点,玻璃体腔注射抗VEGF药物逐渐成为ROP的重要治疗方式;在Ⅰ区ROP、Ⅱ区后部ROP和急进型ROP治疗中为首选治疗方式。但是抗VEGF药物治疗ROP所致的严重系统并发症、最低有效剂量及后期复发情况等问题尚待进一步研究。本文将对ROP抗VEGF治疗现状进行综述。

胱硫氨酸β-合成酶在食管胃结合部腺癌中的表达及其临床意义

目的 检测胱硫氨酸β-合成酶(CBS)在食管胃结合部腺癌(AEG)中的表达,探讨CBS表达与肿瘤血管新生、临床病理特征及预后的关系。方法 选取经手术切除的243例AEG患者的蜡块标本制作病理芯片,采用免疫组织化学法检测癌组织及配对癌旁正常组织中CBS、血管内皮细胞生长因子(VEGF)及微血管密度(MVD)的表达情况,分析CBS表达水平与VEGF及肿瘤MVD的相关性。探讨CBS表达水平与AEG患者的临床病理特征及预后的关系。结果 CBS在AEG患者的癌组织和配对癌旁正常组织中的阳性表达率分别为66.67%(162/243)和30.45%(74/243),两组比较差异有统计学意义(P<0.001)。CBS表达水平与T分期、淋巴结转移、吸烟史、VEGF表达及MVD均有关(P<0.05),而与患者的年龄、性别、分化程度、TNM分期及饮酒史无关(P>0.05)。CBS低表达患者的中位无病生存时间(DFS)为63个月,显著长于CBS高表达患者的50个月,差异有统计学意义(P=0.0039)。Cox多因素回归分析显示,CBS表达(HR=1.827,95%CI:1.146~2.912,P=0.011)、VEGF表达(HR=2.684,95%CI:1.637~4.401,P<0.001)、MVD(HR=4.064,95%CI:2.419~6.829,P<0.001)及TNM分期(HR=2.354,95%CI:1.523~3.638,P<0.001)是影响AEG患者DFS的独立因素。结论 CBS高表达可能与肿瘤新生血管相关,是AEG预后的不良因素之一,在AEG的诊治中具有潜在应用价值。

Nrf2调节IGF-1/VEGF对脑梗死大鼠神经细胞活性及应激反应的影响

目的研究核因子E2相关因子(Nrf)2调节胰岛素样生长因子(IGF)-1/血管内皮细胞生长因子(VEGF)对脑梗死大鼠神经细胞活性及应激反应的影响。方法64只SPF级SD大鼠随机选取12只作为健康组,剩余大鼠建立脑梗死模型,建模过程中意外死亡4只,剩余模型随机分为模型组、Nrf2组、IGF-1组及联合组,每组12只。Nrf2组于腹腔注射Nrf2激动剂莱菔硫烷10 mg/kg,连续给药3 d;IGF-1组麻醉后于前囟后0.8 mm,中线旁1.8 mm,硬膜下3.7 mm将0.2μg/μl IGF-1注入大鼠侧脑室,持续10 min后缝合、消毒;联合组在Nrf2组基础上给予IGF-1组处理。Bederon评分评估大鼠是否建模成功,苏木素-伊红(HE)染色观察大鼠脑组织形态,分光光度计测量超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、乳酸脱氢酶(LDH)、一氧化氮合酶(iNOS)水平,TUNEL检测各组神经细胞凋亡,Western印迹检测各组Nrf2、IGF-1、VEGF蛋白表达。结果与健康组相比,模型组、Nrf2组、IGF-1组、联合组神经行为学评分、细胞凋亡率明显升高(P<0.05);与模型组相比,Nrf2组、IGF-1组、联合组神经行为学评分及细胞凋亡率明显降低(P<0.05),Nrf2组与IGF-1组以上指标差异无统计学意义(P>0.05);与Nrf2组、IGF-1组相比,联合组神经行为学评分及细胞凋亡率明显降低(P<0.05)。健康组脑组织神经细胞结构完整;模型组神经细胞核深染且分布杂乱并伴有坏死产生;与模型组相比,Nrf2组、IGF-1组与联合组神经细胞核深染情况有所改善,分布较为整齐且坏死减少。与健康组相比,模型组SOD明显降低,MDA、LDH、iNOS明显升高(P<0.05);与模型组相比,Nrf2组、IGF-1组SOD明显升高,MDA、LDH、iNOS明显降低(P<0.05);Nrf2组与IGF-1组差异无统计学意义(P>0.05);与Nrf2组、IGF-1组相比,联合组SOD明显升高,MDA、LDH、iNOS明显降低(P<0.05)。健康组Nrf2、IGF-1、VEGF蛋白表达明显高于模型组、Nrf2组、IGF-1组、联合组、IGF-1抑制剂组、Nrf2+IGF-1抑制剂组(P<0.05);模型组与Nrf2+IGF-1抑制剂组差异无统计学意义(P>0.05),模型组与Nrf2+IGF-1抑制剂组Nrf2、IGF-1、VEGF表达明显高于IGF-1抑制剂组,明显低于Nrf2组、IGF-1组、联合组(P<0.05);Nrf2组与IGF-1组差异无统计学意义(P>0.05),Nrf2组与IGF-1组Nrf2、IGF-1、VEGF表达明显低于联合组(P<0.05)。Nrf2与IGF-1、VEGF呈正相关(r=0.26、0.27,均P<0.05),VEGF与IGF-1呈正相关(r=0.45,P<0.05)。结论Nrf2通过调节IGF-1/VEGF可抑制脑梗死大鼠神经细胞凋亡并减轻氧化应激损伤,从而发挥脑保护作用。

中药水蛭素对荷瘤鼠Ki-67与VEGF表达的影响

目的分析Ki-67增生抗原与VEGF细胞因子在荷瘤鼠组织中的表达,探讨其与肿瘤的内在关系。方法取小鼠48只,随机分成4组,左前腋下接种H22肝癌瘤细胞0.2毫升/只。连续用药水蛭素,第15天处死动物,剥离肿块称重。同时取荷瘤鼠肿块组织固定、包埋、切片、染色、孵育、滴加抗体等,用免疫组化法检测Ki-67增生抗原与VEGF细胞因子的表达。Ki-67阳性表达定位于细胞核,VEGF阳性表达定位于细胞质。结果Ki-67与VEGF模型对照组呈强阳性;水蛭素大剂量组呈弱阳性;水蛭素小剂量组呈阳性。结论水蛭素能抑制荷瘤鼠肝癌实体瘤Ki-67增生抗原与VEGF细胞因子的高表达,具有明显的抗肿瘤作用,这与中药水蛭素活血化瘀及强大的抗凝血功效有密切关系。

血管内皮细胞生长因子在缺血性脑损伤中血管新生、神经发生和神经保护的作用

血管内皮细胞生长因子(VEGF)是血管发生和神经营养因子,不仅能促进血管新生,还能直接作用于神经细胞发挥神经营养和神经保护作用。缺血性脑损伤诱导VEGF及其受体表达,促进血管内皮细胞增殖,减少梗死体积;并通过IP3K/Akt/NF-κB和MAPK/ERK信号途径介导神经营养和神经保护作用,减少凋亡,促进神经干细胞增殖、迁移和分化,改善神经功能。但由于VEGF能增加血管通透性,在缺血早期可能加重脑水肿。

骨髓基质细胞体外分化移植对局灶脑缺血大鼠分子表达及行为的影响

目的观察大鼠骨髓基质细胞分化为内皮细胞后静脉移植治疗大鼠永久大脑中动脉闭塞模型(MCAO)后缺血脑血管内皮细胞生长因子(VEGF)及其受体FLK-1的表达以及动物行为学改变。方法利用400 ng/ml重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(rhGM-CSF)在体外诱导骨髓基质细胞分化为内皮细胞。线栓法制作永久SD大鼠MCAO模型(n=45),24 h后细胞移植组(n=15)舌静脉注射3×106分化后的内皮细胞,对照组1(n=15)注射等量PBS,对照组2(n=15)血管闭塞后不予任何处理。在细胞移植前及移植后1、3、5、7、14 d分别采用姿势反射实验、肢体不对称应用实验和角落实验观察大鼠动物行为学评分的变化,并通过免疫组化染色方法观察缺血脑组织血管内皮细胞生长因子(VEGF)及其受体FLK-1的表达。结果细胞移植组动物行为学评分优于对照组1、2,在移植后第7天和第14天较两个对照组有显著性差异(P<0.05);各组缺血侧脑组织缺血周边和皮层VEGF、FLK-1阳性细胞较非缺血侧增多(P<0.05),其中以细胞移植组最明显(P<0.05);VEGF主要表达在神经元、神经胶质细胞和部分内皮细胞,FLK-1主要表达在内皮细胞和部分神经元、神经胶质细胞;细胞移植组缺血侧毛细血管增生较对照组多(P<0.05)。结论骨髓基质细胞体外诱导分化后的内皮细胞静脉移植可以改善大鼠局灶脑缺血的神经功能;内皮细胞移植后可促进缺血脑组织VEGF、FLK-1的表达;动物神经功能的改善机制可能与VEGF、FLK-1的表达增加,内皮细胞及毛细血管增殖有关。