关于细菌内毒素国家标准品981稳定性考核

自中国药典1995年版二部收载细菌内毒素检查法以来,细菌内毒素检查法正逐步替代热原检查法,成为一种快速、简便的定量半定量检测热原物质的方法,近年来,被广泛应用于医药、生物制品、医疗器械及临床等方面的细菌内毒素检测。特别是2000年版中国药典又将定量法载入附录之中,而且用细菌内毒素检查法代替兔法的药品品种增加67种。在该检查法中。

细菌内毒素国家标准品的协作标定

目的:标定中国食品药品检定研究院细菌内毒素工作标准品(细菌内毒素检测用)。方法:以细菌内毒素国家标准品(9000 EU/支,细菌内毒素检测用)为标准,采用2020年版《中华人民共和国药典》四部1143细菌内毒素检查法中凝胶法和动态浊度法分别对给定的6支细菌内毒素工作标准待标品进行效价标定。结果:待标品预估效价为90 EU/支,标定结果除1支存在偏差外,其余5支效价均在可接受范围。结论:本批待标品采用动态浊度法进行检测时效价较凝胶法测定结果和预估效价均偏低,是否因环境或运输因素使其效价衰减,还有待进一步的实验研究。采用量反应平行线法对动态浊度法测定结果进行尝试计算,结果显示其试品间存在差异,其他全部符合平行,可能是配制时的浓度需要调整。

第7批细菌内毒素国家标准品的建立

目的建立第7批细菌内毒素国家标准品。方法冻干制备了2批细菌内毒素国家标准品候选品。以第2批细菌内毒素国际标准品(94/580)为基准,采用凝胶法、动态浊度法和终点显色法3种方法,组织了13家单位进行协作标定。结果与结论通过比较2批候选品标定结果的精密性及对3种标定方法是否存在显著性差异,最终确定其中1批候选品为第7批细菌内毒素国家标准品,效价为10000EU.支-1,批号:150600-200707。

细菌内毒素国家标准品研制技术规范的介绍

目的为保证细菌内毒素国家标准品的质量,规范研制工作,制定技术规范。方法详细介绍细菌内毒素国家标准品研制要求及主要工作流程。结果与结论进一步加强和规范了细菌内毒素国家标准品的管理工作。

第六批细菌内毒素国家标准品和第二批细菌内毒素国际标准品致热活性的比较

本文首次报道了我国第六批细菌内毒素国家标准品(981)的致热活性结果，并与第二批细菌内毒素国际标准品(IS2)的致热活性进行了比较。981的致热闽是7．6EU／ml，IS2的致热阈是13．9EU／ml，结果表明我国现行细菌内毒素国家标准品与现行细菌内毒素国际标准品的致热活性是一致的。

细菌内毒素国家标准品原料的制备及其理化性质和生物学活性的分析

目的制备第7批细菌内毒素国家标准品的原料。方法常规方法培养和收获细菌,超声破碎菌液,热酚水法制备内毒素粗品,充分透析去酚后,浓缩,取上清,超速离心(4℃,105000×g,4h),最后冻干。采用该方法共制备得到3批内毒素原料候选品,对其进行理化分析和生物学活性测定后,确定其中一批作为内毒素国家标准品原料。同时与细菌内毒素国际标准品、中国细菌内毒素国家标准品(NS,Lot:981)和日本细菌内毒素国家标准品进行一系列比较。结果3批原料候选品中,3号内毒素原料的生物学活性最好,杂质含量最低。结论3批内毒素原料的生物学活性以及理化性质基本一致,表明采用的提取方法稳定、重现性好。通过生物学活性和杂质含量的比较,结果表明,3号内毒素原料可以作为制备新一批细菌内毒素国家标准品的原料。

活性炭吸附力实验专用细菌内毒素国家标准品的建立

目的:为提高活性炭(供注射用)的质量,验证其对细菌内毒素的吸附能力,建立第1批细菌内毒素国家标准品(活性炭吸附力实验专用)。方法:冻干制备了1批细菌内毒素国家标准品(活性炭吸附力实验专用)候选品。以第2批细菌内毒素国际标准品为基准,采用凝胶法、动态浊度法和终点显色法3种方法,组织了13家单位进行协作标定。结果:本次制备的待标品经协作标定,最终定值其效价为每瓶10 000 EU,均匀性考察合格,标准物质适用性符合规定。结论:本批待标品确认为细菌内毒素国家标准品,可作为第1批细菌内毒素国家标准品(活性炭吸附力实验专用),以供活性炭测定用,本批标准品效价为每瓶10 000 EU,批号:150605-201501。

第七批细菌内毒素国家标准品原料制备方法的研究

目的进行第七批细菌内毒素国家标准品原料制备方法的研究。方法采用4种方法制备内毒素,对得到的内毒素原料进行理化分析后,选取其中最好的制备方法,再采用正交法对其实验条件进行优化。结果最终方法确定为:复苏、培养和收获大肠杆菌;热酚水法粗提;超速离心(4℃,105000×g,4h)纯化;冻干得到原料。结论确立了第七批细菌内毒素国家标准品原料的制备方法。

獭兔在药品热原检查实验中的应用研究

目的研究獭兔在药品质量检验热原检查项目中的应用前景。方法按中国药典(2015年版)分别用普通级獭兔和新西兰兔进行市售药品甘油果糖注射液等4种供试品进行热原检查以及细菌内毒素国家标准品(灵敏度测试)的热原实验,观察比较实验兔的体温变化。结果市售4种注射液分别用獭兔和新西兰兔进行热原检查结果均符合规定,细菌内毒素国家标准品按5EU·kg^-1、10EU·kg^-1剂量静脉注射给药,獭兔、新西兰兔均有升温超过0.6℃,且无明显差别。结论獭兔可应用于药品检验中的热原检查实验。

鲎试剂灵敏度稳定性观察

鲎试剂为鲎科动物 (Tachypleustridentotus ,Leach)血液变形细胞溶解物的无菌冷冻干燥品 ,用于检测灭菌制剂的细菌内毒素含量 ,控制热原。本文据《中国药典》(1995年版 )收载的测定方法及要求对所用鲎试剂进行了灵敏度复核。鲎试剂灵敏度准确与否 ,是检测结果是否有效的关键 ,而鲎试剂作为一种生物制剂 ,卫生部药品标准作出遮光、冷藏、有效期 1年的规定。那么它在使用期内 ,以及在以后一段时间内 ,灵敏度稳定性到底如何呢 ?为此 ,笔者对药典规定用于大输液细菌内毒素检查用的鲎试剂进行为期 3年的灵敏度的稳定性观察 。