欧美杨细菌性溃疡病菌的拮抗细菌筛选鉴定

【目的】筛选获得欧美杨细菌性溃疡病菌杨树朗斯代尔氏菌(Lonsdalea populi)的拮抗细菌。【方法】以欧美杨细菌性溃疡病病原菌L.populi CFCC 13731为靶标菌,采用平板拮抗法筛选拮抗菌株,并通过牛津杯法测定其防效。通过观察菌株形态、生理生化实验、16S rRNA序列分析,对高效拮抗菌株进行鉴定。【结果】筛选获得10株具有拮抗作用的菌株,复筛获得1株菌株(k1)对L.populi具有较好的拮抗效果,鉴定结果表明菌株k1为多粘类芽孢杆菌(Paenibacillus polymyxa)。【结论】筛选获得的多粘类芽孢杆菌k1对L.populi具有较好的拮抗作用,在欧美杨细菌性溃疡病防治中将具有较大的应用潜力。

辽宁地区软枣猕猴桃细菌性溃疡病调查及防治措施

近年来,在辽宁省软枣猕猴桃主产区出现细菌性溃疡病,该病害导致树势衰弱,甚至植株死亡。为确定该病害的发生情况,对大连及丹东地区开展发病率调查。结果表明:大连感病园田间平均发病率为27.47%,丹东为11.67%。在此基础上,提出了综合防治措施,旨在为软枣猕猴桃产业可持续发展提供理论指导和技术支撑。

猕猴桃细菌性溃疡病的研究进展

猕猴桃细菌性溃疡病是一种严重威胁猕猴桃生产的毁灭性病害。近年来,该病在新西兰和意大利等猕猴桃出口大国爆发,并有世界范围内进一步扩散之势,给猕猴桃产业的发展造成了严重威胁。笔者基于国内外最新的研究报道,对猕猴桃细菌性溃疡病的发病症状、病原鉴定、快速检测方法、致病力差异、病原菌侵染机理、病害发生流行规律及防治技术等方面进行了综述,并探讨了该病害未来的研究方向与防治策略。

猕猴桃细菌性溃疡病研究进展

细菌性溃疡病(bacterial canker)是猕猴桃(kiwifruit)生产中的毁灭性病害。该病的发生具有蔓延快、致病性强、根除难度大等特点,成为猕猴桃产业发展的主要限制因子。综合国内外相关研究报道,就细菌性溃疡病在世界猕猴桃产区的分布和危害,病原菌的分类地位、寄主范围、遗传多样性和分子检测技术,猕猴桃对溃疡病菌的抗性机制,病害的侵染循环、流行因素以及综合防治技术等方面进行了系统综述,旨在为进一步揭示病害成灾规律、有效控制病害提供新信息。

番茄细菌性溃疡病研究进展

根据国内外近年来番茄溃疡病的研究概况,对番茄溃疡病的历史、主要症状、病原菌的分类地位及生物学特性、病原菌的分离、检测和鉴定技术、病害的田间发生、流行条件及防治方法进行了综述,分析了我国加入世界贸易组织后实施《卫生与植物卫生措施协定》以及农产品安全条例等,认为做好番茄溃疡病风险性分析、监测国际种子贸易传入该病害的可能性非常重要,同时提出了今后加强番茄溃疡病研究的主要方向。

番茄细菌性溃疡病菌的实时荧光PCR检测

由C lavibacter m ichiganensissubsp.m ichiganensis(Cmm)引起的番茄细菌性溃疡病是一种严重危害番茄生产的种传细菌性病害。根据ITS序列多态性设计引物及TaqM an探针进行实时荧光PCR检测的结果表明,这组引物-探针能检测出所有供试的Cmm菌,对照菌均未检测到荧光信号。用接种但未显示症状的番茄苗叶片及人工处理的带菌种子提取的核酸作为模板,均能检测到病菌,其检测灵敏度比常规PCR高约100倍。实验中不需病原菌的分离培养及PCR的后续处理。该方法快速、简便、安全、准确,适用于出入境检验检疫及种子、种苗健康检测领域。

陕西省猕猴桃细菌性溃疡病菌(Pseudomonas syringae pv.actinidiae)Rep-PCR的遗传多样性分析

【目的】由丁香假单胞猕猴桃致病变种(Pseudomonas syringae pv.actinidiae,Psa)引起的溃疡病是猕猴桃生产中最具毁灭性的病害,明确病菌的群体遗传特性将对了解病害发生规律和防治策略的制定具有重要理论意义。【方法】采用ERIC-PCR(enterobacterial repetitive inter-genic consensus)和BOX-PCR指纹技术分析了陕西省猕猴桃主要栽培区Psa的遗传特性。【结果】ERIC-PCR聚类结果显示,相似系数为0.626时,72个Psa菌株被分为6个类群,其中供试菌株中的75.7%属于第Ⅱ类群,且菌株无明显的采集地和寄主品种的聚类。BOX-PCR指纹聚类分析可将86个Psa菌株分为8个类群(相似系数为0.668),其中第Ⅰ类群菌株数量最多,占供试菌株数量的69.8%,其地理来源为眉县、周至、杨凌及其全部的意大利供试菌株,其中来源眉县的81.6%的菌株都聚集在该类群;菌株未表现出明显的寄主品种类群。【结论】陕西省猕猴桃溃疡病菌基因组存在丰富的遗传多样性;ERIC-PCR和BOX-PCR多态性分析技术可为我国Psa基因多样性的研究提供一个有效途径。

猕猴桃细菌性溃疡病菌对17种杀菌剂的敏感性及不同药剂田间防效

为明确猕猴桃细菌性溃疡病菌（Pseudomonas syringaepv．actinidiae）对不同杀菌剂的敏感性以及田间防效，采用紫外分光光度计法，在室内测定该病菌对17种杀菌剂的室内毒力，并选择其中9种杀菌剂进行田间防效试验。结果表明：猕猴桃细菌性溃疡病菌对硫酸链霉素水剂（As）、氢氧化铜w=53．8％水分散粒剂（WG）、农用硫酸链霉素w=72％可溶性粉剂（SPX）3种药剂的敏感性强，其EC。。达到18．72～23．79mg／L，为高度敏感；其次为氢氧化铜w=46．1％水分散粒剂（WG）、中生菌素w=3％可湿性粉剂（WP）、盐酸四环素有效成分（AF）、施纳宁w=45％水剂（AS）、叶枯唑w=20％WP、链·土霉素w=90％AF、三氯异氰尿酸w=85％SPX、乙酸铜w=20％wP、加瑞农w=47％WP9种药剂，其EC50为61．98～131．53mg／L，为中度敏感；而噻霉酮w=1．5％水乳剂（EW）、喹啉酮w=33．5％悬浮剂（SC）、壬菌铜w=30％微乳剂（ME）、铜大师w=86．2％wP和噻菌铜w=20％SC5种药剂敏感性略差，其EC。。为208．1～317．38mg／L，为低度敏感。9种杀菌剂田间试验防效存在显著性差异（P〈0．05），以氢氧化铜w=46．1％WG对猕猴桃溃疡病防效最好，平均防效达到87．6％；其次为农用链霉素w=72％SPX、中生菌素w=3％WP和叶枯唑w=20％WP，防效分别达到74．7％、69．0％和64．0％，噻霉酮w=1．5％EW的防效为51．6％；而以噻菌铜w=20％SC、壬菌铜w=30％ME及喹啉酮w=33．5％SC的防效均较差，仅为23．9％～35．1％，与对照药剂施纳宁w=45％AS的防效略低或相当。说明，氢氧化铜、硫酸链霉素、中生菌素、叶枯唑及噻霉酮均可作为陕西目前及今后猕猴桃细菌性溃疡病的较理想防治药剂。

不同猕猴桃品种对细菌性溃疡病的抗病性及其聚类分析

通过田间定点抗病性调查,结合前人的研究结果得出:不同猕猴桃品种对细菌性溃疡病的抗性存在明显差异。金魁和两种雄株中华软、美味硬最为抗病,早鲜次之,魁蜜稍抗。华美2号、海沃德中感。秦美、金丰最感病。用最长距离法对安徽省9个猕猴桃品种进行抗细菌性溃疡病系统聚类,可以将9个品种划分为5类。在谱系图上,抗病性相同的品种大致划分在同一个类中,第1类中华软、美味硬(8、9)为免疫品种;第2类早鲜、金魁(6、7)为高抗品种;第3类魁蜜(5)为中抗品种;第4类为中感品种,华美2号(4)为偏抗病,海沃德(3)为感病品种;第5类则为感病品种,金丰(1)为高感品种,秦美(2)为感病品种。其结果与实际抗性调查情况基本相符。

猕猴桃细菌性溃疡病防治技术研究

从栽培措施、化学防治、物理防治等方面对猕猴桃细菌性溃疡病的防治技术进行了研究。结果表明 ,该病的防治应以栽植抗病品种、合理的栽培措施以及冻害的预防为基础。化学防治以刮除病斑后涂抹复方治溃灵效果较好 ,防治效果可达 86 %。另外 ,将其它果树上的“桥接”

猕猴桃细菌性溃疡病生防菌的筛选、鉴定及其防效初探

从健康猕猴桃植株中筛选具有生防潜力的内生放线菌,为猕猴桃细菌性溃疡病防治提供材料。采用平板渗透法筛选对猕猴桃细菌性溃疡病具有拮抗作用的内生放线菌,通过测定不同拮抗内生放线菌发酵液对猕猴桃溃疡病病原菌(Pseudomonas syringae pv.Actinidiae,Psa)的最低抑制浓度(Minimal Inhibitory Concentrations,MIC)筛选高抗性菌株;采用喷雾法及注干法进行高抗性菌株的田间防治试验;结合形态、生理生化特征及16S r DNA序列分析,明确高抗性菌株分类地位。从431株内生放线菌中筛选出7株具有明显抗性的菌株,其中菌株M109的抑菌效果最强(MIC值为0.91 mg/m L)。田间试验表明,菌株M109的喷雾法防效为72.1%,注干法防效为84.6%。分类鉴定结果显示菌株M109为肉桂地链霉菌(Streptomyces cinnamonensis)。试验表明,肉桂地链霉菌S.cinnamonensis M109对猕猴桃细菌性溃疡病防效显著,具有应用潜力。

基于栽培管理措施的猕猴桃细菌性溃疡病防治技术

对陕西猕猴桃种植区的栽培管理技术措施与猕猴桃枝干溃疡病发病关系的研究发现 ,栽培管理措施及水平直接影响溃疡病的发生程度 ,管理精细的果园发病较轻。为有效控制病害 ,冬季修剪应在落叶后至元月中旬之间进行 ;冬灌不能晚于 1 1月底 ,春灌不早于 4月 ;合理施肥 ,控制春季萌芽的早晚、伤流的多少和树木生长势 。

湘西地区猕猴桃细菌性溃疡病抗性资源筛选及其抗性机理研究

由Pseudomonas syringae pv.actinidiae(Psa)引起的溃疡病是猕猴桃生产中威胁最大的细菌性病害。种植抗病品种是防治猕猴桃溃疡病最有效途径,猕猴桃抗源是抗病育种的物质基础。本试验通过离体接种,在室内评价了4个不同种的7个猕猴桃资源及品种对溃疡病的抗性。结果表明:供试材料离体叶片、枝条接种溃疡病菌后,其发病时间、病斑大小、发病率差异明显。按病斑大小排序,其抗性强弱依次为毛花猕猴桃‘M9808’>对萼猕猴桃‘S9801’>美味猕猴桃‘M-06’>美味猕猴桃‘米良1号’>中华猕猴桃‘Z-12’>中华猕猴桃‘东红’>中华猕猴桃‘红阳’(CK)。其中,毛花猕猴桃‘M9808’抗病性最强,表现为发病最晚,离体叶片、枝条分别于接种后10 d、20 d发病,比对照推迟了8 d、10 d;病斑最小,为对照的1/25、1/11;发病率最低,为对照的1/28、1/10。抗病性相关酶活性比对发现,不同材料的PAL、CAT、POD酶活性差异较大,抗性材料均高于感病材料,且峰值出现时间早于感病材料。其中,毛花猕猴桃‘M9808’的PAL峰值最高,接种后5 d出现,比对照早10 d;CAT、POD峰值接种后10 d出现,比对照早5 d。说明毛花猕猴桃‘M9808’对溃疡病抗性最强,可作为今后猕猴桃抗病育种或抗性砧木的理想材料。这为猕猴桃抗病育种提供了理论依据,为猕猴桃溃疡病的防控提供了参考。

加工番茄品种抗细菌性溃疡病的鉴定

【目的】番茄细菌性溃疡病是番茄上最严重,最具毁灭性的病害之一,种植抗病品种是防治该病害最简便、最经济的措施之一。搞清目前新疆加工番茄一些栽培品种对番茄细菌性溃疡病的抗性情况,为其防治提供理论依据。【方法】对收集的30个加工番茄品种进行温室育苗,于4～5片真叶期进行针刺接种。采用分级调查法调查病情,观察其发生发展情况。根据病情指数划分反应型,确定供试品种的抗感类型。【结果】在供试的30个加工番茄品种中没有免疫、抗病或耐病品种,只有H2401、石番18、石番97-10、石红306和石红401表现为中度感病,剩余全为高感品种。【结论】供试的30个加工番茄品种中没有免疫、抗病或耐病品种,均为感病或高感品种。

我国猕猴桃细菌性溃疡病研究分析及防控

为了明确猕猴桃细菌性溃疡病的研究动态和进展,为该病的研究和防治提供参考。对1988—2015年期间中国知网中国期刊全文数据库上的猕猴桃细菌性溃疡病文献进行了统计分析。结果表明,我国猕猴桃细菌性溃疡病逐年加重,各猕猴桃产区发生不均衡;从文献研究内容上看,对猕猴桃细菌性溃疡病的防治和药剂筛选试验等内容较多,对病害的基础性研究以及规律、预测预报等方面研究较少。本文在详细分析文献的基础上提出了猕猴桃细菌性溃疡病的防控建议。

东北地区番茄细菌性溃疡病的发生和病原鉴定研究

1988～1989年从北京市、辽宁和黑龙江省等地调查采集的患溃疡病的病株和病果上分离到17个细菌菌株,接种番茄幼苗、果实及叶片,均能产生典型的溃疡病症状,各菌株致病力无明显差异。各菌株经细菌染色反应,形态特征,培养性状,生理生化反应,血清学反应(ELISA法)及蛋白质凝聚丙烯酰胺胶电泳等鉴定,认为番茄溃疡病的病原细菌是:密执安棒杆菌密执安亚种(Clavibacter michiganense subsp.michiganense(Smith)Davies et al.)。试验表明病原细菌可经种子带菌传染,病残体和病土壤可能是初侵染菌源。抗病性测定45个番茄品种均属感病品种。寄主范围除番茄外,尚能侵染茄子、龙葵和心叶烟。

猕猴桃细菌性溃疡病的危险性分析

猕猴桃细菌性溃疡病是猕猴桃的重要病害。为了正确认识该病发生的危险性,有效防止其进一步扩散蔓延,参照国际上有害生物风险分析方法,对猕猴桃细菌性溃疡病在国内的危险性进行了定性和定量分析,做出了综合评价,并提出检疫和防治管理措施。

番茄细菌性溃疡病苗期接种新方法的研究

在剪叶、浸根和针刺等细菌病害传统接种方法基础上设计了打顶接种新方法;以番茄细菌性溃疡病菌中国菌株和美国菌株借助打顶法接种佳粉10、合作908和华南红宝石3个国内主栽番茄品种2～3片真叶期幼苗,在昼夜最低、最高温度15～18℃、32～35℃和相对湿度为30%～60%的温室条件下,打顶法接种番茄幼苗后溃疡病发病率为87.5%～100.0%,病情指数随接种菌悬液浓度提高而增大,达到23.96～82.29,3个供试品种之间表现稳定一致;剪叶、浸根和针刺接种方法的发病率普遍在40%以下,病情指数在20以下,3个供试品种之间未表现明显差异;进一步研究显示,使用选择性培养基mSCM能够从打顶法接种后的发病植株上获得培养性状与原接种体一致的分离物,专化性免疫凝聚试剂盒检测到特定的测试线,PCR扩增到614 bp的特异性条带,证实该分离物为番茄细菌性溃疡病菌,发病植株为接种体侵染所致.该研究结果表明,打顶接种方法比剪叶法、针刺法和浸根法更适合用于番茄溃疡病菌的致病性测定和评价不同番茄品种苗期的抗病性,具有应用价值.

猕猴桃细菌性溃疡病病菌越冬场所的研究

通过对病园的越冬病株枝、叶、芽、叶痕、根、野生猕猴桃病枝、土壤等进行采样、分离 ,再接种、鉴定 ,证明猕猴桃细菌性溃疡病菌在田间的越冬场所有 :田间病株枝、叶、芽、叶痕、野生猕猴桃病株、田间病残体、土壤表土层。病株根系经多次分离未获得稳定的致病菌株。

中国4省猕猴桃细菌性溃疡病菌的生物型检测和遗传多样性分析

由丁香假单胞菌猕猴桃致病变种Pseudomonas syringae pv.actinidiae(Psa)侵染引起的猕猴桃细菌性溃疡病(kiwifruit bacterial canker)是全球猕猴桃生产上最具毁灭性的细菌病害。为探明福建、安徽、四川和陕西4省Psa菌株的生物型和遗传多样性,用5对PCR特异性引物PsaJ-F/-R、PsaK-F/-R、Tac-F/-R、Con002-F/-R和avrRps4-F1/-R2检测Psa菌株的生物型;用4对PCR引物27F/1492R、PsaF1/R2、gapA-Fps/Rps和rpoD+364s/-1222ps分别扩增16S rRNA、ITS、gapA和rpoD基因,进行多基因联合分析Psa菌株的遗传多样性。结果表明,特异性引物Tac-F/-R从47株Psa菌株中均能扩增出一条545 bp的特异条带,其他4对引物未扩增出任何条带,说明供试Psa菌株的生物型均为biovar 3。多基因联合分析表明,4省Psa存在丰富的遗传多样性,4个群体共检测出27个单倍型,单倍型多样性为0.955。安徽、福建、四川和陕西群体的单倍型数差异较大,分别为1、8、12个和12个。4个群体的多态性位点数、核苷酸多样性和平均核苷酸差异数差异极显著(P<0.01),其中福建群体的多态性最丰富,而安徽群体的多态性最低。AMOVA分析表明,3.6%的遗传变异来源于种群间,而96.4%的遗传变异来源于种群内,说明种群内变异是遗传变异的主要来源。遗传分化分析表明,安徽省Psa群体与其他3个群体间的遗传分化极高(F_(st)>0.175),福建、四川和陕西群体间的遗传分化水平较低(F_(st)<0.017)。研究结果有利于了解福建省Psa的来源,为阻断Psa的传播和猕猴桃细菌性溃疡病的长期可持续控制提供了理论参考。