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细菌脂多糖诱导人单核细胞株对细菌脂蛋白的耐受性及其与肌动蛋白骨架关系 被引量:1
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作者 刘建仓 周荣 +2 位作者 刘良明 刘韧 肖南 《细胞生物学杂志》 CSCD 2007年第5期743-747,共5页
细菌脂多糖(LPS)可诱导宿主对LPS的耐受,但对细菌脂蛋白(BLP)是否存在交叉耐受,目前报道不一。采用人单核细胞株(THP-1),建立小剂量LPS诱导THP-1对LPS耐受的细胞模型;观察细胞肌动蛋白骨架、炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-6的浓度及NF-κB... 细菌脂多糖(LPS)可诱导宿主对LPS的耐受,但对细菌脂蛋白(BLP)是否存在交叉耐受,目前报道不一。采用人单核细胞株(THP-1),建立小剂量LPS诱导THP-1对LPS耐受的细胞模型;观察细胞肌动蛋白骨架、炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-6的浓度及NF-κB的DNA结合活力的变化情况;探讨BLP交叉耐受及细胞骨架在其中的作用。结果显示,THP-1细胞经小剂量(10ng/ml)LPS、大剂量(100ng/ml)LPS或BLP刺激后,细胞形态严重变形,肌动蛋白重组,细胞周边肌动蛋白丝带消失,出现明显的肌动蛋白收缩团块及伪足,细胞核内NF-κB的DNA结合活性显著升高,培养上清液中炎症因子(TNF-α、IL-1β及IL-6)的释放显著增加;而小剂量LPS预刺激12h后,再用大剂量的LPS或BLP刺激6h,上述指标明显改善;采用细胞骨架肌动蛋白聚集破坏剂鬼笔环肽预处理后的THP-1细胞,可取消由小剂量LPS诱导的自身耐受及对BLP的交叉耐受;可见,细菌LPS、BLP(100ng/ml)可诱导THP-1细胞肌动蛋白骨架的改变,激活NF-κB信号通路,诱导炎性细胞因子TNF-α、IL-1、IL-6过度释放,激活宿主炎症细胞的炎症反应;而小剂量LPS预刺激后可诱导出THP-1细胞对LPS的自身耐受和对BLP的交叉耐受;细胞骨架肌动蛋白参与了小剂量LPS诱导THP-1细胞对LPS自身耐受和对BLP交叉耐受的形成。 展开更多
关键词 人单核巨噬细胞 细菌多糖 细菌脂蛋白 耐受性 细胞骨架
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Actin骨架偶联IRAK-NF-κB信号通路参与细菌脂蛋白诱导的交叉耐受
2
作者 周荣 刘建仓 +2 位作者 刘良明 刘韧 肖南 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第8期1604-1609,共6页
目的:采用人单核细胞株(THP-1),建立小剂量BLP诱导THP-1细胞对BLP耐受的细胞模型,观察BLP诱导THP-1细胞对BLP耐受及对LPS交叉耐受时细胞actin骨架的变化情况,并探讨细胞actin骨架在BLP耐受及交叉耐受形成中的作用。方法:采用人单核细胞... 目的:采用人单核细胞株(THP-1),建立小剂量BLP诱导THP-1细胞对BLP耐受的细胞模型,观察BLP诱导THP-1细胞对BLP耐受及对LPS交叉耐受时细胞actin骨架的变化情况,并探讨细胞actin骨架在BLP耐受及交叉耐受形成中的作用。方法:采用人单核细胞株THP-1,建立小剂量BLP预处理诱导的BLP耐受细胞模型;采用ELISA法测定炎症因子TNF-α、IL-1β及IL-6浓度;采用FITC标记的鬼笔环肽进行actin骨架染色;采用EMSA法检测NF-κB转录活性。结果:大剂量BLP(100μg/L)及大剂量LPS(100μg/L)孵育6h可诱导THP-1细胞的炎症反应激活,TNF-α、IL-1β及IL-6的释放显著增加,白细胞介素-1受体相关激酶-1(IRAK-1)活性显著增强,NF-κB转录活性明显上调,细胞actin骨架收缩成团块状,细胞形态改变并形成伪足;而用小剂量BLP(10μg/L)预处理12h后,THP-1细胞对大剂量BLP(100μg/L)及大剂量LPS(100μg/L)孵育6h的耐受性均明显增强,炎症因子(TNF-α、IL-1β及IL-6的释放明显减少,IRAK-1激酶活性被显著抑制,NF-κB转录活性明显降低,细胞伪足形成明显减少且形态明显改善,但仍有肌动蛋白聚集呈"团块"样;此外,actin骨架聚集抑制剂鬼笔环肽可取消由小剂量BLP诱导的耐受及交叉耐受,TNF-α、IL-1β、IL-6释放明显升高,IRAK-1激酶活性明显提高,NF-κB转录活性明显上调。结论:细胞骨架actin参与THP-1细胞BLP耐受及BLP交叉耐受的形成,其机制与actin骨架偶联的IRAK-NF-κB信号通路有关。 展开更多
关键词 细菌脂蛋白 交叉耐受 肌动蛋白细胞骨架 THP-1细胞
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细菌脂蛋白耐受对脓毒症老龄及成年小鼠心脏功能保护作用的对比 被引量:1
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作者 王磊 周静 周苏明 《中华老年多器官疾病杂志》 2015年第4期276-281,共6页
目的:探讨细菌脂蛋白(BLP)耐受对老龄小鼠心肌细胞的保护作用,并比较其对老龄小鼠与成年小鼠心功能影响的差异。方法选取86只健康雄性C57BL/6老龄小鼠(SPF级,24月龄)和55只成年雄性C57BL/6小鼠(6~8周龄),用小剂量BLP预处理... 目的:探讨细菌脂蛋白(BLP)耐受对老龄小鼠心肌细胞的保护作用,并比较其对老龄小鼠与成年小鼠心功能影响的差异。方法选取86只健康雄性C57BL/6老龄小鼠(SPF级,24月龄)和55只成年雄性C57BL/6小鼠(6~8周龄),用小剂量BLP预处理老龄小鼠及成年小鼠诱导BLP耐受,分别比较正常对照组、假手术(sham)组、脓毒症(剖腹手术行盲肠结扎穿孔致脓毒症,CLP)组、BLP耐受+CLP组,其中成年小鼠在盲肠结扎穿孔0,2,6,12h四个时间点做小鼠二维超声心动图,老龄小鼠在0,3,6,12h四个时间点做小鼠二维超声心动图,选择左心室短轴缩短率(FS)、射血分数(EF)、左心室舒张末期内径(LVIDd)等做为观测指标。结果老龄小鼠CLP组与BLP耐受+CLP组的FS、EF、LVIDd自手术后均呈下降趋势,但是BLP耐受+CLP组的降幅较CLP组小。成年小鼠BLP耐受+CLP组0~6h时段FS、EF、LVIDd的变化趋势与CLP组相同,但各时间点数值均低于CLP组;而6h后BLP耐受+CLP组的3项指标转而上升,至12h时高于CLP组,其中FS、EF差异均有统计学意义(P<0.05)。BLP耐受+CLP组老龄小鼠的FS呈现出进行性下降趋势,而在成年小鼠中6h后为进行性增高趋势,12h明显高于假手术组和CLP组(P<0.05)。成年小鼠CLP组在术后EF上升,6h后出现下降的趋势,12h低于术前水平;而老龄小鼠CLP组术后EF进行性下降。成年小鼠BLP耐受+CLP组术后出现的EF值呈逐渐上升趋势,相反,老龄组则进行性下降。老龄小鼠BLP耐受+CLP组的LVIDd术后进行性下降,而成年小鼠BLP耐受+CLP组术后2h时低于术前水平(P<0.05),6h后逐渐回升。结论脓毒症对FS、EF、LVIDd有抑制作用,老龄小鼠心脏收缩功能和舒张功能所受抑制更加严重;BLP耐受对心功能有一定的保护作用,此作用在成年小鼠较明显,在老龄小鼠未见明显保护作用。 展开更多
关键词 休克 脓毒性 细菌脂蛋白耐受 心功能 保护
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细菌脂蛋白耐受中核转录因子核转位机制研究 被引量:4
4
作者 高丽杰 李崇辉 +1 位作者 汪江淮 黄志强 《中国危重病急救医学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期267-270,共4页
目的探讨细菌脂蛋白(BLP)耐受所致核转录因子-κB(NF-κB)活化受抑制的分子机制。方法以不同浓度BLP(10、100、1000ng/m1)预处理人急性单核细胞白血病细胞(THP-1)诱导BLP耐受,再以不同浓度BLP(O、10、100、1000ng/m1)刺激... 目的探讨细菌脂蛋白(BLP)耐受所致核转录因子-κB(NF-κB)活化受抑制的分子机制。方法以不同浓度BLP(10、100、1000ng/m1)预处理人急性单核细胞白血病细胞(THP-1)诱导BLP耐受,再以不同浓度BLP(O、10、100、1000ng/m1)刺激经BLP预处理(耐受组)或未经BLP预处理(对照组)的THP-1细胞,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测培养上清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的释放,确定最适的BLP预处理和刺激浓度。然后按此条件处理细胞不同时间(O、0.5、1、2、6h)并提取蛋白,用蛋白质免疫印迹法(Westernblotting)检测NF-κB亚单位p50和p65的表达、核转位及磷酸化情况。结果对照组中10、100、1000ng/mlBLP可剂量依赖性刺激THP1活化并产生TNF-α(pg/ml:184.86±32.51、3215.88±167.09、6042.96±245.37),耐受组中100ng/mlBLP预处理几乎完全抑制不同剂量BLP诱导的TNF-α释放。故最适BLP预处理浓度为100ng/ml,刺激浓度为1000ng/ml。Western blotting检测表明,在BLP耐受的细胞质中p50蛋白表达明显高于对照组(0h:542.9±15.6比272.8±13.2,0.5h:558.0±16.9比236.4±11.8,1h:524.7±17.5比211.6±9.8,2h:584.9±15.6比222.4±12.3,均P〈0.01),而两组间P65蛋白无明显差异。BLP刺激还可诱导对照组细胞中p50和p65发生核转位,即细胞核中p50和p65蛋白增加(1hp50:344.2±13.6比79.0±5.2,p65:78.4±4.5比0,均P〈0.05),而耐受组细胞核中p50和p65均无明显变化。另外,BLP刺激还可诱导对照组细胞中p65的536位丝氨酸发生快速磷酸化(O.5h:0.67±0.08比0.04±0.01,1h:0.71±0.11比0.04±0.01,均P〈0.05),但是在BLP刺激的耐受组细胞中磷酸化p65蛋白水平无明显变化。结论BLP耐受的THP-1细胞中抑制性NF-κB亚单位p50表达上调,而具有转活化能力的亚单位p65的核转位及磷酸化均受到抑制,可能是BLP耐受中TNF-α等NF-κB依赖的基因表达减少的分子机制之一。 展开更多
关键词 细菌脂蛋白 耐受 核转录因子-ΚB P65 P50
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白细胞介素-1受体相关激酶1蛋白过表达对细菌脂蛋白耐受的影响 被引量:2
5
作者 李崇辉 王金晶 +2 位作者 高丽杰 汪江淮 黄志强 《中国危重病急救医学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期8-11,共4页
目的探讨细菌脂蛋白(BLP)信号转导分子Toll样受体2(TLR2)和白细胞介素-1受体相关激酶1(IRAK-1)与BLP耐受发生的关系。方法在人胚肾293(HEK293)细胞中过表达TLR2以及IRAK-1蛋白,利用蛋白质免疫印迹法和双荧光素酶报告基因检测... 目的探讨细菌脂蛋白(BLP)信号转导分子Toll样受体2(TLR2)和白细胞介素-1受体相关激酶1(IRAK-1)与BLP耐受发生的关系。方法在人胚肾293(HEK293)细胞中过表达TLR2以及IRAK-1蛋白,利用蛋白质免疫印迹法和双荧光素酶报告基因检测实验观察其对BLP耐受的影响。结果以BLP刺激稳定转染并表达TLR2的HEK293细胞可以剂量依赖性地诱导NF—xB活化,而且BLP预处理HEK—TLR2细胞可诱导BI,P耐受的发生。在HEK—TLR2细胞中过表达IRAK-1可以剂量依赖性地增加NF—KB的活化并逆转BLP耐受:转染前BLP活化组与耐受组的NF—κB活化程度分别为0.3294±0.010和0.168±0.010;转染0.02/μgIRAK-1质粒后活化组与耐受组的NF—κB活化程度分别为0.493±0.010和0.427±0.035,均比转染前明显升高,差异均有统计学意义(均P〈0.01)。结论HEK293细胞中过表达TLR2不能阻止BLP耐受的诱导,但是在HEK—TLR2细胞中过表达IRAK-1可部分逆转BLP耐受,提示IRAK-1蛋白表达水平的变化在BLP耐受发生中起关键作用;IRAK-1可作为细菌感染和脓毒症治疗的重要靶点。 展开更多
关键词 白细胞介素-1受体相关激酶1 细菌脂蛋白耐受 信号转导
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细菌脂蛋白对人单核细胞内细胞髓系分化因子88及肿瘤坏死因子表达的影响
6
作者 周苏明 周静 +1 位作者 程蕴琳 吴文溪 《中华急诊医学杂志》 CAS CSCD 2007年第3期260-262,共3页
目的观察在不同剂量细菌脂蛋白(BLP)刺激后,人单核细胞(THP-1)髓系分化因子88蛋白(MyD88)的表达及肿瘤坏死因子(TNF-α)含量的变化。方法用小剂量BLP诱导THP-1产生耐受,再以大剂量BLP攻击,分别比较对照组、BLP耐受组、耐受... 目的观察在不同剂量细菌脂蛋白(BLP)刺激后,人单核细胞(THP-1)髓系分化因子88蛋白(MyD88)的表达及肿瘤坏死因子(TNF-α)含量的变化。方法用小剂量BLP诱导THP-1产生耐受,再以大剂量BLP攻击,分别比较对照组、BLP耐受组、耐受后攻击组和直接攻击组MyD88和TNF-α的表达。用WesternBlot测定MyD88蛋白含量,ELISA法测定TNF-α含量。结果BLP耐受组、耐受后攻击组和直接攻击组的TNF-α水平均高于对照组,而耐受后攻击组的TNF_a表达明显低于直接攻击组,各组问MyD88蛋白含量无明显改变。结论BLP可刺激机体产生炎症因子,小剂量BLP诱导THP-1细胞产生BLP耐受,抑制细胞表达TNF-α,但不同剂量BLP对MyD88的蛋白表达无影响。 展开更多
关键词 细菌脂蛋白 耐受 髓系分化因子88 肿瘤坏死因子-Α
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IL-10对细菌脂蛋白诱导乳大鼠心肌细胞凋亡的抑制作用 被引量:1
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作者 黎志财 周静 +4 位作者 张倩 朱冬梅 黄敏 韩艺 周苏明 《中华临床医师杂志(电子版)》 CAS 2012年第13期70-72,共3页
目的探讨白细胞介素-10(IL-10)对细菌脂蛋白(BLP)诱导大鼠乳鼠心肌细胞凋亡的抑制作用。方法 (1)体外培养大鼠乳鼠心肌细胞,以1μg/ml的BLP分别刺激心肌细胞0、12、24、36、48h。(2)以不同浓度的BLP(1μg/ml和5μg/ml)和TNF-α(20ng/ml... 目的探讨白细胞介素-10(IL-10)对细菌脂蛋白(BLP)诱导大鼠乳鼠心肌细胞凋亡的抑制作用。方法 (1)体外培养大鼠乳鼠心肌细胞,以1μg/ml的BLP分别刺激心肌细胞0、12、24、36、48h。(2)以不同浓度的BLP(1μg/ml和5μg/ml)和TNF-α(20ng/ml和60ng/ml)分别刺激心肌细胞24h。(3)将细胞分为五组,正常对照组、BLP(1μg/ml)组、IL-10(20ng/ml)组、IL-10(20ng/ml)+BLP(1μg/ml)组及BLP(1μg/ml)+IL-10(20ng/ml)组,刺激细胞24h。提取细胞蛋白,Westernblot法检测心肌细胞procaspase-3、cleaved caspase-3、bcl-2及bax蛋白的表达水平。结果 (1)BLP刺激心肌细胞24h后,caspase-3被明显激活,表现为cleaved caspase-3的表达逐渐增加。(2)与正常对照组比较,不同浓度的BLP和TNF-α分别刺激心肌细胞24h后可明显促进cleaved caspase-3表达增加(P<0.01),且5μg/ml的BLP较1μg/ml的BLP刺激细胞后cleaved caspase-3的表达更高(P<0.05)。(3)与正常对照组相比,BLP组中心肌细胞cleaved caspase-3的表达明显升高(P<0.01),而bcl-2/bax的比率显著降低(P<0.01)。与BLP组相比,IL-10+BLP组和BLP+IL-10组中,心肌细胞cleaved caspase-3水平显著降低(P<0.01),而bcl-2/bax比率明显升高(P<0.05),但这两组间无统计学差异。结论 IL-10对细菌脂蛋白诱导的乳大鼠心肌细胞凋亡具有抑制作用。 展开更多
关键词 白细胞介素10 细胞凋亡 细菌脂蛋白 乳鼠心肌
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芍药苷对细菌脂蛋白诱导的THP-1细胞炎症因子表达的影响 被引量:4
8
作者 张倩 周静 +3 位作者 黄敏 毕立清 黎志财 周苏明 《江苏医药》 CAS CSCD 北大核心 2011年第9期1002-1004,共3页
目的研究芍药苷对细菌脂蛋白(BLP)诱导的人单核细胞系(THP-1)细胞炎症因子表达的影响。方法采用THP-1进行细胞培养,加入同一浓度BLP(1000 ng/ml)分别培养1、2、4、6、8、12、24、36、48 h,及将BLP刺激后的THP-1细胞与不同浓度芍药苷(10-... 目的研究芍药苷对细菌脂蛋白(BLP)诱导的人单核细胞系(THP-1)细胞炎症因子表达的影响。方法采用THP-1进行细胞培养,加入同一浓度BLP(1000 ng/ml)分别培养1、2、4、6、8、12、24、36、48 h,及将BLP刺激后的THP-1细胞与不同浓度芍药苷(10-8、10-7、10-6、10-5、10-4mol/L)分别作用4 h和48 h后,收集细胞上清液;用ELISA法分别测定肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)水平。结果给予BLP刺激后,TNF-α及IL-6均有明显增加,TNF-α在4 h达高峰,IL-6在24 h后显著升高,48 h达高峰。芍药苷体外作用可呈浓度依赖性抑制BLP刺激后THP-1细胞表达TNF-α、IL-6的水平(P<0.01)。结论芍药苷可通过抑制TNF-α、IL-6的释放,减轻炎症反应。 展开更多
关键词 芍药苷 细菌脂蛋白 肿瘤坏死因子Α 白细胞介素6
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Rab7蛋白参与了BLP耐受巨噬细胞对细菌清除能力增强的过程 被引量:2
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作者 赵舒祺 蔡军伟 +7 位作者 李雪 杨勤 黄林 罗海华 项静 乔敏 姜勇 刘靖华 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期900-906,共7页
目的:探讨Rab GTP酶是否参与了对细菌脂蛋白(BLP)耐受的骨髓诱导分化巨噬细胞(BMDMs)杀菌能力增强的过程。方法:首先利用real-time PCR比较BLP耐受巨噬细胞和非耐受细胞中Rab5a、Rab5b、Rab7、Rab9、Rab9b、Rab11a、Rab11b、Rab12、Rab3... 目的:探讨Rab GTP酶是否参与了对细菌脂蛋白(BLP)耐受的骨髓诱导分化巨噬细胞(BMDMs)杀菌能力增强的过程。方法:首先利用real-time PCR比较BLP耐受巨噬细胞和非耐受细胞中Rab5a、Rab5b、Rab7、Rab9、Rab9b、Rab11a、Rab11b、Rab12、Rab32和Rab34的表达变化,筛选出水平升高的Rab7分子;进一步用real-time PCR和Western blot实验证实Rab7的mRNA和蛋白表达是否在BLP耐受细胞感染大肠杆菌后继续升高;接下来用RNAi技术下调BLP耐受巨噬细胞Rab7表达,观察细胞对细菌的吞噬能力及杀灭能力的影响。结果:在检测的10个Rab GTP酶中,Rab7在BLP耐受BMDMs的mRNA水平升高,是非耐受细胞的1.4倍;进一步用real-time PCR和Western blot实验证实Rab7的mRNA和蛋白表达在BLP耐受细胞感染大肠杆菌后,随着时间延长均明显升高;下调Rab7表达不影响BLP耐受巨噬细胞对细菌的吞噬能力,但是显著降低其对细菌的杀灭能力。结论:BLP耐受通过上调巨噬细胞Rab7的表达,在增强巨噬细胞对细菌的杀灭过程中发挥重要作用。 展开更多
关键词 细菌脂蛋白 耐受 细菌清除 RAB GTP酶 Rab7蛋白
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环氧合酶-2对细菌脂多糖诱导的鼻黏膜组织中MUC2基因表达的影响 被引量:1
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作者 王振霖 李鹏 +4 位作者 李源 张革化 黄雪琨 曲秋懿 张秋航 《中国耳鼻咽喉颅底外科杂志》 CAS 2011年第1期6-10,共5页
目的探讨细菌脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的离体鼻黏膜组织中环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)及前列腺素E2(prostaglandin E2,PGE2)对黏液素2(mucin2,MUC 2)表达的影响,以阐明慢性鼻-鼻窦炎中黏液过度分泌的病理学机制。方... 目的探讨细菌脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的离体鼻黏膜组织中环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)及前列腺素E2(prostaglandin E2,PGE2)对黏液素2(mucin2,MUC 2)表达的影响,以阐明慢性鼻-鼻窦炎中黏液过度分泌的病理学机制。方法应用荧光实时定量PCR技术检测不同浓度的LPS、PGE2和COX-2特异性抑制剂NS-398干预前后,体外培养的鼻黏膜组织中COX-2和MUC2的基因表达变化,并以酶标免疫测定检测干预前后的PGE2释放水平。结果 COX-2,MUC2和PGE2在体外培养的健康鼻黏膜组织中呈微弱的表达。LPS呈浓度依赖性诱导鼻黏膜组织中COX-2和MUC2基因表达及PGE2释放增加;以不同浓度的NS-398阻断COX-2后,观察到NS-3 9 8呈浓度依赖性减弱LPS对MUC 2的基因表达及PGE 2释放的诱导。外源性的PGE2呈浓度依赖性增加MUC2的基因表达,对COX-2表达无明显影响。结论 LPS通过诱导COX-2进而增加PGE2合成来调节MUC2的表达增高,可能是慢性鼻-鼻窦炎中黏液过度分泌的部分机制。 展开更多
关键词 鼻窦炎 鼻黏膜 环氧合酶-2 蛋白 细菌多糖
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细菌脂多糖、脂蛋白和DNA体内协同致病作用观察
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作者 黄宏 蒋建新 +3 位作者 朱佩芳 王正国 张道杰 杨程 《中华创伤杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第9期668-671,共4页
目的观察细菌脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)、脂蛋白(bacteriallipoprotein,BLP)及其DNA〔鸟嘌呤二核苷酸(CpG)寡核苷酸(oligonucleoetide),CpG-ODN〕的体内协同致病作用。方法147只小鼠随机分为等渗盐水对照组、单纯LPS组、单纯CpG-... 目的观察细菌脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)、脂蛋白(bacteriallipoprotein,BLP)及其DNA〔鸟嘌呤二核苷酸(CpG)寡核苷酸(oligonucleoetide),CpG-ODN〕的体内协同致病作用。方法147只小鼠随机分为等渗盐水对照组、单纯LPS组、单纯CpG-ODN组、单纯BLP组、LPS+BLP组、LPS+CpG-ODN组和LPS+BLP+CpG-ODN组,尾静脉注射给药,观察小鼠死亡率及血清肿瘤坏死因子(TNF)-α水平。结果注射后12,24,48h,二联组的死亡率显著高于单独给药组(P<0.05或P<0.01);三联给药组各时相点死亡率显著高于二联组(P<0.05)。单独给药后6h,TNF-α水平均显著高于对照组(P<0.05),12,24h与对照组比较,差异无统计学意义。二联组与单因素组和对照组比较,6,12h血TNF-α均明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。三者联合刺激时,6,12h血TNF-α与二联组比较,差异有统计学意义(P<0.05),至24h仍显著高于对照组(P<0.05)。结论细菌LPS、细菌脂蛋白和细菌DNA不仅自身存在一定的致病能力,而且三者间具有明显的协同效应,特别是三者联合给药时作用最强。 展开更多
关键词 多糖 细菌脂蛋白 细菌DNA 肿瘤坏死因子 细菌多糖 协同效应 致病作用 蛋白 血清肿瘤坏死因子 体内
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TLR1/2信号促CD8^+T细胞功能及其机制 被引量:5
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作者 骆菲菲 郑秀娟 +1 位作者 张丹 储以微 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期38-42,共5页
目的:探讨Toll受体1/2(Toll like receptor1/2,TLR1/2)信号对荷瘤小鼠来源的CD8^+T细胞功能的影响及其可能机制。方法:利用小鼠Lewis肺癌细胞株3LL建立小鼠肺癌荷瘤模型,MACS分选小鼠脾CD8^+T细胞;体外经PBS或TLR1/2激动剂BLP刺激后,Rea... 目的:探讨Toll受体1/2(Toll like receptor1/2,TLR1/2)信号对荷瘤小鼠来源的CD8^+T细胞功能的影响及其可能机制。方法:利用小鼠Lewis肺癌细胞株3LL建立小鼠肺癌荷瘤模型,MACS分选小鼠脾CD8^+T细胞;体外经PBS或TLR1/2激动剂BLP刺激后,Real-time PCR和流式细胞术分别从基因和蛋白水平检测CD8^+T细胞的TLR分子表达;用ELISA和流式细胞术检测经PBS或BLP刺激后的CD8^+T细胞分泌细胞因子和增殖的能力,并用关键信号分子抑制剂分析可能的分子机制。结果:与PBS对照组相比,TLR1/2激动剂BLP不但有效上调荷瘤机体CD8^+T细胞TLR1和TLR2分子的基因水平[TLR1:(0.353±0.015)vs(0.101±0.017),P<0.01;TLR2:(0.232±0.031)vs(0.080±0.004),P<0.05]及蛋白水平(P<0.05),而且显著促进CD8^+T细胞分泌功能性细胞因子[IFN-γ:(2 375±305)vs(850±50),P<0.05;IL-2:(1 600±200)vs(350±50),P<0.05]和增殖的能力(P<0.05),这一效应依赖于NF-KB和P38通路。结论:TLR1/2信号直接作用于荷瘤小鼠的CD8^+T细胞并促进其功能,该研究既丰富了TLR的作用范围,也为基于TLR激动剂的肿瘤生物治疗提供了实验依据。 展开更多
关键词 TLR1/2信号 细菌脂蛋白 CD8+T细胞 信号通路
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胸腺肽α1对THP-1细胞Toll样受体2和MyD88以及TNF-α表达的影响 被引量:1
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作者 周苏明 周静 +1 位作者 程蕴琳 吴文溪 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2006年第10期921-924,共4页
目的:观察人THP-1细胞与胸腺肽α1(Tα1)孵育后,予细菌脂蛋白(BLP)刺激后,Toll样受体2(TLR2)、髓系分化因子88(MyD88)蛋白的表达及细胞因子TNF-α的变化。方法:实验采用人THP-1细胞系进行细胞培养,分为4组:对照组为THP-1细胞不加任何刺... 目的:观察人THP-1细胞与胸腺肽α1(Tα1)孵育后,予细菌脂蛋白(BLP)刺激后,Toll样受体2(TLR2)、髓系分化因子88(MyD88)蛋白的表达及细胞因子TNF-α的变化。方法:实验采用人THP-1细胞系进行细胞培养,分为4组:对照组为THP-1细胞不加任何刺激;BLP组以1000ng/mlBLP刺激2h;Tα1组为THP-1细胞加1000ng/mlTα1孵育24h,不加BLP刺激;Tα1+BLP组为THP-1细胞加1000ng/mlTα1孵育24h后再加1000ng/mlBLP刺激2h。以Westernblot分析TLR2、MyD88蛋白含量。ELISA法测定TNF-α。结果:与对照组相比,BLP组和Tα1+BLP组的TNF-α均显著增加,而Tα1组无显著改变;在TLR2和MyD88的表达上,Tα1组和Tα1+BLP组均高于对照组和BLP组。结论:胸腺肽α1可增加THP-1细胞TLR2、MyD88蛋白的表达,其对免疫细胞的影响与BLP诱发炎症反应的途径不完全一致。 展开更多
关键词 胸腺肽Α1 细菌脂蛋白 TOLL样受体2 肿瘤坏死因子-Α
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革兰氏阴性菌脂蛋白Lol系统转运蛋白的功能及表面展示分泌机制 被引量:8
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作者 陈国忠 张燕娇 陈师勇 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第12期1769-1777,共9页
细菌脂蛋白是细胞膜的重要组成成分,在革兰氏阴性菌的生理及致病性中扮演着重要的角色。革兰氏阴性菌中已知负责胞内脂蛋白转运的是Lol(Localization of lipoprotein)系统。该系统识别成熟脂蛋白的分泌信号,将外膜脂蛋白转运并定位于细... 细菌脂蛋白是细胞膜的重要组成成分,在革兰氏阴性菌的生理及致病性中扮演着重要的角色。革兰氏阴性菌中已知负责胞内脂蛋白转运的是Lol(Localization of lipoprotein)系统。该系统识别成熟脂蛋白的分泌信号,将外膜脂蛋白转运并定位于细胞外膜内侧。近年来的研究发现,跨细胞外膜进行表面展示的脂蛋白实际上在革兰氏阴性菌中广泛存在,其分泌机制开始成为研究热点。为了对革兰氏阴性菌中脂蛋白分泌机制的研究现状有一个系统全面的了解,本文概述了脂蛋白转运过程中Lol系统5个转运蛋白的功能与保守性、不同细菌中脂蛋白分泌信号的差异以及表面展示脂蛋白可能的分泌机制。 展开更多
关键词 革兰氏阴性菌 细菌脂蛋白 蛋白转运 Lol系统 表面展示
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BLP耐受通过上调MARCO增强巨噬细胞的吞噬能力 被引量:1
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作者 习大林 项静 +6 位作者 蔡军伟 赵舒祺 吉晶晶 李月 苏婷 姜勇 刘靖华 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期914-919,共6页
目的:探讨胶原样结构巨噬细胞受体(MARCO)在细菌脂蛋白(BLP)耐受巨噬细胞吞噬能力增强过程中的作用。方法:分离、分化和培养骨髓来源的巨噬细胞(BMDMs),并制备BLP耐受细胞;利用流式细胞术和荧光显微镜检测并比较BLP耐受与非耐受细胞吞... 目的:探讨胶原样结构巨噬细胞受体(MARCO)在细菌脂蛋白(BLP)耐受巨噬细胞吞噬能力增强过程中的作用。方法:分离、分化和培养骨髓来源的巨噬细胞(BMDMs),并制备BLP耐受细胞;利用流式细胞术和荧光显微镜检测并比较BLP耐受与非耐受细胞吞噬细菌的能力,同时用流式细胞术和qPCR检测BLP耐受对MARCO蛋白及mRNA表达的影响;进一步利用小干扰RNA下调MARCO表达,通过流式细胞术及荧光技术探讨MARCO对BLP耐受巨噬细胞吞噬能力的影响。结果:BLP耐受巨噬细胞吞噬细菌的量较非耐受巨噬细胞明显增加(P<0.05);同时BLP耐受巨噬细胞膜表面MARCO蛋白表达水平较非耐受细胞明显升高,并且在细菌刺激后进一步增加,MARCO的mRNA水平变化与蛋白水平变化一致;下调MARCO表达后,BLP耐受巨噬细胞对细菌的吞噬能力明显下降,提示BLP耐受巨噬细胞吞噬能力增强与巨噬细胞膜表面MARCO蛋白的表达上调有关。结论:BLP耐受通过上调巨噬细胞膜表面MARCO蛋白的表达,增强其对细菌的吞噬能力。 展开更多
关键词 胶原样结构巨噬细胞受体 巨噬细胞 吞噬 细菌脂蛋白 耐受
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Isolation of Prawn(Exopalaemon carinicauda) Lipopolysaccharide and β-1,3-Glucan Binding Protein Gene and Its Expression in Responding to Bacterial and Viral Infections 被引量:1
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作者 GE Qianqian LI Jian +3 位作者 DUAN Yafei LI Jitao SUN Ming ZHAO Fazhen 《Journal of Ocean University of China》 SCIE CAS 2016年第2期288-296,共9页
The pattern recognition proteins (PRPs) play a major role in immune response of crustacean to resist pathogens. In the present study, as one of PRPs, lipopolysaccharide and 13-1, 3-glucan binding protein (LGBP) ge... The pattern recognition proteins (PRPs) play a major role in immune response of crustacean to resist pathogens. In the present study, as one of PRPs, lipopolysaccharide and 13-1, 3-glucan binding protein (LGBP) gene in the ridge tail white prawn (Exopalaemon carinicauda) (EcLGBP) was isolated. The full-length cDNA of EcLGBP was 1338 bp, encoding a polypeptide of 366 amino acid residules. The deduced amino acid sequence of EcLGBP shared high similarities with LGBP and BGBP from other crus- taceans. Some conservative domains were predicted in EcLGBP sequence. EcLGBP constitutively expressed in most tissues at dif- ferent levels, and the highest expression was observed in hepatopancreas. With infection time, the cumulative mortality increased gradually followed by the proliferation of Vibrio parahaemolyticus and white spot syndrome virus (WSSV). The expression of EcLGBP in response to E parahaemolyticus infection was up-regulated in hemocytes and hepatopancreas, and the up-regulation in hepatopancreas was earlier than that in hemocytes. EcLGBP expression after WSSV infection increased at 3 h, then significantly decreased in both hemocytes and hepatopancreas. The results indicated that EcLGBP was involved in the immune defense against bacterial and viral infections. 展开更多
关键词 Exopalaemon carinicauda LGBP WSSV Vibrio parahaemolyticus immune response
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小儿急性细菌性脑膜炎患者脑脊液中肿瘤坏死因子-α水平及临床意义 被引量:5
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作者 崔晓波 陈凤明 《临床医学》 CAS 2005年第4期8-10,共3页
目的 检测小儿急性细菌性脑膜炎患者脑脊液和外周血中肿瘤坏死因子(TNF)-α水平,并探讨其在疾病发生过程中的作用。方法 对28名小儿急性细菌性脑膜炎患者和20 例健康对照儿童,采集外周血清,并行腰椎穿刺收集脑脊液,利用ELISA方法检测... 目的 检测小儿急性细菌性脑膜炎患者脑脊液和外周血中肿瘤坏死因子(TNF)-α水平,并探讨其在疾病发生过程中的作用。方法 对28名小儿急性细菌性脑膜炎患者和20 例健康对照儿童,采集外周血清,并行腰椎穿刺收集脑脊液,利用ELISA方法检测外周血和脑脊液中TNF-α水平。经合理选择抗生素治疗,待临床症状控制后,再继续检测外周血和脑脊液中的TNF-α含量。并观察其在疾病发生过程中的作用。结果 我们发现28例小儿急性细菌性脑膜炎患者脑脊液中TNF-α水平明显比健康对照组增高(P< 0.005)。而两组之间外周血中的TNF-α水平比较差异也有显著性(P< 0.01),表现为急性细菌性脑膜炎患者外周血TNF-α显著升高。经过合理选择抗生素治疗后,急性细菌性脑膜炎患者脑脊液中TNF-α浓度比疾病发作时比较明显下降(P< 0.05),并接近健康对照者。结论 TNF-α在小儿急性细菌性脑膜炎脑脊液中明显升高。可能是由于细菌脂蛋白直接刺激诱导淋巴细胞和单核巨噬细胞分泌TNF-α,并参与脑脊膜炎症过程。 展开更多
关键词 小儿 急性细菌性脑膜炎 脑脊液 肿瘤坏死因子-Α 细菌脂蛋白 巨噬细胞
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