养殖大黄鱼冷藏过程中细菌菌相的变化

采用感官、挥发性盐基氮(TVBN)、菌落总数对大黄鱼(Pseudosciaena crocea)在0℃、5℃冷藏过程中的品质变化特征进行分析,并对细菌菌相进行定性和定量研究。结果表明,冷藏初期、高品质期和货架期终点菌落总数N(CFU/g)的对数值(lgN)分别为5.40±0.17、6.98±0.17、7.38±0.09,TVBN分别为(7.00±1.82)mg.100-1.g-1、(13.00±1.42)mg.100-1.g-1、(29.92±1.75)mg.100-1.g-1。冷藏初期分离获得211株菌株,84.8%是革兰氏阴性菌,出现少量革兰氏阳性菌(6.2%),优势菌群是肠杆菌科细菌(6.6%)、气单胞菌属(14.2%)、不动杆菌属(13.3%)、摩氏杆菌属(11.8%),并出现了一定比例的假单胞菌属、嗜麦芽窄食单胞菌和其他细菌。冷藏过程中细菌菌相逐渐变得单一,腐败希瓦氏菌上升趋势明显。高品质期时,0℃冷藏大黄鱼优势菌群为腐败希瓦氏菌(45.8%)和缺陷短波胞单胞菌(13.6%);5℃冷藏大黄鱼优势菌群为腐败希瓦氏菌(37.9%)和假单胞菌属(15.6%)。货架期终点时,0℃、5℃冷藏大黄鱼优势菌为腐败希瓦氏菌,比例分别为75.5%和59.6%。

肉鸡屠宰加工中减菌处理前后细菌菌相分析

基于16S r DNA V6~V8可变区的聚合酶链式反应-变性梯度凝胶电泳(polymerase chain reaction-denaturing gradient gel electrophoresis,PCR-DGGE)技术分析肉鸡屠宰加工过程中减菌处理前后胴体或产品细菌多样性。在预冷环节前采用50℃、1.5%乳酸溶液对肉鸡胴体冲淋15 s进行减菌处理,采集屠宰加工环节中减菌处理前后的胴体或分割产品表面样品,提取样品中的细菌总DNA,通过16S r DNA V6~V8可变区的PCR扩增,变性梯度凝胶电泳,对PCR扩增片段割胶回收、克隆测序分析减菌前后细菌菌相变化。结果表明,减菌前,胴体清洗环节DGGE条带的数量最多、亮度最强,细菌污染最严重,其次是分割环节,而预冷环节细菌种类及数量最少,污染程度最低;减菌后,各屠宰加工环节细菌种类与数量较减菌前均有所减少,其中胴体清洗环节与分割环节细菌的种类与数量减少量最多,预冷环节细菌的种类及数量最少,不同屠宰加工环节细菌种类并不完全一致;乳杆菌属细菌在整个肉鸡屠宰加工过程中均有出现,与肠杆菌科和假单胞菌属细菌为肉鸡屠宰加工过程中的优势腐败菌。

太平洋牡蛎在-3℃微冻贮藏过程中的品质和细菌菌相变化

以太平洋牡蛎(Crassostrea gigas)为研究对象,对其在-3℃微冻贮藏过程中的感官品质、细菌总数和细菌菌相变化情况进行了分析。结果表明,牡蛎在微冻贮藏过程中,感官评分呈下降的趋势,至第30天时已接近感官拒绝点。细菌总数呈先减少后增加的趋势,第60天贮藏期末时为4.1lg cfu.g-1。牡蛎生鲜样品的初始菌相比较复杂,分离到的菌株分别属于14个属(科),其中假单胞菌(Pseudomonas spp.)和弧菌(Vibrionaceae)为优势菌,比例分别为22%和20%。微冻贮藏过程中,各个菌属的比例有不同程度的变化,其中假单胞菌比例不断增加,成为牡蛎微冻贮藏过程中的优势菌。

臭氧水对牡蛎细菌菌相及货架期的影响

分析了臭氧水对牡蛎细菌菌相及5℃条件下冷贮货架期的影响。结果表明,在臭氧水的作用下,牡蛎体内的初始细菌总数由3.2×103降至1.75×102,货架期由235h延长至283h。采用SHEWAN等提出的海产鱼贝类细菌测定图示对臭氧水处理前后牡蛎体内的菌相变化情况进行了分析,发现臭氧水对牡蛎体内各属细菌的杀灭作用是不同的。通过分析货架期终点时的菌相,发现对照组与臭氧组在腐败初期时的优势菌都是假单胞菌Ⅰ/Ⅱ群(PseudomonasⅠ/Ⅱsp)。

对虾冷藏过程中细菌菌相变化的研究

为进一步揭示虾类的腐败机理,以养殖南美白对虾和海捕鹰爪虾为研究对象,对其贮藏过程中细菌总数(APC)和细菌菌相的变化进行了研究。结果表明,养殖南美白对虾和海捕鹰爪虾的初始细菌总数分别为4.20 Log10 CFU·g-1和3.60 Log10 CFU·g-1,南美白对虾的初始细菌总数明显高于鹰爪虾(P<0.05);贮藏过程中两种对虾细菌总数的变化情况也有所不同,但都是在第4天达到106 CFU·g-1的货架期上限水平。在南美白对虾初始菌相中,革兰氏阴性菌为优势菌,其所占比例较高的主要有Aeromonas(气单胞菌)、Pseudomonas(假单胞菌)和Enterobacteriaceae(肠杆菌),分别占26%、21%和10%;在鹰爪虾初始菌相中,也是革兰氏阴性菌占优势,其中Pseudomonas、Aeromonas和Shewanella(希瓦氏菌)比例较高,分别占28%、16%和12%。在贮藏过程中,两种对虾细菌菌相的变化情况有所不同,南美白对虾的优势腐败菌为Pseudomonas和Aeromonas,而鹰爪虾的优势腐败菌为Pseudomonas和Shewanella。

太平洋牡蛎细菌菌相分析及-20℃冻藏过程中菌相变化

以胶州湾太平洋牡蛎(Crassostrea gigas)为研究对象,分析了生鲜牡蛎的细菌菌相及在-20℃冻藏过程中的菌相变化情况。研究发现,生鲜牡蛎的初始菌相比较复杂,从生鲜牡蛎中分离到的85株细菌分别属于14个属(科),其中Pseudomonas和Vibrionaceae为优势菌,比例分别为22.4%和20.0%。冻藏过程中,各属(科)细菌的数量都呈下降趋势,Flavobacterium、Staphylococcus、Micrococcus、Lactococcus和Lactobacillus由于其较强的耐冻性,成为牡蛎冻藏过程中的优势菌。

不同贮藏温度下低盐腌渍大黄鱼鲜度及细菌菌相变化

为研究低盐腌渍大黄鱼的鲜度变化与其腐败细菌的关系,对低盐腌渍大黄鱼在5、15和25℃下贮藏过程中的感官、总挥发性盐基氮(TVBN)、硫代巴比妥酸(TBA)及菌落总数(TVC)进行了测定,并通过MIDI气相色谱法对其细菌菌相进行分析。结果表明,随着贮藏时间的延长,感官评分降低,TVBN、TBA、TVC显著(p<0.05)增长,5、15和25℃贮藏下的货架期分别为29、14、4 d。货架期终点时,感官评分、TVBN、TBA和TVC分别为(1.05±0.05)、(29.53±1.03)mg/100 g、(0.40±0.06)mg/100 g和(7.60±0.40)lg(cfu/g)。另一方面,大黄鱼中共分离鉴定出14种细菌,其特定腐败菌因贮藏温度变化而有所差异,在5℃贮藏下为彭氏变形杆菌,在15℃和25℃贮藏下为产气肠杆菌。通过比较,发现特定腐败菌比例与TVBN变化存在极显著相关性(p<0.01),而与TBA的相关性并不显著(p>0.05),说明肠杆菌科细菌是通过分解氮类并产生挥发性盐基氮从而导致低盐腌渍大黄鱼在贮藏过程中的腐败。

虾蛄在低温贮藏过程中的细菌菌相分析

分离纯化不同贮藏温度下虾蛄腐败过程中的优势菌株,并利用ATB ExpressionTM仪进行鉴定,以探讨虾蛄贮藏温度、贮藏时间与腐败细菌菌相变化之间的关系,进一步揭示虾蛄的腐败机理。结果表明:虾蛄在三种贮藏温度下,随着贮藏时间的延长,细菌总数不断增加,增长速度依次为:冷藏>冰温>冷冻,贮藏期间均有7种典型菌株出现,有一株未鉴定出,其余6株分别是少动鞘氨醇单胞菌(Sphingomonas paucimobilis)、嗜麦芽窄食单胞菌(Stenotrophomonas maltophilia)、泛菌属(Pantoea)、嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)、温和气单胞菌(Aeromonas sobria)和腐败希瓦菌群(Shewanella putrefaciens)。其中贮藏前期以Sphingomonas paucimobilis和Pantoea为主,冷藏后期的优势腐败菌为Shewanella putrefaciens和Aeromonas hydrophila,冰温和冻藏条件下的优势腐败菌均为Stenotrophomonas maltophilia和Aeromonas hydrophila。

淡腌黄鱼制品品质评价及细菌菌相分析

从生产企业和当地超市随机抽取5批真空包装淡腌黄鱼,对其感官、理化、微生物品质及残存细菌进行定性及定量研究。结果表明:各产品栅栏因子及其强度存在一定差异,水分含量为43.35%～71.50%,Aw为0.90～0.97,pH值为6.35～7.13,盐分含量为2.69%～3.13%。产品品质的差异由栅栏因子种类和强度的不同决定,感官评价均可接受。挥发性盐基氮为13.60～26.33 mg/100g。过氧化值为2.13～3.13 meq/kg,细菌总数为4.56～6.19 lgCFU/g,大肠菌群均低于30 MPN/100g。从5批淡腌黄鱼样品中总共分离得到293株细菌。菌相组成比较单一,主要存在3种菌落,分别为普通变形杆菌(Proteus vulgaris)、侵肺巴斯德菌(Pasteurellapneumotropica)、彭氏变形杆菌(Proteus penneri)。

养殖多宝鱼细菌菌相分析

对新鲜多宝鱼微生物指标进行定性和定量分析。通过对体表的细菌进行分离、纯化后,采用细菌的传统鉴定方法与现代自动化鉴定仪器相结合的方法,对分离纯化所得到的鱼体菌种进行鉴定,完成多宝鱼的细菌菌相分析。结果表明:分离获得的206株细菌,革兰氏阳性菌占菌株总数的18.9%,革兰氏阴性菌占菌株总数的72.3%,其中的优势菌株为金黄色葡萄球菌(12.6%)、液化沙雷氏菌(10.7%)、肠杆菌属(19.4%)和莫拉氏菌属(8.3%)。其中肠杆菌的数量较多,说明养殖鱼所用海水受污染较重,应引起重视,为后期研究冷藏过程中多宝鱼的特定腐败菌及生鲜多宝鱼冷藏工艺的优化和新工艺的开发提供理论依据。

屠宰过程中猪胴体表面及环境的细菌菌相分析

应用传统培养方法结合高通量测序技术分析屠宰分割过程中猪胴体表面微生物污染情况,并对屠宰车间刀具和分割车间接触面进行细菌菌落计数,以确定屠宰分割过程中的关键污染环节。结果表明:测序共得到881458个有效序列,864个可操作分类单元,样品共注释到了22门、33纲、79目、162科、382属和613种的微生物信息。变形菌门(Proteobacteria)、拟杆菌门(Bacteroidota)和厚壁菌门(Firmicutes)为优势菌门,不动杆菌属(Acinetobacter)和气单胞菌属(Aeromonas)为主要的优势菌属。屠宰分割过程中群落多样性的排序为放血>脱毛>分割>开膛>冲淋>冷却,冷却环节胴体表面的微生物多样性最低,分割后有所增加,表明分割是关键污染环节。传统微生物计数与测序的结果一致,从脱毛到冷却环节,猪胴体表面各类微生物数量呈下降趋势,分割后显著上升;分割车间各接触面菌落总数平均为6.11(lg(CFU/cm^(2))),高于屠宰车间刀具(平均为4.86(lg(CFU/cm^(2)))),表明分割车间各接触面是关键污染源,进一步证明猪胴体分割环节为关键污染环节。

肉鸡屠宰加工中减菌处理前后细菌菌相分析

禽产品一直都是人们十分关注的一个问题,因为这关乎于人们的生命财产安全,所以对于禽产品的加工以及销售都有严格的把控,现对肉鸡屠宰加工中减菌处理前后细菌菌相进行简单的分析。从肉鸡屠宰加工中的细菌情况出发,对于肉鸡屠宰加工中间的处理进行详细说明,最后对处理前后细菌菌相进行简单的分析。

PCR-DGGE结合生理生化鉴定分析冷藏金枪鱼细菌菌相变化

以感官、色差、质构、挥发性盐基氮(TVB-N)、K值以及菌落总数、嗜冷菌总数为鲜度指标,研究4℃冷藏金枪鱼贮藏期间品质变化;并结合生理生化鉴定和16S rDNA,应用变性梯度凝胶电泳(DGGE)指纹图谱技术,分析冷藏金枪鱼主要微生物的菌相演替变化规律。结果表明:冷藏期间,金枪鱼感官品质劣变明显,亮度值L*、红度值a*和咀嚼性、硬度均呈下降趋势;贮藏第4天,菌落总数自3.60 lg (CFU/g)升至4.66 lg (CFU/g),而嗜冷菌数与菌落总数之间的差异减小;贮藏第6天,TVB-N值与K值分别由初始值9.62 mg/100 g和3.22%上升至25.00 mg/100 g和23.00%;不同冷藏时期的金枪鱼中微生物群落结构具有相似性,样品初始菌相中主要优势菌为噬氢菌、不动杆菌、假单胞菌、解糖假苍白杆菌、Boseaeneae、鞘氨醇单胞菌和油短波单胞菌。随着贮藏时间的延长,微生物多样性降低,至货架期终点第6天,红游动菌、约氏不动杆菌、假单胞菌、解糖假苍白杆菌成为主要优势腐败菌。

南美白对虾冰温下菌相变化

通过测定南美白对虾的冰点,确定了南美白对虾冰温贮藏温度;分析了冰温贮藏条件下南美白对虾细菌总数的变化情况,并通过生化实验分离鉴定了生鲜状态和达到一级鲜度时南美白对虾的细菌菌相。结果表明,南美白对虾冰点为(-1.4±0.1)℃,冰温贮藏3d后细菌总数达到1.03×105,达到一级鲜度的细菌总数极限值;4 d后细菌总数达到1.75×106,到达货架期终点。生鲜南美白对虾的优势菌为Aeromonas spp.,Chromobacterium spp.和Photobacterium spp.;冰温贮藏条件下达到一级鲜度时,南美白对虾的特定腐败菌(specific spoilage organisms,SSO)为Shewanella spp.,Flavobacte-rium spp.和Acinobacter spp.。

罗非鱼冷藏过程细菌种群的变化

对养殖尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)0～10℃贮藏过程中感官、化学、微生物品质和细菌种群消长研究表明,初始样品挥发性盐基氮为(8.08±0.29)mg/(100g),菌落总数(CFU/g)的对数值为4.79±0.60;细菌种群复杂,种类繁多,分离到570株菌,其中80.5%为革兰氏阴性菌,13.6%为革兰氏阳性菌,优势菌是假单胞菌(Pseudomonas spp.)(36.5%)、肠杆菌科细菌(Enterobacteriaceae)(14.2%)和气单胞菌(Aeromonas spp.)(15.3%),同时检出了一定比例的不动杆菌和其他细菌。冷藏过程中肠杆菌科细菌、气单胞菌等生长受到抑制,细菌菌相组成逐渐变得单一,适应低温环境下革兰氏阴性菌比例不断增加,0℃、5℃、10℃贮藏至货架期终点时,阴性菌的比例分别达到86.4%、88.9%、100.0%;假单胞菌增殖显著,比例分别达到80.7%、68.1%、60.0%,可确认其为0～10℃贮藏罗非鱼的优势腐败菌。假单胞菌的种类变化趋势显示,优势顺序分别为荧光假单胞菌(P.uorescens)、恶臭假单胞菌(P.putida)、铜绿假单胞菌(P.aeruginosa)、产碱假单胞菌(P.alcaligenes),0℃、5℃、10℃贮藏至货架期终点时,假单胞菌中荧光假单胞菌分别占52.1%、53.1%、59.3%,可确认其为最优势种群。

冷藏鲳鱼贮藏期间的细菌种群变化

分析了鲳鱼(Pampus argenteus)冷藏期间的感官、pH值、微生物指标及主要细菌种群变化。研究表明,初始样品pH值为7.217±0.015,菌落总数(CFU/g)的对数值为3.967±0.012;初始细菌种类较多,其中45.92%为革兰氏阴性菌,54.08%为革兰氏阳性菌,优势菌为腐生葡萄球菌(Staphylococcus saprophyticus 28.81%)、松鼠葡萄球菌(Staphylococcus sciuri 15.38%)、嗜冷杆菌(Psychrobacter spp.12.09%)、草莓假单胞菌(Pseudomonas fragi 9.02%)、荧光假单胞菌(Pseudomonas fluorescens 8.53%)与腐败希瓦氏菌(Shewanella putrefaciens 6.39%),同时检出一定比例的成团肠杆菌、微杆菌与嗜根库克菌。冷藏过程中,腐生葡萄球菌与松鼠葡萄球菌等生长受到抑制,细菌菌相组成逐渐单一,适应低温环境条件的革兰氏阴性菌比例逐渐增加,在贮藏的第3、5、7天至货架期终点(pH值为8.057±0.005,菌落总数(CFU/g)的对数值为9.137±0.032)时,阴性菌比例分别达到83.82%、95.86%、96.88%与93.57%。其中,假单胞菌与腐败希瓦氏菌增长显著,在贮藏末期比例为45.71%与33.57%,荧光假单胞菌(35.00%)明显多于草莓假单胞菌(10.71%)。

南美白对虾在低温贮藏过程中的品质及菌相变化分析

测定南美白对虾在不同低温贮藏过程中的感官品质、挥发性盐基氮(total volatile base nitrogen,TVB-N)含量和菌落总数变化,并分离纯化各贮藏温度条件下的腐败菌株,利用ATB ExpressionTM仪进行鉴定,以明确南美白对虾在不同低温贮藏过程中的菌相变化,进一步揭示其腐败机理。结果表明:在冷藏、冰温贮藏、冻藏过程中,南美白对虾的货架期分别为3、8 d和56 d,到货架期终点时的菌落总数分别为6.76、6.82、5.91(lg(CFU/g)),TVB-N含量均值分别为27.06、29.96、27.45 mg/100 g;南美白对虾初始菌相中的优势菌株为Chryseobacterium meningosepticum(22.0%)和Pseudomonas sp.(18.4%)。到货架期终点,冷藏条件下的优势菌株为Shewanella putrefaciens(35.1%)和Pseudomonas sp.(24.3%);冰温贮藏条件下的优势菌株为Shewanella putrefaciens(32.0%)和Chryseobacterium meningosepticum(27.0%);冻藏条件下的优势菌株为Aeromonas sobria(30.5%)和Photobacterium damselae(25.0%)。

真空冷藏鲢鱼片品质变化及细菌菌群分析

采用真空和空气包装鲢鱼片,研究在(4±1)℃冷藏条件下鲢鱼片的品质变化和贮藏终点细菌菌相.结果表明,真空包装能有效抑制需氧菌的生长并延缓TVB-N的增加,非真空包装的冷藏货架终点为10d,真空包装货架期延长到20d;从菌相分析可以看出,Pseudomonas和Aeromonas为非真空包装冷藏终点的优势菌,而真空包装可以有效抑制Pseudomonas和Aeromonas,但在冷藏终点出现大量产酸菌,如Lactobacillus和Weissella.

冷藏鲍鱼品质变化及细菌菌群分析

通过感官评价、化学指标评价及细菌分离鉴定方法,研究(4±1)℃条件下冷藏鲍鱼的品质变化和贮藏终点细菌菌群.结果表明,冷藏条件下,冷藏鲍鱼的感官评分随冷藏时间的增加呈现下降趋势,挥发性盐基氮(TVB-N)值和鲍鱼中的菌落总数随冷藏时间的增加呈上升趋势,冷藏鲍鱼的货架期可设定为8 d;货架期终点菌群结构复杂,其中假单胞菌属、希瓦氏菌属和弧菌属为货架期终点鲍鱼的腐败优势菌.本研究可为鲍鱼保鲜技术的开发研究提供参考依据.

仿刺参体表微生物的菌相分析

采用3种培养基对大连仿刺参体表微生物进行分离,并通过细菌形态、生理生化特性和16SrD-NA分子生物学相结合的方法对分离纯化的细菌进行鉴定,从而了解大连仿刺参体表的菌群组成。结果表明,从仿刺参体表分离纯化了105株细菌,鉴定出10种不同的菌属分别为交替假单胞菌属(Pseud-oalteromonas)、希瓦氏菌属(Shewanella)、假单胞菌属(Pseudomonas)、弧菌属(Vibrio)、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis),变形菌属(Proteobacterium)、Alteromonadacea、不动杆菌属(Acinetobacter)、解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloiquefaciens),腐生葡萄球菌(Staphylococcus saprophyticus),其中交替假单胞菌属和弧菌属分别占分离菌株的23.8%和22.9%。