样本数量和终质量浓度对DNA混合池PCR扩增质量和测序效果的影响

为筛选适宜的DNA混合池法,采用两因素交叉分组设计,以混合样本数量(20、60和150个)和终质量浓度(50、100和150ng/μL)为组合因子,分析不同混合池对PCR扩增质量及SNPs检出率的影响。结果表明:在同一混合样本数量下,以终质量浓度100ng/μL建立的DNA混合池扩增的PCR产物纯度和OD260/OD280均优于50ng/μL,但对测序结果无显著影响;以终质量浓度150ng/μL建立的DNA混合池扩增的PCR产物杂带较多,不符合测序要求。在同一混合样本终质量浓度下,混合样本数越多,SNPs检出率越高。综上,从PCR扩增质量、SNPs检出率和试验成本来分析,以混合样本150个、终质量浓度100ng/μL组合建立的DNA混合池效果最好。

多粘类芽胞杆菌DN-1防治水稻纹枯病初步研究

多粘类芽胞杆菌是一种能防治多种病原真菌病害的生防细菌.本文通过抑菌率测定、盆栽试验、田间防效试验首次研究不同浓度多粘类芽胞杆菌DN-1对水稻纹枯病的防治效果,试验结果表明当终浓度在5～120亿芽孢/L（667 m^2用水量50 L）时,对水稻纹枯病室内抑菌率达62.21％～90.54％;盆栽试验防效达46.19％～77.11％;药后12、24 d,2013年田间防效分别达43.43％～75.70％、59.01％～79.64％;2014年田间防效均分别达50.72％～77.26％、53.65％～77.29％;DN-1终浓度在120亿芽孢/L时两年间田间防治效果与井冈霉素A 60 g.a.i/hm^2处理相当,低于噻呋酰胺60 g.a.i/hm^2处理.

DuCV和GPV与DEV三重PCR检测方法的建立及应用

根据GenBank中的序列,合成针对鸭圆环病毒(DuCV)REP基因、鹅细小病毒(GPV)NS1基因、鸭肠炎病毒(DEV)UL6基因的3对特异性引物,以病毒的克隆质粒作为模板,进行退火温度、引物终浓度的优化,建立一种能同时鉴别DuCV、GPV、DEV的三重PCR检测方法,并检验该方法的特异性、敏感性和重复性。结果显示:试验所建立的三重PCR检测方法的最适退火温度为58.5℃,引物DuCV REP、GPV NS1、DEV UL6的最适终浓度分别为0.9、0.6、0.7μmol/L;该方法能够同时扩增出DuCV、GPV和DEV的特异性片段,而不能扩增出NDV、RA、AIV、DHV和TUMV,表明该方法特异性强;该方法对质粒DuCV、GPV和DEV模板的最低检测量分别为1、100、10 fg,表明该方法敏感性好;运用该方法对DuCV+GPV+DEV、DuCV+GPV、GPV+DEV、DuCV+DEV、DuCV、GPV、DEV进行检测,均能扩增出与预期一致的特异性片段,表明该方法重复性好;运用该方法对42份临床样本进行检测,其检出率分别为26.19%、30.95%和19.05%,与单一PCR的检出结果一致,表明该方法能适用于临床样本的检测。试验建立的方法具有快速、简便、特异性强、敏感性好、重复性好等特点,可用于DuCV、GPV和DEV临床样本混合感染的快速诊断及鉴别诊断。

荧光增白剂对伊朗核型多角体病毒分离株对棉铃虫幼虫的杀虫活性的增效作用(英文)

在室内条件下调查了几种荧光增白剂对采自伊朗East-Azarbaijan的棉铃虫Helicoverpa armigera核型多角体病毒两个地域株(EAZ-I和EAZ-II)对棉铃虫2龄幼虫的杀虫活性,以提高这两个地域株的生物学活性。结果表明:与EAZ-II相比,EAZ-I的杀虫活性强,其对棉铃虫幼虫的LC50和LT50值低(分别为1.98×103OB/mL和122.7h)。本研究所用的所有荧光增白剂均能有效增强病毒的生物学活性,特别是0.2%的TinopalF-3543与EAZ-I混用对棉铃虫幼虫的LC50值最低(5.16×102OB/mL),与病毒单独应用相比活性增强了3.84倍。幼虫致死的相对速率测定结果表明,荧光增白剂提高了菌株的LT50值,其中TinopalF-3543的效果最佳。这些结果说明,在害虫综合治理中影响围食膜通透性的荧光增白剂与核型多角体病毒制剂混用是一种可供选择的重要方法。

4种葡萄糖保护剂用于血糖测定的效果

通过在室温下对正常人血液标本加与不加葡萄糖保护剂的实验观察,确定了碘醋酸钠、氟化钠、D-甘露糖(D-M)、柠檬酸混合试剂等4种葡萄糖保护剂的最佳终浓度分别为0.75、5.0、10.0、10.0mg/ml。对D-M保护剂用2种血糖测定方法进行了比较,葡萄糖氧化酶法和电极法分别为Y-1.03X-11.47 γ=0.999,Y=1.07X-4.78 γ=0.998;D-M对其它生化指标测定值影响最小。认为D-M作为血中葡萄糖的保护剂较为理想。

葡萄酒涩感定量评价方法的建立

葡萄酒是以新鲜葡萄或葡萄汁作为原料,经发酵酿制而成,属于健康酒精饮品。具有保护心肌,软化心血管,美容及助消化的功效。当前,由于葡萄酒市场的扩大,使得葡萄酒品质难以区分,因此如何评价及鉴定成品葡萄酒的品质是相当重要的。葡萄酒涩感涩感是评价葡萄酒质量的重要指标之一,葡萄酒中涩感来源于酒体中单宁酸与人体口腔唾液中蛋白的结合而产生的收敛性。当前,对葡萄酒涩感的评价主要是通过品酒师的感官品评。

ABTS底物检测漆酶活力条件和算法比较——以长白山两种林分土壤为例

选取长白山针叶林与阔叶林A层土壤,以0.25~12.5 mmol L^(-1)不同终浓度2,2'-连氮-双(3-乙基苯并噻唑-6-磺酸)(ABTS)为底物,考察漆酶氧化产物在0~32、0~54和0~95 min吸光值线性变化率,并藉此获得3个不同时间段线性拟合漆酶活力值;以一级反应动力学方程拟合最大吸光值增幅及相应平均反应时间,计算吸光值平均变化率,并藉此获得非线性拟合漆酶活力值。当ABTS浓度为7.5 mmol L^(-1)时,反应体系吸光值增幅和酶活最大。阔叶林反应体系吸光值增量显著大于针叶林,前者在0~300 min持续增加,且不同算法间漆酶活力差异不显著;后者仅在0~21 min显著变化,且非线性拟合漆酶活力值显著高于线性拟合。非线性拟合测算的漆酶活力变异系数整体上低于线性拟合。因此,森林土壤漆酶活力测定应重视酶底物浓度、反应时间、算法和林分条件变化带来的显著影响。