大鼠“延髓内脏带”向终纹床核投射的儿茶酚胺能神经元对内脏伤害性刺激的FOS表达

ＨＲＰ注入大鼠一侧终纹床核，存活４８小时，再将１％Ｆｏｒｍａｌｉｎ导入胃内造成内脏伤害刺激，存活２小时后，灌注取材．对延髓切片进行ＨＲＰ是色和抗ＦＯＳ（ＡＢＣ法）、抗ＴＨ（ＰＡＰ法）免疫组化反应的三重反应．在光镜下发现“延髓内脏带”内出现七种阳性细胞，包括ＨＲＰ阳性、ＴＨ和ＦＯＳ免疫反应阳性；ＴＨ／ＨＲＰ、ＦＯＳ／ＨＲＰ、ＦＯＳ／ＴＨ等双重阳性以及ＦＯＳ／ＨＲＰ／ＴＨ三重反应阳性细胞．这些阳性细胞主要见于内脏带背内侧部的孤束核，其次是腹外侧区的腹外侧网状核（ＶＬＲ），中间部较少．ＴＨ和ＦＯＳ免疫阳性细胞以及ＴＨ／ＦＯＳ双重阳性细胞为双侧分布，ＨＲＰ／ＦＯＳ、ＨＲＰ／ＴＨ以及ＨＲＰ／ＴＨ／ＦＯＳ阳性细胞也为双侧分布但以注射区同侧为多。

大鼠纹状体边缘区与杏仁核和终纹床核之间相互联系的免疫组织化学研究

为了解大鼠纹状体内的神经活性物质与边缘系统重要结构杏仁核和终纹床核内相应神经活性物质之间的关系。对大鼠脑的连续冠状切片进行了 P物质、降钙素基因相关肽、亮氨酸 -脑啡肽、胆囊收缩素和神经元型一氧化氮合酶等的免疫细胞化学反应 ( ABC法 )。结果证明 :P物质、降钙素基因相关肽和胆囊收缩素在纹状体中主要分布在边缘区 ;亮氨酸 -脑啡肽主要分布在苍白球 ,其次分布在边缘区 ;神经元型一氧化氮合酶则主要分布在尾壳核和边缘区。上述神经活性物质同时也集中分布在杏仁核和终纹床核 ,而且边缘区内的这些神经活性物质与杏仁核和终纹床核内的相同物质存在着纤维联系。本研究结果说明 :边缘区与边缘系统之间存在着神经化学的相互关系 ,边缘区可能属于边缘系统的一部分。

戊四氮诱发大鼠全身强直-阵挛性癫痫发作诱导终纹床核c-fos癌基因表达

本文用Fos癌蛋白抗体免疫组化法详细研究了戊四氮诱发大鼠全身强直-阵挛性癫痫发作诱导终纹床核c-fos癌基因表达的动态分布,结果如下:腹腔内注入戊四氮50mg/kg后0.5h,前腹区梭形核出现低密度的Fos免疫阳性(Fos-ir)细胞核标记;注射戊四氮后3h,前腹区和后部腹外侧区域均有较高密度的Fos-ir标记,前外区和前背区的密度则较低,后部背内侧区域未见Fos-ir标记;注射戊四氮后6h,终纹床核各核团和区域均出现较高密度的Fos-ir标记,其中,前部的密度高于后部、腹侧区域的密度高于背侧区域。上述终纹床核的Fos-ir标记出现的先后顺序及波及范围很可能反映了戊四氮诱发大鼠全身强直-阵挛性癫痫发作累及终纹床核的顺序和范围。

大鼠终纹床核卵圆核及其邻近区域的传出纤维联系——WGA-HRP顺行追踪法研究

本实验选用150～260g的雄性Sprague-Dawley大鼠13只,把WGA-HRP/HRP混合水溶液加压注入一侧终纹床核群前外侧区的卵圆核区域,冰冻切片,TMB法呈色后,在中枢看到顺行标记终末最密集的部位是:下丘脑后部外侧区、中央杏仁核、中脑中央灰质、臂旁核、三叉神经中脑核、蓝斑;比较多的部位是视前区、下丘脑室周区、弓状核、丘脑中线核群、内侧纽核、腹侧背盖核、脚桥背盖核、中脑网状结构、中缝背核以及迷走神经复合体;在线形中缝核、中央上核、腹侧背盖区、黑质,以及延髓中介核,也看到少量标记终末。本工作对卵圆核的传出纤维联系,进行了较全面的观察。

大鼠终纹床核卵圆核的传入联系——FG和WGA-HRP逆行追踪法研究

实验选用雄性Sprague-Dawley大鼠24只,分2组进行。第1组11只,将2～4％的荧光金(fluoro-gold,FG)水溶液加压或电泳导入一侧终纹床核群卵圆核,检查中枢不同区域逆行标记细胞的分布。第2组13只,将WGA-HRP/HRP混合水溶液注入一侧卵圆核,检查逆行标记细胞在不同脑区的分布。比较两组结果,发现所标记的神经元分布范围和趋势大致相同;但FG标记的神经元突起远较HRP标记长,并在对侧某些区域出现标记细胞。这表明作为一种逆行束路示踪剂,FG较WGA-HRP敏感性高。逆行标记细胞主要见于梨状皮质、纹底、海马下托、视前区、斜角带水平支、大细胞视前区、腹侧苍白球;杏仁体的中央核、内侧核、皮质核;丘脑的中线核群、束旁核、室旁核有散在的标记细胞;下丘脑的前区、外侧区、背侧区和腹内核、弓状核、前乳头体核有数量不等的标记细胞;中脑的中央灰质腹侧半、中缝背核、脚桥被盖核、中缝核群和腹侧被盖区、黑质致密带、脚间核、束间核;脑桥的臂旁核、蓝斑、三叉神经中脑核、A_5区、中缝核群;延髓的孤束核/迷走神经背核和C_1/A_1等区域均可看到一定数量的标记细胞。本工作首次较系统地观察了大鼠卵圓核的传入纤维联系。

大鼠下丘脑室旁核与终纹床核及前额叶皮质间纤维联系的研究

分别注射辣根过氧化物酶(HRP)入大鼠的PVN和BNST,用组织化学的方法在确定注射部位准确的情况下,在PVN、BNST及PFC观察被标记的神经元或轴突末梢,探讨大鼠下丘脑室旁核(PVN)与终纹床核(BNST)及前额叶皮质间(PFC)之间是否存在投射通路;将HRP注射到PVN后,在同侧的BNST见标记的细胞体,在PFC未见标记的细胞体或轴突末梢;将HRP注射到BNST后,在同侧的PVN见标记的轴突末梢,在PFC未见标记的细胞体或轴突末梢。大鼠BNST有神经纤维投射到PVN,PFC与PVN及BNST之间没有直接的或只有极少量的纤维联系,在机体面临威胁性情境时,BNST可能激活HPA轴引发生理和行为反应,PFC是否通过与PVN或BNST的直接或间接的纤维投射实现其调节功能值得关注。

大鼠中脑导水管周围灰质向终纹床核投射的5－羟色胺能神经元对内脏伤害性刺激的FOS表达

本文将ＨＲＰ注入一侧终纹床核，又将Ｆｏｒｍａｌｉｎ导入胃内造成损伤，通过ＨＲＰ呈色、抗ＦＯＳ、抗５－ＨＴ免疫组化染色，在中脑导水管周围灰质发现七种不同标记或免疫反应阳性细胞，即ＨＲＰ逆行标记、５－ＨＴ样阳性和ＦＯＳ样阳性细胞，ＨＲＰ／５－ＨＴ、５－ＨＴ／ＦＯＳ和ＨＲＰ／ＦＯＳ双重标记或免疫反应阳性细胞以及ＨＲＰ／５－ＨＴ／ＦＯＳ三重标记或免疫反应阳性细胞．ＨＲＰ／５－ＨＴ／ＦＯＳ细胞数量很少，出现于中脑导水管周围灰质腹外侧区。

GABA免疫阳性神经元和纤维在大鼠终纹床核的分布

用ABC法研究GABA免疫阳性神经元和纤维在大鼠终纹床核的分布,结果如下;大量GABA阳性神经元分布于终纹床核前外区和前背区背侧部及前腹区和后部腹侧部,其余区域阳性细胞较少,除前外区卵圆形核和囊旁核、前腹区纹旁核和梭形核及后部主核内,中至高密度的阳性细胞限于这些核团范围内,其余区域的细胞散在分布。GABA阳性纤维主要集中于前外区、前背区背侧部、前腹区梭形核和纹旁核及后部背侧区域。终纹内的大量阳性纤维,主要分布于其腹外和腹内角。结合文献报道,上述结果提示,卵圆形核经终纹投射至同侧杏仁中央核,以及杏仁中央核和内侧核经终纹投射至同侧卵圆形核和主核的纤维,均可能为GABA能;其中,卵圆形核向杏仁中央核的GABA能投射,可能在癫痫的发生和发展中起重要作用。

大鼠终纹床核卵圆核内CRF与NT的共存——相邻切片法研究

实验选用170～210g的雄性Sprague-Dawley大鼠,侧脑室注入秋水仙素80～120μg,48小时后经左心室灌流固定,恒冷箱连续切片,厚5μm,每两个相邻的切片相对应,融表在两组载片上,分别用促肾上腺皮质激素释放因子抗血清(Anti-CRF)和神经降压素抗血清(Anti-NT)孵育,ABC或PAP免疫组织化学反应后,DAB呈色,检查、比较配对切片上免疫反应阳性细胞的位置和形态。结果,在相邻切片上看到卵圆核内有数量不等的位置相同、形态相似的免疫反应阳性细胞,即CRF-NT双标记或两种神经肽共存神经元。本组实验首次发现卵圆核内有CRF-NT共存神经元。

吗啡依赖大鼠长期戒断后的觅药行为与终纹床核Fos表达

目的研究吗啡依赖大鼠长期停药后的觅药行为和终纹床核(BNST)各亚区的Fos蛋白表达。方法大鼠皮下注射吗啡使其成瘾,停药2月后进行条件性位置偏爱试验,并检测终纹床核背外侧区(BNST-DL)和终纹床核腹外侧区(BNST-VL)的Fos蛋白表达。结果吗啡处理组大鼠的地点偏爱明显强于对照组,吗啡处理组在BNST-VL的Fos蛋白表达显著高于对照组,在BNST-DL的Fos蛋白水平却低于对照组。结论地点偏爱行为与吗啡相关环境刺激引BNST-VL的激活有关,预先吗啡处理可影响这种关系。

大鼠终纹床核5-羟色胺免疫阳性神经纤维及终支的分布

本文在鞠躬和Swanson有关大鼠终纹床核细胞构筑学研究的基础上,用ABC或PAP免疫组化结合葡萄糖氧化酶-DAB-硫酸镍铵呈色法,对大鼠终纹床核内5-HT免疫阳性神经纤维和终支(简称5-HT纤维)的分布进行了研究。结果如下:终纹床核内的5-HT纤维由较粗纤维、细纤维和膨体型纤维组成。除卵圆形核、囊旁核、梭形核、后背核和主核含3种纤维及终纹床核纹延部仅有膨体型纤维外,终纹床核其余区域中5-HT纤维为细纤维和膨体型纤维的混合。在前部,以其腹内侧部尾侧的5-HT纤维密度最高,腹外侧部及背内侧部次之,背外侧部吻侧最低;在后部,则以腹外侧部密度最高,背外侧部次之,内侧部最低。上述结果表明,终纹床核内各区间5-HT纤维的分布密度和纤维特征的差别基本上与终纹床核各区的个体发生顺序吻合。此外,本文还讨论了终纹床枝内5-HT纤维与5-HT受体不匹配现象。

终纹床核

终纹床核是边缘系统的重要结构之一,它参与内分泌、内脏活动及性行为等多种生理功能的调节。终纹床核各个组成部分的形态构筑、纤维联系和免疫组织化学特征均不相同。

大鼠终纹床核向结合臂旁核的投射 Ⅲ.神经降压肽、促肾上腺皮质激素释放因子肽能通路研究

用荧光金逆行束路追踪结合免疫荧光双标记技术及HRP逆行束路追踪结合免疫细胞化学双标记技术证明,在大鼠终纹床核投射至结合臂旁核的神经元中,位于前外侧区卵圆核及其腹侧邻近区中的部分为神经降压肽及促肾上腺皮质激素释放因子免疫反应阳性,双标记细胞分别约占这个部位逆行标记细胞总数的40％及20％;在前腹侧区的梭形核及大细胞核中,部分为促肾上腺皮质激素释放因子免疫反应阳性。

电刺激终纹床核群对大鼠痛阈的影响

本实验用辐射热作为伤害性刺激，以浅麻状态大鼠甩尾反射潜伏期为痛阈指标，观察了电刺激终纹床核群对大鼠痛阈的影响。结果表明，电刺激终纹床核群使大鼠甩尾反射潜伏期明显延长；这种作用可被ＰＡＧ内微量注入γ－氨基丁酸所阻断。提示终纹床核群参与了痛觉调制，其下行抑制通路主要是经过ＰＡＧ中继的。

大鼠孤束核内含calbindin D-28K的内脏伤害性神经元向终纹床核的投射—荧光金标记结合免疫荧光技术研究

既往的研究证明孤束核和终纹床核参与内脏伤害性信息的传递和调控。Calbindin D-2 8K是钙结合蛋白家族的成员 ,为神经细胞特别是投射神经元的选择性标记物。应用荧光金逆行追踪和免疫荧光技术相结合的方法 ,对给予内脏伤害性刺激后大鼠孤束核内 FOS的表达并显示 Calbindin D-2 8K免疫阳性的神经元向终纹床核的投射进行了研究。结果显示 :将荧光金注入一侧终纹床核外侧部后 ,孤束核中尾段内双侧出现荧光金逆行标记细胞 ,注射区同侧占优势 :孤束核的相同平面可观察到双侧等量分布的免疫反应阳性的 Calbindin D-2 8K和 FOS细胞 :三种阳性细胞的分布有明显的重叠现象。在其重叠分布区可见荧光金 /Calbindin D-2 8K、FOS/Calbindin D-2 8K、荧光金 /FOS双重阳性以及荧光金 /Calbindin D-2 8K/FOS三重阳性细胞。除 FOS/Cal-bindin D-2 8K双重阳性细胞为双侧分布外 ,荧光金 /Calbindin D-2 8K、荧光金 /FOS双重阳性以及荧光金 /Calbindin D-2 8K/F OS三重阳性细胞的出现均以注射区同侧为主。荧光金 /Calbindin D-2 8K、F OS/Calbindin D-2 8K双重阳性和荧光金 /Calbindin D-2 8K/F OS三重阳性神经元占孤束核内 Calbindin D-2 8K免疫阳性神经元总数的百分比分别为 2 .79%、15 .3 %和 2 .5 6% ;

大鼠终纹床核5-羟色胺免疫阳性神经纤维和终支的起源

本文用WGA-HRP逆行束路追踪结合免疫酶组织化学双标记法,对大鼠终纹床核5-羟色胺(5-HT)免疫阳性神经纤维和终支(5-HT纤维)的起源进行了研究。结果如下,终纹床核主要区域的5-HT纤维,除主要起源于中缝背核和中央上核外,尚有部分纤维源自B_9组细胞群和尾侧线形核;在这些发出纤维支配终纹床核的中缝核神经元中,约有1/3为5-HT免疫阳性且主要为同侧;除少数区域外,这些核群内所有类型的5-HT免疫阳性神经元均有部分发出纤维投射到终纹床核。

TH免疫阳性神经成分在大鼠终纹床核的分布

本文在Ju和Swanson有关大鼠终纹床核细胞构筑的最新研究基础上,用ABC免疫组化结合葡萄糖氧化酶-DAB-硫酸镍铵呈邑法洋细研究了酪氨酸羟化酶免疫阳性神经成分在大鼠终纹床核的分布,结果如下;1.终纹床核中的酪氨酸羟化酶阳性神经元主要集中于前腹区纹旁核和腹核,总数约10个左右的阳性神经元还分布于前背区,后者尚未见文献报道;2.终纹床核各部均有酪氨酸羟化酶阳性神经纤维和终支,以前外区和前腹区密度最高,前背区次之,后部较低。结合文献报道得到下述推测;上述酪氨酸羟化酶阳性神经元可能为多巴胺能;前外区和前背区的酪氨酸羟化酶阳性纤维可能主要由多巴胺能纤维组成,而前腹区的酪氨酸羟化酶阳性纤维则可能主要为去甲肾上腺素能和肾上腺素能。

大鼠终纹床核内血管活性肠多肽免疫阳性物质的分布

根据最近鞠躬等对终纹床核的划分,本文用ABC、PAP法研究血管活性肠多肽免疫阳性物质在终纹床核内的分布。发现终纹床核内血管活性肠多肽免疫阳性终末较多,分布较集中。以卵圆核的周边部及囊旁核密度最高;前侧区的前连合上方及卵圆核的中央次之;梭形核、前腹区的吻侧水平面含中等密度阳性终末;主核、束间核、后背核内无免疫阳性物质。此外,终纹床核内可见许多沿血管壁走行的阳性纤维。血管活性肠多肽免疫阳性细胞多分布在免疫阳性终末较稀少的区域,以卵圆核中央密度最大,前背区尾侧水平最多。细胞多为中小型梭形细胞,也有三角形及多极形的细胞。

大鼠终纹床核向结合臂旁核的投射 Ⅱ.HRP、FG逆行追踪研究

用HRP、荧光金逆行束路追踪技术对大鼠终纹床核向结合臂旁核的投射进行了研究。结果显示,投射至结合臂旁核的终纹床核神经元几乎全部位于终纹床核前部,后部罕见。在终纹床核前部中投射神经元位于前背区、前外侧区及前腹侧区,其中以前外侧区中的细胞数目最多。标记细胞主要出现于BST的卵圆核及其腹侧邻近区、菱形核、大细胞核和纹旁核等处。

大鼠终纹床核向结合臂旁核的投射 Ⅰ.HRP、PHA-L顺行追踪研究

应用HRP、PHA-L顺行标记技术对大鼠终纹床核向结合臂旁核的投射进行了研究。在尾侧结合臂旁核,投射终支分布于臂旁外侧核的腹外侧亚核及臂旁内侧核,在腹外侧亚核与臂旁内侧核之间的结合臂中也可见标记纤维;在中吻部结合臂旁核标记终支分布于臂旁外侧核的外外侧亚核、背外侧亚核、中央外侧亚核、腹外侧亚核及内外侧亚核;在结合臂背内侧端背侧可见许多标记终支分布;在臂旁内侧核亦见标记终支。