苦参碱对LPS激活的小胶质细胞炎症因子释放和CX3CR1蛋白表达的影响

目的探讨苦参碱对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)激活的小胶质细胞炎症因子释放和CX3CR1(CX3C chemokine receptor 1)蛋白表达的影响。方法选择小胶质N9细胞系,将细胞分为Control组、苦参碱(10μmol·L^(-1))组、LPS(300 ng·mL^(-1))组、LPS+苦参碱(0.1、0.3、1.0、3.0、10.0μmol·L^(-1))组以及LPS+米诺环素(minocycline,MINO)(30μmol·L^(-1))组。MTT法检测各组细胞的细胞存活率;ELISA法测定活性氧(ROS)和炎症因子白细胞介素-6(IL-6)、前列腺素E2(PGE2)的表达;免疫荧光法测定M1/M2极化标记物CD32与CD206的表达;Western blot与免疫荧光检测CX3CR1的表达。结果MTT实验结果显示:0~100μmol·L^(-1)的苦参碱以及0~10μg·mL^(-1)的LPS对N9细胞活力无影响(P=0.9828,P=0.7107);LPS刺激亦未降低经苦参碱预处理的N9细胞的细胞存活率(P=0.7445)。ELISA实验结果显示:与Control组相比,LPS组的ROS、IL-6、PGE2水平均升高(P均<0.01);与LPS组相比,LPS+苦参碱组ROS、IL-6、PGE2水平均下降(P均<0.01)。免疫荧光结果显示:与Control组相比,LPS组CD32的相对荧光强度升高,CD206相对荧光强度降低(P均<0.01);与LPS组相比,LPS+苦参碱组CD32相对荧光强度下降,CD206相对荧光强度升高(P均<0.001)。Western blot与免疫荧光检测结果显示:与Control组相比,LPS组的CX3CR1水平降低(P<0.05);与LPS组相比,LPS+苦参碱组CX3CR1水平升高(P<0.05)。结论苦参碱能够抑制LPS诱导的小胶质细胞炎症因子释放,抑制小胶质细胞的M1型极化,促进小胶质细胞向M2表型转化,并上调CX3CR1的表达。