经典Wnt信号通路与子宫肌瘤

随着中国女性育龄期的延迟,健康查体和医学超声技术的进步,越来越多育龄期女性被发现患有子宫肌瘤。既往有症状的子宫肌瘤最主要的治疗方法是手术治疗,但子宫切除术和子宫肌瘤剔除术均会对育龄期女性生活质量产生不同程度的影响。因此,探讨子宫肌瘤发病机制,寻求新的治疗方法,对于罹患子宫肌瘤女性的诊治具有重要意义。经典Wnt信号通路是调节子宫肌瘤细胞增殖、凋亡的关键途径,参与子宫肌瘤的发生、发展。因此,探讨经典Wnt信号通路在子宫肌瘤中的作用机制对疾病的诊断、治疗和患者的预后具有重要的临床意义。

BMP2信号通路与经典Wnt信号通路及相互交联对成骨分化的调控

在以间充质干细胞为代表的具有成骨分化潜能的细胞中,多条信号传导通路及其构成的动态调控网络参与调控其成骨分化过程。其中BMP2和经典Wnt信号通路在此过程中的作用日益受到关注。国内外研究表明,BMP2和经典Wnt信号通路在调控靶细胞成骨分化过程中伴有彼此通路中的关键分子的表达水平和功能活性的改变,并在一定条件下表现出对成骨分化特异性标志物的协同和拮抗调控。成骨增殖分化过程是一个动态过程,在成骨分化的不同阶段,分子通路的作用不同,相互之间的调节也动态变化的,研究BMP2和经典Wnt信号通路在成骨分化过程中的相互调节作用,对于指导治疗骨质疏松和骨折有重要的作用,本文就BMP2和经典Wnt信号通路对靶细胞成骨分化的调控作用以及在此过程中两条信号通路之间的交联作一简要综述。

经典Wnt信号通路调控对大鼠心肌梗死后心肌愈合的影响

目的探讨经典Wnt信号通路对大鼠心肌梗死后心肌组织愈合的影响。方法建立大鼠急性心肌梗死模型,采用免疫组化和实时荧光定量PCR技术检测经典Wnt信号通路中的两个关键信号分子Wnt-1、β-catenin蛋白及mRNA在对照组(C组)、梗死组(I组)和非梗死组(N组)各时间点心肌组织中的时空表达;同时观察心肌梗死后心肌组织的病理学变化。结果各时间点心肌组织中Wnt-1、β-catenin的表达水平在C组与N组中无显著性差异。I组4天、7天、10天、14天心肌组织中Wnt-1、β-catenin的蛋白表达水平较C组、N组明显增高(P<0.01);I组1天、4天、7天、10天、14天心肌组织中Wnt-1、β-catenin的mRNA表达水平较C组、N组明显增高(P<0.01);且动态变化与心肌梗死后心肌的愈合过程相平行。通过病理形态学与免疫组化分析发现肌纤维母细胞、内皮细胞在发生梗死的大鼠心脏中增殖和迁移的过程中伴随着Wnt-1、β-catenin的高表达。结论经典Wnt信号通路参与心肌梗死后心肌组织的修复和愈合过程;并对肌纤维母细胞和血管内皮细胞的增殖、迁移起一定的调控作用。

经典Wnt信号通路与精神分裂症

精神分裂症是一种重性精神病性障碍,病因和机制尚未明确,但目前普遍认为是由多个微效基因协同并与环境因素共同作用导致的疾病。由多基因组成的信号通路及通路间的相互作用在精神分裂症发病中可能起重要作用。与中枢神经系统发育和功能维持密切相关的经典Wnt信号通路近年来受到较多关注。许多针对Wnt信号通路与精神分裂症的关联研究均表明,精神分裂症患者细胞内Wnt信号通路异常。文章就目前针对经典Wnt信号通路在精神分裂症发病中潜在作用的相关研究作一综述。

经典Wnt信号通路与弥漫大B细胞淋巴瘤

弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)的发病机制虽未完全阐明,但研究显示与信号通路表达异常有关,如经典Wnt通路。在DLBCL发病机制的研究中观察到经典Wnt通路的重要下游因子β-catenin的表达和核内定位。同时证据显示经典Wnt通路不仅与DLBCL发病机制有关,还和DLBCL临床分期密切相关,经典Wnt通路通路有可能成为治疗DLBCL潜在的有用靶点。

辛伐他汀对大鼠成骨细胞经典Wnt信号通路相关因子表达的影响

目的观察不同浓度、不同时间辛伐他汀对体外培养的大鼠成骨细胞经典Wnt通路Wnt3a、LRP5和β-catenin的m RNA表达的影响,探讨辛伐他汀抗骨质疏松的可能机制。方法用酶消化法培养大鼠颅骨成骨细胞,采用倒置相差显微镜及碱性磷酸酶染色和茜素红染色观察和鉴定成骨细胞。用浓度分别为10^-8mol/L、10-7mol/L、10^-6mol/L和10^-5mol/L的辛伐他汀干预大鼠成骨细胞24 h、48 h和72 h,并设无辛伐他汀为对照组,采用RT-PCR检测经典Wnt信号通路Wnt3a、LRP5和β-catenin的m RNA表达情况。结果镜下观察及染色结果均显示具有成骨细胞典型特征。RT-PCR结果显示：10^-5mol/L辛伐他汀组干预24 h后较对照组Wnt3a[（2.09±0.12）vs（1.82±0.09）]、LRP5[（1.42±0.07）vs（1.29±0.07）]和β-catenin[（1.10±0.06）vs（0.95±0.06）]的m RNA表达显著增加;干预48 h和72 h后各组Wnt3a（F=37.78和96.52,P=0.000）、LRP5（F=10.32,P=0.001和F=22.02,P=0.000）的m RNA表达随着辛伐他汀浓度的增大而显著增加,β-catenin的m RNA表达较对照组显著增加（F=6.67和21.90,P〈0.05）;10^-8-10^-5mol/L辛伐他汀各组中分别干预24 h、48 h和72 h,随着干预时间延长Wnt3a和LRP5的m RNA表达均增加;干预48 h与24 h比较,β-catenin的m RNA表达差异无统计学意义[（1.08±0.09）vs（1.02±0.06）,P〉0.05],而干预72 h较24 h显著增加[（1.23±0.10）vs（1.02±0.06）,P〈0.05],且辛伐他汀浓度为10^-6mol/L和10^-5mol/L干预72 h较48 h显著增加[（1.32±0.07）vs（1.11±0.05）和（1.47±0.08）vs（1.19±0.04）,P〈0.05]。结论辛伐他汀可促进体外培养大鼠成骨细胞经典Wnt信号通路Wnt3a、LRP5和β-catenin的m RNA表达。

黄芪桂枝五物汤不同剂量治疗糖尿病周围神经病变量效关系及对经典Wnt信号通路的影响

目的观察《金匮要略》黄芪桂枝五物汤原方不同给药剂量治疗糖尿病周围神经病变气虚血瘀证的疗效及对经典Wnt信号通路的影响。方法将2018年4月—2020年12月嘉定区中医医院收治的120例糖尿病周围神经病变患者随机分为甲钴胺组、中药低剂量组、中药正常剂量组、中药高剂量组,每组30例。甲钴胺组给予甲钴胺口服,中药正常剂量组给予原方剂量黄芪桂枝五物汤口服,中药低、高剂量组分别给予0.5倍和1.5倍原方剂量黄芪桂枝五物汤口服,4组均治疗12周。观察比较4组治疗前后糖代谢指标[空腹血糖(FPG)、餐后2 h血糖(2hPG)、糖化血红蛋白(HbA1c)]、多伦多临床神经病变评分量表(TCSS)评分、中医症状积分、腓总神经和正中神经的运动神经传导速度(MNVC)及感觉神经传导速度(SNVC)、血清中经典Wnt信号通路关键分子(β-catenin、cyclinD1、c-myc、DKK1)mRNA表达量,统计4组临床疗效及达到显效、有效的时间。结果治疗后,中药正常剂量组和中药高剂量组FPG、2hPG、HbA1c、TCSS评分、中医症状积分及血清中DKK1 mRNA表达量均明显低于甲钴胺组(P均<0.05),血清中β-catenin、cyclinD1、c-myc mRNA表达量均明显高于甲钴胺组(P均<0.05),腓总神经和正中神经MNVC、SNVC均明显快于甲钴胺组(P均<0.05);中药正常剂量组和中药高剂量组总有效率分别为90.0%(27/30)和93.3%(28/30),均明显高于甲钴胺组的63.3%(19/30),且达到显效、有效的时间均明显短于甲钴胺组,差异均有统计学意义(P均<0.05)。结论黄芪桂枝五物汤原方剂量和1.5倍原方剂量治疗糖尿病周围神经病变气虚血瘀证疗效优于甲钴胺,且疗效呈剂量依赖性提高,其作用机制可能与激活经典Wnt信号通路有关。

经典Wnt信号通路在骨肉瘤中作用的研究进展

骨肉瘤是骨组织中最常见的恶性肿瘤,恶性程度高,易发生于儿童和青少年。Wnt信号通路是一条含有高度保守的碱基序列的信号通路,它调控细胞极性、增殖、分化,胚胎发育,组织稳态及细胞癌变,肿瘤细胞侵袭转移等众多生物过程。经典Wnt信号通路与骨肉瘤的发生、发展关系密切,在骨肉瘤细胞增殖、侵袭转移等方面的重要调控作用为骨肉瘤发病、转移机制以及化疗耐药方面的研究提供了重要方向和方法。

经典Wnt信号通路与牙周膜干细胞成骨分化

牙周炎是口腔最常见的疾病之一,累及牙周支持组织,随着疾病的进展将引起附着丧失、牙周袋形成、牙槽骨吸收,最终导致牙齿松动脱落.因被牙周炎破坏吸收的牙槽骨自愈能力十分有限,所以牙周炎的治疗目标是在彻底清除菌斑生物膜的基础上,争取获得较多的牙周组织再生.牙周膜干细胞作为最适宜进行牙周组织再生的细胞,被广泛研究.Wnt信号通路分为经典Wnt通路和非经典Wnt信号通路,为十分复杂而高度保守的通路传导途径.该通路与牙周膜干细胞成骨分化的关系十分密切,牙周膜干细胞的成骨分化又对牙周组织再生有重要意义.该文对经典Wnt信号通路与牙周膜干细胞成骨分化的研究概况作一综述.

经典Wnt信号通路在骨肉瘤中的作用机制

随着社会医疗水平的进步,骨肉瘤患者5年生存率提高,已被证实与身高、家族遗传病史、辐射、病毒等相关,但其发病机制至今尚不明确,晚期骨肉瘤患者仍存在远处转移的问题,没有得到有效控制。而经典Wnt信号通路在骨肉瘤的凋亡、化疗耐药性及侵袭转移等方面均起着重要的调控作用,通过抑制经典Wnt信号通路的活性,可以减缓骨肉瘤的生长和侵袭。因此,探讨经典Wnt信号通路在骨肉瘤中的作用机制对疾病的诊断、治疗和患者的预后具有重要的临床意义。

经典Wnt信号通路与肝脏关系的研究进展

经典Wnt信号转导通路的暂时激活在肝脏发育、出生后肝脏正常生长、肝细胞再生、肝小叶分带、肝脏代谢和氧化应激反应过程中发挥着重要作用,研究显示这条通路异常持续激活与多种慢性肝病的进展显著相关.近年来针对经典的Wnt信号通路在肝脏病理生理过程中的作用作了大量的研究,并取得一些进展,本文对此作一综述.

经典Wnt信号通路中β-catenin在细胞核内外分布的调控机制及潜在治疗靶点的研究进展

经典Wnt信号通路在肿瘤细胞的增殖分化中发挥重要作用,该信号通路中的核心蛋白分子β-catenin介导信号从细胞质传递到细胞核,并在核内参与组成转录复合体,激活下游靶基因转录。β-catenin进入细胞核内是其激活下游转录因子的重要前提,其出入细胞核的方式尚未完全解析。β-catenin入核方式主要为利用经典入核途径关键蛋白直接入核及通过“分子伴侣”协助入核,而出核方式主要为依赖染色体维持区域1(chromosome maintenance region 1,CRM1)的出核途径。细胞膜上的钙黏蛋白、细胞质内的降解复合体相关蛋白及细胞核内的转录复合体相关蛋白等均可导致β-catenin滞留,从而影响其在细胞核内外的分布。在不改变细胞内β-catenin总量的情况下,通过减少β-catenin入核及核内滞留作用、增加其出核及核外滞留作用,从而阻断Wnt/β-catenin信号通路,也是治疗经典Wnt信号通路相关疾病的有效途径。本文总结近年来关于β-catenin在细胞核内外分布状态的调控机制,为进一步研究治疗经典Wnt信号通路相关疾病提供潜在靶点及新思路。

益骨汤含药血清通过经典Wnt信号通路促进成骨细胞增殖分化的研究

目的:在经典wnt信号通路抑制剂大鼠Dickkopf相关蛋白1(DKK1)的干预下,观察益骨汤含药血清对成骨细胞的经典Wnt信号通路的影响,探究益骨汤治疗骨质疏松的作用机制,为临床使用补肾活血中药防治骨质疏松症提供实验依据。方法:将40只雌性SD大鼠随机分成2组,益骨汤水提液组和空白对照组,连续灌胃10天,获取含药血清。从乳鼠颅盖骨中分离培养成骨细胞,实验分为4组,即A组(益骨汤含药血清组)、B组(DKK1组)、C组(DKK1+益骨汤含药血清组)、D组(空白血清对照组)。进行细胞增殖MTT检测、碱性磷酸酶活性检测,RT-PCR检测经典Wnt/β-catenin通路中β-链蛋白(β-catenin)、低密度脂蛋白受体相关蛋白5(LRP-5)、DKK1基因的表达情况。结果:根据MTT法动态观察各组成骨细胞增殖,发现成骨细胞增殖呈规律性:48 h至72 h成骨细胞呈对数增长期,96 h后细胞增殖逐渐受到抑制。同一时间点与B组比较,A、C、D各组成骨细胞的增殖和ALP活性显著较高,差异均有统计学意义(P<0.05)。同一时间点与D组比较,A组成骨细胞的增殖和ALP活性显著较高,差异均有统计学意义(P<0.05)。与B组比较,A、C、D组β-catenin mRNA、LRP-5 mRNA、TCF mRNA的表达均明显升高,DKK1 mRNA的表达明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。与D组比较,A组β-catenin mRNA、LRP-5 mRNA、TCF mRNA的表达均明显升高,DKK1 mRNA的表达明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:益骨汤含药血清可能是通过抑制DKK1的高表达,从而上调经典Wnt/β-catenin信号中β-catenin、LRP-5、TCF基因的表达,达到促进成骨细胞增殖,起到抗骨质疏松作用。

经典Wnt信号通路与肿瘤免疫耐受的研究进展

经典Wnt信号通路是调控胚胎发育、组织稳态和损伤修复的重要通路,在进化过程中高度保守,但其信号转导异常也与恶性肿瘤的发生、进展、耐药及复发等密切相关。经典Wnt信号通路过度激活通过影响免疫细胞诱导肿瘤免疫耐受并抑制T细胞浸润到肿瘤微环境,破坏正常的免疫监测,导致恶性肿瘤患者对免疫检查点抑制剂产生耐药。经典Wnt信号通路调节剂能够增强肿瘤免疫治疗的效果。因此,进一步阐明经典Wnt信号通路在肿瘤免疫耐受发生中的作用及机制将为恶性肿瘤的治疗提供更多策略。

经典Wnt信号通路在放射性肠损伤中的研究进展

放射治疗(Radiation therapy,RT)是肿瘤常用的治疗手段,是多种放射源的重要组成部分。RT通过杀死肿瘤细胞为肿瘤治疗做出了重大贡献。然而,肠道等快速更新的组织是人体对辐射最敏感的器官,在腹腔内或盆腔恶性肿瘤治疗过程中,不可避免受到照射,随后表现为放射性肠损伤。目前,广为接受的辐射损伤防护假说涉及经典Wnt信号通路(即Wnt/β-catenin),激活Wnt/β-catenin信号通路能保护肠道上皮免受辐射损伤,其潜在的机制包括诱导肠道隐窝干细胞再生、清除ROS等。本文就肠道放射性损伤特点、经典Wnt信号通路及其在放射性肠损伤中的研究进展作一综述。

MiR-125a-5p靶向APC激活经典WNT信号通路促进hiPSCs分化为多巴胺能神经前体细胞

目的通过调节miR-125a-5p的表达实现人诱导性多能干细胞(hiPSCs)向多巴胺(DA)能神经前体细胞及DA能神经元的高效转化。方法应用MicroRNAs高通量测序与分析,miR-125a-5p的筛选、靶基因(APC)的预测与验证;miR-125a-5p前体miR-125a慢病毒载体的构建与包装,miR-125a-5p过表达hiPSCs细胞株的构建、筛选及其向多DA能神经前体细胞与DA能神经元的诱导分化;免疫细胞化学、实时定量PCR(qRT-PCR)及蛋白印迹(WB)法检测miR-125a-5p过表达hiPSCs与对照hiPSCs向DA能神经前体细胞及DA能神经元诱导分化过程中神经前体细胞标志物Nestin、底板细胞标志物Foxa2、DA能神经前体细胞标志物En1、DA能神经前体细胞分选标志物Corin、神经元标志物Tuj1及DA能神经元标志物TH的表达。结果 MiR-125a-5p在hiPSCs向DA能神经前体细胞及神经元诱导分化过程中的表达呈递增趋势,miR-125a-5p靶向调节经典WNT信号通路关键因子APC,稳定过表达miR-125a-5p的hiPSCs细胞株能向DA能神经前体细胞及DA能神经元分化,其诱导分化效率与对照hiPSCs相比在神经前体细胞(NPCs)阶段FOXA2、EN1、CORIN的表达明显增高,神经元阶段TH、DAT和Nurr1的表达明显增高,提示过表达miR-125a-5p的hiPSCs具有更好的向DA能神经前体细胞及DA能神经元的诱导分化潜能。结论 MiR-125a-5p能通过靶向下调APC的表达激活经典WNT信号通路活性,促进hiPSCs向DA能神经前体细胞及DA能神经元的诱导分化。

经典Wnt信号通路对少突胶质前体细胞生长发育的调控

少突胶质前体细胞(OPCs)经历增殖、迁移、分化为成熟少突胶质细胞(OLs),包绕轴突形成髓鞘,维持轴突正常功能及神经冲动传导。OPCs的生长发育受多种信号分子及通路的影响,其中经典Wnt信号通路与OPCs正常及病理状态下的增殖、迁移和分化过程密切相关,通路中相关分子的变化导致该通路的活化均会影响OPCs的发育,进而影响髓鞘的形成与修复再生。

经典Wnt信号通路中卷曲蛋白7在胃癌中的作用

卷曲蛋白7(FZD7)是卷曲蛋白受体(FZDs)家族成员之一。FZD7参与Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号转导,并与不同的Wnt配体、FZDs和共受体结合。FZD7在进化过程中是高度保守的,在各种生物、组织和人类疾病中都有表达。据报道FZD7在调节正常胃肠组织稳态及胃癌生长、转移、肿瘤干细胞维持和化疗耐药性中发挥关键作用,可能是一个潜在的治疗靶点。然而,FZD7在胃癌中的确切机制尚未阐明。本文主要综述目前FZD7在胃癌发生发展中的分子机制以及靶向FZD7药物的研究进展。

经典Wnt信号通路在大鼠脑缺血后血管新生中的作用

目的研究缺血性脑卒中大鼠缺血周边脑组织的经典Wnt信号通路活性及干预该通路活性对缺血周边血管新生的影响。方法随机将50只雄性Wistar大鼠分为4组:假手术组(Sham组,n=10),脑缺血对照组(MCAO组,n=20),氯化锂干预组(Li Cl组,n=10),DKK1干预组(DKK1组,n=10)。免疫印迹法检测经典Wnt信号通路成分,FITC-dextran检测血管密度,多普勒血流仪检测血流量。结果脑缺血1 d后,与Sham组相比,MCAO组缺血周边脑组织细胞核蛋白及细胞浆蛋白中β-catenin表达水平显著下降(P<0.05),7 d时明显恢复,14 d时接近正常水平。与MCAO组相比,Li Cl组β-catenin表达水平及p-GSK-3β/GSK-3β比值提高(P<0.05),并且缺血周边血管密度及血流量增加(P<0.05);DKK1组变化相反,β-catenin表达水平及p-GSK-3β/GSK-3β比值降低(P<0.05),血管密度及血流量下降(P<0.05)。结论经典Wnt信号通路参与调节缺血性脑卒中后缺血周边的血管新生。

非经典Wnt信号通路在2型糖尿病大鼠非酒精性脂肪性肝炎发生与发展中的作用

探讨非经典Wnt信号通路在2型糖尿病大鼠非酒精幽旨肪性肝炎（NASH）发生与发展中的作用。方法将雄性SD大鼠24只随机等分为对照组和模型组。对照组喂以基础饲料，模型组喂以高糖高脂饲料。4周后，模型组注射链脲佐菌素（30mg／kg）诱导2型糖尿病（T2DM）。各组继续对应饲料喂养至12周，模型组成功造模为T2DM-NASH模型。取血清及肝脏组织。检测血清葡萄糖、ALT、ASR水平;苏木素-伊红及油红O染色观察肝脏病理改变;免疫组织化学、Western blot检测肝脏Wnt5a、NF-1cB P65蛋白的表达；实时PCR定量检测肝脏Wnt5a mRNA、NF-KBp65 mRNA的表达，分别与对照组比较。数据以均数士标准差（x±s）表示，采用t检验和直线相关与回归分析进行统计学分析。结果对照组和T2DM-NASH组中，血清葡萄糖分别为（6．25±1．28）mmol／L和（31．21±0．86）mmol／L，t=-36．204；血清ALT分别为（31．00±3．69）U／L和（301．50±8．62）U／L，f=-99．94;血清AST分别为（77．58±1．83）U／L和（344．75±1．82）U/L，t=-358．85，P值均〈0．01。苏木素-伊红及油红O染色显示肝细胞脂肪变性及肝组织炎症。免疫组织化学结果显示对照组和T2DM-NASH组的WntSa表达量（积分吸光度）分别为1．15FA士577．45和4．04E5士2．42FA，f=-56．24;NF-kB p65表达量（积分吸光度）分别为1．28FA±1．59E3和4．21E5±1．68E4，t=-83．895，P值均〈0．01。Westeem blot结果显示T2DM-NASH组WntSa蛋白相对表达量和对照组相比为4．21±0．34比1．00±0．25，t=17．030;T2DM—NASH组NF—KB P65蛋白相对表达量和对照组相比为4．93±0．76比1．00±0．13，f=11．438，P值均〈0．01。实时定量PCR结果显示T2DM-NASH组Wnt5a mRNA相对表达量和对照组相比为9．53±0．64比1．04±0．35，f=20．165，P〈0．011;T2DM-NASH组NF-KBp65 mRNA表达量和对照组相比为0．60±0．13比0．74±0．10，t=-1．802，P=0．125。相关性分析结果表明T2DM-NASH组肝组织WntSa蛋白表达水平分别与血清ALT、AST水平存在正相关性（r=0．64，P〈0．05；r=0．59，P〈0．05）。肝组织WntSa与NF-1cBp65蛋白表达存在正相关性（r=0．58，p〈0．05）。结论Wnt5a可能通过激活NF-kB介导炎症反应参与到T2DM合并NASH的发生与发展。