利用月经血建立的经血源性基质干细胞系

背景:经血源性基质干细胞被证实是一种新型的成体干细胞,目前国内关于其系统的建系方法报道极少。目的:建立经血源性基质干细胞系,并鉴定其表型和多能性。方法:收集健康成年女性的月经血,通过密度梯度离心法分离出经血源性基质干细胞进行培养,观察细胞的形态及增殖特性;采用CCK-8法检测各株细胞的增殖能力,定期收集细胞进行核型分析,采用流式细胞术检测细胞表面抗原CD34,CD38,CD44,CD45,CD73,CD90,CD105,Oct-4的表达,对细胞进行体外成脂和成骨诱导分化并鉴定。结果与结论:成功从6名健康志愿者的经血中分离获得4株经血源性基质干细胞系。细胞呈现典型的梭状结构,具有46,XX核型,能在体外稳定迅速增殖,传代后大约48 h进入对数生长期,表达CD44,CD73,CD90,CD105及Oct-4,不表达CD38,CD34,CD45;成脂诱导22 d后油红O染色阳性,成骨诱导2周后茜素红染色阳性。实验表明经血源性基质干细胞具备扩增迅速、核型稳定、多潜能性等优点,通过建立经血源性基质干细胞系,为进一步的临床治疗应用以及科学研究奠定了基础。

自体血清与胎牛血清对经血源性基质干细胞增殖的影响

目的 探讨自体血清替代胎牛血清培养经血源性基质干细胞的可行性,从而为疾病的个体化治疗提供参考.方法 收集20~30岁健康育龄女性的月经血,通过密度梯度离心法分离出经血源性基质干细胞,分别均匀地接种于含10%胎牛血清的DMEM/F-12培养体系和含10%自体血清的DMEM/F-12培养体系中,观察细胞的形态及增殖特性,并采用CCK-8法绘制生长曲线.比较两种培养体系培养的经血源性基质干细胞的成骨及成脂能力.结果 两种培养体系下,经血源性基质干细胞均呈典型的短小梭形生长,均可形成集落.成人自体血清组培养的经血源性基质干细胞在增殖速度上接近于胎牛血清组,CCK-8生长曲线的吸光度值差异无统计学意义（P〉0.05）.结论 两种培养体系下的经血源性基质干细胞均具有成骨及成脂能力.成人自体血清组培养的经血源性基质干细胞的形态和增殖能力接近于胎牛血清组,并维持了经血源性基质干细胞的基本生物学特性,可以替代胎牛血清用于经血源性基质干细胞的扩增培养,作为一种无异种血清的培养体系,为大量扩增经血源性基质干细胞用于开展临床治疗提供了较为安全的选择.