孕早期流产1012例绒毛细胞培养及遗传学分析

为了探讨早期自然流产与胎儿染色体异常的关系，本院经过长时间的探索发现绒毛细胞长期培养法和染色体制备方法简单，并且能获得足够分析的中期染色体。本文采用上述方法对早期流产患者进行绒毛细胞遗传学分析，报告如下。

绒毛细胞培养和核型分析在早期胚胎停育中的应用与评价

目的：探讨绒毛细胞培养和染色体核型分析在早期胚胎停育中的应用价值。方法：通过对109例孕周为6～14周早期胚胎停育孕妇绒毛组织进行细胞培养，分析其染色体核型。结果：101例绒毛细胞培养成功，成功率为92．7％；其中没有细菌感染和用药保胎的新鲜绒毛细胞培养成功率达100％，培养时间短，平均7天。在8例培养失败的标本中，除1例因细菌污染外，其余7例均为绒毛不新鲜或无活力。发现异常核型47例（阳性率为46．5％），其中16-三体8例，占17．0％；69，XXN和45，XO各6例，占12．8％；10-三体4例，占8．51％；22-三体和21-三体各3例，占6．38％。结论：绒毛细胞的培养与绒毛标本的新鲜程度、胚胎停育的时间及保胎时间等有密切关系，通过采用相关措施，尽量提高早期胚胎停育患者绒毛组织细胞培养和染色体核型分析的成功率，以提高出生人口的素质。

孕早期58例绒毛细胞培养及染色体核型分析

目的探讨孕早期绒毛细胞培养染色体核型分析在产前诊断中的应用。方法对2012年3月至2016年12月在我院产科门诊就诊的58例具有产前诊断指征的孕妇,在B超引导下经腹抽取绒毛,用培养法进行绒毛细胞培养及G显带染色体核型分析;结果 58例绒毛标本,培养成功58例,培养成功率100%;共检出染色体异常核型30例,异常率为51.72%;其中11例45,X;6例18三体;4例21三体;1例47,XXX;1例92,XXXX;1例47,XN,+mar嵌合体;1例X染色体部分重复嵌合体;2例染色体缺失;1例平衡易位。结论绒毛细胞培养及染色体核型分析方法简便可靠,成功率高,能在孕早期及时发现胎儿染色体疾病,为产前诊断提供帮助。

早期胚胎停育的高危因素及其绒毛细胞培养和染色体核型分析

目的分析早期胚胎停育的高危因素及其绒毛细胞培养和染色体核型,探讨胚胎停育的病因,为临床诊断和治疗提供参考。方法选择2014年8月-2017年10月在固原市隆德县医院就诊的早期胚胎停育患者172例为研究组,选择同期胚胎正常发育孕妇140例为对照组,对比两组临床资料,对胚胎停育的高危因素进行分析;并对172例早期胚胎停育患者绒毛细胞进行培养,分析其染色体核型。结果影响早期胚胎停育的高危因素包括高龄、孕前超重、有胚胎停育史、有孕前患病史、忧郁/焦虑等。172例早期胚胎停育患者绒毛细胞培养成功161例(93.60%),培养失败11例(6.40%)。培养成功的161例患者中检出异常核型65例,其中常染色体三体30例占异常核型的46.15%,三倍体14例占21.54%,四倍体4例占6.15%,嵌合体6例占9.23%,性染色体单体8例占12.31%,结构异常3例占4.62%;检出正常核型96例,其中男性核型44例占45.83%,女性核型52例占54.17%。结论高龄、孕前超重、有胚胎停育史、有孕前患病史、严重忧郁/焦虑等均为早期胚胎停育的高危因素,染色体胚胎异常是早期胚胎停育主要的发病原因,对绒毛细胞进行染色体核型分析有利于分析胚胎停育的病因。

血清代用品在绒毛膜细胞培养制备染色体中的应用

本文首次报道自行研制的血清代用品 (SS)替代小牛血清用于绒毛膜细胞培养制备染色体。通过 2 0 0例与常规方法的对比研究 ,结果表明 ,用血清代用品 (SS)替代大部分小牛血清进行绒毛膜细胞培养 ,其培养成功率及可分析的分裂相数与常规法比较均无显著性差异 (P >0 0 5 )。

214例孕早期流产患者绒毛细胞培养及其遗传学分析

目的探讨绒毛细胞染色体异常与孕早期自然流产间的临床关系。方法对214例妊娠早期自然流产患者绒毛细胞进行培养,染色体制备及核型分析。结果进行绒毛细胞染色体培养214例,培养成功201例,总体成功率达93.9%,可用于染色体核型分析报告198例,分析成功率为92.5%。共分析绒毛标本198例,其中检出正常核型101例,占51.0%(101/198);异常核型97例,占49.0%(97/198)。异常核型中以数目异常为主,其中常染色体三体最多见,61例(63%);三倍体13例(13%);性染色体异常9例(9%);结构异常8例(8%)。结论胚胎染色体异常时导致妊娠早期自然流产的重要因素之一,临床上开展流产绒毛染色体检查有利于判断本次流产原因,合理指导下次妊娠。

46例早期自然流产绒毛组织的改良培养及染色体核型分析

目的探讨改良的绒毛细胞培养方法在分析早期自然流产原因中的应用价值。方法应用长期培养法联合旧培养基内的活细胞（组织块）传代培养及4＂C保存旧培养基内种细胞的方法，对46例早期自然流产绒毛组织进行细胞培养、染色体制备及核型分析。结果46例自然流产绒毛细胞全部培养成功。共检出异常核型30例（65．2％），以非整倍体多见，共16例，占异常核型的53．3％[其中，常染色体三体8例，双重三体2例，性染色体单体（45，X）6例]，多倍体6例，嵌合体4例，结构异常4例；正常核型16例（34．8％），男、女性核型各8例。结论采用高效改良绒毛细胞培养法可显著提高绒毛细胞培养成功率。胚胎染色体异常是早期自然流产的主要原因，常规检查早期流产胚胎绒毛的染色体有利于查明流产原因，合理指导下次妊娠。

染色体微阵列用于胚胎停育及自然流产原因的筛查

孕早期胚胎停育及自然流产的发生率超过1%[1],严重影响患者的身心健康。辅助生殖技术(ART)虽然大大提高了妊娠率,但60%以上受术者发生自然流产和胚胎停育,查明原因对提高妊娠率及预防自然流产意义重要。尽管造成胚胎停育及自然流产的因素很多且存在诸多争议,但染色体异常是多数学者认可的最主要原因[2]。染色体异常检测常采用绒毛细胞培养染色体G显带核型分析技术,但分辨率和敏感度较低,漏检率和误检率较高。

南宁地区313例绒毛细胞染色体核型分析

目的探讨通过绒毛细胞培养及染色体核型分析,为产前遗传咨询提供可靠的实验室依据。方法对2006年至2011年间在我院遗传门诊就诊的313例有产前诊断指征的妊娠妇女,在超声的引导下进行腹穿绒毛活检,获取绒毛组织进行培养并进行染色体制备分析。结果 313例标本中共300例培养成功,13例培养失败,成功率为95.8%;其中核型正常288例,异常36例。结论绒毛细胞培养技术稳定可靠,能早期明确染色体异常,为产前遗传咨询提供依据,降低出生缺陷的发生。

染色体核型分析与荧光原位杂交用于胚胎停育患者病因学诊断

目的探讨染色体核型分析技术及荧光原位杂交(FISH)技术两种检测方法在胚胎停育患者胎儿病因学诊断中的应用。方法对78例胚胎停育患者清宫后的妊娠组织行细胞培养后做染色体核型分析;若培养失败,采用FISH进行分析。结果78例胚胎停育患者的妊娠组织,染色体培养且成功用于核型分析者38例,其中检出正常核型23例、异常核型15例、常染色体三体8例、三倍体1例、性染色体异常3例、结构异常3例。40例染色体培养失败,采取FISH检测,检出正常染色体15例,异常染色体25例,其中常染色体三体占19例、三倍体2例、45XO 4例。结论胚胎停育的主要原因是胚胎染色体异常导致。通过染色体核型分析及FISH检测对胚胎停育的妊娠组织进行分析,两种方法对异常核型和常染色体数目异常的检出有明显差异,对胚胎坏死时间长的妊娠组织,FISH成功率更高。临床上应结合两种检测方法用于胚胎停育的原因分析,为下次妊娠提出指导意见。

高通量测序技术与传统染色体核型分析技术在稽留流产遗传学分析中的比较

目的比较传统染色体核型分析技术和高通量测序技术在稽留流产遗传学分析中的应用,探讨高通量测序在临床遗传学分析中的价值。方法采用绒毛细胞培养及染色体核型分析检测稽留流产绒毛组织1530例;采用高通量测序和生物信息分析技术检测稽留流产绒毛组织例。比较两种方法的一致性及差异。结果 (1)传统染色体核型分析技术:1530例稽留流产绒毛培养成功率为93.5%(1431/1530);在1431例核型分析结果中,染色体正常占44.4%(636/1431);染色体数目异常占53.9%(771/1431)(其中含嵌合体29例);染色体结构异常占1.7%(24/1431)。(2)高通量测序技术:25例稽留流产绒毛样本全部检测成功,成功率100%;染色体正常占28%(7/25);染色体数目异常占56%(14/25)。染色体结构异常(染色体片段的缺失和重复)占16%(4/25)。(3)通过两种检测方法的比较,发现高通量测序技术具有更高的染色体结构异常检出率。结论高通量测序技术用于诊断稽留流产绒毛组织是可行的,与传统染色体核型分析技术相比成功率高,且对染色体结构异常的诊断有较高的敏感性,可以作为传统染色体核型分析技术的补充方法。

涂向东 副主任技师

涂向东 福州总医院实验科副主任技师。第三军医大学检验本科毕业。从事临床检验工作二十多年。对临床医学检验工作有较丰富的实验经验。在临床细胞遗传和分子生物技术有特长，近年来开展了骨髓细胞染色体培养、羊水细胞培养、绒毛细胞培养、脐带血培养染色体核型分析等多项特殊检验及免疫不育的相关检测。在省内率先开展了Y染色体微缺失分子诊断。