稽留流产患者血清、绒毛与蜕膜组织中SLIT2的表达及临床意义

目的:探讨稽留流产患者血清、绒毛与蜕膜组织中神经导向因子2(SLIT2)表达水平及临床意义。方法:收集2020年10月-2023年10月本院收治的196例稽留流产患者临床资料为稽留流产组,正常早孕终止妊娠者120例为对照组。酶联免疫吸附法检测血清SLIT2水平,实时荧光定量聚合酶链式反应检测绒毛组织、蜕膜组织中SLIT2 mRNA表达水平;采用Pearson相关分析探讨稽留流产不同标本中SLIT2表达与血清hCG、VEGF、IL-6水平的相关性,受试者工作特性(ROC)曲线评估不同标本中SLIT2对稽留流产的诊断价值。结果:稽留流产组血清SLIT2水平(6.04±1.12ng/ml)、绒毛(0.62±0.16)及蜕膜组织(0.45±0.14)SLIT2 mRNA表达均低于对照组(9.15±1.86ng/ml、1.86±0.33、1.54±0.27),血清绒毛膜促性腺激素(hCG)(41.16±5.23MIU/mD)、血管内皮生长因子(VEGF)(91.05±9.26pg/ml)水平低于对照组(86.54±8.39MIU/mD、124.26±12.73pg/ml),白细胞介素-6(IL-6)(47.51±5.08pg/ml)水平高于对照组(10.37±1.44pg/ml);血清、绒毛组织、蜕膜组织中SLIT2水平与血清hCG、VEGF水平均呈正相关,与IL-6水平呈负相关(均P<0.05)。血清、绒毛组织、蜕膜组织中SLIT2诊断稽留流产的曲线下面积(AUC)分别为0.771、0.903、0.865(0.814~0.916),截点值分别为7.59ng/ml、0.99、1.24,特异度分别为57.0%、87.0%、66.9%,灵敏度分别为92.6%、84.7%、92.6%。结论:稽留流产患者血清、绒毛组织、蜕膜组织中SLIT2水平均降低,且与机体炎症反应、胎盘血管生成有关,有望作为诊断稽留流产的潜在标记物。

米非司酮对人蜕膜与绒毛糖脂及雌孕激素受体的影响

本文从糖脂与激素受体等方面观察了米非司酮抗早孕的作用机理。采用Ｌａｄｉｓｃｈ微量分部、ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－２５柱层析及高效薄层定量分析（ＨＰＴＬＣ），发现米非司酮引起蜕膜与绒毛糖酯含量及组分的变化；应用ＤＣＣ法测定蜕膜组织中雌、孕激素受体（ＥＲ、ＰＲ）。结果表明米非司酮使蜕膜组织中ＥＲ上升，ＰＲ下降，干扰了ＥＲ与ＰＲ之间的平衡。以上研究提示来非司酮抗早孕作用是多环节的，蜕膜是其重要的作用部位。

米非司酮对人早孕蜕膜和绒毛超微结构的影响

从超微结构水平，研究早孕妇女口服米非司酮（２５ｍｇ，Ｂｉｄ×２天）４８ｈ后，蜕膜和绒毛的超微结构改变，结果表明：蜕膜中大蜕膜细胞皱缩，粗面内质网和线粒体肿胀，蜕膜颗粒细胞中高电子密度颗粒减少或消失，同时伴随着周围网状纤维的溶解；而绒毛功能活跃的合体滋养细胞则表现不同程度的退行性改变。表明米非司酮阻断孕激素作用，对蜕膜的影响是直接的，而绒毛则主要是受继发性血供不足的影响。蜕膜中颗粒细胞及基质中网状纤维是米非司酮抗早孕重要的作用部位。

人早孕期蜕膜和绒毛外滋养层细胞的免疫组织化学研究

侵入蜕膜组织的绒毛外滋养层细胞在HE染色标本上不易辨认。我们用免疫组织化学,ABC法,过氧化物-抗过氧化物酶标记蜕膜组织中的hCG与hPL阳性细胞。结果证明,子宫内膜中只要有一个绒毛外滋养层细胞存在就能被显示出来。这对提高妊娠诊断,防止残留滋养层细胞的增生与恶性病变很有意义。我们在蜕膜组织中还发现3类胎盘激素阳性细胞:hCG阳性细胞,hPL阳性细胞及hCG与hPL均为阳性的细胞。这一发现,证明了蜕膜有内分泌功能。

Bcl-2和Bax蛋白在人早孕胎盘绒毛和蜕膜组织中的表达

目的探讨Bcl-2和Bax蛋白在人早孕绒毛和蜕膜组织中的表达及其意义。方法应用免疫组织化学ABC法检测Bcl-2和Bax蛋白在孕5～7周绒毛和蜕膜组织细胞中的表达,用真彩色病理图像分析系统4.0图像分析软件测定Bcl-2和Bax蛋白表达的积分吸光度值。结果Bc1-2蛋白主要分布于孕5～7周绒毛合体滋养层细胞、蜕膜细胞的细胞质和细胞核中,蛋白表达积分吸光度值依次降低,其差异无统计学意义（P〉0.05）。Bax蛋白在孕5～7周绒毛细胞滋养层细胞、合体滋养层细胞中均未见表达;孕6周,Bax蛋白表达于极少部分蜕膜细胞的细胞质中。结论Bc1-2和Bax蛋白在人早孕过程中参与了绒毛滋养层细胞增殖和分化、子宫内膜蜕膜化的过程,在绒毛的发生、发育、胎盘形成和组织结构改建及功能完善等方面发挥着重要作用。

米非司酮对早孕蜕膜与绒毛转化生长因子β基因表达及血清肿瘤坏死因子α的影响

目的:了解米非司酮对早孕蜕膜和绒毛中转化生长因子β基因表达及血清肿瘤坏死因子α水平的影响,探讨来非司酮对母-胎界面及血清中细胞因子的调节作用。方法:应用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)测定正常和服用米非司酮100 mg后的人早孕蜕膜和绒毛中转化生长因子β_1(TGF-β_1)及受体(TGF-β_1R)的基因表达;采用放射免疫法测定米非司酮应用前后血清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)的水平。结果:服药组蜕膜中TGFβ_1及受体的基因表达比对照组明显下降(P<0.05),而服药组绒毛中TGFβ_1及受体的基因表达与对照组比较没有显著差异(P>0.05)。服药后血清TNF-α水平明显高于服药前(P<0.05)。结论:米非司酮抗早孕作用是多环节的,可能通过多种机理协同参与促进流产的发生。其中,米非司酮通过降调节蜕膜中TGF-β_1与TGF-β_1R的转录,提高血清TNF-α的水平,从母-胎界面局部至外周,使免疫刺激和抑制失调,导致母体对胚胎排斥而不利于妊娠的维持。

米非司酮对早孕绒毛蜕膜组织细胞增殖及凋亡的影响

目的探讨米非司酮对早孕绒毛蜕膜组织细胞增殖及凋亡的影响。方法选取2012年6月-2013年12月该院收治的自愿采用米非司酮药物流产的早孕妇女48例作为研究组,同期在自愿进行人工吸宫流产的早孕妇女50例作为对照组,比较分析两组患者绒毛蜕膜组织中Bcl-2、Bax、Fas、Survivin蛋白表达情况及细胞增殖指数和凋亡指数。结果与对照组相比,研究组患者绒毛蜕膜组织中Bax、Fas以及Survivin蛋白的阳性表达明显提高(P<0.05),而两组Bcl-2蛋白的阳性表达变化不明显(P>0.05)。与对照组相比,研究组患者绒毛蜕膜凋亡指数均明显提高(P<0.05),两组绒毛蜕膜的增殖指数变化不明显(P>0.05)。讨论米非司酮抗早孕机制可能是通过对基因Bax、Fas以及Survivin蛋白表达的调控,以达到诱导早孕绒毛蜕膜组织细胞凋亡,从而起到抗早孕的临床作用。

不同作用时间的米非司酮对早孕蜕膜、绒毛组织超微结构的影响

目的观察不同作用时间的米非司酮对早孕蜕膜、绒毛组织超微结构的影响,探讨药物流产中缩短米非司酮与米索前列醇用药间隔的可行性。方法随机选取自愿要求中止妊娠的早孕妇女80例,分为对照组、12 h组、24 h组、48 h组各20例。对照组直接行负压吸引术;3个用药组顿服米非司酮150 mg,之后于不同时间行负压吸引术;留取各组蜕膜、绒毛组织。应用透射电镜观察各组蜕膜、绒毛组织的超微结构改变。结果对照组蜕膜细胞体积较大,胞质内细胞器丰富;合体滋养细胞表面有大量微绒毛。12 h组蜕膜细胞胞质内充满大量囊性扩张的粗面内质网,线粒体的部分嵴和膜融合、缺失,颗粒细胞中高电子密度颗粒数量减少或消失,细胞周围胶原纤维排列紊乱、断裂,甚至崩解;合体滋养细胞表面微绒毛数量减少,细胞质高度水肿,细胞滋养细胞变扁变小,轮廓不清。24 h组、48 h组与12 h组大致相同。结论米非司酮作用后12 h蜕膜、绒毛组织已经发生变性坏死,为缩短米非司酮的用药时间提供了形态学方面理论依据。

自然流产病例的绒毛与蜕膜细胞增殖和细胞凋亡的研究

目的 从细胞增殖与细胞凋亡的角度探讨自然流产的发生机制。方法 对 30例正常早孕吸宫流产病例和 30例自然流产病例的绒毛与蜕膜组织进行研究。常规光镜观察细胞形态学变化 ;免疫组织化学S P法检测增殖细胞核抗原 (PCNA)在细胞中的表达 ;用DNA缺口原位未端标记技术 (TUNEL)检测细胞凋亡 ;免疫组化S P法检测bcl 2 bax基因蛋白表达率比值。结果 自然流产绒毛组织形态学结构均出现程度不同的退行性改变 ,绒毛的细胞滋养细胞及蜕膜中增殖指数 (PI)较正常早孕时明显减少 (P <0 0 1) ,而合体滋养细胞中从未发生过增殖 ,PI为 0 ;与此相反自然流产绒毛的细胞滋养细胞、合体滋养细胞及蜕膜中凋亡指数 (AI)较正常早孕时明显增多 (P <0 0 5 ,P <0 0 1) ,同时 ,早孕流产的绒毛及蜕膜中促 /抑凋亡基因bcl 2 bax表达率的比值也较正常早孕时下降 (P <0 0 5 ,P <0 0 1) ,结果与细胞凋亡的发生一致。结论 细胞增殖和凋亡可能在孕卵发育过程中起着重要作用 ,绒毛和蜕膜组织中大量的细胞凋亡是其形态学退变的根本 ,并进而阻碍了孕卵的发育。

米非司酮对人早孕绒毛及蜕膜中骨桥蛋白和绒毛膜促性腺激素-β表达的影响

目的:探讨米非司酮对早孕绒毛及蜕膜中骨桥蛋白(OPN)和绒毛膜促性腺激素-β(β-hCG)表达的影响。方法:采用免疫组化半定量法检测米非司酮药物流产(n=20)和人工流产(n=20)的早孕绒毛及蜕膜中的OPN(骨桥蛋白)和β-hCG的表达。结果:OPN和β-hCG在早孕妇女绒毛组织和蜕膜组织中的表达米非司酮组均显著低于手术流产组,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:米非司酮可能抑制了早孕绒毛及蜕膜中OPN和β-hCG的合成,进而影响胚泡着床和胎盘的形成,使妊娠难以维持,最终流产。

E-钙粘蛋白在胚胎停育患者绒毛和蜕膜中的差异性表达

目的:探讨E-钙粘蛋白(E-Cad)与胚胎停育的关系。方法:选取胚胎停止发育妇女为实验组,同期正常早孕自愿要求流产的妇女为对照组,分别留取其绒毛和蜕膜组织标本,采用荧光实时定量PCR(Real time-PCR)对标本E-Cad mRNA转录水平进行分析。结果:在绒毛标本中,E-Cad在实验组中mRNA表达水平(0.875±0.07)显著高于对照组(0.337±0.11);在蜕膜标本中,实验组E-Cad mRNA的表达水平(0.927±0.12)显著高于对照组(0.512±0.08)。结论:E-Cad的差异表达可能参与了胚胎停育的发生及发展,蜕膜和绒毛组织中E-Cad的高表达可能是导致早期胚胎停育的原因之一。

三苯氧胺对人早孕蜕膜和绒毛超微结构的影响

目的:从超微结构水平,观察三苯氧胺对蜕膜和绒毛超微结构的影响。方法:将停经40～45天的早孕妇女 9例,随机分 3组,正常对照组 3例,三苯氧胺组 3例(三苯氧胺,20mg,2次/日,x4天),三苯氧胺并米索组2例,于第5天阴道内置米索800μg。结果:三苯氧胺主要使大蜕膜细胞皱缩,粗面内质网肿胀,线粒体体积变小。蜕膜颗粒细胞中高电子密度颗粒减少,而绒毛合体滋养细胞则表现不同程度的退行性改变。并用米索后其对蜕膜及绒毛滋养细胞的损伤进一步加重。结论:三苯氧胺主要使大蜕膜细胞和合体滋养细胞发生退行性改变而起到抗早孕作用。

白细胞介素-2在反复自然流产患者绒毛及蜕膜组织中的表达

目的：研究白细胞介素-2（IL-2）在反复自然流产患者绒毛及蜕膜组织中的表达水平及意义.方法：应用免疫组织化学和图像分析,分别对30例反复自然流产患者（病例组）和30例正常妊娠者（对照组）绒毛和蜕膜组织中IL-2的表达进行定位和半定量分析;应用显微镜观察反复自然流产患者绒毛和蜕膜组织的形态学变化.结果：免疫组织化学显色显示,IL-2蛋白定位于绒毛组织的滋养层细胞和蜕膜组织的蜕膜细胞细胞质内,且病例组的IL-2蛋白表达高于对照组.H-E染色结果显示,病例组的蜕膜组织结构模糊、细胞变性坏死、部分细胞连接消失,血管内皮有缺损;绒毛组织的滋养层变薄,细胞变性坏死,细胞嗜酸性增强,绒毛中轴纤维化程度增强.结论：绒毛和蜕膜组织中IL-2蛋白的高表达与反复自然流产有关,可能参与反复自然流产的病理过程.

正常妊娠反复自然流产绒毛及蜕膜组织中细胞因子信号转导负调控因子的表达:改变Th1/Th2平衡调节可影响妊娠结局

背景:细胞因子信号转导负调控因子(suppressors of cytokine signaling,SOCS)参与多种细胞因子信号通路的调节,SOCS1-3对妊娠的调节作用较为突出。目的:通过检测反复自然流产患者和正常妊娠绒毛及蜕膜组织中SOCS3蛋白表达,了解反复自然流产患者SOCS3蛋白的表达。方法:Westenblotting方法检测反复自然流产患者和正常妊娠绒毛组织及蜕膜组织SOCS3的表达。结果与结论:与正常妊娠组相比,反复自然流产组SOCS3在绒毛组织中表达减少(P<0.05),在蜕膜组织中表达减少(P<0.01)。推测SOCS3蛋白可能影响妊娠结局,反复自然流产组SOCS3表达降低,可能导致Th2反应降低,从而导致流产发生。

米非司酮对人早孕绒毛、蜕膜组织血管生成的影响探讨

目的:探讨米非司酮对早孕绒毛与蜕膜组织血管生成的影响。方法:取服米非司酮及米非司酮配伍米索前列醇后的早孕绒毛与蜕膜组织,以负压吸引流产术的绒毛与蜕膜组织为对照组,应用免疫组织化学技术,观察米非司酮对血管内皮生长因子(VEGF)与微血管密度(MVD)的影响。结果:服用米非司酮、米非司酮配伍米索前列醇后,绒毛、蜕膜组织的VEGF分别由对照组的1.61±0.65分、1.61±0.77分,下降至0.83±0.58分、0.83±0.39分和0.80±0.63分、0.70±0.67分(P<0.05);其MVD值分别由10.70±2.24个、28.08±8.81个,下降至5.25±1.95个、18.58±4.83个和4.30±1.06个、17.80±4.29个(P<0.001、P<0.01)。服用米非司酮与米非司酮配伍米索前列醇,绒毛、蜕膜组织VEGF与MVD值无显著性差异。结论:米非司酮使早孕绒毛与蜕膜组织的VEGF与MVD值下降,这可能是米非司酮终止早孕的机理之一。

白细胞介素-6在反复自然流产患者绒毛和蜕膜组织中的表达

目的：研究白细胞介素-6（IL-6）在反复自然流产患者绒毛与蜕膜组织中的表达情况，为防治反复自然流产提供理论依据。方法：应用免疫组织化学显色法和图像分析技术，对IL-6蛋自在反复自然流产患者（病例组）和正常人工流产者（对照组）绒毛和蜕膜组织中的表达进行定位和半定量分析；H—E染色法观察反复自然流产患者绒毛和蜕膜组织的形态学变化。结果：免疫组织化学显色显示，在绒毛组织中，IL-6蛋白定位于滋养层细胞的细胞质内，病例组的IL-6蛋白表达明显低于对照组；在蜕膜组织中，IL-6定位于蜕膜细胞和腺上皮细胞的细胞质内，且病例组蜕膜细胞的表达明显高于对照组，而2组在腺上皮细胞的表达无差异；H—E染色结果显示，病例组绒毛组织的滋养层变薄，细胞变性、坏死，细胞嗜酸性增强，绒毛中轴纤维化程度增强，蜕膜细胞失去细胞间连接。部分蜕膜细胞解体、核消失，细胞嗜酸性增强。结论：绒毛和蜕膜组织中IL-6蛋白表达的变化与反复自然流产有关．IL-6可能参与反复自然流产的病理过程。

白细胞介素-8蛋白在反复自然流产患者绒毛及蜕膜组织中的表达

目的探讨反复自然流产患者绒毛及蜕膜组织中白细胞介素-8(IL-8)蛋白水平的表达。方法应用免疫组织化学染色和Western blotting技术,分别对30例反复自然流产患者(流产组)和30例正常妊娠者(对照组)绒毛、蜕膜组织中IL-8的蛋白表达进行定位及半定量分析。结果免疫组织化学染色结果显示,在绒毛组织中,流产组和对照组IL-8的蛋白表达主要定位于绒毛上皮细胞的细胞质内;在蜕膜组织中,流产组IL-8蛋白表达于蜕膜细胞的胞质内,对照组蜕膜细胞则为阴性,但两组腺上皮细胞均为阳性反应。Western blotting结果显示,在绒毛组织中,流产组IL-8的蛋白相对含量明显高于对照组(P﹤0.01);在蜕膜组织中,流产组IL-8的蛋白相对含量高于对照组(P﹤0.05)。结论流产组绒毛及蜕膜组织中IL-8蛋白表达增强与反复自然流产有关,IL-8可能参与反复自然流产的病理过程。

米非司酮对早孕绒毛和蜕膜组织中端粒酶的影响

目的 探讨米非司酮配伍米索前列醇早孕流产对绒毛、蜕膜组织端粒酶活性的影响。 方法 采用TRAP SYBRGreen染色法对 4 0例药物流产的绒毛和蜕膜进行了检测 (实验组 ) ,并与 4 0例正常人工流产的绒毛和蜕膜组织比较 (对照组 )。 结果 绒毛组织实验组 2 8% (11/ 4 0 )端粒酶阳性表达 ,对照组 73% (2 9/ 4 0 )呈阳性表达 ,两者有显著性差异 (P <0 .0 5 ) ;蜕膜组织实验组 2 8% (11/ 4 0 )阳性表达与对照组 2 0 % (9/ 4 0 )无显著性差异 (P >0 .0 5 )。 结论 米非司酮可使绒毛组织端粒酶活性下降 ,对蜕膜的端粒酶活性影响无显著性差异。