人绒毛膜促性腺激素对绒癌细胞系TIMP表达的影响

目的 :研究人绒毛膜促性腺激素 (hCG)对滋养层细胞或绒癌细胞侵袭性的影响。方法 :采用RT PCR方法 ,观察不同浓度hCG对JEG 3绒癌细胞系表达金属蛋白酶组织抑制因子TIMP 1和TIMP 2的影响。结果 :用不同浓度hCG处理 4 8h后 ,JEG 3细胞中TIMP 1mRNA的表达略降低 ,而TIMP 2mRNA的表达则被诱导增加。结论 :人绒毛膜促性腺激素 (hCG)可能通过改变绒癌细胞中TIMP的表达 。

hCG对绒癌细胞系MMP-2和MMP-8表达的影响

为了探讨人绒毛膜促性腺激素 (hCG)对绒癌细胞侵袭性相关基因表达的影响作用 ,采用逆转录多聚酶链反应 (RT PCR)检测方法 ,观察了不同浓度hCG不同处理时间对JEG 3绒癌细胞系表达基质金属蛋白酶(MMP 2和MMP 8)的影响 .结果显示 ,绒癌细胞系JEG 3表达MMP 2和MMP 8;分别用 0、5 0、5 0 0、5 0 0 0、2 5 0 0 0IU/LhCG处理 48h后 ,JEG 3细胞中MMP 2mRNA的含量无明显变化 ,MMP 8mRNA的表达则被诱导 ,并随hCG作用浓度增高而增强 .进一步研究处理时间对MMP表达的影响 ,结果发现经 2 5 0 0 0IU/LhCG处理的JEG 3细胞 ,MMP 8的表达随处理时间的延长逐渐增强 ,而MMP 2的表达则在第 6h被显著诱导后逐渐降低 .以上结果提示 ,hCG可诱导绒癌细胞系JEG 3中MMP 2和MMP 8两种基质金属蛋白酶的表达 ,并因此可能对绒癌细胞系的侵袭性具有影响作用 ,然而hCG对这两者表达的影响规律并不完全一致 .

常用化疗药物诱导人绒癌细胞系BeWo凋亡的比较

为比较氟尿嘧啶(5-FU)、顺铂和紫杉醇诱导人绒癌细胞系 BeWo 凋亡的效应,用 Annexin VFITC/PI 流式细胞技术(FCM)定量分析三种抗癌药在不同浓度、不同时间下所诱发 BeWo 细胞凋亡率和继发性坏死率的变化。结果表明,5-FU 和紫杉醇诱导 BeWo 细胞凋亡具有明显的时间效应和剂量效应,顺铂在小剂量短时间内对细胞的作用以凋亡为主,在大剂量或作用时间较长时则以坏死为主。结论:5-FU、顺铂和紫杉醇都能诱导 BeWo 细胞发生凋亡,且在不同浓度、不同时间其作用机制不完全相同。本实验为临床联合应用化疗药物治疗绒癌剂量和时间的选择提供了实验依据。

绒毛膜癌细胞的融合与侵袭和转移能力变化关系的研究

目的:观察人绒毛膜癌(绒癌)细胞系中BeWo细胞株在福斯考林(forskolin)诱导融合前后细胞中基质金属蛋白酶-2(MMP-2)及上皮钙黏蛋白(E-cad)的表达变化,以探讨绒癌细胞融合与其浸润和转移能力变化的关系。方法:用BeWo细胞株进行培养传代,以100mmol/L浓度的forskolin作用于BeWo细胞,用逆转录聚合酶链(RT-PCR)方法检测细胞中人类内源性逆转录病毒基因编码的膜糖蛋白(Syncytin mRNA)表达量的变化;免疫印迹技术(Western blot)方法检测细胞中表达MMP-2及E-cad蛋白表达量的变化。结果:以BeWo细胞作为靶细胞,根据RT-PCR和Western blot方法中条带的形状和亮暗程度可知Syncytin基因和E-cad及MMP-2蛋白的表达呈时间依赖性,随着forskolin作用时间的增加,Syncytin基因及E-cad蛋白的表达逐渐增加,而MMP-2蛋白表达量逐渐减少,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:Syncytin高表达与融合后绒癌细胞的浸润转移能力的改变可能有一定关系,Syncytin的检测有望成为滋养细胞肿瘤患者判定预后的有价值的指标,并为滋养细胞肿瘤的治疗开辟了新的思路。

小分子干扰RNA对绒毛膜癌细胞人类白细胞抗原G基因表达的影响

目的探讨小分子干扰RNA(siRNA)对绒毛膜癌(绒癌)细胞中人类白细胞抗原G(HLA-G)基因表达的影响,了解HLA-G基因在绒癌发生、发展中的作用。方法设计并合成HLA-GsiRNA,分为两组。实验组以不同浓度(分别为1.0、2.5、5.0μg/L,下同)的HLA-GsiRNA转染HLA-G基因高表达的绒癌细胞系JEG-3细胞,对照组以等量阴性对照siRNA转染JEG-3细胞。实时荧光定量RT-PCR技术检测转染后JEG-3细胞中HLA-GmRNA的表达,HLA-GmRNA的表达以PCR循环数阈值(Ct值)表示;蛋白印迹法测定JEG-3细胞中HLA-G蛋白的表达;显微镜观察并计数转染后存活的JEG-3细胞数。结果HLA-GsiRNA转染JEG-3细胞后,明显下调JEG-3细胞中HLA-GmRNA及蛋白的表达水平。实验组不同浓度的HLA-GsiRNA转染后,JEG-3细胞的Ct值[分别为(20.67±0.02)、(21.37±0.03)、(21.43±0.02)个循环数],分别与对照组[分别为(20.33±0.01)、(20.37±0.02)、(20.40±0.03)个循环数]比较,差异有统计学意义(P<0.05)。上述浓度转染后,实验组JEG-3细胞的HLA-G蛋白表达水平[分别为0.42±0.03、0.37±0.02、0.12±0.04],分别与对照组[分别为1.69±0.23、1.62±0.31、1.36±0.22]比较,差异有统计学意义(P<0.01)。实验组JEG-3细胞生长较对照组明显受到抑制(P<0.05)。结论HLA-GsiRNA可以下调HLA-GmRNA及蛋白的表达水平,抑制细胞生长,表明HLA-G基因在绒癌的发生、发展中具有重要作用。