绿脓杆菌外毒素A受体结合亚单位基因的克隆与表达

为防治绿脓杆菌感染造成的细胞坏死及多器官衰竭，本试验克隆了含绿脓杆菌外毒素Ａ（ＰＥＡ）结合亚单位（Ⅰ区）和部分跨膜亚单位（Ⅱ区）编码３０９个氨基酸的约１０００ｂｐ的基因片段，以正确阅读框架将该片段置于原核高效表达Ｔ７启动子下游，构建了高效表达质粒ｐＥＴ－ＥＡＢ。转化宿主菌ＢＬ２１（ＤＥ３）、ＨＭＳ１７４（ＤＥ３）、ＨＭ１７４（ＤＥ３）ｐｌｙｓＳ和ＢＬ２１（ＤＥ３）ｐｌｙｓＳ后，经ＩＰＴＧ诱导４ｈ，均表达了外源目的基因蛋白，其中ＢＬ２１（ＤＥ３）和ＢＬ２１（ＤＥ３）ｐｌｙｓＳ的表达量明显高于其他宿主菌。经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析，外源蛋白分子量约３４０００，与ＰＥＡⅠ区和部分Ⅱ区基因所编码的蛋白理论估计值相符，命名为ＰＥ３４。凝胶薄层扫描显示，ＰＥ３４含量占菌体蛋白总量的５６％。

绿脓杆菌外毒素A受体结合亚单位基因的克隆与表达

绿脓杆菌外毒素A(PEA)是绿脓杆菌感染的最主要致病因子,它由3个区域共613个氨基酸组成,分子质量66 ku。在体内,毒素先由Ⅰ区(受体结合亚单位)识别细胞表面受体并与之结合,而后,通过Ⅱ区(跨膜亚单位)将具有ADP-核糖基化活性的毒性单位导入胞浆,使Ⅲ区(毒力亚单位)发挥毒力作用,催化细胞内的延长因子2(EF-2)发生ADP-核糖基化反应,使EF-2灭活,抑制蛋白合成而杀灭细胞。在这种结合、入胞。

GA结合蛋白亚单位a在结肠癌中的表达及临床意义

目的探讨GA结合蛋白亚单位a(GABPA)在结肠癌中的表达及临床意义。方法纳入2007年1月-2011年12月湖北省恩施自治州中心医院确诊结肠癌患者174例,采用免疫组化方法检测结肠癌组织及对应癌旁组织中GABPA蛋白的表达情况;分析GABPA的表达和临床病理特征的关系;分析GABPA的表达与预后的相关性。结果GABPA在结肠癌组织中的阳性表达率为20.11%(35/174),而在癌旁组织中阳性表达率为55.17%(96/174),差异有统计学意义(χ^2=6.23,P<0.05);GABPA的低表达与结肠癌患者淋巴结转移、远处转移和TNM分期差异有统计学意义(χ^2/P=5.803/0.022,5.000/0.032,4.258/0.047);而与患者性别、年龄、肿瘤大小、血管侵润和分化程度差异无统计学意义(P>0.05);与GABPA高表达患者比较,GABPA低表达患者其生存天数显著缩短,差异有统计学意义(χ^2=7.15,P=0.006)。结论结肠癌组织中GABPA低表达与结肠癌的发生、发展可能有关,GABPA可能是结肠癌新的标志物及治疗靶点。

G蛋白β3亚单位C825T等位基因多态性与妊娠期体重增加和产后肥胖的相关性研究

目的研究温州地区汉族人群妇女GNB3 C825T等位基因多态性与妊娠期间体重增加和产后超重及肥胖的相关性。方法在肥胖专科门诊、体检中心随机选取309例已产妇女,分为产后超重及肥胖组和产后体重正常对照组,PCR/RFLP检测基因型。结果(1)与对照组比较,产后超重及肥胖组的TT基因型携带率显著增加(P<0.01),TT/CT致产后肥胖的比数比(OR值)为2.6(95%可信区间1.4～4.6,P<0.01);TT/CC致产后肥胖的OR值为2.6(95%可信区间1.3～5.1,P<0.01);等位基因T与C比,致产后肥胖的OR值为1.5(95%可信区间1.1～2.1,P<0.01)。(2)妊娠期间体重增加值比较,TT型比CC型和CT型体重增加更显著(P<0.01),CT型比CC型体重增加亦明显(P<0.01);妊娠前后体重变化值比较,TT型比CC型和CT型产后体重明显增加(P<0.01),而CT型与CC型相比,其产后体重虽有增加,但差异无统计学意义(P=0.076)。结论GNB3 825T等位基因与妊娠期间体重较多增加和产后超重及肥胖密切相关。GNB3 825TT基因型可作为早期预测产后超重及肥胖的遗传学指标之一。

G蛋白β3亚单位基因C825T等位基因多态性与糖尿病肾病的相关性

目的:研究G蛋白β3亚单位基因(GNB3)C825T等位基因与糖尿病肾病(DN)的相关性。方法:本组均为2型糖尿病(DM)患者,随机选取95例DN患者(DN组)和51例无肾病的2型DM患者(DM组),DN组再分为微量蛋白尿组和显著蛋白尿组,采用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术检测各组的基因型和等位基因频率。结果:(1)DN组的TT基因型及T等位基因频率均明显高于DM组(P<0.01)。(2)微量蛋白尿组的TT基因型较DM组TT基因型携带者显著增加(P<0.05),T等位基因频率显著增高(P<0.01)。结论:GNB3C825T等位基因与早期和中晚期DN均有相关性,可作为评估2型DM患者发生肾病危险性的一个遗传学指标。

G蛋白β3亚基基因多态性与功能性消化不良和肠易激综合征关系的研究进展

功能性胃肠病(FGIDs)是一组临床常见消化系统疾病,其病因和发病机制尚不完全清楚,目前认为主要与胃肠动力异常、内脏高敏感等有关。G蛋白是一类细胞内信号转导分子,可介导多种与胃肠动力、内脏感觉相关的细胞内反应,在FGIDs的发病中具有重要意义。研究发现G蛋白β3亚基(GNβ3)基因是与FGIDs易感性相关的候选基因之一,本文对GNβ3基因多态性与功能性消化不良和肠易激综合征关系的研究进展作一综述。

G_(12)亚型G蛋白对M_3乙酰胆碱受体介导的磷脂酶D调控

目的:阐明何种Gα亚型蛋白偶联M3乙酰胆碱受体(M3mAChR)并介导PLD的激活。方法:将带有Gαq、Gα12及Gα13基因的质粒转染入HEK293细胞,在细胞内过度表达,用免疫杂交检测相应的表达蛋白,并测定胞内M3mAChR介导的PLD及PLC活性。结果:Gα12、Gα13亚型野生型及功能增强型蛋白的过度表达,导致胞内M3mAChR介导的PLD活性明显升高(P<0.001);而过度表达Gα12、Gα13功能缺陷型蛋白,则使胞内M3mAChR介导的PLD活性明显降低(P<0.001);但Gαq野生型及功能增强型蛋白的过度表达仅影响胞内PLC活性,对M3mAChR介导的PLD激活没有影响。结论:M3mAChR介导的胞内PLD激活极有可能是Gα12、Gα13而不是Gαq亚型G蛋白。

大鼠“承山”穴的神经解剖学特征——霍乱毒素亚单位B结合荧光素488法

目的：应用霍乱毒素亚单位B结合荧光素488（CTB—Alexa 488）新一代荧光示踪技术研究大鼠“承山”穴神经解剖学特征。方法：用微量注射器将5μL0．05％CTB—Alexa 488分别注入4只雄性SD大鼠“承山”穴。在40～48h后将动物灌流固定，取出脑、脊髓和双侧腰部脊神经节，并制成组织切片，后直接用荧光显微镜系统观察和记录被CTB-Alexa 488显示的神经标记。结果：被CTB-Alexa 488标记的神经元在荧光光栅450～490的条件下呈绿色，均位于示踪剂注入侧的相关神经组织中。其中标记的一级感觉神经元分布在L4-L5的脊神经节，而被标记的一级运动神经元呈柱状分布在L4-L5节段脊髓前角第Ⅸ层的中外侧部。结论：应用CTB-Alexa 488荧光示踪技术成功揭示了与“承山”穴相关的初级感觉和运动神经元在脊神经节和脊髓的分布规律。

Cbfα-1和MCP-1在DN大鼠肾内小动脉中表达意义及相关性研究

目的观察核心结合因子α亚单位1(Cbfα1)及单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)在糖尿病肾病(DN)大鼠肾内小动脉上的表达及其变化规律,探讨其两者关系对糖尿病肾病血管病变的影响。方法设对照组、糖尿病肾病组两组,建立STZ诱导的DN大鼠模型。采用茜素红染色观察肾实质内小动脉周围钙盐沉积,分别采用免疫组化及mRNA原位杂交法检测Cbfα1和MCP-1在肾实质内小动脉上的蛋白表达及基因定位。方法①DN组各时间点血糖及尿蛋白量(24h)均较C组显著增高(P<0.05),自第12周开始,DN组血肌酐较C组显著增高(P<0.05)。②茜素红染色DN组第4～12周时偶见肾内小动脉少许点状红色钙盐沉积,第24周时可见肾实质内小动脉及周围组织有较多红色点片状沉积,C组茜素红染色为阴性。③DN组肾实质内小动脉Cbfα1蛋白及mRNA在4周时已有表达,随时间延长表达逐渐增强,各时间点均明显高于对照组,C组各时间点表达差异无统计学意义;DN组肾实质内小动脉MCP-1蛋白及mRNA在4、12周表达无显著差异,24周表达明显上调,C组肾小动脉无表达。④Cbfa1与MCP-1呈明显正相关关系(r=0,495,P<0.01)。结论①DN大鼠肾内小动脉钙化前即已有Cbfa1的表达;②炎症因子MCP-1可影响Cbfα1的表达;③肾内小动脉上Cbfa1、MCP-1的表达变化可能参与DN进展。

大鼠膀胱经背段的神经解剖学特征——CB-HRP逆行示踪研究

目的 通过对大鼠膀胱经躯干段经过的背阔肌及背最长肌的相应脊髓和背根神经节内标记神经元的研究 ,了解经脉线及非经脉线神经支配的区别和经络的神经解剖学特征 ,从而为经络实质的研究提供形态学基础。方法 用霍乱毒素 B亚单位结合辣根过氧化物酶 ( CB-HRP)对膀胱经经脉线及非经脉线上背阔肌和背最长肌进行逆行示踪研究。结果 经脉线上脊髓腹角运动神经元和背根节感觉神经元标记细胞数明显多于非经脉线 ,并且经脉线上脊髓腹角运动神经元有较为广阔的树突野。结论 在经脉线所通过的背阔肌及背最长肌中 ,感觉及运动神经终末密集 ,经络的功能可能与丰富的传入传出神经支配有关。

糖尿病肾病大鼠肾实质内小动脉钙化及其与骨基质蛋白的关系

目的:探讨糖尿病肾病(DN)大鼠肾内小动脉上核结合因子α亚单位1(Cbfa1)、骨钙素(OC)、骨保护素(OPG)的表达及其变化规律。方法:设对照组、糖尿病组两组,建立STZ诱导的DN大鼠模型。茜素红染色观察肾实质内小动脉周围钙盐沉积,并分别采用免疫组化及mRNA原位杂交法检测肾实质内小动脉上Cbfa1、OC、OPG的蛋白表达及基因定位。结果:(1)DN组肾内小动脉Cbfa1蛋白及mRNA表达明显高于对照组。(2)DN组第12周时出现OC mRNA弱表达,16周～24周出现OC蛋白弱表达,对照组无OC表达。(3)DN组OPG蛋白及mRNA在12周时达峰值,16周后下调,均明显高于对照组。结论:(1)DN大鼠肾内小动脉钙化前即已有Cbfa1、OC及OPG的表达。(2)Cbfa1是糖尿病血管钙化的重要转录因子,也是血管钙化的早期生物学标志。(3)OPG在DN时早期表达上调,后期表达下调。(4)肾内小动脉上Cbfa1、OC及OPG的表达变化可能参与DN进展。

黄连解毒汤对幼龄自发性高血压大鼠血管内皮NO通路影响的研究

目的:研究黄连解毒汤(HLJD)对自发性高血压大鼠(SHR)血管内皮保护作用及该药物的作用机制。方法:40只6周龄雄性SHR大鼠随机分为模型组(SHR组)、阳性组(卡托普利组)、黄连解毒汤高剂量组、黄连解毒汤低剂量组每组10只,空白组10只(正常WKY大鼠),灌胃6周并用无创尾套法测量其尾动脉收缩压及舒张压;酶联免疫吸附(ELISA)法测定大鼠血清中一氧化氮(NO)、超氧物歧化酶(SOD)、血管紧张素II(AngII)、钙调素(CaM)含量变化;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)、免疫印迹技术(Western blot)测定胸主动脉中Ras同源基因家族成员A(RhoA)、环鸟苷酸依赖性蛋白激酶(cGK)、肌球蛋白结合亚单位(MYPT1)mRNA与蛋白表达情况。结果:给药6周后,与模型组相比,黄连解毒汤各剂量组和阳性组均能显著地降低大鼠的血压。与空白组比较,模型组动物血清中AngII与SOD水平显著升高(P<0.01),NO与CaM水平显著降低(P<0.01);与模型组比较,阳性组和黄连解毒汤各组中的AngII与SOD水平降低(P<0.01或P<0.05),NO与CaM水平提高(P<0.01或P<0.05)。黄连解毒汤能够降低高血压大鼠胸主动脉RhoA、MYPT1的表达(P<0.05),并能提高高血压大鼠胸主动脉cGK的表达(P<0.05)。结论:黄连解毒汤能降低高血压大鼠的血压,调节血管内皮舒缩因子的分泌,并可影响cGK,RhoA,MYPT1等因子的表达,而这些因子的表达与NO的活性密切相关。

NGF对大鼠坐骨神经损伤后腰髓MBP含量及其前角神经元的影响

目的 :探讨NGF对大鼠坐骨神经完全离断后腰髓前角神经元的作用。方法 :30只大鼠分为 3组 ,Ⅰ组为生理盐水对照组 (硅胶管内注入 2 0ul生理盐水 ) ;Ⅱ组为NGF硅胶管给药 ,每只大鼠 10 0ng( 5ng/ul× 2 0ul) ;Ⅲ组为NGF硅胶管内给药后 +每日肌注NGF5 0 0ng/kg。切除单侧坐骨神经 10mm ,并用硅胶管桥接坐骨神经断端。术后 1、2、3、4个月分别进行霍乱毒素亚单位B结合的辣根过氧化酶 (CB -HRP)作为示踪剂 ,同时取标本测定脊髓髓鞘碱性蛋白 (MBP)含量。结果 :CB -HRP示踪Ⅱ和Ⅲ组优于对照组 ,前角运动神经元增多 ,突触连结成网 ;MBP含量Ⅱ组和Ⅲ组明显高于对照组 ,MBP含量减少不明显。结论 :外周神经损伤后 ,损伤局部应用NGF能减少其前角运动神经元死亡及脱髓鞘改变。

GCIP-27多克隆抗体的制备及鉴定

目的:制备GCIP-27多克隆抗体,为GCIP-27的作用机制研究以及进一步的GCIP特异性免疫药物的研发提供重要的实验材料。方法:以含GCIP-27的融合蛋白凝胶为抗原免疫兔子,ELISA和Western blot分别检测多克隆抗体的效价和特异性。结果:3只动物中1只产生了高效价的抗血清,另2只产生的效价较低。GCIP-27多克隆抗体效价为1∶10 240,能与GCIP-27特异性结合。结论:用含GCIP-27的融合蛋白凝胶免疫兔子可有效地诱导免疫动物产生GCIP-27特异性抗体,为GCIP-27深入研究奠定了基础。

非小细胞肺癌组织中KISS-1、C1QBP、ITGA7表达及相关性

目的探究非小细胞肺癌组织中肿瘤转移抑制基因蛋白(KISS-1)、补体成分1q亚单位结合蛋白(C1QBP)、整合素α7(ITGA7)表达及相关性。方法选取非小细胞肺癌患者319例,均行手术切除。取癌组织及癌旁组织,免疫组化检测KISS-1、C1QBP、ITGA7样本,使用Western印迹检测KISS-1、C1QBP、ITGA7表达水平,对比KISS-1、C1QBP、ITGA7与临床病例特征的关系及三者在非小细胞肺癌中的相关性。结果癌组织KISS-1、C1QBP、ITGA7表达显著高于癌旁组织(P<0.05);KISS-1、C1QBP、ITGA7在非小细胞肺癌组织中的表达与肿瘤直径、淋巴结转移有关(P<0.05);KISS-1、C1QBP、ITGA7高表达者多淋巴结转移、肿瘤直径更大;KISS-1、C1QBP、ITGA7表达与年龄、性别、分期、病理类型无关(P>0.05);KISS-1、C1QBP呈正相关(r=0.238;P=0.002);KISS-1、ITGA7呈正相关(r=0.241;P=0.002);C1QBP、ITGA7呈正相关(r=0.206;P=0.007)。结论KISS-1、C1QBP、ITGA7在非小细胞肺癌中呈现出高表达,且三者呈现出正相关存在。

GTP结合蛋白仪亚基11在肺动脉高压大鼠肺无肌动脉肌化过程中的表达及西地那非的干预作用

目的探讨GTP结合蛋白α亚基11（Godl）在肺动脉高压大鼠无肌动脉肌化过程中的表达及西地那非的干预作用。方法将30只清洁级SD大鼠按随机数字表法随机均分为正常对照组、野百合碱组和西地那非组3组；后两组以50mg／kg野百合碱腹腔注射4周制备肺动脉高压模型，且西地那非组在肺动脉高压形成后给予西地那非（25mg／kg）灌胃2周，正常对照组以等量生理盐水替代野百合碱腹腔注射4周。颈静脉插管测量各组大鼠肺动脉压力，检测肺无肌动脉组织的形态学特征和血管增生程度，Western印迹法测定大鼠肺组织目标蛋白Gα11、血管平滑肌特征标志骨桥蛋白（OPN）和增殖细胞核抗原（PCNA）的表达情况并进行统计学分析。结果野百合碱组的肺动脉平均压（mPAP）、肺无肌动脉管壁厚度指数（TI）和面积指数（AI）均显著高于正常对照组[（27．43±3．97）比（11．93±1．52）mmHg（1mmHg=0．133kPa）、0．49±0．07比0．31±0．09和0．74±0．05比0．45±0．10]（均P〈0．05），同时Gα11及相关标记蛋白OPN和PCNA的表达量均明显增强；西地那非组mPAP、TI和AI[（18．59±1．44）mmHg、0．39±0．09和0．56±0．04]均显著低于野百合碱组（均P〈0．05），且Gα11、OPN和PCNA的表达也随之减弱。结论Gα11蛋白与大鼠肺动脉高压肺无肌动脉肌化发生密切相关，西地那非通过抑制Gα11表达可有效减轻肺动脉高压和肺血管重构。

温州地区汉族人群G蛋白β3亚基C825T基因多态性与肥胖的相关性研究

目的研究温州地区汉族人群G蛋白β3亚基（GNB3）C825T等位基因多态性与超重及单纯性肥胖的相关性。方法超重及单纯性肥胖组为肥胖专科门诊中随机选取161例超重或单纯性肥胖患者，并于温州市中心血站随机选取313名体重正常健康献血者为对照组，PCR-RFLP检测基因型。结果（1）温州地区汉族人群GNB3 825T等位基因频率为0．428，与其他人种的基因频率显著不同。（2）超重及单纯性肥胖组的TT基因型携带者显著增加（P〈0．01），TT／CT导致肥胖的比数比（OR值）为2．9（95％可信区间1．8-4．7，P〈0．01）；TT／CC致肥胖的OR值为2．7（95％CI 1．5—4．7，P〈0．01）；TT基因型分布按体重指数（BMI，kg／m^2）分组后，正常体重（18≤BMI〈23）、超重（23≤BMI〈25）、Ⅰ度肥胖（25≤BMI〈30）和Ⅱ度肥胖（BMI≥30）4组均显著高于低体重（BMI〈18组，P〈0．05或P〈0．01）；Ⅰ度肥胖、Ⅱ度肥胖组高于正常体重组（均P〈0．05）；Ⅱ度肥胖组高于超重组（P〈0．01）。（3）同组男女间比较GNB3 C825T基因型和T等位基因频率分布差别无统计学意义。结论GNB3 C825T等位基因频率分布存在种族差异，温州地区汉族人群GNB3 825T等位基因频率为0．428，GNB3 825T等位基因与超重及单纯性肥胖呈正相关。GNB3 825T基因型可作为早期预测单纯性肥胖的遗传学指标之一。

超声引导下星状神经节阻滞对颈动脉内膜切除术中脑氧代谢和S100B蛋白的影响

目的探讨超声引导下星状神经节阻滞(stellate ganglion block,SGB)对颈动脉内膜切除术(carotid endarterectomy,CEA)过程中脑氧代谢和血清S100B的影响。方法前瞻性纳入2021年6月至2023年4月在南京医科大学附属苏州医院择期全身麻醉下行CEA的患者,美国麻醉医师协会(American Society of Anesthesiologists,ASA)分级为Ⅱ~Ⅲ级,年龄40~75岁,随机分为SGB组和对照组。在麻醉诱导前,SGB组在超声引导下行同侧SGB,对照组不行SGB。在全身麻醉下行超声引导下右侧锁骨下静脉置管术,记录全麻诱导前(T0)、气管插管时(T1)、血管阻断前(T2)、血管开放后(T3)和手术结束时(T4)的平均动脉压(mean arterial pressure,MAP)和心率(heart rate,HR)以及T1~T4各时间点颈内静脉球部压力。在各时间点采集动脉血和颈内静脉球部血进行血气分析,计算颈静脉球部血氧饱和度(jugular venous bulb oxygen saturation,SjvO_(2))、动静脉血氧含量差(arteriovenous oxygen content difference,AVDO_(2))、脑氧摄取率(cerebral oxygen extraction rate,COER)、乳酸生成率(lactate production rate,LPR)和乳酸氧指数(lactate-oxygen index,LOI)。通过酶联免疫吸附法检测各时间点颈内静脉球部血血清S100B浓度。记录术后声音嘶哑、血肿、头晕、膈神经阻滞、恶心和呕吐发生率。结果共纳入82例行CEA的患者,SGB组和对照组各41例。SGB组麻醉诱导和手术过程中HR显著低于对照组,气管插管和手术开始时MAP和HR也较对照组更稳定(P均<0.05)。SGB组SjvO_(2)、AVDO_(2)和COER在T1~T3期间变化较小,而在T4时SjvO_(2)升高,AVDO_(2)和CEOR降低。相比之下,对照组SjvO_(2)、AVDO_(2)和COER在T3时下降,T4时略有回升。SGB组各时间点SjvO_(2)均显著高于对照组(P均<0.05)。两组AVDO_(2)和COER均随时间推移逐渐降低,对照组各时间点均显著高于SGB组(P均<0.05)。两组LPR和LOI在T1~T4期间增高,T3时达最高值,T4时有所下降,对照组T4时与T2时比较差异有统计学意义(P均<0.05)。对照组各时间点LPR和LOI均显著高于SGB组(P均<0.05)。另外,两组血清S100B先升后降,但SGB组T2~T4各个时间点均显著低于对照组(P均<0.05)。SGB组围手术期不良事件发生率显著低于对照组(P<0.05)。结论在CEA术前进行同侧SGB能有效抑制应激反应,保持术中血流动力学稳定,提高脑组织氧供,具有一定的神经保护作用。

P物质在大鼠“三阴交”穴区相关感觉神经元和神经纤维中的表达

目的:运用神经示踪技术结合荧光免疫组织化学技术揭示"三阴交"穴区神经支配的显微结构,探讨腧穴的神经解剖学和化学特征。方法:以5只雄性SD大鼠为实验对象,在其后足内踝尖上相当于三阴交穴区的部位注入荧光素488结合霍乱毒素亚单位B(AF 488-CTB),3d后将大鼠灌流固定,分别取出穴区局部组织及其神经支配相对应节段的脊神经节和脊髓进行组织学观察和分析,并进一步采用免疫荧光组织化学技术显示P物质在相关神经组织和穴区局部组织中的表达。结果:AF 488-CTB仅在穴区局部皮下和肌肉组织中极小的范围内扩散。AF 488-CTB标记的感觉和运动神经元分别存在于示踪剂注入侧腰(L)3至L 6节段的脊神经节和脊髓前角,主要集中在L 4和L 5节段。P物质免疫阳性标记主要集中在脊神经节中的小型感觉神经元和脊髓背角浅层的神经纤维终末以及穴区局部皮下的游离神经纤维。对比发现,有一部分(24.1%)AF 488-CTB标记的感觉神经元同时呈P物质免疫阳性表达。结论:本研究从显微结构角度揭示了与"三阴交"穴区相关的感觉和运动神经元在神经系统中呈节段或区域性分布,其中部分感觉神经元为P物质免疫反应阳性,这进一步从感觉神经通路方面提供了针刺可能影响P物质的形态学依据。

降钙素基因相关肽在大鼠“合谷”穴区相关感觉和运动神经元中的表达

目的:综合运用神经示踪和荧光免疫组织化学技术揭示合谷穴区相关感觉和运动神经元的化学表达。方法:先将荧光素594结合霍乱毒素亚单位B(AF 594-CTB)分别注入4只大鼠"合谷"穴区确定与其相关神经元在脊神经节和脊髓中的分布,然后在对应的组织切片上用降钙素基因相关肽(CGRP)免疫染色方法显示所标记神经元的化学特征。结果:所有AF 594-CTB标记的神经元均出现在示踪剂注入侧的脊神经节和脊髓前角。所标记的感觉神经元以C 7脊神经节为中心分布在C 5-T 1的脊神经节中,其中73.5%表现为CGRP阳性;所标记的运动神经元以C 8节段为中心分布在C 6-T 1脊髓前角的后外侧部,全部表现为CGRP阳性。结论:CGRP广泛存在于支配合谷穴区的感觉和运动神经元中,提示针刺合谷穴可能会通过这些神经元对CGRP发挥调节作用。