冻干b型流感嗜血杆菌结合物疫苗中磷含量测定方法建立及验证

目的:建立冻干b型流感嗜血杆菌(Hib)结合疫苗磷含量检测的超滤法联合紫外分光光度法,并对该方法进行验证及初步应用。方法:用去离子水将样品溶解后超滤,收集超滤管中Hib多糖,采用等体积比硫酸高氯酸消解样品,使用钼酸铵在酸性条件下与磷形成磷钼酸,与维生素C生成蓝色化合物,在825 nm下有最大吸收。对该方法进行线性、精密度、稳定性、准确度验证。用建立的方法检测3批次商业化冻干Hib结合疫苗磷含量。结果:标准磷在质量浓度1~10μg·mL^(-1)内线性关系良好(r=1.000),线性方程为Y=8.878×10^(-2)X+2.402×10^(-3),方法在低、中、高浓度水平下回收率均值分别为在97.35%、96.65%、97.42%(n=3),RSD分别为2.55%、0.95%、0.95%;重现性试验的RSD为2.81%;中间精密度RSD 2.14%;磷标准品衍生物溶液室温放置1 h稳定,RSD为0.39%。结论:该方法结果准确、可靠,可用于冻干b型流感嗜血杆菌结合疫苗磷含量检测,同时也为其他多糖蛋白结合疫苗磷含量测定提供了思路。

一种国产b型流感嗜血杆菌结合疫苗的安全性及免疫原性研究

目的评价一种国产b型流感嗜血杆菌结合疫苗的安全性和免疫原性。方法采用随机、盲态、阳性对照、非劣效性研究设计,选择3月龄~5岁健康婴幼儿为研究对象,分3个年龄组,按照1∶1比例随机接种试验疫苗和对照疫苗;使用日记卡收集安全性数据,采集免疫前和全程免疫后第28天血液标本进行抗体检测;并比较。结果试验组不良反应以一、二级为主,局部反应以红斑为主、全身反应以发热为主;与对照疫苗相当,试验疫苗具有可接受的安全性。两组全程免疫后第28天抗PRP抗体质量浓度≥1.0μg/mL的受试者百分比均为100.00%。仅在3~5月龄组中发现试验组GMC略低于对照组(P=0.041),另2个年龄组中GMCs、GMFIs差异均无统计学意义(P值均>0.05)。结论该b型流感嗜血杆菌结合疫苗安全性可以耐受,免疫原性良好。

药品包装材料与b型流感嗜血杆菌结合疫苗相容性研究

目的考察不同组合的内包装材料对Hib结合疫苗的影响,选出最适合的包装材料。方法对所选药品包装材料按照生产厂家的不同来搭配,共得到12种组合,根据相容性试验设计,将样品置于25±2℃环境下,分别在1、2、3、6个月时取样,进行pH值、内毒素、不溶性微粒3个项目的检测。结果对pH值、内毒素含量、不溶性微粒检测数据进行分析,选出了对Hib结合疫苗影响最小的包装材料组合C+Y组。结论一个适宜的包装内环境对产品的稳定性十分重要。

不同部位接种b型流感嗜血杆菌结合疫苗不良反应比较

目的探讨不同部位接种b型流感嗜血杆菌结合疫苗(haemophilus type b conjugate vaccine,Act-Hib)不良反应情况。方法将500例预防接种Act-Hib的2～8月龄婴幼儿随机分为实验组与对照组,每组各250例,分别于大腿前外侧肌和上臂三角肌进行疫苗接种。比较两组婴幼儿接种后局部及全身反应情况。结果实验组婴幼儿局部反应程度明显轻于对照组,两组比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论婴幼儿预防接种Act-Hib,在大腿前外侧肌注射接种局部反应程度明显轻于在上臂三角肌注射。

b型流感嗜血杆菌结合疫苗副反应观察

目的观察国产b型流感嗜血杆菌结合疫苗(以下简称Hib结合疫苗)的接种副反应。方法选择茂名市区接受Hib结合疫苗接种的适龄儿童为观察对象,观察组171名儿童接种国产Hib结合疫苗,对照组151名儿童接种进口葛兰素史克Hib结合疫苗,对接种后副反应进行追踪观察和记录。结果观察组全身总反应率为7.6%,全部为弱反应,无中、强反应出现,局部反应率为0.6%;而对照组全身总反应率为3.3%,其中弱、中、强反应率分别为1.3%1、.3%、0.7%,局部反应率为2.0%;观察组与对照组全身反应率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论国产Hib结合疫苗的安全性与进口结合疫苗基本相同,可广泛推广使用。

结核分枝杆菌肝素结合血凝素对结核性胸膜炎诊断、鉴别诊断的临床观察

目的探讨结核分枝杆菌肝素结合血凝素对结核性胸膜炎诊断、鉴别诊断的价值。方法选取结核性胸腔积液患者54例为观察组,另选取恶性肿瘤胸膜转移患者40例为对照组,以重组结核分枝杆菌肝素结合血凝素为抗原,通过酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测患者胸腔积液中IgG抗体。结果观察组IgG抗体高于对照组,差异有显著性(P<0.05);ROC曲线分析结果显示,胸水中IgG抗体的诊断临界值为0.46时,诊断敏感度为90.7%、特异度为90.0%、准确度为90.4%。结论结核分枝杆菌肝素结合血凝素对结核性胸膜炎的辅助诊断,以及与恶性肿瘤胸膜转移的鉴别诊断具有重要价值。

A群C群脑膜炎球菌多糖疫苗及b型流感嗜血杆菌结合疫苗中丙酮残留量检测方法的建立与验证

目的建立A群C群脑膜炎球菌多糖疫苗和b型流感嗜血杆菌结合疫苗中丙酮残留量的检测方法并加以验证。方法参照《中华人民共和国药典》三部（2010年版）中＂毛细管柱顶空进样等温法＂,优化色谱条件,建立A群C群脑膜炎球菌多糖疫苗和b型流感嗜血杆菌结合疫苗中丙酮残留量的检测方法并对该方法进行验证及初步应用。结果色谱条件为顶空平衡温度70℃,顶空平衡时间40 min,汽化室温度200℃,柱箱温度40℃,检测器温度250℃,进样量为1.0 m L,载气（高纯氮气）流量1.3 m L/min,尾吹气（高纯氮气）流量5 m L/min,分流比1∶1。丙酮质量分数在2×10^-6-5×10^-5范围内具有良好的线性关系（r〉0.99）。丙酮的平均回收率及相对标准偏差（RSD）分别为86.05%-105.11%及2.1%-9.5%,检测限为2×10^-6,定量限为3×10^-6。结论本方法的线性、特异性、准确性、重复性等均符合规定,方法准确、稳定,可用于A群C群脑膜炎球菌多糖疫苗和b型流感嗜血杆菌结合疫苗中丙酮残留量的检测。

贺州市2～59月龄婴幼儿接种b型流感嗜血杆菌结合疫苗安全性观察

目的：评价国产b型流感嗜血杆菌（Hib）结合疫苗在2～59月龄婴幼儿中常规使用后的安全性。方法选取贺州市辖区共6945名2～59月龄健康婴幼儿为受种人群，按月龄分为2～6月龄、7～11月龄、12～59月龄3个年龄组，分别按免疫程序接种Hib结合疫苗并观察记录接种后3天内的局部和全身不良反应发生情况。结果接种疫苗后局部反应总发生率为6.0%，其中轻度、中度及重度反应依次为4.9%、0.8%和0.3%；全身反应总发生率为8.8%，其中轻度、中度及重度反应依次为6.6%、2.1%和0.1%。第1、2、3针次局部反应发生率分别为7.0%、4.0%和2.0%，第1、2、3针次的全身反应发生率分别为10.2%、5.6%、3.9%，且两种反应的发生率在不同针次之间差异均具有统计学意义（P〈0.05）。2～6月龄组、7～11月龄组及12～59月龄组的局部反应发生率分别为3.7%、4.7%和8.1%，全身反应发生率依次为13.7%、5.7%和3.5%，两种反应的发生率在不同月龄组之间差异均具有统计学意义（P〈0.05）。结论国产Hib结合疫苗上市后常规使用是安全的，婴幼儿接种后不良反应发生率较低，且大多数以轻度反应为主。

接种b型流感嗜血杆菌结合疫苗致婴儿过敏反应一例

b型流感嗜血杆菌结合疫苗,用于预防由b型流感嗜血杆菌引起的侵袭性感染。一般自3个月龄开始接种,隔1个月或2个月接种1次,每次注射0.5mL,共3次,在18月龄加强接种1次。注射后一般无不良反应,有的可出现局部红、肿、硬结、压痛、低热或皮疹。本例婴儿过敏反应呈速发型,且症状较重,属罕见。

接种b型流感嗜血杆菌结合疫苗耦合幼儿急疹1例报道

流感嗜血杆菌是革兰氏阴性杆菌，根据其抗原结构的不同，分为a、b、C、d、e、f、g共6个血清型，其中b型毒力最强，与临床致病性关系最大。人类是流感嗜血杆菌的唯一宿主，常寄生于正常人的上呼吸道，通过空气、飞沫和密切接触传播。6个月-5岁的幼儿由于次阶段从母体获得的保护性抗体随着年龄的增长逐步消失，而自身免疫系统尚未健全，易发生b型流感嗜血杆菌感染而致的脑膜炎、肺炎、败血症等严重疾病。世界卫生组织（WHO）统计，60％的5岁以下儿童细菌性脑膜炎是b型流感嗜血杆菌引起的，病死率5％～10％，后遗症发生率30％～40％。WHO建议所有国家应将b型流感嗜血杆菌结合疫苗纳入常规的儿童计划免疫，我市将该种疫苗列为二类疫苗，对2个月以上、5岁以下的幼儿实行自愿接种。

2011—2016年河南省b型流感嗜血杆菌结合疫苗预防接种不良反应监测分析

目的分析2011—2016年河南省b型流感嗜血杆菌结合疫苗(简称Hib疫苗)预防接种不良反应的发生特征,评价Hib疫苗预防接种的安全性。方法通过中国免疫规划信息管理系统,收集2011—2016年河南省报告的Hib疫苗不良反应个案数据和Hib疫苗接种数据,采用描述流行病学方法对其进行分析。结果 2011—2016河南省共报告Hib疫苗接种不良反应960例,年平均报告发生率为10.55/10万剂次;以一般反应为主,占93.23%;4—8月为高峰;主要集中在郑州市、洛阳市、濮阳市和周口市;男性多于女性;<1岁儿童为主要报告人群;不良反应主要发生在首剂次接种后及接种后2 d内。一般反应的主要症状为发热、红肿、硬结,异常反应主要为过敏反应性疾病,治愈或好转达99.79%。结论 Hib疫苗不良反应报告发生率较低,具有良好的安全性。

凝胶法和动态浊度法在b型流感嗜血杆菌结合疫苗细菌内毒素控制中的应用比较

目的在b型流感嗜血杆菌结合疫苗生产过程中采用凝胶法和动态浊度法检测中间品、原液和成品中细菌内毒素含量,以此控制热原,提高制品质量,并对两种方法进行比较。方法采用《中华人民共和国药典》(2010年版)三部附录ⅫE细菌内毒素检查法中的凝胶法和动态浊度法。结果 Hib中间品、原液及成品经凝胶法和动态浊度法测定,内毒素含量均<25EU/μg、5EU/μg、25EU/剂,符合规定。结论各项检定结果表明:应用动态浊度法和凝胶法检测b型流感嗜血杆菌结合疫苗中间品、原液和成品细菌内毒素含量结果相符,动态浊度法定量检测对于内毒素含量内控指标有很好的指导意义。

b型流感嗜血杆菌结合疫苗临床研究

目的评价b型流感嗜血杆菌(Hib)结合疫苗在3月龄～5岁婴幼儿中的安全性和免疫原性。方法采用随机、盲态、同类制品平行对照设计,对1～5岁、7～12月龄和3～6月龄组婴幼儿分别接种b型流感嗜血杆菌结合疫苗,观察局部及全身反应,并检测血清抗体滴度。结果 3个年龄组接种Hib结合疫苗后不良反应总发生率为24.9%,1～5岁、7～12月龄和3～6月龄组不良反应总发生率分别为19.8%、24.9%和30.0%,其中3～6月龄试验组和对照组间不良反应总发生率差异有统计学意义(P=0.029 1),试验组高于对照组,其余2个年龄组试验组和对照组间不良反应总发生率差异无统计学意义(P=0.737 8和P=0.757 8)。Hib结合疫苗免后阳转率达98.5%。达保护性水平的比例为95.6%,免后抗-Hib平均水平(GMT)为8.77μg/ml。结论 b型流感嗜血杆菌结合疫苗接种3月龄～5周岁受试者达到良好的免疫效果,接种后具有良好的安全性及耐受性。

b型流感嗜血杆菌结合疫苗的安全性评价

目的：评价b型流感嗜血杆菌结合疫苗的安全性,为Hib疫苗的免疫接种推广提供依据。方法：回顾性分析自愿接种Hib疫苗的10 087名6个月龄~5周岁的婴幼儿的资料,按年龄分为6~11个月龄组（1 163名）和12~59个月龄组（8 924名）;分析儿童接种后不良反应发生情况。结果：6~11个月龄组幼儿接种72 h后的局部不良反应发生率明显高于12~59个月龄组幼儿,差异具有统计学意义（P﹤0.05）;6~11个月龄组幼儿接种72 h后全身不良反应发生率高于12~59个月龄组幼儿,差异无统计学意义（P﹥0.05）。结论：b型流感嗜血杆菌结合疫苗在6个月龄~5周岁的婴幼儿中使用具有较好的安全性,但在接种过程中应密切关注幼儿出现的局部反应和全身反应,并进行及时处理。

高效阴离子交换色谱-脉冲安培法检测冻干b型流感嗜血杆菌结合疫苗的游离多糖含量

目的 建立高效阴离子交换色谱-脉冲安培(HPAEC-PAD)法检测冻干b型流感嗜血杆菌(Hib)结合疫苗中游离多糖含量的方法,并对其进行验证,为Hib结合疫苗的质量监控提供依据。方法 优化水解供试品的实验条件,利用HPAEC-PAD法检测供试品中多聚磷酸核糖基核糖醇(PRP)含量。色谱条件采用CarboPacPA10分析柱(2mm×250mm)与CarboPac PA10保护柱(2 mm×50 mm),氢氧化钠-醋酸钠溶液梯度洗脱,流速为0.25ml/min,脉冲安培检测器,进样体积为20μl。用乙醇分步沉淀法、C4固相萃取法和超速离心法分离Hib游离多糖,并对三种方法得到的结果进行比较。同时验证方法的系统适用性、特异性、线性、精密度及准确性。结果 确定水解条件为终浓度0.4mol/L的NaOH,于37℃振荡1.5 h。本公司生产的冻干Hib结合疫苗不可用C4固相萃取柱分离游离多糖,确定了超速离心联合HPAEC-PAD法为冻干Hib结合疫苗游离多糖检测的最适方法。该方法专属性、分离度良好;PRP浓度在0.1962~19.616μg/ml范围内与峰面积呈良好的线性关系,R2>0.99。3批供试品分别测定6次,RSD分别为4.1%、2.3%、3.3%,不同时间测得的中间精密度RSD分别为8.3%、3.6%和9.1%。游离多糖的加标回收率分别为102.9%、94.3%、92.0%,RSD分别为3.9%、8.7%、5.3%。结论 初步建立了冻干Hib结合疫苗游离多糖含量测定的超速离心联合HPAEC-PAD法。该方法具有良好的准确性、精密度及稳定性,可用于冻干Hib结合疫苗中游离多糖含量的检测。

冻干b型流感嗜血杆菌结合疫苗原液无菌检查方法的建立

通过本试验建立适用于冻干b型流感嗜血杆菌结合疫苗原液的无菌检查方法。方法:根据冻干b型流感嗜血杆菌结合疫苗原液的特性,选用0.1%蛋白胨水溶液为稀释液和冲洗液,在3个稀释及冲洗梯度下,以6种试验菌进行抑菌性方法学试验和停滞试验,选择最佳稀释及冲洗梯度,最终确认该方法的有效性。结果:采用无菌检查薄膜过滤法对冻干b型流感嗜血杆菌结合疫苗原液进行无菌检查,用100ml0.1%蛋白胨水溶液分别稀释和冲洗可满足该样品的无菌检查要求。

b型流感嗜血杆菌结合疫苗预防接种不良事件报告与分析

目的:观察b型流感嗜血杆菌结合疫苗的疑似预防接种不良反应(AEFI)发生率。方法:选取2018年12月-2022年03月成都欧林生物科技股份有限公司出库的1162433支Hib结合疫苗接种者为研究对象,通过中国AEFI监测信息管理系统收集AEFI 266例。观察不同年份、年龄段、性别及联合应用其他疫苗发生AEFI情况。结果:2018年12月-2022年3月,出库的1162433支Hib结合疫苗,发生AEFI共266例,发生率2.288/万支;266例AEFI中,痊愈212例,好转44例,不详10例。1岁发生AEFI 99例,占37.22%;6~11个月发生AEFI 93例,占34.96%。266例AEFI中,男155例,女111例,性别占比男:女=1.40:1。AEFI的临床表现发生率由高到低依次为发热、接种部位肿胀、接种部位硬结。266例AEFI中,单独使用Hib结合疫苗235例,占88.34%,联合其他药品31例,占11.66%。联合用药发生的不良反应单独用药时也可能发生,无新的药品-药品之间的相互作用。结论:Hib结合疫苗具有较好的免疫效果,AEFI发生率较低,且多为一般反应,提倡在适龄儿童群体应用并予以推广。