重组人生长激素中宿主蛋白的点─免疫结合测定法

本文应用碱性磷酸酶免疫斑点法，检测重组人生长激素中Ｅ．ｃｏｌｉ蛋白质。该法的最低检出量为１．９ｎｇ；线性范围为２．５～０．０３９μｇ／ｍｌ；平均回收率为１１５．２％，ＲＳＤ＝６．９９％（ｎ＝８）。并具有灵敏、特异、操作简便等特点。

白三烯B_4放射受体结合测定方法的建立及其特性的分析

白三烯Ｂ＿４放射受体结合测定方法的建立及其特性的分析赵宁，朱秀媛，程桂芳（中国医学科学院，中国协和医科大学药物研究所，北京１０００５０）白三烯Ｂ４（ｌｅｕｋｏｔｒｉｅｎｅＢ４，ＬＴＢ４）是花生四烯酸（ａｒａｃｈｉｄｏｎｉｃａｃｉｄ）５－脂氧酶代谢产物...

快速点免疫结合测定法检测血清甲胎蛋白及其临床应用

利用配对试验，选择最佳的大鼠单克隆抗体搭配，建立了检测血清甲胎蛋白（ＡＦＰ）的快速点免疫结合测定法（ＤＩＢＡ）。本法在２５分钟内可完成检测，敏感度达２５ｎｇ／ｍｌ。在检测１５３个临床血清样品中，本法与常规ＥＬＩＳＡ检测的结果全部相符。

用斑点免疫结合测定诊断蓝舌病病毒

最近,印度的研究人员研制出两种对蓝舌病病毒(BTV)

简单,快速同时测定乙肝表面抗原和甲胎蛋白点免疫结合？…

建立了一种同时检测乙肝表面抗原（ＨＢｓＡｇ）和甲胎蛋白（ＡＦＰ）的临床实验室方法。该方法建立基于双抗体夹心点免疫结合测定（ＤＩＢＡ），在单个的硝酸纤维膜（ＮＣ）孔上分别包被抗ＨＢｓＡｇ和抗ＡＦＰ单抗。选择最佳的实验条件，保证了快速、敏感，取约１０μｌ血清按常规一次检测，即可同时获ＨＢｓＡｇ和ＡＦＰ两项结果。在室温，孵育时间为１０ｍｉｎ条件下，ＨＢｓＡｇ检测的敏感度为２．５ｎｇ／ｍｌ。

冷杉梢斑螟化学感受蛋白DabiCSP8的配体结合特性分析

采用分子生物学和荧光竞争性结合测定等技术,研究了冷杉梢斑螟Dioryctria abietella雌虫性腺和雌、雄成虫足中高表达的化学感受蛋白DabiCSP8基因的表达特征和功能。定量分析结果表明,DabiCSP8基因在雌虫性腺中显著高表达,表达量分别是雌、雄虫触角的1232.27倍和3130.64倍;此外,该基因在雌、雄成虫足中表达量也较高。通过原核表达系统及亲和层析技术获得了13.64 kD的目的蛋白DabiCSP8。结合测定结果表明,DabiCSP8与探针N-苯基-1-萘胺(1-NPN)具有强的结合能力,结合常数(K_(1-NPN))为(1.61±0.02)μmol/L。β-紫罗兰酮是DabiCSP8的最佳结合配基,解离常数(K_(d))为(11.43±0.62)μmol/L。DabiCSP8结合腔内的极性氨基酸精氨酸46(Arg46)能够与β-紫罗兰酮形成两个氢键,暗示Arg46在该化合物的结合中起着重要作用。此外,DabiCSP8与部分杀虫剂具有中等强度的结合能力。

利用动静结合的方法测定单桩承载力

采用动静结合的方法检测单桩实际承载力 ,缩短了施工整体工期 ,简化了测试程序 。

新型多功能膜/基结合力测定仪的研制

采用改进划痕法原理及切向力检测临界载荷方法,研制了一种新型多功能膜/基结合力测定仪。该仪器结构新颖,实用简便,不仅能测定金属膜层与基体的结合强度,还能对金属膜层进行模拟单颗粒磨损试验。试验表明,该仪器具有较高的可靠性。

未结合胆红素直接测定法研究孕妇各项肝功能与新生儿高胆红素血症关系

目的探讨孕妇各项肝功能特别是未结合胆红素直接测定法结果与新生儿高胆红素血症的关系。方法对本院295例孕妇肝功能指标与新生儿高胆红素血症关系进行前瞻性研究。结果新生儿高胆红素血症患儿与孕妇血清转氨酶(ALT)、间接胆红素(直接测定法)(IBIL)、血清胆汁酸(TBA)存在相关性。结论我们可以监测围生期孕妇的肝功能,并能尽早的对新生儿高胆红素血症或核黄疸进行干预。

EDTA滴定法在高速公路路面施工检测结合料剂量问题的探讨

EDTA滴定法简便快捷,在高速公路路面施工中成为检测半刚性底基层、基层结合料剂量的首选方法,在甘肃谗柳高速公路路面施工中,通过试验验证,发现用EDTA滴定法测定的结合料剂量结果会随时间的变化而变化,本文对此进行阐述。

改进小麦粉磁性金属物测定方法的探讨

阐述了磁性金属物测定器法和磁铁吸引法测定小麦粉磁性金属物的缺点和弊端。磁性金属物测定器法受小麦粉中添加剂影响很大,测定结果偏高;磁铁吸引法重复性差,双试验结果误差很大,不能真实地反映小麦粉中磁性金属物含量,测定结果偏低。而用磁性金属物测定器和磁铁吸引结合法(简称双磁法),测定结果真实、准确,方法科学易行。

灭字脊虎天牛CSP基因的鉴定、表达谱及XquaCSP7基因的功能研究

基于已发表的灭字脊虎天牛Xylotrechus quadripes的触角转录组数据,采用BLAST同源搜索的方法从转录组中一共鉴定到14个CSP基因,所有CSP均具有全长序列、信号肽序列和4个保守的半胱氨酸。序列比对结果表明,灭字脊虎天牛CSP间氨基酸一致性差异较大(12%~73%),平均值为34%;具有C1-X6-C2-X18-C3-X2-C4的半胱氨酸保守模式。进化分析表明,除XquaCSP8和XquaCSP12外,其余XquaCSPs聚类到不同分支。表达谱分析表明,XquaCSP7基因在触角特异表达;XquaCSP4、CSP5、CSP12和CSP14基因在触角高表达;XquaCSP13基因在足特异表达;其余XquaCSPs基因在多个组织中有表达。结合测定结果发现,XquaCSP7与测试的21种寄主气味结合能力均较弱,荧光取代率在4.5%~13.5%之间,其中与苯乙酮的结合能力最强,荧光取代率为13.5%。研究结果可为后续灭字脊虎天牛CSP基因的功能研究奠定基础。

手持拉曼光谱仪在抗体类药物鉴别中的应用研究

目的:基于主成分分析(PCA)算法的Trutools模式,利用手持拉曼光谱仪建立快速鉴别抗体类药物的方法。方法:通过选取抗PD-1抗体、抗VEGF抗体、抗Her-2抗体,采集拉曼光谱数据,建立数据模型,分别对3种抗体进行鉴别。选择其中一种抗PD-1抗体,采用加热和光照两种条件对其进行加速降解处理,利用手持拉曼光谱仪对加速降解的抗体进行检测,研究所建方法能否检出加速降解的抗体。并通过分子排阻色谱(SEC-HPLC)、离子交换色谱(IEC-HPLC)及竞争结合酶联免疫吸附测定(ELISA)法对加速降解的抗体进行检测,与拉曼光谱检测结果进行比较。结果:通过建立的拉曼光谱数据模型可以鉴别3种不同类型的抗体,且拉曼光谱可以鉴别加速降解后的抗PD-1抗体。结论:手持拉曼光谱仪可以用来快速鉴别抗体类药物。本研究首次将手持拉曼光谱仪引入到抗体药物大分子检测中,为抗体类药物的现场快速鉴别及打假工作提供了新的工具与方法。

实验性哮喘豚鼠肺组织β-肾上腺素能受体的量变及电针刺激对其影响

本文采用放射配基结合法,观察了实验性哮喘豚鼠肺组织β-肾上腺素能受体的变化,并与正常动物作了比较。结果表明,哮喘豚鼠肺组织的β-受体结合~3H-DHA的最大结合量(BmAX)比对照组者低38%(P<0.01)。首次观察到随哮喘发作次数的增多,豚鼠肺组织β-受体的减少趋于明显;电针刺激可使哮喘豚鼠肺组织的β-受体数量恢复至对照动物水平。电针刺激对正常动物的β-受体数量未见有影响。

α_1受体在不同动物心室肌中的分布

本文采用放射性配基结合法测定四种哺乳动物心室肌中α_1受体密度及亲和力。α_1受体密度(B_(max))有明显种族的差异。大白鼠心室肌中的α_1受体密度最高(98.1±4.0fmol/mg蛋白),豚鼠、兔、人心室肌中的α_1受体密度分别为19.3±2.5,12.8±1.1,9.2±1.9fmol/mg蛋白。而其配基与受体部位结合之亲和力(K_d)则无明显差异。其生理及病理意义有待进一步探讨。

硫酸锌对5－HT与［~3H］granistron竞争NG108－15细胞中5－HT_3受体的影响

本文用放射配体结合测定法观察了硫酸锌对５－ＨＴ３受体激动剂５－ＨＴ与［３Ｈ］ｇｒａｎｉｓｅｔｒｏｎ竞争ＮＧ１０８－１５细胞中５－ＨＴ３受体能力的影响。结果证实，硫酸锌（１ｍＭ）能使５－ＨＴ竞争受体的浓度──反应曲线左移，半数抑制结合浓度降低（Ｐ＜０．０５），对斜率无明显影响。提示锌离子可能也影响５－ＨＴ３受体功能，有增强５－ＨＴ与５－ＨＴ３受体结合的作用。

钌(Ⅱ)配合物合成、表征及其与DNA相互作用研究

设计合成一个新的配体(CHIP)和它的两个钌(Ⅱ)多吡啶配合物[Ru(bpy)2(CHIP)](ClO4)2(bpy=2,2'-联吡啶,CHIP=2-环己基咪唑并[4,5-f]邻菲咯啉)和[Ru(phen)2(CHIP)](ClO4)2(phen=1,10-邻菲洛林),采用元素分析,质谱和1HNMR对其进行表征。用电子吸收光谱、粘度测试、DNA熔点变化研究配合物与DNA作用。研究结果表明配合物与DNA之间通过插入作用结合。

新医药学与转化医学

本文通过对转化医学的提出背景、发展目标、研究路线图的系统介绍和对东、西方医学体系的差异及趋势分析,较全面地阐述了转化医学对新医药学发展所带来的启示。中医药学的优势在于具有整体观、系统论的指导思想;强调天人合一,调节平衡;采用中药复方来进行个体化治疗等特点。但中医药学在现代化道路上尚需解决若干关键科学问题:中医药如何从限于自己解释自己的封闭系统转化成能容纳百川的开放系统;如何实现和其他现代科学(如系统生物学等)之间的结合、整合、融合;如何体现现代的科学模式、研究方式和研究成果,即用数据(Data)来表现,而不是用语言(Word)来表现等。尽管东西方医学体系存在很大的差异,但是东西方医学优势互补、相互融合的趋势已经出现,我们应有意识的实现东、西方医学的结合、整合、融合并上升为21世纪的新医药学。有中国特色的新医药学基本模式具有以下几个特点:①医药不分家的一体化研究,具有药物系统针对生命系统的"系统-系统"相互作用特性;②临床诊断具有"病证结合"的整体表达模式,即包含了中医证候量化指标、西医病理生化指标及影像学指标和临床系统生物学发现的生物标志物(基因、蛋白质、代谢物);③方、病、证对应的临床治疗模式,即针对"病证结合"的人体系统,用药形式是复方药物,达到"方、病、证对应,整体治疗,系统调节"的目标;④新药研发模式是"医生参与、医药结合",走"临床-动物-临床"的研发途径;⑤复方药物和人体两个系统的表征能采用整体表征和局部特征相结合、定性分析和定量测定相结合等模式。