植酸酶YiAPPA与生淀粉结合域SBD融合酶的构建及酶学性质分析

旨在获得酶学性质改良的植酸酶YiAPPA与生淀粉结合域SBD的融合酶。通过在植酸酶YiAPPA的C末端融合嗜热酸性α-淀粉酶GTamy的生淀粉结合域SBD,获得融合酶YiAPPA-SBD。酶学性质分析表明,YiAPPA-SBD的高温活性和热稳定性得到了提高,并获得了对生玉米淀粉的结合能力。其中YiAPPA-SBD于55-90℃范围内的相对酶活均高于YiAPPA的相对酶活;于80℃的半衰期提高约2倍;在生玉米淀粉浓度大于8%的条件下,YiAPPA-SBD对其结合率达到80%以上。并且YiAPPA-SBD保留有YiAPPA的其它优良酶学性质,最适反应pH为4.5,37℃的绝对酶活高达3 900 U/mg,具有优良的pH稳定性和蛋白酶抗性。

嗜热酸性生淀粉α-淀粉酶Gt-amy的C末端结构域功能及生淀粉结合位点分析

为确定嗜热酸性生淀粉α-淀粉酶Gt-amy中参与生淀粉结合的结构区域,对Gt-amy的C末端结构域(C-terminal domain,CTD)进行缺失突变,并比较Gt-amy及CTD缺失突变体Gt-amy-T的酶学性质。在与Gt-amy相同的条件下,Gt-amy-T不能结合和降解玉米淀粉,CTD可有效结合玉米淀粉。以可溶性淀粉为底物,Gt-amy-T的kcat值约为Gt-amy的77.9%。CTD的系统进化关系分析显示CTD不是典型的淀粉结合结构域,但是本研究证实CTD属于生淀粉结合结构域,在Gt-amy结合并降解生淀粉中发挥重要作用,并且CTD有利于Gt-amy发挥可溶性淀粉酶活力。此外,本研究将CTD中Tyr残基定点突变为Ala残基,通过比较CTD与突变体的玉米淀粉结合能力以及Gt-amy与Gt-amy W501A/W514A的玉米淀粉结合率和降解率,确定CTD中W501和W514可能是生淀粉结合位点。

生本结合:智障儿童数学应用能力的有效性

"生本理念"是现在一种新型的教育理念,它一切为了学生、高度尊重学生、全面依靠学生。在这种新型教育理念下,对于智力落后儿童的数学应用能力的教学,不仅要做到尊重学生的个性化发展,还要善于挖掘智力落后儿童的共同特点,利用其特点进行有效的、具有针对性的教学活动。并运用各种手段使学生通过"(投其所好)点燃学生学习兴趣→(情感共鸣)保持教学有效互动→(以声表情)循环练习→(巧用教具)内化数学知识"这一过程逐步培养其数学应用能力,真正做到"一切为了学生,为了学生的一切"。

刍议中职工学结合生实习前心理健康教育的重要性

要让在校就读一年以上的中职工学结合生顺利完成实习,就必须让工学结合生调整好社会角色转换的心理状态。本文针对学生出现的心理健康问题案例进行了调查和剖析,强调了学生心理健康的不可忽视性。

中职现代制造技术专业群“工学结合导生制”实训模式的可行性分析

本文采用文献资料法、调查法、比较分析法,“工学结合导生制”实训模式在教学实践中的实训模式的构建进行了梳理,显示出“工学结合导生制”实训模式在中职实训教学中运用的可行性与必要性,从而给出一些中职学校实训课教学的应用策略,为中职学校实训教学改革提供借鉴。

D407A/D430A双位点突变对嗜热酸性生淀粉α-淀粉酶GTamy酶学性质的影响

旨在研究位于嗜热酸性生淀粉α-淀粉酶GTamy的结构域A与生淀粉结合域RSBD间的Ca^(2+)结合位点对其酶学性质的影响,构建了GTamy的Ca^(2+)结合位点突变体GTamy D407A/D430A,并比较了GTamy与突变体GTamy D407A/D430A的酶学性质。结果表明,与GTamy相比,突变体的高温活性和热稳定性明显降低。突变体于80℃的比活力由1 756.75 U/mg降低至1 484.48 U/mg;80℃的半衰期由3 h降低至2.5 h。以可溶性淀粉为底物时,突变体的底物结合能力不变,反应速率为GTamy的79%;以玉米淀粉为底物时,突变体的底物吸附率为GTamy的67.9%,底物降解率为GTamy的59.3%。该Ca^(2+)结合位点可能通过改变RSBD和催化活性中心的分子结构来影响GTamy的高温活性和热稳定性。本研究表明该Ca^(2+)结合位点有利于GTamy维持高温活性和热稳定性。

大气挥发性有机物污染特征分析及控制措施研究

空气中的大气挥发性有机物一旦浓度过高,便会对人体及大气环境造成严重损害,故研究大气挥发性有机物污染特征分析及控制措施。采集某研究区站点环境空气样本,利用气相色谱/质谱联用仪测定大气挥发性有机物浓度。组成特征:研究区存在大气挥发性有机物污染现象,其中芳香烃类的污染物质最高;时间分布特征:冬季大气挥发性有机物浓度最高,按降序依次为春季、秋季、夏季;空间分布特征:东南方向地区的大气挥发性有机物浓度最大。针对以上发现,提出控制大气挥发性有机物污染的方法,以期为挥发性有机物污染监测与治理提供参考和借鉴。

以“德育作业”为突破口实施多元德育课程评价

本文作者进行了“德育作业”的实践研究，把“德育作业”的布置与德育课程评价紧紧结合起来：深入文本，设置主题德育作业内容；结合生本，丰富主题德育作业形式；根据校本，拓宽主题德育作业途径。其阶段性的盘点与整合，为期末的德育课程总评积累了素材，提供了依据，并取得了很好的效果。

民族声乐艺术中的“声情并茂”

民族声乐艺术是一种能够直接表现人们内心情感的艺术形式,不但声音悠扬,而且能够通过动人的声音表达内心的真情实感,并在展现其审美取向的同时传达出一种独特的神韵。所以,演唱者不但要注重声乐技巧的运用,还要注重情感的表达,只有做到"声情并茂",才能令声乐艺术达到感动观众的境界。