MSRE-PCR法检测卵巢癌组织中OPCML基因甲基化

目的建立甲基化敏感性限制性内切酶-PCR(MSRE-PCR)法检测OPCML基因,探讨其在卵巢癌中的意义。方法用亚硫酸氢钠修饰测序法检测5例卵巢癌组织及正常卵巢组织中OPCML基因甲基化,分别用MSRE-PCR和巢式甲基化特异性PCR(MSP)检测组织DNA中OPCML基因甲基化发生率。结果 DNA序列中存在6个Bsh1236I酶切位点,酶切24 h能完全消化非甲基化DNA,MSRE-PCR和巢式MSP检测卵巢癌组织中OPCML基因甲基化发生率分别为86.7%和84.4%,正常卵巢组织两法均阴性。结论 MSRE-PCR检测卵巢癌组织OPCML基因甲基化发生率与巢式MSP相比没有显著性差异,是一种操作简便、敏感的甲基化检测方法。

环状RNA circ-COPA在胃癌组织中表达的临床意义及其对胃癌细胞生物学行为的影响

目的:探讨环状RNA(circRNA)circ-COPA在胃癌组织中表达的临床意义及其对胃癌细胞增殖、侵袭、阿片样物质结合蛋白/细胞黏附分子样蛋白(OPCML)表达的影响。方法:选取2017年12月至2021年3月期间在深圳市宝安区福永人民医院接受手术治疗和病理检查的52例胃癌患者作为研究对象。采用定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)技术检测这些患者癌组织及癌旁组织中circ-COPA的表达量,并分析其癌组织中circ-COPA的表达量与其临床病理特征的关系。培养胃癌SGC7901细胞,分别将对照序列和circ-COPA序列转染到细胞中(将转染后的细胞分别作为Control组和circ-COPA组)。采用qRT-PCR技术检测两组细胞中circ-COPA的表达量。采用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法检测两组细胞的增殖能力。采用Transwell小室实验检测两组细胞的侵袭能力。采用qRT-PCR技术和Western blot技术检测两组细胞中靶基因的表达情况。结果:1)与癌旁组织相比,52例患者胃癌组织中circ-COPA的表达量较低,P<0.05。2)在52例患者中,年龄≥60岁患者与年龄<60岁患者中存在癌组织中circ-COPA低表达情况患者的占比相比,P>0.05;男性患者与女性患者中存在癌组织中circ-COPA低表达情况患者的占比相比,P>0.05;与病灶直径<5 cm的患者相比,病灶直径≥5 cm患者中存在癌组织中circ-COPA低表达情况患者的占比较高,P<0.05;与肿瘤TNM分期为Ⅰ期或Ⅱ期的患者相比,肿瘤TNM分期为Ⅲ期患者中存在癌组织中circ-COPA低表达情况患者的占比较高,P<0.05;与未发生淋巴结转移的患者相比,发生淋巴结转移患者中存在癌组织中circ-COPA低表达情况患者的占比较高,P<0.05。3)circ-COPA组细胞中circ-COPA的表达量高于Control组细胞,P<0.05。4)在培养2 d、3 d、4 d、5 d后,circ-COPA组细胞的吸光度均低于Control组细胞,P<0.05。5)进行Transwell小室实验的结果显示,与Control组细胞相比,circ-COPA组细胞的侵袭数较低,P<0.05。6)与Control组细胞相比,circ-COPA组细胞中OPCML mRNA和OPCML的表达量均较高,P<0.05。结论:与癌旁组织相比,胃癌组织中circ-COPA的表达水平较低。上调胃癌SGC7901细胞中circ-COPA的表达水平能够抑制其增殖和侵袭能力。circ-COPA对胃癌SGC7901细胞增殖和侵袭能力的影响可能与其能够促进OPCML基因的表达有关。