大鼠体内的葛根素浓度及药代动力学

目的:评价大鼠体内葛根素浓度及药代动力学,为临床葛根素用药方案制定选择提供参考。方法:建立葛根素在大鼠体内浓度测定方法,采用该方法进行葛根素药代动力学实验室研究,分析文献报道的高效液相色谱(HPLC)分析法检测葛根素含量方法,制定色谱条件:色谱柱:AcclaimC 18色谱柱(5μm,4.6 mm×150 mm),流动相:甲醇:水,检测器:Modle 500 UV检测器;检测波长:250 nm,色谱工作站:N2000双通道工作站。配制葛根素标准液、外标物溶液、待测血浆样品液、空白对照液等。分别进样行梯度洗脱,验证方法的专属性、线性关系、回收率、精密度、稳定性。选择12只洁净大鼠,雌雄各半,随机分为2组,将采用药典葛根素推荐剂量下限给予腹腔灌胃设为低剂量组,给予药典推荐剂量上线腹腔灌胃设为高剂量组。2组大鼠分别于灌胃后不同时间采集眼眶静脉血,采用已验证的HPLC分离检测方法检测血浆葛根素药物浓度,采用DAS2.0统计软件处理葛根素浓度-时间数据,绘制药时曲线图,计算药代动力学指标并行组间比较。结果:1)拟定色谱条件下,大鼠血浆空白溶液、葛根素对照溶液、葛根素血浆样品溶液中主要成分保留时间差异明显,未发生重叠,说明该方法专属性较好。2)加入不同浓度葛根素对照品于大鼠血浆中,所得浓度-峰面积呈良好的线性关系,回归方程为:Y=3.957×10^6X-697.329,r=0.9983,检测限:0.055~0.660μg/mL。不同浓度葛根素对照品回收率为(103.110±0.521)%,高浓度和低浓度2组回收率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。日内精密度为:3.14%,日间精密度5.26%;12 h内,放置不同时间的样品间葛根素含量检测相对偏差(RSD)为3.95%;不同灌胃剂量大鼠药时曲线均符合二室模型;大鼠灌胃葛根素后,不同剂量大鼠的AUC 0-t、C max、MRT 0-t、CL差异有统计学意义(P<0.05)。结论:采用HPLC检测大鼠体内葛根素方法可行,采用低剂量用药方案即可获得较好的药物吸收代谢效果,高剂量则影响葛根素吸收。