草酸钠结晶肾损伤肾小管上皮细胞中骨桥蛋白相关长链非编码RNA的差异表达

目的检测草酸钠诱导的人肾小管上皮细胞结晶肾损伤模型中与骨桥蛋白(OPN)相关的长链非编码RNA(lncRNA)的差异表达,并探讨OPN相关lncRNA在结晶肾损伤发病中的作用。方法利用草酸钠(20 mmol/L)刺激人肾近曲小管上皮细胞HK-2建立草酸钠诱导的结晶肾损伤肾小管上皮细胞模型。运用RNA干扰技术对其转染OPN小干扰RNA构建OPN敲低细胞模型(OPN-siRNA组),对照组细胞转染阴性随机对照序列(NC-siRNA组)。采用Arraystar公司提供的人类全基因组lncRNA芯片(V4.0)检测两组结晶肾损伤肾小管上皮细胞模型中与OPN相关的lncRNA和mRNA的差异表达水平,并采用生物信息学方法分析lncRNA芯片结果。结果全基因组lncRNA芯片结果显示草酸钠诱导的结晶肾损伤肾小管上皮细胞模型中与OPN相关的差异表达lncRNA共583个,其中OPN-siRNA组表达上调354个、下调229个;差异表达mRNA共235个,上调139个,下调96个。生物信息学分析结果显示差异表达lncRNA参与结晶肾损伤中细胞生长、酶活性调节等多种生物学过程。结论草酸钠体外诱导的结晶肾损伤肾小管上皮细胞模型中存在OPN相关的差异表达的lncRNA。

基于GC-MS技术的金钱草干预结晶肾损伤小鼠血清代谢组学研究

目的 利用血清代谢组学方法监测结晶肾损伤相关的代谢变化,评价金钱草提取物治疗结晶肾损伤的作用。方法 将21只野生型C57BL/6小鼠随机分为3组:空白对照组、结晶肾损伤模型组和金钱草干预组。采用乙醛酸盐诱导小鼠结晶肾损伤模型,给予6 d相应的治疗后,取小鼠血清进行气相色谱-质谱联用仪分析,结合模式识别筛选模型组和对照组之间的差异代谢物,并以此评价金钱草的治疗作用。结果 血清代谢组学分析鉴定了14种结晶肾损伤相关的生物标志物,包括嘌呤代谢物、氨基酸代谢物、脂肪酸代谢物等,同时数据显示金钱草提取物对结晶肾损伤有改善作用。结论 金钱草提取物能够通过调节失衡的嘌呤代谢、氨基酸代谢、糖代谢等途径而发挥预防和治疗结晶肾损伤作用。

LncRNA-ATB在草酸钙结晶诱导的HK-2细胞损伤、增殖抑制和上皮-间质转化中的作用

目的探讨长链非编码RNA lncRNA-ATB在草酸钙结晶性肾细胞损伤中的作用。方法以一水草酸钙(COM)结晶诱导HK-2细胞损伤为模型,应用短发夹RNA(shRNA)慢病毒构建干扰lncRNA-ATB表达的稳转细胞株;qRT-PCR检测lncRNA-ATB的表达;qRT-PCR和Western-blot检测上皮-间质转化(EMT)标志物的表达;CCK-8试剂盒检测细胞增殖;LDH试剂盒检测细胞损伤。结果COM刺激的HK-2细胞中lncRNA-ATB表达显著升高(P<0.05),细胞发生损伤,增殖受抑制且发生EMT;COM刺激后HK-2细胞的上皮细胞标志物E-cadherin和ZO-1表达水平明显降低、而间质细胞标志物N-cadherin和Vimentin表达水平显著上升(P<0.01)。干扰lncRNA-ATB的表达显著缓解COM刺激所致的细胞损伤(P<0.01)、增殖抑制(P<0.01)和EMT(P<0.05)。结论LncRNA-ATB可促进COM诱导的HK-2细胞损伤、增殖抑制和EMT,提示其可能参与调控草酸钙结晶性肾损伤。

尼龙-1010的增强辐射交联

用凝胶测定技术及广角X射线衍射(Wide angle X-ray diffraction,WAXD)等方法研究了尼龙-1010与添加了交联剂4,4′—双马来酰亚胺二苯甲烷(4,4′-Bismaleimideodephenylmathan,BMI)的尼龙-1010的辐射交联规律,试样的交联G值,结晶结构随吸收剂量的变化,讨论了交联剂存在下辐照对结晶损伤的影响。结果表明,多官能团单体的存在,不仅增强了辐射交联结构的生成,同时也促进了其结晶结构的辐射损伤,损伤的初始剂量减小。BMI单体主要存在于界面区,抑制应力键裂解、加强了界面交联,进一步导致结晶表面缺陷的积累和结晶度W_c下降,表明辐射损伤由晶面开始而逐步向结晶内部伸入。结晶度W_c、微晶尺寸L_(hkl)与剂量D关系表明,辐照初期W_c及L_(hkl)的增加与应力链断裂、氢键作用下分子链段重排有关,高吸收剂量的W_c与L_(hkl)的变化率与结晶比表面大小相关,010面较100面更易受损伤。