基于高分辨质谱的darobactin的结构解析策略

目的Darobactin(达罗巴汀)是一类经核糖体合成的翻译后修饰肽,该七肽具有独特的稠和双环结构,本研究建立了系统的基于高分辨质谱的darobactin组分的结构解析策略。方法依据文献中报道的在高能碰撞裂解(HCD)和碰撞诱导裂解(CID)模式下获得的一级及二级高分辨质谱数据,以碎片离子结构式的方式呈现了darobactin A的裂解途径,并修正了文献中部分碎片离子结构和质荷比的错误。针对特殊的双环结构,本文提出了基于生物合成路径的“逆向裂解途径”来确证1位和3位色氨酸之间因醚键断裂而生成的特征离子,并首次解析出包含特殊碳碳键的色氨酸-赖氨酸的碎片离子,为判断5位色氨酸被其他氨基酸(如精氨酸)取代提供了直接证据。结果建立了系统的darobactin A的结构解析策略,并以darobactin B/D/E的碎片离子加以验证,从理论上推导了其他darobacitn组分如C和F的特征离子。结论本文为快速判定darobactin新组分及其前体肽的结构提供了研究基础。

基于高效液相色谱-四级杆飞行时间串联质谱的棘白霉素B母核的结构解析策略

目的建立基于高效液相色谱-四级杆飞行时间串联质谱(HPLC-Q/TOF-MS/MS)的棘白霉素B母核(ECBN)及其杂质的结构解析策略。方法通过HPLC-Q/TOF-MS/MS对ECBN的碎片离子进行解析,总结了①~④4条碎片离子裂解途径,这4条裂解途径包括特征性b、y离子及氨基酸残基离子。另外,由于ECBN中含有较多羟基(8个)导致产生连续脱水离子峰,可以辅助推断ECBN类似物的结构。结果本研究首次建立了系统、完善的ECBN的结构解析策略,共解析了4个杂质的结构,包括已知杂质M和N,还发现了两个新的杂质:丝氨酸(2位)取代的ECBN[ECBN-Ser(2)]和3-羟基-4-羟甲基脯氨酸(6位)取代的ECBN[ECBN-4hMe3-Hyp(6)]。结论本研究为快速、合理解析ECBN或其衍生物中的杂质结构提供了方法,适用于棘白霉素类药物的质量研究。

新时代军队基层人才培养策略结构解析

加强新时代军队基层人才培养是实现强国强军战略的关键基础支撑,党的十九届五中全会把锻造高素质专业化军事人才方阵作为提高国防和军队现代化质量效益的重要规划内容,为加强新时代军队基层人才培养工作擘画了远景目标蓝图、赋予了鲜明时代内涵,也为军队基层研究思考具体方法策略提供了目标引领和信心动力。立足时代全新特点和人才成长规律,军队基层人才培养必须朝着科学化、体系化、精准化、实效化目标聚焦用力,深入研究解析培养策略内在结构本质原理,全体系打造升级人才培养的动力系统、操作系统、管理系统、支持系统和免疫系统,为打赢未来战争预先夯固根基、积蓄能量和厚实底数。

基于高效液相色谱-飞行时间质谱的替考拉宁组分的结构解析研究

目的建立一种基于高效液相色谱-四级杆飞行时间质谱(HPLC-Q/TOF-MS)的替考拉宁组分分离和结构解析的分析方法。方法采用Symmetry C_(18)色谱柱,以含0.1%甲酸的水溶液为流动相A,以含0.1%甲酸的乙腈溶液为流动相B,线性梯度条件洗脱。建立了基于高分辨质谱信息的替考拉宁的结构解析策略,详细归属了替考拉宁母核离子、低相对分子质量端的脂肪酰基-氨基葡萄糖及N-乙酰基葡萄糖胺特征离子所代表的碎片结构。结果首次系统总结了替考拉宁的裂解途径,发现了2个母核开环后的特征碎片离子。除《欧洲药典》10.0版中已收录的10个组分外,推导了11个具有替考拉宁母核的组分和4个脂肪酰基-氨基葡萄糖化合物,特别是具有不饱和脂肪酰基的组分,包括4个脂肪酰基含有双键(RS-8a、RS-8b、RS-10a和RS-10b)和1个含有共轭双键的组分(RS-6)。结论基于高分辨质谱的结构解析策略可用于替考拉宁未知组分的结构鉴定,为严格控制替考拉宁的质量提供了一种解决思路。

基于离线二维液质联用技术的多黏菌素E新组分的研究

目的建立一种基于离线二维高效液相色谱-四级杆飞行时间质谱技术(off-line 2D HPLC-Q/TOF-MS)的多黏菌素E(PME)组分的结构分析方法。方法采用《欧洲药典》10版中的硫酸多黏菌素E的分析方法,经半制备液相色谱分别收集含量超过0.15%的馏分,去除溶剂后,注入液质联用系统。在HPLC-Q/TOF-MS方法中,根据建立的基于高分辨质谱的PME的结构解析策略推导其他未知组分的结构。结果通过离线半制备技术既可以富集含量较低的组分,也可以继续通过第二维色谱进行分离,提高峰容量。经质谱分析,共检测到31个组分。除《欧洲药典》中收载的11个组分外,还检测到包括已知组分如多黏菌素E1(PME1)、多黏菌素E2(PME2)、多黏菌素E4(PME4)、多黏菌素E2-缬氨酸(PME2-Val)的异构体和氨基酸取代产物,如2位苏氨酸转化为丝氨酸的PME组分[PME-Ser(2位)]及脂肪酰基链上的取代产物如3′位羟基化的PME2组分(3′-OHPME2),并首次解析出5个PME的脱水化合物,即2位或10位苏氨酸脱水形成脱氢丁氨酸而产生的PME1或PME2脱水物。结论本研究中的off-line 2D HPLC-Q/TOF-MS可以更全面的评价PME产品中的组分,特别是新型PME脱水物的发现扩展了对PME结构多样性的认识,本方法能够更严格地控制该类产品的质量。