论结核分支杆菌特异性细胞免疫反应在结核性胸膜炎的临床意义

分析结核分支杆菌特异性细胞免疫反应在结核性胸膜炎的临床意义。方法 选择我院和第四人民医院2017年01月-2021年12月收治的结核性腹膜炎患者(n=200,例)为实验组进行分析,同期选择2017年01月-2021年12月来我院进行常规健康体检患者(n=200,例)为对照组进行分析,所有患者进行结核分支杆菌特异性细胞免疫反应。对比两组患者的A.TB、TST以及TB-AB阳性检测率。结果 实验组患者A.TB检测(50.00%)以及TST检测(20.00%)阳性检测率高于对照组A.TB检测(20.00%)以及TST检测(5.00%),有差异,(P<0.05);两组患者TB-AB检测阳性率无差异,(P>0.05)。结论 临床采用结核分支杆菌特异性细胞免疫反应,可以有效的提高临床结核性胸膜炎的阳性诊断率。

结核特异性细胞免疫反应试验在结核病中的诊断价值

目的通过对结核特异性细胞免疫反应（TB-IGRA）试验结果进行分析,探讨TB-IGRA在结核病诊断及鉴别诊断中的意义。方法收集甘肃省人民医院2014年1~12月住院的肺结核、疑似肺结核及肺外结核患者共1 366例,采用TB-IGRA检测结核分枝杆菌相关γ-干扰素,进行敏感度和特异性指标分析,与涂片镜检、结核抗体检测及结核分枝杆菌核酸检测方法进行比较。结果 TB-IGRA在肺结核及肺外结核病中的阳性检出率高达85.40%及86.20%,同时与涂片镜检、结核抗体检测及结核分枝杆菌核酸检测比较,其阳性率分别为82.90%、36.60%、11.00%和31.70%。TB-IGRA检测阳性率显著高于另3种方法。结论 TB-IGRA是检测结核分枝杆菌的快速敏感指标,且优于传统方法,在临床结核病诊断中有重要价值。

特异性T细胞体外释放酶联免疫法检测结核病的临床应用

目的:探究特异性T细胞体外释放酶联免疫法检测结核病的临床应用价值。方法:选取疑似发生结核病患者128例进行临床研究,患者均在医护人员辅助下完成结核菌素皮肤试验、特异性T细胞体外释放酶联免疫法、结核分枝杆菌分离培养检验,以结核分枝杆菌分离培养结果为金标准,统计前两种方法的诊断结果与诊断效能。结果:结核分枝杆菌分离培养结果如下,阳性、阴性检出率分别是62.50%与37.50%。结核菌素皮肤试验、特异性T细胞体外释放酶联免疫法的阳性率、阴性率比较差异无统计学意义(P>0.05)。特异性T细胞体外释放酶联免疫法的敏感性、特异性、准确性、阳性预测值、阴性预测值大于结核菌素皮肤试验(P<0.05)。结论:结核病临床诊断中应用特异性T细胞体外释放酶联免疫法,诊断效能较好,值得临床推广。

结核杆菌特异性细胞免疫与结核抗体辅助诊断男性生殖系统结核的价值

目的评价结核杆菌特异性细胞免疫与结核抗体辅助诊断男性生殖系统结核的价值。方法回顾性分析2017年1月至2020年6月于我院就诊的174例男性生殖系统结核及炎症病例,通过比较各种检验方式(方法A:结核杆菌特异性细胞免疫检测;方法B:结核抗体检测;方法C:串联检测;方法D:并联检测)的诊断效能评估其辅助诊断男性生殖系统结核的价值。结果两种检测方法的一致性较差(kappa=0.022),诊断结果差异有统计学意义(χ^(2)=31.7,P<0.001)。方法A(81.6%)及方法D(84.2%)的敏感性高于方法B(21.1%,χ^(2)=19.4,P<0.01)及方法C(18.4%,χ^(2)=22.0,P<0.01),方法B(93.9%)及方法C(100.0%)的特异性高于方法A(59.2%,χ^(2)=11.1,P<0.01)及方法D(57.1%,χ^(2)=18.1,P<0.01);方法C具有最高的敏感度(Se)、阳性预测值(PPV)及阳性似然比(LR+),具有最低的误诊率(α),方法D具有最高的特异度(Sp)、阴性预测值(NPV)、约登指数,具有最低的漏诊率(β)及阴性似然比(LR-);方法A-D的AUC面积依次为0.704、0.575、0.592以及0.686。结论两种检验方法同时为阳性时患有生殖系统结核的可能性最大,此时误诊率最低;两种检验方法同时为阴性时患有生殖系统结核的可能性最小,此时漏诊率最低;单独检测时,结核杆菌特异性细胞免疫检测比结核抗体检测具有更高的诊断效能;联合检测时,并联诊断效能高于串联诊断效能。

抗结核治疗中患者外周结核分枝杆菌抗原水平与特异性免疫应答相关性分析

目的:活动期结核病患者外周呈现相当水平的结核特异性细胞免疫应答,在治疗过程中也呈现一定的动态变化特征,这种结核特异性细胞免疫应答的抗原驱动因素则还未知。本研究通过同步分析肺结核患者在抗结核治疗过程中外周特异性抗原和抗原特异性T细胞应答水平的动态变化,探讨外周抗结核特异性细胞免疫应答的理论依据。方法:利用外周血抗原富集-质谱鉴定技术动态检测外周血浆中结核特异性抗原CFP-10在患者抗结核治疗过程中含量的动态变化,并采用流式细胞术同步分析CFP-10刺激后的T细胞应答水平,分析CFP-10含量变化与不同细胞因子分泌T细胞数量的相关性。结果:CFP-10抗原水平在患者治疗过程中呈现个体化差异,同时在TB治疗中CFP-10含量与CFP-10特异性IFN-γ^+CD4^+T细胞比例具有显著相关性(P=0.029),但是CFP-10的含量与TNF-α^+CD4^+T细胞比例之间则无相关性(P=0.98)。结论:本研究获得了结核病患者治疗过程中外周结核病原菌抗原的动态变化特征,据此可推断目前所采用的IFN-γ释放实验某种程度上可以反映患者外周结核分枝杆菌抗原的载量,上述基于结核病原学和机体免疫应答水平的同步检测,有利于进一步解析抗结核免疫应答的抗原驱动因素,并为建立新型抗结核治疗疗效评价的生物标志物提供前期理论依据。

结核分支杆菌培养上清诱导呼吸道上皮细胞IL-8表达

目的 :观察呼吸道上皮细胞对结核杆菌产物产生的炎症反应 ,探讨炎症反应信号传递的机制。方法 :制备结核分枝杆菌强毒力H37RV株培养上清 ,用培养上清刺激肺上皮细胞株SPC A 1和A5 49,酶联免疫吸附实验检测细胞IL 8表达量。用突变MyD88表达重组质粒转染SPC A 1细胞 ,观察MyD88与结核杆菌培养上清诱导上皮细胞炎症反应信号传递的关系。结果 :结核分枝杆菌强毒力H37RV株培养上清明显增加SPC A 1和A5 49细胞IL 8的表达。用突变MyD88表达重组质粒 pcDNA3 .1 mMyD88转染SPC A 1 ,结果显著抑制了结核杆菌培养上清对SPC A 1细胞的炎症刺激作用。结论 :结核杆菌培养上清能够诱导呼吸道上皮细胞IL 8表达 ,Toll/IL 1受体信号通路及MyD88分子与细胞炎症反应的信号传递相关 ,提示在肺结核病发病过程中 ,结核杆菌的代谢产物可能刺激肺上皮细胞产生炎症细胞因子 。

母牛分支杆菌菌苗应用于老年复治涂阳肺结核患者的临床观察

目的探讨母牛分支杆菌菌苗(M.Vaccae)应用于老年复治涂阳肺结核患者的临床疗效及对免疫功能的影响。方法老年复治涂阳肺结核患者106例,随机分入微卡治疗组及对照组(各53例),化疗方案均为3HRZE/6HR,治疗组加用M.Vaccae治疗,分别观察治疗前后症状与体征、胸部X线变化、痰菌、免疫功能状态及不良反应等。结果治疗后两组在症状体征、肝肾功能、体液免疫等指标的对照中无明显差异(P>0.05),两组CD3、CD4水平均有明显升高(P<0.05),但两组对照无明显差异(P>0.05);在病变吸收、空洞缩小、痰菌阴转、NK细胞上升、PPD阳转等方面,治疗组明显高于对照组(P<0.05);治疗组无明确因M.Vaccae导致的副作用。结论M.Vaccae可加快老年复治涂阳肺结核患者病变吸收、空洞缩小、痰菌转阴的速度,调节细胞免疫功能,无明显不良反应。

结核分支杆菌分泌蛋白Mtb81克隆、表达、纯化及血清学诊断价值的初步研究

目的通过结核分支杆菌Mtb81基因在大肠杆菌中的表达,获得大量纯化的重组Mtb81蛋白。通过Western-blot和ELISA方法评价Mtb81抗原,检测血清中抗结核抗体的灵敏度和特异性,为进行结核病血清学诊断打下基础。方法应用PCR技术扩增结核分支杆菌H37Rv Mtb81DNA序列;构建pET24b-Mtb81重组质粒,然后转化入表达宿主大肠杆菌BL21(DE3);通过Western-blot鉴定重组Mtb81蛋白,采用Chelating Sepharose Fast Flow纯化重组Mtb81蛋白;将纯化的重组Mtb81蛋白通过Western-blot、酶联免疫吸附试验(ELISA)方法,检测结核病人及正常人血清中的抗体,应用Microsoft Excel软件统计分析实验数据。结果pET24b-Mtb81在大肠杆菌BL21(DE3)细胞内以包涵体形式存在,表达量占菌体总蛋白的30%左右。纯化后的Mtb81样品经SDS-PAGE和光密度扫描分析表明其纯度为95%左右。纯化后的Mtb81蛋白通过Western-blot鉴定,结果显示:加入结核病人血清抗体于目的蛋白位置有一条显色带,而加入正常人血清组则无显色反应;酶联免疫吸附试验(ELISA)方法,检测30例结核病人及正常人血清中的抗体,结果显示:rMtb81的特异性和灵敏度分别为96%、93%。结论pET24b-Mtb81大肠杆菌工程菌株能高效表达Mtb81蛋白,Western-blot结果证明表达蛋白具有很好的免疫反应性和抗原特异性;ELISA结果证明重组Mtb81检测结核病人血清中的抗结核抗体,具有较高的灵敏度和特异性。

结核特异性转移因子研究概况

近20年来,由于流动人口增加,艾滋病迅速蔓延(艾滋病多伴发结核)、结核菌耐多药株的大量出现以及卡介苗对成人预防效果欠佳等原因,使全球乃至我国,结核病呈明显上升趋势.结核病已被列为全球危害最为严重的三大传染病(疟疾、结核、艾滋病)之一.我国已成为仅次于印度的结核大国.……

酶联免疫斑点检测（TSPOT-TB）结核分枝杆菌与结核病的相关性分析

目的研究酶联免疫斑点（T SPOT-TB）检测结核分枝杆菌特异性T细胞与结核病的相关性分析。方法用酶联免疫宽点技术测定早期分泌性抗原靶ESAT-6和ESAT-10特异性T细胞，由传染病研究所证实或可疑的72例病人作为实验对象，并将TSPOT—TB的测定结果和传统的诊断方法相比较。结果64例肺结核或肺外结核病人中，TSPOT—TB方法检测到63例，表明其灵敏度为98．4％。其中的45例病人同时做结素实验，仅有40例呈阳性（89％），而TSPOT—TB测定100％为阳性（P=0．056）。72例病人中，有6人被排除活动性结核，其中5（83．3％）人TSPOT-TB实验阴性，因此可以在可疑活动性结核病人快速排除非结核病人。结论TSPOT-TB实验对检测结核是一种灵敏的方法，对现在低发病率背景下检测结核的诊断程序及治疗监测是一种有用的补充。

结核杆菌对小鼠巨噬细胞吞噬功能的影响观察

结核病严重危害着人类的健康,1998年世界卫生组织(WHO)统计表明,目前全世界有1/3的人口受结核杆菌的感染,每年约300万人死于肺结核[1].我国卫生部对全国结核病进行的流行病学调查表明,我国的结核病疫情仍然相当严峻,并呈上升趋势.结核杆菌侵入机体后引起的特异性免疫主要是细胞免疫,而巨噬细胞与结核杆菌的粘附和吞噬是宿主与病原体作用的第一步,而且很可能是结核杆菌在体内最终结局(清除、潜伏感染、原发性结核病或重新活动)的重要因素之一[2],有资料表明,机体对结核杆菌的反应性与机体是否初次接触结核杆菌有关[3],但巨噬细胞对结核杆菌的反应性与机体是否预先致敏的关系尚不清楚,我们用结核杆菌及卡介苗分别免疫小鼠,观察结核杆菌对小鼠巨噬细胞吞噬功能的影响.

结核分支杆菌H_(37)Rv株抗原成份分析

通过免疫印迹技术(W estern b lotting),用结核杆菌的单克隆抗体及兔抗结核菌多克隆抗体对结核分支杆菌H37R v的菌体蛋白和培养液蛋白成份进行了初步分析,发现固体培养菌与液体培养菌的菌体具有基本一致的多肽抗原成份,而培养液中的抗原成份与前两者差异稍大。通过筛选和鉴定结核分枝杆菌的特异性和保护性抗原,研究结核杆菌的免疫反应特点,为探索结核病的诊断和治疗的新途径奠定了一定的基础。

结核杆菌热休克蛋白70-乙型肝炎表面抗原诱导特异性免疫反应

目的 研究体外构建结核杆菌热休克蛋白和乙型肝炎表面抗原复合物(HSP70-HBsAg)诱导针对乙型肝炎表面抗原特异性免疫反应能力,为该复合物的临床应用奠定基础。 方法 考察体外构建HSP70-HBsAg复合物是否能引起小鼠的体液和细胞免疫;将复合物负载树突状细咆(D C),D C激活同源的T淋巴细胞产生细胞毒性T淋巴细胞(CTL),检测其杀伤HepG2-S细胞的能力。 结果 HSP70-HBsAg复合物能引起小鼠的体液免疫和细胞免疫;HSP70-HBsAg和HBsAg均可诱导CD 81 T淋巴细胞的特异性CTL,而前者的诱导效果更强。 结论 体外构建的HSP70-HBsAg蛋白复合物具有免疫原性,HSP70可以增强抗原蛋白诱导特异性免疫反应的能力,HSP70～HBsAg有望作为蛋白疫苗用于临床慢性乙型肝炎的免疫治疗。

肺结核患者外周血自然杀伤细胞和T细胞数量和细胞因子水平变化

抗结核免疫低下是结核易感及发展为活动性病变的主要因素。小儿和老人是结核病的好发人群，可能是因为小儿免疫系统不成熟而老人免疫功能渐渐衰退所致。机体对抗外来病原体的入侵首先是依赖先天免疫做出快速而强烈的反应，随后才是具有抗原特异性的获得性免疫反应。在结核病状态下，

肺结核诊断中结核感染T淋巴细胞试验的应用价值

目的探讨肺结核诊断中结核感染T细胞试验的应用价值。方法本次研究选取我院于2017年11月-2018年10月收治的疑似肺结核患者100例作为研究对象,均接受结核感染T细胞试验和结核分支杆菌抗体检测,对比两种方法诊断肺结核的敏感性、特异性。结果T-SPOT.TB诊断肺结核的敏感性为97.0%,显著高于结核分支杆菌抗体,且其诊断特异性为显著低于结核分支杆菌检测,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论与结核分枝杆菌抗体检测相比,采用T-SPOT.TB诊断的检出率更高,且其灵敏性远高于结核分枝杆菌特异性细胞免疫反应,而特异性却相差不大,值得临床推广。

流式细胞因子检测技术及其在结核病中的应用

细胞因子主要介导和调节免疫应答及炎症反应。正常情况下．细胞因子的表达和分泌受到严格的调控，病理状态下会出现异常表达．故检测细胞因子对于疾病的诊断、治疗具有重要意义。细胞因子免疫学检测方法基本原理是将细胞因子作为抗原，用针对该抗原的特异性抗体进行定量或定性的检测。既往检测技术主要采用ELISA法．由于细胞因子半衰期不同．其检测结果的准确性降低。

现代免疫学的特点简介及进展点滴

现代免疫学的发展,无论技术或理论方面都是十分迅速而且非常广泛的,它不仅涉及予防医学,更与临床医学及基础医学产生日益密切的联系,并且对医学以外的学科如理学,农学等都起到一定的促进作用。因此有人认为,免疫学是边缘学科,也是医学中的带头学科。现代免疫学的发展特点,概括起来有如下几个方面:1.由传染性免疫这一条战线扩展。

副结核分枝杆菌MAP0862蛋白的重组表达及抗原性分析

为了验证MAP0862蛋白在副结核分枝杆菌感染鉴别诊断中的作用,试验以从发病山羊消化道病料中提取的副结核分枝杆菌基因组DNA为模板,克隆MAP0862基因并构建重组表达载体pET28a-MAP0862,然后对其进行诱导表达及Western-blot分析。结果表明:检测到的羊副结核分枝杆菌MAP0862基因与GenBank中K10菌株基因完全相同;重组表达载体pET28a-MAP0862经IPTG诱导表达出约40 ku的目标蛋白,与预期结果相符;Western-blot对比分析显示, MAP0862蛋白只与羊副结核阳性血清发生显色反应。说明MAP0862蛋白具有良好的免疫反应原性和特异性。

结核感染T细胞斑点试验对脊柱结核的诊断价值

目的探讨结核感染T细胞斑点(T-SPOT.TB)试验在脊柱结核诊断中的应用价值。方法将2015年1月至2016年12月佛山市南海区人民医院收治并确诊的脊柱结核与非结核各50例患者,分为结核组与非结核组。两组患者均行T-SPOT.TB检测、结核菌素纯蛋白衍化物(PPD)皮试、抗结核抗体检测,比较3种诊断方法的检测结果。结果 T-SPOT.TB试验检测脊柱结核的敏感度为88%,特异度为94%,阳性似然比为14.667,阴性似然比为0.126,明显优于PPD皮试和抗结核抗体检测;对脊柱结核组T-SPOT.TB检测与其他两种检测方法进行配对比较,差异亦有统计学意义(P<0.05)。结论 T-SPOT.TB试验诊断脊柱结核灵敏度及特异度较高,检测结果真实可靠,具有较好的应用价值。