靶向高通量测序在非结核分支杆菌肺病诊断中的应用

非结核分枝杆菌(non-tuberculosis mycobacteria,NTM)肺病作为临床常见病种,近年来呈快速增多趋势,其诊断是临床亟待解决的难题,尽早明确菌株对NTM肺病的临床治疗有重要指导意义。传统检验方法因检测周期长、敏感度低、阳性率低等局限性常导致误诊、误治,已不能满足目前临床诊断的需求,靶向高通量测序(tNGS)技术是一项正在飞速发展的新兴技术,对比传统检验方法存在诸多优势,在一定程度上能够克服传统检验技术的缺点,并逐步应用于临床,但目前仍存在不足之处,本文对其在NTM肺病诊断中的应用做一综述。

66例非结核分支杆菌肺病的临床分析

目的 了解非结核分支杆菌 (NTM )肺病的临床特征。方法 对 1998— 2 0 0 2年 4年间广州地区 4 12 9例分支杆菌培养阳性的病例中 ,经菌型鉴定而确诊为NTM肺病的资料完整的 6 6例病例进行分析。结果 6 6例NTM肺病中 ,快速生长型感染的有 4 0例 ,其中脓肿分支杆菌 2 9例 ,龟分支杆菌 7例 ,耻垢分支杆菌 3例和偶然分支杆菌 1例 ;慢速生长型感染的有 2 6例 ,其中鸟分支杆菌 18例 ,胞内分支杆菌 6例 ,蟾分支杆菌和海分枝杆菌各 1例。分枝杆菌混合感染的有 10例 ;新发现病例16例 ,病程在 1～ 10年的有 31例 ,11～ 2 5年 11例 ,30年以上的有 8例 ;主要症状依次为咳嗽、咳白粘痰、咯血和发热 ;X线胸片示两侧受累者达 6 9.7% ,右侧 2 1.2 % ,左侧仅有 4 .5 % ,无病灶者占4 .5 % ;出现胸腔积液的有 7例 ;NTM对抗结核药物呈现高度的原始耐受性 ,但对喹诺酮类、大环内脂类和氨基糖甙类的耐药率相对较低。结论 NTM肺病的临床特征无特异性 ,病程长 ,常规的抗结核治疗效果差。

肺非结核分支杆菌病的CT征象分析

目的探讨肺非结核分支杆菌病CT表现。资料与方法回顾性分析70例确诊的肺非结核分支杆菌病CT表现。结果CT表现结节63例,斑片、片样实变68例,空洞56例,薄壁空洞48例,支气管扩张62例,树芽征25例,磨玻璃影6例,线状及纤维条索影22例。结论肺非结核分支杆菌病CT表现与结核类似,需结合其它表现进行诊断。

牛鼻腔分泌物非结核分支杆菌分离培养结果分析

目的调查非结核分支杆菌在牛中的感染情况。方法对174头牛鼻腔分泌物,按中国防痨协会1995年11月颁布的“结核诊断细菌学检验规程”进行非结核分支杆菌分离培养和鉴定。结果从174份标本中分离出分支杆菌88株,阳性率为50.5%,其中草分支杆菌占22.7%、偶然分支杆占21.5%、戈登分枝杆菌占17.3%、不产色分支杆菌占14.8%、土分支杆菌占10.2%、龟脓肿分支杆菌占9.1%和鸟胸分支杆菌占2.2%。结论非结核分支杆菌在牛中存在的现象应引起重视,其毒力对人类的影响应进一步研究,以便采取有效的措施,保护人群的健康。

非结核性分支杆菌皮肤感染63例临床分析

目的 探讨皮肤软组织肌注后龟分支杆菌皮肤感染的临床特点、诊断和治疗手段。方法 分析 2 0 0 0年 12月～ 2 0 0 1年 3月 6 3例非结核性分支杆菌皮肤感染患者的临床表现、病理、B超、药物敏感试验、治疗结果。结果 6 3例患者的 99处感染灶可分为混合溃疡型 5 1例次 ,脓肿型 2 8例次 ,硬结型 16例次 ,蜂窝织炎型 4例次。病理显示为肉芽肿、类结核结节占多数。其中 38例经细菌培养证实为龟分支杆菌感染。全部病例经敏感抗菌药和抗结核药联合应用及外科治疗后 6～ 8个月痊愈。结论 皮肤软组织龟分支杆菌感染暴发流行很罕见 ,临床表现多样化 ,易反复 ,病程长 ,对多种抗菌药物耐药 ,治疗困难。

非结核分支杆菌相关皮肤及软组织感染研究进展

自1882年Koch宣布发现人结核分支杆菌（MTB）以来，就不断有发现非结核分支杆菌（NTM）的报道。NTM是指结核分支杆菌复合群和麻风分支杆菌以外的其它分支杆菌。广泛存在于水及土壤中。近年来，在世界各地不断出现暴发流行，尤其是可导致院内感染，并在国内外的整形美容外科中有增加的趋势，该领域的感染主要涉及皮肤及软组织。不易早期诊断，而且治疗困难，预后不佳。

应用双重PCR技术快速鉴定结核与非结核分支杆菌

目的 :建立双重PCR技术快速鉴定结核与非结核分支杆菌。方法 :通过试验选择双重PCR最佳反应条件 ,检测引物A1、A2和B1、B2扩增分支杆菌的特异性及扩增结核分支杆菌的敏感性 ,并对 34株结核分支杆菌和非结核分支杆菌临床分离株鉴定。结果 :引物A1、A2能扩增所试 2 4种分支杆菌 ,B1、B2仅扩增结核分支杆菌复合体菌种 ,两对引物扩增 12种非分支杆菌均为阴性。结果表明 ,用引物A1、A2扩增分支杆菌属共有的 6 5Kda抗原基因383bp片段和B1、B2扩增结核分支杆菌复合体特异的插入序列IS10 812 38bp片段鉴定结核与非结核分支杆菌是特异的。两对引物双重PCR检测结核分支杆菌DNA的敏感性分别为 1Pg和 10 0fg。双重PCR检测 34株临床分离株 ,结核分支杆菌可见 383bp和 2 38bp两条扩增带 ,非结核分支杆菌仅见 383bp一条扩增带。据此差别 ,能将结核与非结核分支杆菌鉴别开 ,并能在 1～ 2d完成试验。结论

面部溶脂针注射致非结核分支杆菌感染的救治策略

目的:回顾性分析经小切口适度清创配合规律抗结核治疗面部注射溶脂针后非结核分枝杆菌感染并发症的方法,探讨面部非结核分支杆菌感染合理、有效的救治策略。方法:2009年4月至2015年7月我科共收治9例面部注射溶脂术后合并非结核分枝杆菌感染患者,采用在感染灶设计3~5mm小切口,进行多次的适度清创、持续负压吸引、间断冲洗,静脉给予硫酸阿米卡星注射液、乳酸环丙沙星氯化钠注射液,口服异烟肼片、利福喷丁胶囊抗结核治疗,口服联苯双酯滴丸保护肝脏功能,辅助理疗等综合治疗;出院后口服异烟肼片、利福喷丁胶囊、吡嗪酰胺胶囊、克拉霉素胶囊抗结核治疗6~12个月。结果:经30~90d院内上述综合方法治疗,感染病灶基本愈合;院外继续口服药物抗结核治疗,8例13部位在保持正常面部容貌的前提下,非结核分支杆菌得到治愈,1例患者因院外用药不规律,出院后2个月病灶复发,继续住院再次上述治疗后治愈;随访1~4年均无复发,经门诊激光治疗,面部外观得到进一步改善。结论:对面部注射溶脂术后合并非结核分枝杆菌感染的患者,采取上述综合治疗策略,不仅能有效控制非结核分支杆菌感染,而且能减少面部损伤,减少治疗美容注射术后并发症的二次损伤,可恢复至正常外观,值得临床推广。

HRCT在非结核分支杆菌肺病诊断及随访中的价值

目的:探讨非结核分支杆菌肺病的HRCT表现及其在随访中的应用价值。方法:回顾性分析经临床确诊的50例非结核分支杆菌肺病的HRCT资料,并对随访的23例患者治疗前后的HRCT资料进行对比分析。结果:3个肺叶及以上受累占94%(47/50),上叶受累占98%(49/50)。HRCT上所有病例均能检出结节病灶及树芽征,显示有斑片状影47例,空洞29例,纤维条索影29例,支气管扩张43例。病变通常以多种形态混杂存在。23例随访患者HRCT表现:10例病灶影像学变化不明显,5例好转,8例缓慢进展,其中6例由原来的斑片影、磨玻璃影及结节影演变为空洞。结论:胸部HRCT对非结核分支杆菌肺病的诊断及随访具有重要价值。

痰标本分离非结核分支杆菌44例报告

目的探讨痰标本鉴定非结核分支杆菌(NTM)的意义。方法对本院1997年9月～1999年3月255份痰标本鉴定的44株NTM与相对应的37份临床资料对照分析。结果NTM检出率17.3%,NTM对抗结核药总耐药率79.5%。37例NTM检出者抗结核治疗病灶吸收好转率83.3%,24例痰菌阴转率83.3%,反复痰鉴定为NTM者病程长,耐多种抗结核药。结论NTM感染及引发的疾病必须引起医学检验与临床的重视。痰标本一次鉴定的NTM大部分为寄生菌,实验室有必要进一步开展NTM的菌种鉴定技术。连续痰鉴定为NTM者为NTM肺病高度可疑者。诊断多耐药肺结核,必须除外NTM肺病。

长期机械通气并发非结核分支杆菌肺病的诊治

目的分析长期机械通气患者并发非结核分支杆菌肺病诊治过程。方法对1例老年长期机械通气患者并发非结核分支杆菌肺病X线、痰菌、实验室检查及治疗结果进行系统的分析。结果通过X线、痰菌、实验室检查确诊为非结核分支杆菌肺病,给予帕司烟肼(异烟肼+对氨基水杨酸,力克肺疾)、利福喷汀、左氧氟沙星及克拉霉素治疗,X线所示肺部阴影吸收,痰菌转阴。结论长期机械通气除注意呼吸机相关肺炎外,还应注意非结核分支杆菌肺病,给予联合治疗。

儿童非结核分支杆菌脑膜炎误诊分析

非结核分支杆菌脑膜炎与结核分支杆菌脑膜炎的临床表现、射线胸片特征极为相似,仅靠胸片和痰菌抗酸染色涂片无法区分。临床上在未行抗酸杆菌菌型鉴定的情况下,即给予抗结核治疗是造成误诊的主要原因。儿童非结核分支杆菌脑膜炎病的临床特点:1)儿童患者可以发病;2)呼吸系统症状较轻,缺乏特异性,神经系统症状明显,且病情进展迅速,脑脊液生化似化脓性脑膜炎改变;3)脑脊液检查到NTM阳性;4)抗化脓菌治疗无效,抗痨治疗有效,但病情反复,易复发;5)经长期规律抗痨治疗可治愈。

结核分支杆菌与非结核分支杆菌快速鉴别的实验研究

目的探讨提供一种从菌种水平快速检测和鉴别分支杆菌的方法。方法应用三对分别对应于分支杆菌(分子量65000)表面抗原、结核分支杆菌插入序列IS6110及人类β珠蛋白基因的部分序列的特异性寡核苷酸引物对受试菌种及临床标本中的DNA进行多重PCR扩增,其扩增产物分别为439bp、268bp及123bp,并对439bp进行BstEⅡ和HaeⅢ两种限制性内切酶消化,同时,将135例临床标本进行培养、涂片,和多重PCR联合限制性片段长度多态性分析(mPCRRFLP)检测。结果mPCRRFLP方法可将12种受试的标准菌种分别区分到种及亚种水平。本方法在临床实验中亦体现出较高的灵敏性及特异性。结论mPCRRFLP分析是对结核分支杆菌与非结核分支杆菌进行菌种分类鉴定的一种快速有效的方法。

一例非结核分支杆菌肺病并发感染性休克的护理

非结核分支杆菌病是指由人、牛结核分支杆菌和麻风分支杆菌以外的非结核分支杆菌（Nontuberculous mycobacteria,NTM）引起的疾病[1]。人体感染NTM后只有极少数人发病,目前国内文献报道的患者数仅百余例,NTM病具有全身中毒症状和局部损害等临床表现,主要侵犯肺部引起NTM肺病[2]。

副结核分支杆菌实时荧光定量PCR检测方法的建立及应用

为加强副结核分支杆菌(MAP)的检测、监测与防控,建立MAP荧光定量PCR(qPCR)检测方法,根据国内MAP流行菌株特异性插入序列IS900设计1对特异性引物和探针,构建重组阳性质粒用作建立qPCR的模板,优化反应体系和条件,验证该方法的特异性、敏感性和重复性。结果显示,该方法最低检测限为5拷贝/μL;重复试验中批内和批间变异系数均小于4%;与牛传染性鼻气管炎病毒、牛副流感病毒3型、牛轮状病毒、牛病毒性腹泻病毒、牛支原体、肺炎克雷伯菌和曼氏杆菌等病原检测无交叉反应,能特异性检出MAP。应用建立的qPCR开展了内蒙古自治区6个市的MAP临床样品检测和流行情况分析,结果显示MAP平均阳性率为0.85%(6/704)。结果表明,成功建立了MAP的实时荧光定量PCR检测方法,可用于临床中MAP的监测和调查,为MAP疾病诊断与监控提供了快捷的方法。

河南省部分地区青少年非结核分支杆菌感染情况调查研究

本文对我省南阳、驻马店两地区2695名青少年学生进行了 PPD-T 及 PPD-B 分臂皮内注射对照试验,结果发现,PPD-B 阳性感染率达11.2%,非结核分支杆菌感染率为8.1%,且有地区差异。

社区获得性快生长型非结核分支杆菌肺病58例分析

目的 了解社区获得性快生长型非结核分支杆菌肺病的临床特点。方法 对 1986年 1月～ 1997年间痰抗酸杆菌培养阳性 390 7例中 ,经菌型鉴定证明为快生长型非结核分支杆菌肺病者 5 8例进行回顾性分析。结果 按 Runyon分类法 ,感染 型偶然分支杆菌 38例 ,龟分支杆菌 2 0例 ;男 39例 ,女 19例 ;病程 8～ 40年 ;主要症状咳嗽、咯白粘痰、咯血、发热 ;X线胸片两侧受累者 6 0 .3% ,左侧 2 4.1% ,右侧 15 .5 % ;对异烟肼、链霉素、乙胺丁醇、利福平、对氨基水杨酸、丙硫异烟胺耐药率很高 ,而对卡那霉素耐药率相对较低。结论 快生长型非结核分支杆菌肺病者病程长、症状不特异、耐药率高、抗结核治疗疗效差。

应用BACTEC 460 TB系统区分出的非结核分支杆菌进一步菌种鉴定意义的探讨

本文对 １９９１～１９９４年从临床痰标本中以 ＢＡＣＴＥＣ ＮＡＰ法区分出并保留下来的５２株非结核分支杆菌进行了菌种鉴定，结果；鸟－胞内分支杆菌２５株（４８．１％）；龟－偶然分支杆菌６侏（１１．５％）；瘰疬分支杆菌４株（７．７％）；戈登分支杆菌８株（１５．４％）；微黄分支杆菌３株（５．８％）；结核分支杆菌４株（７．７％）；未定菌种２株（ ３．８％）。与此同时，对其中病历资料较为完整的％株菌株所对应的２９份病历与临床进行了核实。结果：确诊为肺结核病的１７例（株）；诊断为非结核分支杆菌病的７例（１４株）；另有５例（株）诊断为肺炎、癌症及稳定结核病灶等其它肺部疾病。由此可见，只有将菌种鉴定结果与相应的临床病例相结合，才具有实际意义。