结核分枝杆菌/利福平耐药性实时荧光PCR检测与抗酸染色在肺结核中的诊断价值

目的评估并分析结核病诊断中结核分枝杆菌/利福平耐药性实时荧光PCR检测(GeneXpert MTB/RIF)技术与抗酸染色的诊断价值。方法选取2019年10月至2021年10月中新广州知识城医院收治的80例疑似肺结核患者作为研究对象,采用GeneXpert MTB/RIF技术检测、抗酸染色检测,以临床病理诊断为金标准,比较两种方法的阳性率、诊断效能。结果80例疑似肺结核患者经临床病理诊断确诊42例,GeneXpert MTB/RIFF检测阳性率高于抗酸染色阳性率;GeneXpert MTB/RIF检测诊断灵敏度、特异度、准确度分别为90.48%、100.00%、95.00%,抗酸染色的诊断灵敏度、特异度、准确度分别为33.33%、100.00%、65.00%,GeneXpert MTB/RIF技术诊断灵敏度、准确度高于抗酸染色结果,差异有统计学意义(P<0.05)。结论在肺结核诊断中应用GeneXpert MTB/RIF具有显著的诊断价值,大大提高结核分枝杆菌、利福平耐药性检测的灵敏度及特异度,为疾病临床诊疗活动开展提供有效参考。

结核杆菌/利福平耐药实时荧光定量核酸扩增检测技术联合干扰素-γ释放试验对肺结核的诊断效能

目的探讨结核杆菌利福平耐药实时荧光定量核酸扩增检测(Gene Xpert-MTB/RIF)技术联合干扰素-γ释放试验(IGRA)对肺结核的诊断效能,为临床治疗提供参考。方法选取2022年3月至2024年3月睢宁县中医院收治的78例疑似肺结核患者的临床资料,进行回顾性分析。所有患者均接受结核分枝杆菌(MTB)培养、Gene Xpert-MTB/RIF、IGRA检查,以MTB培养结果为金标准,分析Gene X-pert MTB/RIF联合IGRA对肺结核的诊断效能。结果MTB培养结果显示:78例疑似肺结核患者中,阳性58例,阴性20例;联合检测结果显示:阳性72例,阴性6例。联合检测准确度为85.90%,灵敏度为94.83%,特异度为60.00%,阳性预测值为91.67%,阴性预测值为66.67%,均高于各项单一检测(均P<0.05)。结论Gene Xpert-MTB/RIF联合IGRA诊断肺结核的价值较高,值得临床应用。

荧光PCR探针熔解曲线技术检测痰标本中结核分枝杆菌异烟肼耐药性的研究

目的评价荧光PCR探针熔解曲线(fluorescence polymerase chain reaction probe melting curve,Melt Pro)技术检测痰标本结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)异烟肼耐药性的应用价值。方法收集2021年5月至2022年5月在北京市疾病预防控制中心结核病门诊Gene Xpert MTB/RIF检测为MTB的(简称MTB阳性)患者痰标本,对每份标本同时进行涂片镜检、分枝杆菌分离培养、Melt Pro技术和线性探针技术(Geno Type MTBDRplus,简称Hain试验)异烟肼耐药检测。分析Melt Pro技术检测痰标本MTB异烟肼的耐药性,痰标本荷菌量对检测结果的影响;以培养阳性菌株异烟肼比例法药敏结果为参考标准,评价Melt Pro技术耐药检测效能。结果收集MTB阳性的合格痰标本157例,经分枝杆菌分离培养获得阳性菌株130株。Melt Pro技术痰标本MTB异烟肼耐药性检测成功率为84.1%(132/157)。不同痰涂片结果等级间,Melt Pro技术检测异烟肼耐药成功的比例差异存在有统计学意义(H=24.169,P=0.000),随痰涂片结果等级的升高,检测成功率由“阴性”标本的64.8%(35/54)升高到“3+”“4+”标本的100%(17/17,6/6);该比例也随Gene Xpert MTB/RIF检测MTB等级的升高而升高,由“极低”标本的54.8%(17/31),到“高”标本的96.4%(27/28),各等级间差异有统计学意义(H=27.763,P=0.000)。Melt Pro技术、Hain试验和药敏试验的异烟肼耐药检出率分别为22.0%(29/132),15.3%(19/124),和14.6%(19/130),三者差异无统计学意义(χ^(2)=2.997,P=0.223)。以培养阳性菌株比例法药敏试验结果为参考标准,Melt Pro技术检测异烟肼耐药的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值分别为:84.6%(11/13)、91.2%(93/102)、55%(11/20)、97.9%(93/95),Kappa值为0.614;Hain试验检测异烟肼耐药的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值分别为:55.6%(10/18)、92.3%(84/91)、58.8%(10/17)、91.3%(84/92),Kappa值为0.490。结论Melt Pro技术可直接检测痰标本MTB耐药性,快速准确筛查患者耐药情况,缩短耐药筛查时间。

4种实验室检测技术对肺外结核病成人患者非呼吸道标本中结核分枝杆菌检出率对比观察

目的 对比观察结核菌荧光染色、环介导等温扩增技术(LAMP)、利福平耐药实时荧光定量核酸扩增技术(Xpert MTB/RIF)、全自动分枝杆菌液体培养检测技术(BACTEC MGIT 960)诊断成人肺外结核病非呼吸道标本结核分枝杆菌(MTB)的效能。方法 收集2019年1月—2021年12月确诊为肺外结核病患者的非呼吸道标本317例份(组织155例份、尿液52例份、胸水47例份、脓液41例份、脑脊液22例份),分别采用荧光染色、LAMP、BACTEC MGIT 960、Xpert MTB/RIF检测,比较各检测技术检测同一种非呼吸道标本的MTB检出率。结果 LAMP、Xpert MTB/RIF、BACTEC MGIT 960、荧光染色的MTB检出率分别为72.6%、70.3%、48.3%、22.7%。在组织标本中的MTB检出率差异具有统计学意义(P<0.05),表现为LAMP和Xpert MTB/RIF检出率最高,其次为BACTEC MGIT960,荧光染色检出率最低;在尿液标本中的MTB检出率差异具有统计学意义(P均<0.05),表现为LAMP和Xpert MTB/RIF检出率最高,其次为BACTEC MGIT 960和荧光染色;在胸水标本中的MTB检出率差异具有统计学意义(P均<0.05),表现为LAMP和Xpert MTB/RIF检出率较高,其次为BACTEC MGIT 960,荧光染色最低;在脓液标本中的MTB检出率差异具有统计学意义(P均<0.05),表现为LAMP和Xpert MTB/RIF检出率较高,其次为BACTEC MGIT960,荧光染色最低;在脑脊液标本中的MTB检出率差异具有统计学意义(P均<0.05),表现为LAMP、Xpert MTB/RIF和BACTEC MGIT 960检出率较高,荧光染色最低。245例荧光染色阴性的标本中,LAMP、BACTEC MGIT 960和Xpert MTB/RIF的MTB检出率分别为66.1%、39.2%和63.7%,LAMP和Xpert MTB/RIF在涂阴标本中的检出率差异无统计学意义,但均高于BACTEC MGIT 960(P均<0.05)。126例标本为Xpert MTB/RIF和BACTEC MGIT 960同时阳性,两种方法检测利福平耐药性统计分析发现,Kappa值为0.829,P<0.05。结论 LAMP和Xpert MTB/RIF诊断人肺外结核病非呼吸道标本MTB灵敏度和特异度高,同时具有检测速度快的优势;荧光染色特异度高,但灵敏度低;BACTEC MGIT 960和Xpert MTB/RIF对利福平药敏的一致性强,但培养时间长,后续能得到药物种类多,对临床治疗在药物选择性上高。

结核分枝杆菌/利福平耐药实时荧光定量核酸扩增检测技术在脊柱结核检测中的应用

目的探讨结核分枝杆菌/利福平耐药实时荧光定量核酸扩增检测技术(GeneXpert Mycobacterium tuberculosis/Rifampin,Xpert MTB/RIF)在不同类型脊柱结核组织标本检测中的作用。方法收集127例脊柱结核患者的301份标本(脓液108份、干酪样标本94份、肉芽组织99份)进行细菌培养和Xpert MTB/RIF检测,计算阳性率。结果127例中,培养阳性60例,阳性率47.24%;301份标本中培养阳性138份,阳性率45.85%。脓液标本和干酪样标本培养阳性率均高于肉芽组织(P<0.05)。Xpert MTB/RIF检测脓液、干酪样标本和总标本阳性率高于细菌培养(P<0.05);60例细菌培养阳性的患者中,Xpert MTB/RIF法的敏感度为96.67%;利福平耐药27例,耐药率为45%,Xpert MTB/RIF检测利福平的敏感度为96.30%,特异性为94.29%;67例细菌培养阴性的患者中,36例Xpert MTB/RIF法检测阳性,敏感度为53.73%。结论Xpert MTB/RIF在脊柱结核标本检验中有较高的敏感性,收集脊柱结核患者的各种标本尤其是脓液标本,使用Xpert MTB/RIF可方便、快速、准确地诊断结核感染和耐药,值得临床推广应用。

结核分枝杆菌/利福平耐药实时荧光定量核酸扩增检测技术在肺结核快速诊断中的应用价值

目的探究结核分枝杆菌/利福平耐药实时荧光定量核酸扩增检测技术在肺结核快速诊断中的应用价值。方法选取2016年5月至2018年5月的疑似肺结核的患者156例作为研究对象,采集其痰液标本,采用痰涂片抗酸染色显微镜进行检验,并对其使用改良罗氏固体进行培养,进行比例法药物敏感实验,采用结核分枝杆菌/利福平耐药实时荧光定量核酸扩增检测技术(Xpert MTB/RIF)进行诊断。结果将改良罗氏固体培养的检测结果作为检测最佳标准,Xpert MTB/RIF检验的敏感度为89. 19%,特异度为100%,将痰涂片抗酸染色显微镜检测法作为检测最佳标准,Xpert MTB/RIF检验的敏感度为89. 33%,特异度为88. 89%,将比例法药物敏感实验作为检测的最佳标准,Xpert MTB/RIF检验的敏感度为87. 5%,特异度为100%。结论采用Xpert MTB/RIF法对肺结核进行检验,诊断具有较高的价值。

以肺泡灌洗液行结核/非结核分枝杆菌检测对菌阴肺结核的诊断价值

目的评估取支气管肺泡灌洗液(BALF)进行结核/非结核分枝杆菌(MTB/NTM)检测对菌阴肺结核的诊断价值。方法收集临床诊断为菌阴肺结核的324例患者资料,对上述患者进行支气管镜检查,所有患者取BALF标本,根据检测方法分为MTB/NTM组(进行罗氏培养、涂片抗酸染色、MTB/NTB检测)、利福平耐药实时荧光定量核酸扩增检测技术(GeneXpert MTB/RIF)组(进行罗氏培养、涂片抗酸染色、GeneXpert MTB/RIF检测)、结核分枝杆菌环介导等温扩增技术(TBLAMP)组(进行罗氏培养、涂片抗酸染色、TB-LAMP检测)。结果MTB/NTM组罗氏培养、涂片抗酸染色、MTB/NTM检测阳性率分别为14.04%、1.75%、43.86%;GeneXpert MTB/RIF组罗氏培养、涂片抗酸染色、GeneXpert MTB/RIF检测阳性率分别为16.77%、3.73%、54.66%;TB-LAMP组罗氏培养、涂片抗酸染色、TB-LAMP检测阳性率分别为18.87%、4.72%、49.06%。MTB/NTM、GeneXpert MTB/RIF、TB-LAMP检测分别与罗氏培养、涂片抗酸染色阳性率比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。MTB/NTM检测与GeneXpert MTB/RIF检测、TB-LAMP检测比较,差异无统计学意义(χ^(2)=2.185,P=0.335)。结论MTB/NTM检测具有较好诊断效能,相对简单、快捷,相较于TB-LAMP检测、GeneXpert检测更经济,并能鉴别NTM,及时减少NTM病患者误诊后使用结核药引起身体损害及经济损失。

结核/非结核分枝杆菌核酸检测对结核性脑膜炎的诊断价值

目的探讨脑脊液中结核/非结核分枝杆菌(mycobacterium tuberculosis/nontuberculous mycobacteria,MTB/NTM)核酸检测诊断结核性脑膜炎(tuberculous meningitis,TBM)的临床价值。方法收集120例TBM患者的临床资料,采用随机数字表法将患者分为TBM A组(n=67,进行脑脊液常规、生化、罗氏培养、涂片查抗酸菌、MTB/NTM核酸检测)和TBM B组(n=53,进行脑脊液常规、生化、罗氏培养、涂片查抗酸菌、GeneXpert MTB/RIF检测),另收集其他中枢神经系统感染患者脑脊液18例为对照组(C组,进行脑脊液常规、生化、罗氏培养、涂片查抗酸菌、MTB/NTM核酸检测、GeneXpert MTB/RIF检测)。结果TBM A组脑脊液罗氏培养、涂片查抗酸菌、MTB/NTM核酸检测阳性率分别为13.43%(9/67)、10.45%(7/67)、46.27%(31/67);TBM B组脑脊液罗氏培养、涂片查抗酸菌、GeneXpert MTB/RIF检测阳性率分别为15.09%(8/53)、11.32%(6/53)、47.17%(25/53),GeneXpert MTB/RIF检测阳性病例中利福平耐药基因检测阳性2例。C组脑脊液罗氏培养、涂片查抗酸菌、MTB/NTM核酸检测和GeneXpert MTB/RIF检测均为阴性。结论MTB/NTM核酸检测与GeneXpert MTB/RIF检测均可辅助早期诊断TBM,相较于后者更经济,并能鉴别非结核分枝杆菌(nontuberculous mycobacteria,NTM)感染,及时减少NTM病误诊、误治,值得临床推广。

结核分枝杆菌利福平耐药实时荧光定量核酸扩增检测技术在肺癌合并肺结核患者早期诊断中的应用价值

目的探讨结核分枝杆菌利福平耐药实时荧光定量核酸扩增检测技术(Gene Xpert-MTB/RIF)在肺癌合并肺结核患者早期诊断中的应用价值。方法选取2016年1月至2019年12月在郑州市第六人民医院住院的260例肺癌合并肺结核患者,留取痰标本后分别进行Gene Xpert-MTB/RIF、抗酸染色痰涂片、痰培养等3种方法检测。结果Gene Xpert-MTB/RIF阳性检出率高于抗酸染色痰涂片,差异有统计学意义(χ^2=33.986,P<0.001);Gene Xpert-MTB/RIF阳性检出率与痰培养比较差异无统计学意义(χ^2=0.446,P=0.504);痰培养阳性检出率高于抗酸染色痰涂片,差异有统计学意义(χ^2=26.854,P<0.001)。结论Gene Xpert-MTB/RIF在肺癌合并肺结核患者早期诊断中具有较高的阳性检出率,检测时间短,操作方法方便快捷,为临床上肺癌合并肺结核患者的早期诊断提供了一个重要的诊断手段,可在临床工作中广泛开展。

Xpert MTB/RIF在抗酸染色阳性痰标本结核分枝杆菌及利福平耐药性检测中的应用分析

目的:探讨多色巢式实时荧光定量核酸扩增检测技术(Multicolor nested real-time fluorescence quantitative nucleic acid amplification detection technology,Xpert MTB/RIF)在抗酸染色阳性痰标本结核分枝杆菌及利福平耐药性检测中的应用价值。方法:选取我院2015年11月—2017年10月疑似肺结核患者190例,进行Xpert MTB/RIF检测、比例法药敏试验、改良罗氏固体培养、显微镜检查。结果:以改良罗氏固体培养法检测结果作金标准,Xpert MTB/RIF检测敏感度为90.00%(81/90)、特异度为89.00%(89/100),两者具有较高一致性(K=0.789);以痰涂片染色法检测结果作金标准,Xpert MTB/RIF检测敏感度为86.67%(91/105)、特异度为98.82%(84/85),两者具有较高一致性(K=0.843);以比例法药敏试验结果作金标准,Xpert MTB/RIF检测利福平耐药敏感度为83.33%(10/12)、特异度为100.00%(67/67),两者具有较高一致性(K=0.895)。结论:采取多色巢式实时荧光定量核酸扩增检测技术可迅速诊断抗酸染色阳性痰标本结核分枝杆菌,并能准确检测利福平耐药性,为临床制定有效干预方案提供可靠依据。

牛副结核分枝杆菌实时荧光定量PCR检测方法的建立

根据GenBank上公布的牛副结核分枝杆菌C-2染色体的ISMav2基因保守区域序列设计合成1对特异性引物,建立了一套SYBR GreenⅠ荧光定量PCR检测牛副结核分枝杆菌(Mycobacterium paratuberculosis)的方法。以实验室构建的牛副结核分枝杆菌pMD-ISMav2阳性重组质粒为标准品,通过优化反应条件,建立了标准曲线,其相关系数为0.999。以构建的标准品为模板,进行了特异性和敏感性试验。结果显示,该方法检测布氏杆菌、大肠杆菌、沙门氏菌、链球菌DNA均为阴性;最低可检测到相当于每微升1.96×101拷贝数的标准品阳性质粒。本研究建立的实时荧光定量PCR具有特异、敏感和快速等优点,可用于牛副结核杆菌病的监测。

牛分枝杆菌SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR检测方法的建立

【目的】建立一种检测牛分枝杆菌的SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR,为防控牛结核病提供技术支持。【方法】根据牛分枝杆菌特异性基因序列(No.MBU87961,gi9954088)设计合成一对扩增牛分枝杆菌的特异性引物,从引物设计、各成分配比、样品采集及样品DNA提取等方面进行优化,并对建立的方法进行标准曲线、溶解曲线分析及特异性、敏感性、重复性、临床样品检验试验。【结果】牛分枝杆菌SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR的检测模板范围为1.0×109～1.0×10拷贝/μL时,其标准曲线呈良好的线性关系,溶解曲线表现为单一波峰,Tm值为86.48～86.65℃。SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR的牛型分枝杆菌扩增结果为阳性,其他参试菌株均为阴性;可检测出10拷贝/μL的牛分枝杆菌DNA,敏感性是常规PCR的100倍;Ct值变异系数小于5%,重复性好;对50份PPD检测为阳性的牛鼻黏液、牛奶和淋巴结进行检测,其结果与常规PCR检测结果一致。【结论】建立的SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR具有快速、便捷、准确等优点,适合于牛分枝杆菌的鉴别诊断。

DNA-微阵列芯片检测技术与Gene-Xpert MTB/RIF技术在新疆维吾尔自治区结核分枝杆菌耐药性诊断中的应用

目的探索DNA-微阵列芯片检测技术(以下简称基因芯片技术)和利福平耐药实时荧光定量核酸扩增检测技术(Gene-Xpert MTB/RIF技术)检测新疆维吾尔自治区结核分枝杆菌中利福平和异烟肼耐药性的应用价值。方法收集2015年新疆维吾尔自治区结核病耐药监测菌株115株,对所有的菌株进行比例法药敏试验、基因芯片技术、Gene-Xpert MTB/RIF技术检测。以比例法药敏试验为“金标准”,分别计算基因芯片技术与Gene-Xpert MTB/RIF技术对结核分枝杆菌耐药性诊断的效能并进行评价。结果比例法药敏试验结果显示,利福平耐药患者40例(34.78%),异烟肼耐药患者48例(41.74%)。以比例法药敏试验结果为“金标准”,基因芯片技术检测结核分枝杆菌对利福平和异烟肼耐药耐药性诊断的灵敏度、特异度分别为80.00%、89.33%和77.08%、97.01%,Gene-Xpert MTB/RIF技术检测结核分枝杆菌对利福平耐药性诊断的灵敏度、特异度分别为92.50%、94.67%。基因芯片技术和Gene-Xpert MTB/RIF技术对利福平耐药患者的诊断效能差异无统计学意义(P>0.05)。结论对于新疆维吾尔自治区结核病耐药监测菌株,基因芯片技术和Gene-Xpert MTB/RIF技术对耐药结核病的诊断均具有较高的灵敏度和特异度。Gene-Xpert MTB/RIF技术操作方法简单,检测时间短;基因芯片技术耐药检测范围广,耗时少,为新疆维吾尔自治区广泛开展耐药结核病快速检测提供了有力的技术支持。

Xpert MTB/RIF技术检测对痰标本中结核分枝杆菌的准确度及其对利福平药敏结果的影响

目的:探究Xpert结核分枝杆菌/利福平(Xpert MTB/RIF)技术检测痰液中结核分枝杆菌准确度及其对利福平药敏结果的影响。方法:选取医院2018年11月—2019年10月期间收治的疑似肺结核患者70例资料,统计其Xpert MTB/RIF技术检测痰液中结核分枝杆菌的结果;并以结核分枝杆菌培养及比例法药敏试验结果为金标准,比较和分析Xpert MTB/RIF技术检测对结核分枝杆菌的敏感度、特异度及准确度,以及Xpert MTB/RIF与比例法检测药敏试验结果的一致性。结果:经结核分枝杆菌培养结果发现,70例疑似肺结核患者中59例被确诊为肺结核,采用Xpert MTB/RIF检测及痰涂片诊断的特异度分别为100.00%、90.91%;采用Xpert MTB/RIF检测结核分枝杆菌的敏感度、准确度分别为38.98%、48.57%;而痰涂片法检测结核分枝杆菌的敏感度、准确度分别为16.95%、28.57%;经Kappa分析发现Xpert MTB/RIF检测法药敏试验利福平耐药性的一致性优于比例法(Kappa=0.782,P<0.05)。结论:Xpert MTB/RIF技术检测具有快速、便于操作的特点,在对结核分枝杆菌诊断的同时可以检测其对利福平耐药性,诊断结果具有客观性。

结核性胸水生化指标与实时荧光PCR检测结果的相关性研究

结核性胸水是结核分枝杆菌感染或胸膜对结核性分枝杆菌感染产生变态反应渗出的液体。目前，临床上对结核性胸水的检测项目主要包括胸水生化、结核分枝杆菌分离培养、PCR检测、X线及超声检测、细胞学检测等。胸水生化检测主要包括LDH、ADA、ACE、蛋白质及葡萄糖，生化检验对诊断结核性胸水具有重要参考价值。近年来，因其灵敏性和特异性，实时荧光PCR技术在临床检测上的使用范围越来越广泛。为探讨结核性胸水生化指标与实时荧光PCR检测结果之间的相关性，我院对2009年9月至2013年11月收治的70例结核性胸膜炎患者的临床治疗进行回顾性分析，现将结果报道如下。

结核分枝杆菌／利福平耐药实时荧光定量核酸扩增检测在肺外结核中的诊断价值

目的：应用结核分枝杆菌（MTB）／利福平（RIF）耐药实时荧光定量核酸扩增检测技术（Xpert MTB／RIF）对临床肺外组织标本中的 MTB 及其 RIF 耐药性进行检测，探讨该方法在肺外结核病中的应用价值。方法复旦大学附属公共卫生临床中心结核科2014年5月至2015年5月住院的高度疑似肺外结核患者300例，分别进行涂片荧光染色显微镜检、BACTEC MGIT 960液体培养、Xpert MTB／RIF 检测，同时所有患者均抽取全血行结核感染 T 淋巴细胞斑点试验（T-SPOT．TB）检测，分析Xpert MTB／RIF 方法对临床肺外结核标本中 MTB 及其 RIF 耐药性检测的敏感度和特异度。两独立样本的计量资料比较采用 t 检验，计数资料比较采用卡方检验。结果300例临床肺外样本，纳入282例进行统计分析，其中男性占62．7％，平均年龄为（32．1＆#177;24．6）岁，女性占37．3％，平均年龄为（37．8＆#177;21．0）岁。临床诊断肺外结核病207例（肺外结核组），非结核75例（非结核组）。以 BACTEC MGIT 960液体培养结果为诊断标准时，Xpert MTB／RIF 检测 MTB 的灵敏度为53．8％（95％CI ：37．4％～69．6％），特异度为100．0％（95％CI ：86．3％～100．0％），阳性预测值为100．0％（95％CI ：80．8％～100．0％），阴性预测值为63．3％（95％CI ：48．3％～76．2％）；在荧光涂片和 BACTEC MGIT 960液体培养均为阳性的标本中，Xpert MTB／RIF 的灵敏度为92．3％（95％CI ：62．1％～99．6％）；在荧光涂片阴性，BACTEC MGIT 960液体培养阳性的标本中，Xpert MTB／RIF 的灵敏度为34．6％（95％CI ：17．9％～55．6％）。在穿刺液、脓液、粪便及尿液中 Xpert MTB／RIF 检测具有明显优势，在浆膜腔积液及脑脊液中欠佳。BACTEC MGIT 960液体培养、荧光涂片、T-SPOT．TB 的灵敏度分别为25．8％、21．8％和70．2％，特异度分别为95．5％、90．3％和51．6％，Xpert MTB／RIF 检测与 BACTEC MGIT 960液体培养、荧光涂片比较差异均无统计学意义（χ^2值分别为0．61和3．45，均 P ＞0．05），但与 T-SPOT．TB 差异有统计学意义（χ^2＝50．58，P ＜0．05），T-SPOT．TB的灵敏度显著优于 Xpert MTB／RIF，但其特异度较低。Xpert MTB／RIF 检测 RIF 耐药的灵敏度为71．4％（95％CI ：30．3％～94．9％），特异度为100．0％（95％CI ：86．7％～100．0％）。结论 Xpert MTB／RIF 检测穿刺液、脓液、粪便及尿液中的 MTB 灵敏度、特异度均较高，而对于浆膜腔积液及脑脊液并不具优势，但其快速、可检测 RIF 耐药的优点为临床肺外结核的诊疗提供帮助。

Xpert MTB/RIF快速检测结核分枝杆菌与利福平耐药性的应用研究

目的评估利福平耐药实时荧光定量PCR技术(Xpert MTB/RIF)快速检测在诊断肺结核和利福平耐药性的应用价值。方法对2016年衢州市人民医院临床疑似肺结核患者的痰样本分别进行抗酸染色、Xpert MTB/RIF检测、MGIT320液体培养、胶体金试验、菌种鉴定和液体药敏试验。结果 435例肺结核痰样本中,抗酸染色检出率为17.01%(74/435),液体培养检出率为35.86%(156/435),Xpert MTB/RIF检出率为35.17%(153/435)。Xpert MTB/RIF检出率高于抗酸染色法,差异有统计学意义(χ~2=26.08,P<0.01),Xpert MTB/RIF技术与液体培养法之间差异无统计学意义(χ~2=0.11,P>0.05)。以液体培养结合胶体金法菌型鉴定为金标准,Xpert MTB/RIF检测结核分枝杆菌灵敏度为94.20%(130/138),特异性为96.39%(267/277),阳性预测值为92.86%(130/140),阴性预测值为97.09%(267/275),两者具有较好的一致性(Kappa=0.90)。以液体药敏为金标准,Xpert MTB/RIF检测利福平耐药的灵敏度90.00%(9/10),特异性97.50%(117/120),阳性预测值75.00%(9/12),阴性预测值99.15%(117/118)。两种方法一致性较好(Kappa=0.80)。结论 Xpert MTB/RIF检测痰液中结核分枝杆菌和利福平耐药性具有较高的灵敏度和特异性,能准确区分非结核分枝杆菌,适用于普通肺结核、耐多药肺结核的快速诊断和筛查。

液体分枝杆菌培养管与利福平耐药实时荧光定量核酸扩增检测技术检测结核杆菌的阳性检出率及检出时间比较

目的比较采用液体分枝杆菌培养管(MGIT)培养法与利福平耐药实时荧光定量核酸扩增检测技术(XpertMTB/RIF)检测结核杆菌的阳性检出率及检出时间的差异。方法收集2016年7月-2017年4月本院就诊的疑似和治疗后复诊的肺结核患者痰标本共1 146例,其中疑似新发患者痰标本616例,治疗后复诊患者痰标本530例。分别采用液体MGIT培养法和XpertMTB/RIF检测法对所有痰标本进行检测,对2种方法的阳性检出率、检出时间及利福平耐药情况进行比较。结果疑似新发患者痰标本液体MGIT培养法阳性检出率明显低于XpertMTB/RIF检测法,差异有统计学意义(P<0.05);疑似新发患者痰标本液体MGIT培养法阳性检出时间大于XpertMTB/RIF检测法;治疗后复诊患者痰标本液体MGIT培养法阳性检出时间亦大于XpertMTB/RIF检测法,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 XpertMTB/RIF较MGIT能够提高结核杆菌的阳性检出率,缩短阳性检出时间,值得在临床检测中使用并推广。

结核分枝杆菌/利福平耐药实时荧光定量核酸扩增检测技术诊断艾滋病患者肺结核的临床应用评价

目的:探讨结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)/利福平耐药实时荧光定量核酸扩增检测(Xpert MTB/RIF)技术诊断艾滋病患者肺结核的应用价值。方法:回顾性分析2017年7月至2019年11月上海市(复旦大学附属)公共卫生临床中心收治的226例疑似肺结核的艾滋病患者的临床资料。分别进行痰涂片荧光染色显微镜下检查、BACTEC MGIT 960液体培养(或罗氏固体培养)和Xpert MTB/RIF检测,并分析在艾滋病患者中Xpert MTB/RIF技术诊断MTB感染和利福平耐药的灵敏度和特异度。结果:226例疑似肺结核患者中,痰培养阳性94例(41.6%),其中MTB阳性51例(54.3%),非结核分枝杆菌(nontuberculosis mycobacteria,NTM)阳性43例(45.7%)。以痰分枝杆菌培养阳性且结核分枝杆菌分泌蛋白64抗原阳性为金标准,Xpert MTB/RIF技术诊断MTB的灵敏度为72.6%[95%可信区间(confidence interval,CI)66.7%~78.4%],特异度为97.1%(95%CI 95.0%~99.3%)。Xpert MTB/RIF技术诊断痰涂片阳性患者MTB的灵敏度为76.7%(95%CI 67.7%~85.8%),特异度为90.0%(95%CI 83.6%~96.5%)。Xpert MTB/RIF技术诊断痰涂片阴性患者MTB的灵敏度为50.0%(95%CI 41.8%~58.2%),特异度为99.3%(95%CI 97.9%~100.0%)。18例患者同时检测利福平表型和基因型耐药,以表型耐药为金标准,Xpert MTB/RIF技术检测利福平基因型耐药的灵敏度为75.0%,特异度为100.0%。结论:艾滋病患者中Xpert MTB/RIF技术诊断肺结核的灵敏度和特异度均较高,且能快速区分MTB和NTM,具有较好的应用价值。

结核分枝杆菌/利福平耐药实时荧光定量核酸扩增检测技术在肺结核快速诊断中的应用价值

目的探讨Xpert MTB/RIF检测肺结核及利福平耐药性的应用价值。方法收集200例疑似肺结核患者的痰标本,进行痰涂片抗酸染色显微镜镜检、改良罗氏固体培养、比例法药敏试验和Xpert MTB/RIF检测,分析Xpert MTB/RIF检测结核分枝杆菌及其利福平耐药性的敏感度和特异度,与"金标准"进行一致性检验。结果以改良罗氏固体培养为"金标准",Xpert MTB/RIF检测痰标本MTB的敏感度和特异度分别为88.30%和87.74%;以痰涂片抗酸染色法为"金标准",Xpert MTB/RIF检测痰标本MTB的敏感度和特异度分别为88.18%和100.00%;以比例法药敏试验为"金标准",Xpert MTB/RIF检测利福平耐药的敏感度和特异度分别为83.33%和100.00%;Xpert MTB/RIF法和改良罗氏固体培养、痰涂片抗酸染色法、比例法药敏试验均具有较好的一致性(K值分别为0.76、0.87、0.77)。结论 Xpert MTB/RIF在肺结核快速诊断中具有较高的诊断效能,在我国结核病实验室中具有较好的应用前景。