结核分枝杆菌快速微量直视培养药敏试验方法的研究

目的建立一种经济、适用、快速的微量结核分枝杆菌(MTB)直视培养药敏方法。方法研制电脑控制无级连续超倍放大、微量培养和图像采集组成的MTB快速培养药敏及鉴定系统;用该系统进行MTB标准菌株H37Rv及临床分离菌株药敏试验;以改良罗氏法(L-J法)为对照,确定药敏试验药物最适浓度。结果本法药敏试验的药物:硫酸链霉素、异烟肼、利福平、乙胺丁醇、硫酸阿米卡星、硫酸卷曲霉素、盐酸左氧氟沙星及对氨基水杨酸异烟肼应用浓度分别为:1、0.1、1、5、5、10、4、1μg/ml;检出时间H37Rv为3d;临床分离菌165株平均5.6d。每实验孔仅需培养基100μl。结论快速法显著缩短了MTB药敏试验时间,节省试剂,操作简便,适合基层单位应用。

结核分枝杆菌游离DNA检测在肺外结核诊断中的价值

目的探讨结核分枝杆菌(MTB)游离DNA(cfDNA)检测技术在肺外结核诊断中的应用价值。方法选取2021年7月至2022年12月该院收治的高度疑似肺外结核患者266例作为研究对象,根据临床诊断结果,分为肺外结核组117例和非结核组149例。所有患者均采集脑脊液、胸腔积液、尿液及血液标本,并同时进行MTB cfDNA检测、结核分枝杆菌及利福平耐药快速检测(GeneXpert MTB/RIF)、涂片抗酸染色及血液标本结核感染T细胞γ干扰素释放试验(TB-IGRA)。通过分析4种检测方法的效能指标评估MTB cfDNA检测技术在肺外结核病诊断中的临床价值。结果MTB cfDNA检测法对脑脊液、胸腔积液、尿液中MTB的检出率均显著高于涂片抗酸染色(χ^(2)=5.714、9.289、9.226,P=0.017、0.002、0.002)。虽然MTB cfDNA检测法对脑脊液、尿液中MTB的检出率高于GeneXpert MTB/RIF,但差异无统计学意义(χ^(2)=0.143,P=0.705;χ^(2)=0.648,P=0.421);MTB cfDNA检测法对胸腔积液中MTB的检出率显著高于GeneXpert MTB/RIF(χ^(2)=4.222,P=0.040)。在肺外结核组,MTB cfDNA检测法的MTB检出率为26.50%(31/117),显著高于GeneXpert MTB/RIF[15.38%(18/117)]和涂片抗酸染色[3.42%(4/117)],差异均有统计学意义(χ^(2)=4.362,P=0.037;χ^(2)=24.492,P<0.05);而TB-IGRA的MTB检出率为72.65%(85/117),显著高于MTB cfDNA检测(χ^(2)=49.850,P<0.001)。MTB cfDNA检测法的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值分别为26.50%、100.00%、100.00%、63.40%,其灵敏度显著高于GeneXpert MTB/RIF(15.38%)和涂片抗酸染色(3.42%),但低于TB-IGRA(72.65%),差异均有统计学意义(P<0.05)。结论MTB cfDNA检测在肺外结核诊断中具有较高的灵敏度及特异度,故MTB cfDNA检测在肺外结核诊断中具有较好的应用前景。

结核分枝杆菌快速培养

目的 建立一种快速、简单、廉价、可靠的结核分枝杆菌培养方法。方法 采用以新鲜椰子水、人血浆、甘油等混合组成的液体培养基 (简称CPG) ,对 36 2例临床标本进行培养 ,同时与罗氏培养基比较。结果 CPG培养阳性 10 3份 ,罗氏培养基阳性 10 5份 (χ2 =0 .0 3P >0 .0 5 ) ,CPG阳性平均时间 9d ,罗氏培养基培养阳性 30 .7d ,CPG明显短于罗氏培养基。结论 CPG用于结核分枝杆菌培养 ,具有配制简单、快速、廉价。

分枝杆菌培养阳性外周血结核感染T细胞斑点试验阴性病例的临床特征分析

目的分析分枝杆菌罗氏培养阳性外周血结核感染T细胞斑点试验(T cell spot test of tuberculosis,T-SPOT.TB)阴性病例的临床特征。方法以2017年1-12月在首都医科大学附属北京胸科医院住院经痰液、体液或组织标本分枝杆菌罗氏培养阳性且T-SPOT.TB阴性的77例患者为观察组,以同期收治分枝杆菌罗氏培养阳性且T-SPOT.TB阳性的77例患者为对照组,比较两组患者的临床特征。结果观察组与对照组比较,非结核分枝杆菌肺病分别为24例(31.2%)与3例(3.9%),肺结核分别为53例(68.8%)与74例(96.1%),差异有显著性(P<0.001)。两组肺结核患者比较,观察组高龄患者(≥65岁)、超重(BMI≥24kg/m^2)及病程超过6个月的占比高于对照组,差异有显著性(P<0.05);两组在性别、吸烟史、饮酒史、基础疾病方面差异无显著性(P>0.05);两组血红蛋白、淋巴细胞计数、白蛋白水平差异有显著性(P<0.05);两组白细胞计数、血小板计数差异无显著性(P>0.05)。结论非结核分枝杆菌感染是分枝杆菌培养阳性T-SPOT.TB阴性的原因,而在结核分枝杆菌感染患者中,高龄(≥65岁)、超重(BMI≥24kg/m2)、病程超过6个月及血红蛋白、淋巴细胞计数、白蛋白水平可能是T-SPOT.TB阴性的影响因素。

结核分枝杆菌新型改良罗氏快速培养基的研究

目的研究结核分枝杆菌(结核菌)快速培养方法,提高阳性率,以协助临床早期诊断。方法在新型改良罗氏快速培养基和改良罗氏培养基上接种结核菌后置5.0%的CO2环境中培养,观察结核菌生长情况。结果10株结核菌生长平均所需时间在改良罗氏培养基上为(17.25±5.88)d,而在新型改良罗氏快速培养基上仅为(9.75±1.64)d,两者差异有显著性(P=0.001);在后者,结核菌生长更快速,菌落形成茂盛。结论新型改良罗氏快速培养基比改良罗氏培养基培养结核菌所需时间明显缩短,且生长结果更易观察。

新型液体培养基用于结核分枝杆菌快速培养的研究

目的以新鲜椰子汁和马血清为基础成分,研制一种快速培养结核分枝杆菌的新型液体培养基。方法将300份肺结核患者痰液标本进行直接涂片镜检,按涂阳和涂阴标本配对接种在新型液体培养基和改良罗氏培养基上,比较两种培养基培养的阳性率和阳性结果出现的时间。结果在新型液体培养基与改良罗氏培养基上结核分枝杆菌培养总阳性率分别为36.0%、37.0%,直接涂片镜检阳性痰液标本在新型液体培养基与改良罗氏培养基培养阳性率分别为94.55%、96.36%,直接涂片镜检阴性的培养阳性率分别为2.1%、2.6%,组组各自比较差异均无显著性(P均>0.05);新型液体培养基平均(9.66±3.14)d出现阳性结果,而改良罗氏培养基平均(27.56±7.74)d出现阳性结果,两者差异有显著性(P<0.01)。结论新型液体培养基能快速培养出结核分枝杆菌,其制作方便,价格低廉,操作简单,适合于广大基层医疗机构使用。

自制培养基结核分枝杆菌快速生长及临床应用观察

[目的]观察结核分枝杆菌在自制培养基上的生长情况,建立快速培养方法。[方法]将改良罗氏培养基的成分进行改进自制5种培养基,每种3支,每支接种菌量10-3mg,观察结核分枝杆菌标准株生长情况。并以第5号培养基3种成分不同浓度,做正交叉实验,得出最佳浓度。收集临床标本,在自制培养基上培养观察。[结果]结核分枝杆菌标准株在5种自制培养基上,菌落开始生长天数及典型菌落出现天数均比改良罗氏培养基短,两者差异均具有显著性(P﹤0.01)。第5号培养基以25%牛肉浸液,20%当归浸液,20%党参浸液的浓度最佳,结核分枝杆菌标准株接种后d3￣5开始生长,d7～9出现典型的“菜花状”菌落。临床标本接种在改良罗氏及自制培养基上,阳性分离率差异无统计学意义(t=0.09,P﹥0.05),两种培养基在典型菌落形成的平均天数差异有统计学意义(t=6.828,P﹤0.001)。[结论]结核分枝杆菌标准株在自制第5号培养基上生长快,培养时间短,为该菌培养提供了一种新的快速培养基,在临床上有一定的实用价值,值得进一步研究、推广。

结核分枝杆菌快速培养基临床应用研究

目的评价分枝杆菌变色液体培养基快速检测痰标本结核分枝杆菌的可靠性。方法将230例疑似肺结核患者痰标本接种于分枝杆菌变色液体培养基和酸性罗氏培养基培养,进行对照平行测定。结果 230例痰涂片标本检出阳性率为27.8%;变色液体培养基和酸性罗氏培养基培养阳性率分别为47.4%,47.0%,两种方法阳性率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论分枝杆菌变色液体培养基检测结核分枝杆菌具有特异、快速、可靠等优点,对结核病患者的早发现、早治疗具有积极意义。

结核分枝杆菌快速培养方法的建立及临床应用初步观察

目的 观察结核分枝杆菌在自制培养基上的生长情况，建立快速培养方法。方法将改良罗氏培养基的成分进行改进，自制5种培养基，每种3支，每支接种菌量10-3mg，观察结核分枝杆菌标准株生长情况。并以第5号培养基3种成分不同浓度做正交叉实验，得出最佳浓度。收集临床标本，在自制培养基上培养观察。结果 结核分枝杆菌标准株在5种自制培养基上，菌落开始生长天数及典型菌落出现天数均比改良罗氏培养基短，两者差异均具有显著性（P〈O．01）。第5号培养基以25％牛肉浸液，20％当归浸液，20％党参浸液的浓度最佳，结核分枝杆菌标准株接种后第3～5d开始生长，第7～9d出现典型的“菜花状”菌落。临床标本接种在改良罗氏及自制培养基上，阳性分离率差异无显著性（f—O．09，P〉O．05），两种培养基上典型菌落形成的平均天数差异有显著性（f一6．828，P〈O．001）。结论 结核分枝杆菌标准株在自制第5号培养基上生长快，培养时间短，为该菌培养提供了一种新的快速培养基，在临床上有一定的实用价值，值得进一步研究、推广。

结核分枝杆菌的快速检测和药敏试验

由结核分枝杆菌（M TB）引起的结核病是全球最重要的公共卫生问题之一，据世界卫生组织统计，自1882年德国科学家柯霍发现 M TB 以来，全世界将近20亿人被 M TB 感染，每年又有将近800万 M TB 新感染者，并且300多万人死亡，其中大约25万死于耐多药 M TB 和广泛耐药 M TB ，而 M TB 耐药主要是由临床用药不规范引起［1‐2］。因此，只有准确、快速检测，及时做抗结核药物药敏试验（DST ），正确用药，才能有效控制和治疗结核病。尽管 M TB 的诊断技术不断更新，新的诊断试剂盒和检测方法相继出现，但它们都有不足，很难完全满足临床诊断的需求。本文主要总结 M TB 的检测和药敏试验的有关知识。

结核分枝杆菌在自制培养基上快速生长初步观察

观察结核分枝杆菌标准株在5种自制培养基上的生长时间及最佳实验条件。将改良罗氏基的成分及传统的实验条件进行改进自制5种培养基，观察结核分枝杆菌标准株生长情况。并以第5号培养基3种成分不同浓度，做正交叉实验。结核分枝杆菌标准株在5种自制培养基上，菌落开始生长天数及典型菌落出现天数均比改良罗氏培养基短，两者差异均具有显著性（P〈0．01）。第5号培养基以25％牛肉浸液，20％当归煎液，20％党参煎液的浓度最佳，结核分枝杆菌接种后第3～5d开始生长，第7～9d出现典型的“菜花状”菌落。结核分枝杆菌标准株在自制第5号培养基上生长快，培养时间短，为该菌培养提供了一种新的快速培养基，值得进一步研究。

结核分枝杆菌快速培养及常规药敏试验在脊柱结核治疗中的应用研究

在临床工作中,结核杆菌感染的诊断率越来越高,尤其在中老年人群,大多数人之前无类似病史^[1],极易造成慢性感染,肺外结核等并发症,在骨关节结核的发病中,脊柱结核是患病率最高的一种,其发病较急,病情较为复杂,若在病程后期通常可以导致患者发生脊柱畸形,甚至影响神经功能,通常引发肢体功能障碍。

痰液涂片试验和结核分枝杆菌培养应用于肺结核患者早期诊断、鉴别诊断和治疗中的临床研究

目的 探讨痰液涂片试验和结核分枝杆菌培养应用于肺结核患者早期诊断、鉴别诊断和治疗中的临床意义.方法 利用痰液涂片试验和结核分枝杆菌培养检查从365例疑似病例中检出了165例确诊的肺结核患者和35例非结核分支杆菌肺病（NTM）,并对165例肺结核患者抗结核药物的治疗并进行对比分析.结果 365例疑似病例中确诊了结核分枝杆菌痰液涂片试验和培养阳性的肺结核患者165例,2014年—2016年分别为52例、58例和55例,被动发现率高达83.64％（138/165）,主动发现率仅为16.36％（27/165）.35例NTM患者的基础疾病以支气管扩张、慢性阻塞性肺病和糖尿病为主,构成比分别为48.64％、21.62％和15.79％.165例痰液涂片试验和培养阳性的肺结核患者2、4和6个月治疗后的总有效率分别为64.85％、87.88％和93.94％.结论 痰液涂片试验和结核分枝杆菌培养是肺结核患者早期诊断、结核分枝杆菌与非结核分枝杆菌鉴别诊断和判别抗结核药物疗效的有价值指标.

结核分枝杆菌快速培养及药物敏感性试验的临床意义

目的:对于肺结核的患者,目前临床上最常用的检测手段就是痰标本涂片的抗酸染色,对结核病进行预期诊断,同时经培养分离的分枝杆菌也可以对分枝杆菌导致的疾病进行确定诊断。但是用传统的固体培养基(LJ培养基)的阳性检出时间为平均4-10周,而用MGIT液体培养基的阳性检出时间可以达到8-14天。为此,我们对部分患者进行了标本的LJ培养基培养分离和MGIT液体培养基培养分离的检测对比,为临床结核病的快速诊断提供理论依据。方法:对一定数量的临床标本涂片进行抗酸染色并对标本进行LJ培养基培养(慢培组),同时进行MGIT液体培养基的快速培养(快培组),并对阳性标本进行药物敏感性试验,然后将二组结果进行对比。结果:快培组阳性检出时间远远短于慢培组,而且阳性检出率也高于慢培组。结论:用MGIT液体培养基全自动快速培养的方法即能缩短阳性标本检出时间,又能提高检出率,还能在短时间内为阳性标本做出药物敏感性试验,对临床疾病的快速诊断提供依据。

结核分枝杆菌快速培养方法

本成果首次发现植物激素对结核杆菌有明显促进增殖作用,研制成功一类结核杆菌快速培养基;首次提出了结核杆菌综合培养环境中O2和CO2最佳浓度（O2为30％,CO2为0.5～5.0％）,并研究设计成功一种简便、适用的供氧培养装置;建立了结核杆菌快速培养新方法,解决了国内外一百多年来结核杆菌培养速度缓慢的难题。临床证实,该法获得痰标本阳性培养结果时间平均为15天。

液体培养基比色法快速检测结核分枝杆菌氧氟沙星耐药性

目的探讨液体培养基比色法在结核分枝杆菌（MTB）氧氟沙星（OFLX）耐药性快速测定中的应用价值。方法（1）材料：液体培养基为本室自制；氨基苯磺酰胺、N-（1-萘）乙烯二胺盐酸盐购于Sigma公司；NaNO3、盐酸购于上海化学试剂公司；OFLX购自sigma公司；

结核分枝杆菌快速培养两种前处理方法分析比较

目的 比较分析两种前处理方法在结核分枝杆菌快速培养中的应用效果.方法 选取本院2016年2月至2017年7月期间采用BacT/ALERT 3D液体培养技术进行结核分枝杆菌快速培养的240例结核病患者进行分组研究,根据随机数表法分为两组,即甲组与乙组,各组120例.甲组应用 N-乙酰-L-半胱氨酸-NaOH（NALC-NaOH）法予以前处理,乙组应用NaOH-生理盐水法予以前处理,对两组结核分枝杆菌快速培养阳性检出率、污染率进行统计比较.结果 甲组结核分枝杆菌快速培养阳性检出率为48.33%,乙组结核分枝杆菌快速培养阳性检出率为46.67%,两组比较不存在统计学差异（P〉0.05）.甲组结核分枝杆菌快速培养污染率为7.50%,乙组结核分枝杆菌快速培养污染率为1.67%,组间对比存在统计学差异（P〈0.05）.结论 在结核分枝杆菌快速培养中应用NaO H-生理盐水法予以前处理,可显著降低操作中被污染的概率,极大的提高了培养准确性,值得临床推广与应用.

结核分枝杆菌快速培养的研究进展及其临床意义

结核病是由结核分枝杆菌感染引起的一种传染性疾病．是单一病阏传染病中病死率最高的疾病防治结核病的关键是早期诊断和早期治疗。目前结核病的实验室诊断主要有细菌学检验、免疫学检验及分子生物学诊断方法，后两种因为方法学还未完善，似阳性和似阴性率较高。