结核分枝杆菌生物被膜体外模型的建立

目的本试验探讨如何建立结核菌生物被膜体外模型。方法选取生长良好的非耐药结核菌在罗氏固体培养基中复苏,在7H9OADC培养基中重新培养1周,使其活力相同,配置苏通培养基分别在烧瓶及孔板中培养结核菌观察生物膜的生长情况。结果 36株结核菌在孔板中培养时使用封口膜的全部培养出生物膜,而未使用封口膜的均培养失败。烧瓶中培养:在培养3周时需要松开瓶盖,否则生物膜生长不良。时间:培养2周时可看到有生物膜出现,5周时生物膜培养成熟。结论结核菌有生物被膜,通过体外培养可以成功获得。

(R)-(+)-长叶薄荷酮对耐药结核分枝杆菌抑制作用及其生物被膜调控基因的影响

目的 研究(R)-(+)-长叶薄荷酮对耐药结核分枝杆菌体外抑制作用及其生物被膜调控基因Rv0024、Rv2872、Ra1362的影响。方法 通过聚合酶链反应(Polymerase chain reaction, PCR)筛选含生物被膜调控基因Rv0024、Rv2872、Ra1362的耐药结核分枝杆菌,采用刃天青显色法和液体培养计数法测定(R)-(+)-长叶薄荷酮对生物被膜介导的耐药结核分枝杆菌的最小抑菌浓度(Minimal inhibit concentration, MIC)和最低杀菌浓度(Minimum bactericidal concentration, MBC),应用反转录-聚合酶链式反应(Reverse transcription-polymerase chain reaction, RT-PCR)检测(R)-(+)-长叶薄荷酮对耐药结核分枝杆菌生物被膜调控基因Rv0024、Rv2872、Ra1362的影响。结果 在3×10^(7) CFU/mL和3×10^(6) CFU/mL菌液浓度下,刃天青显色法测得(R)-(+)-长叶薄荷酮对耐药结核分枝杆菌的MIC和MBC分别为14.79、29.59 mg/mL;液体培养计数法测得(R)-(+)-长叶薄荷酮对耐药结核分枝杆菌的MIC_(90)和MBC分别为19.89、24.62 mg/mL。RT-PCR法结果表明长叶薄荷酮可抑制Rv0024、Ra1362的表达,促进Rv2872的表达(P<0.05)。结论 (R)-(+)-长叶薄荷酮通过调控耐药结核分枝杆菌生物被膜主要基因Rv0024、Rv2872、Ra1362的表达,达到抑制耐药结核分枝杆菌的生长的作用。

利福平对结核分枝杆菌在不同植入材料界面黏附力及生物膜形成的影响

目的通过体外实验研究利福平对结核分枝杆菌(MTB)在不同植入材料界面黏附力及生物膜形成的影响。方法随机选取钴铬钼合金、钛合金、聚乙烯样品各两块分别置入3支离心管中,加入8 m L Middlebrook7H9液体培养基,再接种初始浓度为1010CFU/m L的MTB悬液2 m L混匀,恒温(37℃)下培养30 d,从每支离心管中,随机取出一块材料,经固定、干燥、喷金后,应用扫描电子显微镜观察,比较MTB对不同植入材料的黏附力,同时观察界面生物膜形成情况。然后每支离心管中加入2 m L浓度为1μg/m L的利福平溶液,同样条件下继续培养30 d。取出材料块,经固定、干燥、喷金后,应用扫描电子显微镜观察,了解利福平对MTB黏附力的影响及对MTB生物膜的破坏情况。结果 MTB对不同植入材料界面的黏附力由强到弱依次是聚乙烯、钴铬钼、钛合金;聚乙烯界面可见生物膜形成,钴铬钼合金、钛合金界面均未见生物膜形成;利福平干预后,植入物界面黏附的菌落数显著减少,聚乙烯界面生物膜呈不同程度破坏。结论利福平能抑制MTB对不同植入材料界面的黏附及生物膜形成。

分枝杆菌生物被膜发育调控与抗生素耐药菌防控新措施研发

目前,已知的分枝杆菌属有170多种,是分枝杆菌科中唯一的属。该属的微生物在引起人类疾病的能力方面呈现多样化。分枝杆菌属包括人类病原体(结核分枝杆菌复合菌群和麻风分枝杆菌)和被称为非结核分枝杆菌(non-tuberculosis mycobacteria,NTM)的环境微生物。分枝杆菌的一个常见致病因素是生物被膜的形成。细菌生物被膜通常被定义为表面附着的细菌群落,也被认为是被包裹的微生物细胞的共享空间,包括各种胞外聚合物基质(extracellular polymeric substances,EPS),如多糖、蛋白质、淀粉样蛋白、脂类和胞外DNA (extracellular DNA,EDNA),以及膜小泡和类腐殖质微生物衍生的难降解物质。基质的组装和动力学主要由第二信使、信号分子或小RNA协调。完全破译细菌如何为基质提供结构,从而促进细胞外反应并从中受益,仍然是未来生物被膜研究的挑战。本文介绍了生物被膜五步发育模型和生物被膜形成的新模型,分析了生物被膜的致病性,与噬菌体、宿主免疫细胞的互作,同时解析了分枝杆菌生物被膜关键基因及调控网络,分枝杆菌生物被膜与耐药性,以期为临床上治疗由生物被膜引起的疾病提供基础。

结核分枝杆菌膜囊泡RNA表达谱分析及功能研究

目的 描绘结核分枝杆菌膜囊泡(mycobacterium tuberculosis membrane vesicles,MVs)的RNA特征表达谱,分析其主要的生物功能,初步探索其诱导巨噬细胞凋亡的作用。方法 分离结核分枝杆菌MVs,提取总RNA,采用illumina Hiseq 2500-SE50平台进行双端测序。使用BWA软件进行序列比对,通过COG数据库对基因进行功能注释。通过MTT试验检测细胞存活率,采用Annexin-V联合PI染色法检测细胞凋亡。结果 本研究通过RNA测序及生物信息学分析描绘了结核分枝杆菌MVs中RNA的种类及含量,COG数据库功能注释结果显示这些RNA主要富集的生物学功能包括脂质转运代谢、氨基酸转运代谢、能量产生与转化、次级代谢物合成转运与代谢和转录等。生物分析显示富集的主要功能包括脂质转运代谢、氨基酸转运代谢、能量产生与转化、次级代谢物合成转运与代谢和转录等。功能实验表明,结核分枝杆菌MVs可以降低THP-1源巨噬细胞的存活率,促进细胞凋亡。结论 结核分枝杆菌MVs中含有丰富的短片段RNA,具有诱发细胞凋亡的作用。然而其具体作用机制仍需要更深入细致的研究。

结核分枝杆菌GroEL1蛋白表达、纯化及结构和功能的生物信息学分析

目的:应用基因工程技术和生物信息学方法对结核分枝杆菌GroEL1进行原核表达与纯化及其结构和功能预测,分析该抗原在新型结核疫苗的应用价值。方法:采用PCR技术体外扩增GroEL1基因,并克隆至pET28a质粒中,测序筛选构建成功的pET28a-GroEL1载体,将其载体转化至大肠杆菌BL21(DE3)表达菌株中,IPTG诱导表达重组GroEL1蛋白,利用镍亲和层析柱纯化。从UniProt数据库中获取H37Ra株GroEL1核苷酸和氨基酸序列;分别运用Protparam、TMHMM-2.0、Protscale、NetChop-3.1、Psortb、SignalP-4.1工具预测GroEL1蛋白的理化性质、跨膜螺旋、亲/疏水性、磷酸化位点、亚细胞定位,信号肽;NetNGlyc-1.0和YinOYang-1.2预测其糖基化位点;SOPMA和Swissmodel预测蛋白的二级结构和三级结构;Clustalw对同源序列进行比对。String预测相互作用蛋白,IEBD和ABCpred预测蛋白的B细胞抗原表位。结果:成功构建重组pET28a-GroEL1载体,GroEL1蛋白在大肠杆菌中部分以可溶形式表达。镍亲和层析柱纯化重组GroEL1蛋白,其纯度达90%以上。Western blot鉴定证实重组GroEL1蛋白具有良好的免疫反应性。结核分枝杆菌H37Ra株GroEL1基因全长1620 bp,编码539个氨基酸,分子量55.88 kD,等电点为4.98,预测显示该蛋白亲水性较强、性质稳定,无跨膜区,有37个可能的磷酸化修饰位点和8个O-糖基化位点,属于非分泌蛋白,定位在细胞质,二级结构显示α-螺旋占53.43%,延伸链占11.87%,β-转角占7.61%,无规则卷曲占27.09%,有多个B细胞抗原表位及多个与GroEL1蛋白相互作用蛋白。结论:成功表达并纯化重组GroEL1蛋白,运用生物信息学成功预测GroEL1蛋白的结构和功能,为结核病的预防、诊断和治疗奠定基础。

结核分枝杆菌SepF蛋白的生物信息学分析

目的:采用生物信息学方法分析结核分枝杆菌的Rv2147c基因及其编码的SepF蛋白结构和功能。方法:自NCBI网站获取Rv2147c基因及SepF蛋白的基本信息;使用Protparam和ProtScale预测SepF蛋白的理化性质和亲疏水性;使用SignaIP6.0 Server、DEEP TMHMM和NetPhos3.1软件预测SepF蛋白的信号肽、跨膜结构及磷酸化位点;使用SOPMA预测SepF蛋白的二级结构,通过SWISS MODEL软件构建该蛋白的三级结构模型;分别使用IEDB和SYFPEITHI预测SepF蛋白的B和T细胞表位;通过STRING数据库预测SepF的相互作用蛋白。结果:Rv2147c基因全长657bp,编码的SepF蛋白氨基酸数为218,分子式为C_(1095)H_(1668)N_(320)O_(337)S_(10)。SepF蛋白含有磷酸化位点和抗原表位。结论:生物信息学方法分析SepF蛋白含有一个保守的结构域,其结构域与结核分枝杆菌耐药性的产生密切相关,为抗结核药物靶点的选择提供了新方向。预测SepF蛋白含有大量抗原表位,可能成为结核病疫苗的候选蛋白。

牛源结核分枝杆菌pknB基因生物信息学分析

为了解牛源结核分枝杆菌关键蛋白的生物学功能,应用生物信息学方法对丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶pknB蛋白的结构及生物学特性进行了预测。结果显示:牛源结核分枝杆菌pknB蛋白是一类Ⅱ型跨膜蛋白,其跨膜区位于蛋白中部,亲水性强但缺乏能够分泌表达的信号肽;高级结构中无规则卷曲和α螺旋占比较高,分别为44.73%和32.27%,延伸链和β转角含量较少;pknB蛋白定位在细胞内质网的可能性最高,其次为细胞质,而定位在细胞核、高尔基体和线粒体的可能性最低;存在多个优势抗原表位,其中B细胞抗原表位有12个,分值大于25分的T细胞表位有8个;存在65个潜在的磷酸化修饰位点,它们可能与MRA_3902、MRA_3400、cfp17等多种蛋白发生相互作用。结果说明:pknB蛋白作为一种跨膜蛋白具有良好的免疫原性,并参与宿主的NF-κB信号通路进而影响细菌增殖,可以作为抗结核病疫苗研发及快速诊断试剂盒研制的候选靶标蛋白。

中草药对结核分枝杆菌生物膜的干预

结核病(TB)是由结核分枝杆菌(MTB)引起的传染性疾病,治疗时间长是结核防控面临的主要问题。结核杆菌能形成生物膜后,对抗结核药物的敏感性下降,因此,干预结核杆菌生物膜是治疗结核的新思路。本试验随机选择了11种中草药,评价其对结核杆菌生物膜的干预作用,结果表明,苦参(0.4 mg/ml)能抑制结核杆菌生物膜的形成,山茱萸(0.4、0.8、1.6、3.2、6.4 mg/ml)能促进结核杆菌生物膜的形成,并呈明显的量效关系。研究结果提示,不同中草药对结核杆菌生物膜的形成存在不同的干预结果。进一步开展活性跟踪研究,将为发现干预结核杆菌生物膜的分子骨架奠定基础。

结核分枝杆菌GroES蛋白表达、纯化及其生物信息学分析

目的 将结核分枝杆菌H37Ra株GroES蛋白进行原核表达与纯化,并对其进行生物信息学分析。方法 通过PCR扩增GroES基因并克隆至pET28a中,测序鉴定后将pET28a-GroES转化至大肠杆菌BL21(DE3)中,IPTG诱导GroES蛋白表达,SDS-PAGE分析表达产物,镍亲和层析柱纯化重组GroES蛋白,Western blot鉴定GroES的免疫反应性。应用ORF Finder、ProtParam、TMHMM Server 2.0、NetPhos 3.1 Server、NetNGlyc1.0 Server、SignalP 4.1 Server、BLAST、Softberry、PSORT、Vaxijen、SOPMA、SWISS-MODE、ABC-pred、IEDB、SYFPEITHI、STRING工具对GroES的结构和功能进行生物信息学预测。结果 成功构建重组pET28a-GroES重组体,用ITPG诱导后GroES在大肠杆菌以可溶性形式表达,纯化后GroES纯度达90%,Western blot证实GroES具有免疫反应性。生物信息学显示GroES蛋白由100个氨基酸组成,分子式为C478H776N124O147S1,等电点为4.62,为亲水性蛋白,有9个磷酸化位点,无跨膜区及信号肽序列,其编码基因MRA-3458全长303bp,含1个开放阅读框;GroES二级结构中,α-螺旋占5%,β-折叠占37%,β-转角占8%,无规则卷曲占50%;预测GroES具有多种与之相互作用的蛋白质和潜在的T、B细胞表位。结论 成功表达和纯化具有免疫反应性的重组GroES蛋白,并预测了GroES结构与功能,提示GroES可作为制备结核疫苗或药物的候选蛋白,为更深入理解结核分枝杆菌的感染免疫机制奠定基础。

探讨对比结核分枝杆菌分子生物检测与常规痰涂片检验结核菌的临床价值

研究结核分枝杆菌选择常规痰涂片检验、分子生物检测的临床价值。方法 2023年1月至2024年8月选取100例结核病患者执行随机数字表法分组,对照组50例实施常规痰涂片检验(涂片抗酸染色法检验),观察组50例实施分子生物检测(PCR-荧光检测法),对比两组检测阳性率。结果 观察组的检测阳性率高于对照组(P<0.05)。分析分子生物检测的准确性高于常规痰涂片检验(P<0.05)。结论 PCR-荧光检测法属于常用分子生物检测技术,对结核分枝杆菌比较敏感,可对其实施有效的监测,其准确性高于常规痰涂片检验,并且具有不易污染的特点,因此可作为实验室检测结核菌的重要辅助手段。

结核分枝杆菌生物膜形成与复治结核病治疗的关系初探

结核病长期以来是全球重点关注的健康问题之一，2011年约有新发病例870万例，结核病带来的负担依然严重。复治结核病是结核病治疗领域面临的重要问题之一，但其发生机制尚不清楚。MTB的产生生物膜特性是复治结核病形成的潜在机制。细菌生物膜是一种由细菌自行产生的聚合物基质，可以包裹菌体细胞形成特殊的结构性群落黏附于惰性或活体表面，从而保护菌体免受宿主免疫和药物的攻击。本研究初步探讨MTB生物膜形成与复治结核病及其治疗药物之间的关系，为防治结核病提供新思路。

PCR荧光探针技术对结核分枝杆菌复合群及利福平耐药性检测性能的评价

目的:评价PCR荧光探针技术检测痰液样本中结核分枝杆菌复合群(Mycobacterium tuberculosis complex,MTBC)和利福平耐药性效果,为进一步开展“结核分枝杆菌复合群及利福平耐药核酸检测试剂盒”多中心临床试验提供可行性研究数据。方法:采用前瞻性研究方法,参照入组标准收集2021年12月至2022年8月上海市3家结核病定点医院肺科门诊就诊的205例初诊疑似肺结核患者的3份痰液样本(即时痰、夜间痰、晨痰),分别进行痰涂片、BACTEC MGIT 960(MGIT 960)、GeneXpert MTB/RIF(Xpert)和PCR荧光探针法检测,评价PCR荧光探针法对痰液样本中MTBC及利福平耐药性的检测效能。另对随机选取同期上海市疾病预防控制中心结核病实验室菌株库中保存的96株MTBC临床菌株(包括利福平表型耐药菌株47株和利福平表型敏感菌株49株)分别进行PCR荧光探针法和Xpert检测利福平耐药性,分析两种检测方法对利福平耐药相关基因突变的检出情况。结果:205例疑似肺结核患者中,PCR荧光探针法对MTBC的检出率为22.44%(46/205),与MGIT 960[21.95%(45/205)]、Xpert[20.98%(43/205)]和痰涂片[16.10%(33/205)]的差异均无统计学意义(χ^(2)=0.014,P=0.904;χ^(2)=0.129,P=0.719;χ^(2)=2.650,P=0.104)。以临床诊断为参照标准,PCR荧光探针法、Xpert、MGIT 960和痰涂片检测MTBC的敏感度(95%CI)分别为48.10%(36.93%~59.56%)、48.10%(36.93%~59.56%)、50.63%(39.23%~61.97%)和40.51%(29.79%~52.15%),特异度(95%CI)分别为93.65%(87.47%~97.12%)、96.03%(90.52%~98.53%)、96.03%(90.52%~98.53%)和99.21%(95.01%~99.96%),一致率分别为76.10%(156/205)、77.56%(159/205)、78.54%(161/205)和76.59%(157/205),Kappa值分别为0.453、0.482、0.507和0.446。PCR荧光探针法检测痰液样本中MTBC的涂阴和极低级别阳性样本的检出率[10.73%(19/177)]与Xpert检测结果[8.47%(15/177)]的差异无统计学意义(χ^(2)=0.793,P=0.373)。PCR荧光探针法在检出MTBC的46份样本中同时检出6份样本发生利福平耐药基因突变,突变率为13.04%(6/46);而Xpert在检出MTBC的43份样本中仅同时检出1份样本发生利福平耐药基因突变,突变率为2.33%(1/43)。在96株临床菌株中,两种分子检测方法均检测到56株菌株发生利福平耐药基因突变,除2株探针突变类型不一致外,其他探针突变类型均一致,且多发生在probe E(529~533)和FAM通道(531/533突变)。结论:以临床诊断为参照标准,PCR荧光探针法检测MTBC的效能与MGIT 960、Xpert和痰涂片基本相当,且与Xpert检测MTBC临床菌株的利福平耐药性效果一致,认为PCR荧光探针法不仅是一种等同于Xpert检测功能的新技术,还具有操作简单、价格低于Xpert、真正实现一体化和全封闭等优势。建议在临床推广过程中进一步优化PCR荧光探针法以提高MTBC检出率,并开展多中心临床试验验证研究。

聚乙烯界面结核分枝杆菌黏附力及生物膜的形成

背景:研究证实结核杆菌对钴铬钼、钛合金的黏附力低,且不形成生物膜,但其对聚乙烯的黏附力及生物膜形成情况未见报道。目的:观察利福平干预对聚乙烯界面结核杆菌黏附力及生物膜形成的影响。方法:将聚乙烯和钴铬钼实验材料在无菌条件下分别置于Middlebrook 7H9液体培养基中,与结核杆菌共同培养2周,随机取出2块后,再加入1 mg/L的利福平溶2 m L,继续培养2周后,用激光共聚焦显微镜观测利福平干预前后材料界面单位面积菌落数及菌落厚度,扫描电镜观察利福平干预前后材料界面细菌生物膜结构。结果与结论:利福平干预前,聚乙烯界面单位面积菌落数及菌落厚度均大于钴铬钼组(P<0.05);利福平干预后,聚乙烯界面单位面积菌落数及菌落厚度较干预前明显减少(P<0.05)。利福平干预前,聚乙烯界面可见结核杆菌黏附,形成似"雪花状"、"云雾状",可见生物膜结构;钴铬钼界面可见散在结核杆菌菌落,未见生物膜结构形成。利福平干预后,聚乙烯界面黏附菌落数减少,部分结核杆菌出现干瘪、裂解,生物膜有不同程度的破坏;钴铬钼界面未见菌落形成,偶见单个结核杆菌黏附,未见生物膜形成。表明结核杆菌可在聚乙烯界面形成生物膜,但利福平可抑制甚至破坏结核生物膜。

Ra1362调控环二鸟苷酸影响结核分枝杆菌H37Ra的生物膜发育和休眠

目的通过敲除环二鸟苷酸（c-di-GMP）合成酶基因Ra1362探讨该基因在结核分枝杆菌（MTB）H37Ra株生物膜发育和休眠中的作用。方法以MTBH37Ra株为出发菌株，敲除合成酶基因Ra1362获得基因敲除株△Ra1362，通过体外实验比较细菌的生物膜形成变化；应用转录谱基因芯片和实时荧光定量PCR（RT-PCR）检测野生株和敲除株基因表达的情况变化；同时构建体外快速厌氧休眠模型比较细菌克隆形成、休眠相关基因的表达和活细胞染色情况。结果△Ra1362株于痰液管中培养26d时已形成较厚的皱褶生物膜，形成生物膜的速度明显快于野生株5d；转录谱基因芯片和定量RT-PCR结果也显示△Ra1362株中19个与休眠相关基因的表达水平下调并能通过基因回补和外源添加c—di-GMP所补偿；在快速厌氧模型中发现，迟缓期过后△Ra1362株对氧气的消耗比野生株组要快12h，且细菌处于不能恢复正常生长的休眠状态。结论Ra1362基因通过控制c—di-GMP的合成调控MTB感应缺氧或者氧化还原压力，一方面调控生物膜的发育，另一方面在缺氧条件下通过调控DosR调节子基因的表达来调节细菌的休眠。

结核分枝杆菌毒素-抗毒素系统与生物膜

结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis)是引起结核病的病原菌。其处于持续生存的休眠状态时,可导致长期无症状感染,称为结核潜伏感染。研究显示,结核分枝杆菌染色体中存在大量"毒素-抗毒素系统"(toxin-antitoxin system,TAS),某些TAS在潜伏感染中发挥作用,可调节细菌生长和诱导细菌进入休眠状态;某些TAS参与生物膜形成和应激反应,但其影响生物膜形成的机制尚未阐明。生物膜中的结核分枝杆菌对多种抗结核药物耐药,且能抵抗宿主免疫系统防御;休眠状态的结核分枝杆菌对抗结核药物通常也是耐受的,给结核病治疗带来了巨大挑战。本文就近年来结核分枝杆菌TAS与生物膜的研究及抗结核药物对生物膜形成的影响进行综述。

结核分枝杆菌生物被膜基质及潜在的药物靶点和治疗策略

持留性是结核分枝杆菌产生耐药和复发的重要原因之一.分枝杆菌的持留性与生物被膜的形成密切相关,对生物被膜的研究将有助于新型抗结核药物的开发.细胞外多糖、蛋白、DNA和脂质是结核分枝杆菌生物被膜细胞外基质的重要组成成分.本文阐述了结核分枝杆菌生物被膜基质的组成成分及基于这些成分潜在的药物靶点和治疗策略,希望为结核分枝杆菌生物被膜基质的生物学功能的研究带来新的思考.

mazEF系统及生物膜对北京基因型结核分枝杆菌生存能力的影响

目的探索生物膜形成能力、mazEF3,6,9系统的表达与北京基因型结核分枝杆菌生存力的相关性。方法检测北京、非北京基因型菌株与标准毒力株H37Rv在不同培养条件下的生存力、生物膜形成能力。采用PCR技术扩增上述菌株的mazE3,6,9系统,并进行基因测序;使用荧光定量PCR检测所有菌株的mazEF3,6,9基因、mazF3,6,9毒素基因和mazEF3,6,9抗毒素基因的mRNA表达水平;利用WesternBlot技术检测MazF9蛋白表达水平。结果北京基因型菌株在不同培养条件下的生存力、生物膜形成能力高于非北京基因型菌株。北京、非北京基因型菌株mazF3基因193bp处发生碱基突变,由C突变为T。在mRNA表达水平上,与H37Rv相比,北京、非北京基因型菌株中mazE3低表达;非北京菌株中mazE6低表达,mazE9高表达(P<0.05)。与非北京基因型菌株相比,北京基因型菌株中mazEF3高表达、mazE9低表达、mazF3、mazF6、mazF9高表达,mazF9蛋白高表达(P<0.05)。结论北京基因型菌株具有较强的生存力和生物膜形成能力。mazEF系统的差异表达、生物膜成膜能力强可能与北京基因型菌株生存能力强相关。

结核分枝杆菌生物膜的研究进展

结核病是由结核分枝杆菌引起的一种慢性传染性疾病。近年来,由于治疗周期长、药物不合理使用等原因,导致耐药性结核分枝杆菌出现,给结核病的防控带来了极大挑战。细菌生物膜可导致表型耐药,这对结核分枝杆菌多重耐药机制研究具有重大意义。综述了结核分枝杆菌生物膜的研究情况。

世界卫生组织《结核分枝杆菌耐药相关基因突变目录(第2版)》解读

耐药结核病是2035年实现全球终结结核病流行目标的巨大障碍。世界卫生组织(World Health Organization,WHO)倡导采用快速分子药物敏感性检测技术进行耐药结核病早期诊断,而覆盖全面可靠的耐药检测靶标是提高分子药物敏感性检测技术可靠性的关键。WHO于2023年11月发布《结核分枝杆菌耐药相关基因突变目录(第2版)》,目的是基于更广泛的全球数据汇总形成更为全面准确的耐药相关基因突变目录,为开发与完善基于测序或其他方法的新型分子药物敏感性检测技术提供支持。本文对第2版目录相较于第1版目录在分析流程与耐药突变等内容的更新进行了详细的解读,并对未来目录完善的方向进行了展望。